Komponentenanalyse und antioxidative Aktivität von Polysacchariden aus Cistanche Deserticola
Jun 06, 2023
Zusammenfassung: In dieser Arbeit werden Polysaccharide extrahiertCistanche deserticola, Cistanche deserticolagrobPolysaccharidCLP wird durch DEAE-Cellulose-Säulenchromatographie gereinigt und der neutrale Zucker CLP und der saure Zucker CLP2 von Cistanche deserticola werden erhalten. Der Gehalt an Gesamtzucker, Uronsäure und Protein beträgtRohes Polysaccharid von Cistanche deserticolaCLP, Cistanche deserticola Neutralzucker CLPl undCistanche Deserticola-SäuerzuckerCLP2 wird durch UV-Spektralscanning bestimmt und das Molekulargewicht und die Monosaccharidzusammensetzung von Polysacchariden werden bestimmt. Gleichzeitig werden die DPPH-Radikalfängerkapazität und die gesamte antioxidative Kapazität des rohen Cistanche-Deserticola-Polysaccharids CLP, des Cistanche-Deserticola-Neutralzuckers CLP1 und des Cistanche-Deserticola-Säurezuckers Cl.P2 analysiert. Die gemessenen Daten zeigen, dass die Komponenten des Cistanche-Deserticola-Rohpolysaccharids (CLP), des Cistanche-Deserticola-Neutralzuckers (CLP1) und des Cistanche-Deserticola-Säurezuckers (CLP2) ähnlich sind, es jedoch große Unterschiede in ihrem Gehalt gibt. Bei Cistanche-Deserticola-Neutralzucker (CLP1) und Cistanche können mehrere Elutionspeaks erhalten werden Der saure Deserticola-Zucker CLP2 wird durch eine DEAE-Cellulosechromatographiesäule abgetrennt und gereinigt. Die Molekulargewichtsverteilung beträgt 0~10 000 Da, was darauf hinweist, dass die Hauptbestandteile der Cistanche-Deserticola-Polysaccharide niedermolekulare Zucker sind. Die Ergebnisse der Monosaccharidbestimmung des Neutralzuckers Cistanche deserticola (CLP1) zeigen, dass die Monosaccharide im Neutralzucker Cistanche deserticola (CLP1) hauptsächlich Mannose, Galacturonsäure, Glucose, Galaktose und Arabinose sind saure Zucker ClP2 sind hauptsächlich Rhamnose, Galacturonsäure, Glucose und Galactose. Die Ergebnisse des DPPH-Radikalfängerexperiments und des Experiments zur Gesamtantioxidationskapazität von Polysacchariden aus Cistanche deserticola zeigen, dass die antioxidative Kapazität des neutralen Zuckers Cistanche deserticola (CLPl) höher ist als die des rohen Polysaccharids von Cistanche deserticola CLP und saurer Cistanche-Deserticola-Zucker CLP2.
Schlüsselwörter:Cistanche deserticola; Polysaccharide; Komponentenanalyse;antioxidative Aktivität; Absorption.
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Cistancheist eine krautige parasitäre Pflanze, die eine große Anzahl von enthältPhenolglycosids, Biosynthese,Phenylethanoidglykoside, Zucker und Alkohole. Die Glykane liegen überwiegend in Form von Polysacchariden vor. Cistanche-Polysaccharid hat eine starke immunaktivitätsregulierende Funktion [1-2].
Als Zwischenmetaboliten bei menschlichen Lebensaktivitäten befinden sich freie Radikale in einem instabilen, stabilen Zustand und weisen eine hohe Intensität der oxidativen Aktivität auf, die zu biologischen Makromolekülen führen kann. Daher ist die Verwendung natürlicher Antioxidantien zum Abfangen freier Radikale erforderlich zur Hauptrichtung der aktuellen Lebensmittelforschung werden. Die Polysaccharidzusammensetzung vonCistanchehat eine starke antioxidative Wirkung, die das Abfangen freier Radikale im menschlichen Körper fördern kann. Die Polysaccharidzusammensetzung von Cistanches hat eine starke antioxidative Wirkung und kann das Abfangen freier Radikale im menschlichen Körper fördern [3].
In diesem Artikel wird diePolysaccharidein Cistanche wurde Zinn durch hocheffiziente Gelpermeation extrahiert und klassifiziert. Das Molekulargewicht der Polysaccharide in Cistanche wurde durch Hochleistungsgelpermeationschromatographie bestimmt. Das Molekulargewicht der Polysaccharide von Cistanche wurde durch Hochleistungs-Gelpermeationschromatographie bestimmt und die Zusammensetzung der Polysaccharide wurde ebenfalls bestimmt. Das Molekulargewicht der Polysaccharide von Cistanche wurde durch Hochleistungs-Gelpermeationschromatographie bestimmt und die Zusammensetzung der Polysaccharide wurde ebenfalls ermittelt analysiert.
Die antioxidative Aktivität von Cistanche wurde durch Bestimmung der Fähigkeit zum Abfangen freier Radikale und der gesamten antioxidativen Kapazität der Polysaccharidkomponenten analysiert. Wir haben auch die Fähigkeit zum Abfangen freier Radikale und die gesamte antioxidative Kapazität der Polysaccharidkomponenten von Cistanch bestimmt und eine theoretische Grundlage für die Entwicklung und Nutzung von Cistanch und seinen Mehrwert bereitgestellt.
1 Probenvorbereitung und Extraktion von Polysaccharidsubstanzen aus Cistanche
2,5 kg Cistanche abwiegen, in Scheiben schneiden, 12,5 l destilliertes Wasser hinzufügen und 3 Stunden kochen lassen. Nach 3-stündigem Kochen wurde das Filtrat durch Filtration gesammelt, zu 75-prozentigem Ethanol gegeben und 24 Stunden lang stehen gelassen. Nach dem Sieden wurde das Filtrat durch Filtration gesammelt, zu 75-prozentigem Ethanol gegeben und 24 Stunden lang stehen gelassen, 30 Minuten lang bei 4000 U/min zentrifugiert und der Niederschlag gesammelt. Der Niederschlag wurde gesammelt, eingefroren und getrocknet, um Cistanche-Rohpolysaccharid CLP zu erhalten [4]. Der Niederschlag wurde gefriergetrocknet, um das rohe Polysaccharid CLP von Cistanche zu erhalten [4]. DEAE-Cellulose wurde entnommen, eingeweicht und gequollen, entgast. Sie wurde auf eine DEAE-Cellulose-Anionenaustauschersäule geladen und mit destilliertem Wasser und NaCl-Lösung äquilibriert. Zur Äquilibrierung wurden Wasser und NaCl-Lösung verwendet. 100 mg rohes Polysaccharid von Cistanche tubulosa CLP wurden in 10 ml destilliertem Wasser gelöst und das Eluat nach Elution mit destilliertem Wasser gesammelt.
Das Eluat wurde nach Elution mit destilliertem Wasser gesammelt und durch Konzentration gefriergetrocknet, um den Neutralzucker CLP1 von Cistanche zu erhalten; Das Eluat wurde nach der Elution mit NaCl-Lösung gesammelt und dann nach der Dialyse konzentriert und gefriergetrocknet, um den sauren Cistanche-Zucker CLP1 zu erhalten. Nach der Elution mit NaCl-Lösung wurde das Eluat gesammelt und durch Dialyse konzentriert und gefriergetrocknet, um den sauren Cistanche-Zucker CLP2 zu erhalten [5].
Der neutrale Zucker CLP1 und der saure Zucker CLP2 von Cistanche tubulosa wurden in einer Konzentration von jeweils 1 mg/kg hergestellt. Die Polysaccharidlösungen wurden in einer Konzentration von 1 mg/ml hergestellt und die Polysaccharide wurden durch UV-Spektroskopie unter Verwendung eines Spektrophotometers bei 210-600 nm analysiert. Die UV-Spektren wurden mit einem Spektrophotometer bei 210-600 nm gescannt und als der Peak bei 260-280 nm erschien. Als der Peak bei 260-280 nm erschien, wurde nachgewiesen, dass die Lösung Protein und Nukleinsäure enthielt [6].
2 Bestimmung der Polysaccharid-Substanzzusammensetzung von Cistanche
Zur Bestimmung des Gesamtzuckergehalts in Cistanche-Proben wurde die Phenol-Schwefelsäure-Methode verwendet. Es wurden Glukoselösungen von 0,1 mg/ml, 0,2, 0,4, 0,6, 0,8 und 1 ml gemessen in Reagenzgläsern aus Glas gegeben und mit destilliertem Wasser auf ein Volumen von 1 ml fixiert. Dann wurden 0,5 ml Phenolreagenz und 2,5 ml konzentrierte Schwefelsäure mit einer Konzentration von 6 Prozent in die Reagenzgläser gegeben, gut geschüttelt und auf Raumtemperatur abgekühlt. Die Absorption wurde bei 490 nm mit einem Spektrophotometer gemessen und die Standardkurve mit dem Zuckergehalt als horizontaler Koordinate und der Absorption als vertikaler Koordinate aufgezeichnet und die Regressionsgleichung berechnet [7-8].
Der Proteingehalt der Cistanche-Proben wurde mit der Komas Brilliant Blue-Methode bestimmt. Der Proteingehalt der Proben wurde mit dem Spektrophotometer bei 495 nm gemessen und der Proteingehalt gemäß der Standardkurvengleichung [9] berechnet.
Der Gehalt an Glyoxalat in Cistanche-Proben wurde mit der m-Hydroxyphenyl-Methode bestimmt. Verschiedene Konzentrationen des Standards und 0,4 ml der Probenlösung mit einer Konzentration von 0,1 mg/ml wurden in das Reagenzglas mit 2,5 ml konzentrierter Schwefelsäure gegeben und geschüttelt
Die Konzentration von m-Hydroxybiphenyl und 0,5-prozentige Natriumhydroxidlösung wurden in das Reagenzglas gegeben, gut geschüttelt und 30 Minuten stehen gelassen. Die Absorption bei 525 nm wurde mit einem Spektrophotometer gemessen und die Menge an Glyoxalat in der Probe wurde gemäß der Standardkurvengleichung [10-11] berechnet. Das relative Molekulargewicht der Polysaccharide von Cistanche wurde durch Hochleistungsgelchromatographie bestimmt, und die Zusammensetzung der Monosaccharide von Cistanche wurde durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie bestimmt. Die Monosaccharidzusammensetzung von Cistanche wurde durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie bestimmt [12].
3 Ergebnisse und Analyse der Polysaccharidzusammensetzung von Cistanche Tubulosa
Aus Abb. 1 ist ersichtlich, dass der neutrale Zucker CLP1 von Cistanche Tubulosa einen offensichtlichen Absorptionspeak bei 280 nm zeigte, während der saure Zucker CLP2 von Cistanche Tubulosa keinen offensichtlichen Absorptionspeak bei 260-280 nm aufwies, aber der Das UV-Absorptionsspektrum war höher. Da das in den Proteinen enthaltene Tryptophan und Tyrosin größere UV-Absorptionswerte bei 280 nm aufwies, konnte man davon ausgehen, dass der neutrale Cistanche-Zucker CLP1 Glykoproteine enthielt, es konnte jedoch nicht beurteilt werden, ob der saure Cistanche-Zucker CLP2 Nukleinsäuren und Proteine enthielt.
Es lässt sich nicht feststellen, ob der saure Zucker CLP2 von Cistanche Nukleinsäuren und Proteine enthält.
Die DEAE-Cellulose-Negativionenaustausch-Chromatographiesäulenanalyse kann ionische Substanzen und Verunreinigungen auf der Säule adsorbieren, um die Trennung von Polysaccharidsubstanzen zu erreichen. Nach dem Konzentrieren und Trocknen des destillierten Wassereluats wurden insgesamt 34,68 mg Cistanche-Neutralzucker CLP1 erhalten Unter Verwendung einer NaCl-Lösung zum Eluieren, Konzentrieren und Trocknen wurden insgesamt 16,52 mg saurer Cistanche-Zucker CLP2 erhalten. Die Standardkurvengleichung des Gesamtzuckergehalts, des Proteingehalts und der Glyoxylat-Standardkurvengleichung. Es wurden Messungen des Gesamtzuckers, des Proteins und des Glyoxylats von Cistanche durchgeführt. Der Gesamtzucker-, Protein- und Glucuronsäuregehalt von Cistanche wurde gemessen und in Tabelle 1 aufgeführt.
Die Abtastkurve des UV-Spektrums des Photometers von 210 bis 600 nm ist in Abbildung 1 dargestellt.
Aus Abb. 1 ist ersichtlich, dass der neutrophile Cistanche-Zucker CLP1 einen deutlichen Absorptionspeak bei 280 nm zeigte, während der saure Cistanche-Zucker CLP2 einen Absorptionspeak bei 260-280 nm zeigte. und der saure Zucker CLP2 von Cistanche Tubulosa zeigte einen deutlichen Absorptionspeak bei 260-280 nm. Obwohl es keinen offensichtlichen Absorptionspeak bei 260-280 nm gab, war das UV-Absorptionsspektrum höher. Da Tryptophan und Tyrosin, die in den Proteinen enthalten sind, einen größeren Absorptionswert bei 280 nm als UV-Absorptionswert aufwiesen, kann davon ausgegangen werden, dass der neutrophile Cistanche-Zucker CLP1 Glykoproteine enthielt. Es war jedoch nicht möglich zu bestimmen, ob der saure Cistanche-Zucker CLP2 Nukleinsäuren und Proteine enthielt . Das Vorhandensein von Nukleinsäuren und Proteinen in Cistanche CLP2 konnte nicht festgestellt werden.
Die DEAE-Cellulose-Negativionenaustausch-Chromatographiesäulenanalyse kann ionische Substanzen und Verunreinigungen in der Säule adsorbieren. Die Trennung der Polysaccharidsubstanzen wurde durch Adsorption der ionischen Substanzen und Verunreinigungen an der Säule erreicht. Das Eluat mit destilliertem Wasser wurde konzentriert und getrocknet, um den neutralen Zucker von Cistanche zu erhalten. Nach Konzentrieren und Trocknen des Eluats mit destilliertem Wasser wurden insgesamt 34,68 mg CLP1 erhalten, und nach Konzentrieren und Trocknen mit NaCl-Lösung wurde der saure Zucker CLP1 erhalten. Der saure Zucker CLP2 von Cistanche wurde mit 16,52 mg erhalten. Es wurde die Standardkurvengleichung für den Gesamtzuckergehalt, den Proteingehalt und den Glyoxylatgehalt von Cistanche ermittelt. und Glyoxylat-Standardkurvengleichung. Es wurden Messungen des Gesamtzuckers, des Proteins und des Glyoxylats von Cistanche durchgeführt. Der Gesamtzucker-, Protein- und Glucuronsäuregehalt von Cistanche wurde gemessen und in Tabelle 1 aufgeführt.
Tabelle 1 Gehalt an Gesamtzucker, Protein und Uronsäure in Cistanche deserticola
Das Molekulargewicht und die Peakfläche der Standardprobe können bestimmt werden, und die Regressionsgleichung kann erhalten werden, indem das Lichtemissionssignal der zu testenden Probe in die Regressionsgleichung eingesetzt wird. Das Molekulargewicht der zu untersuchenden Probe kann ermittelt werden. Das Molekulargewicht der zu testenden Proben kann durch Einsetzen der Lichtemissionssignalwerte der zu testenden Proben in die Regressionsgleichung ermittelt werden. Das durchschnittliche Molekulargewicht, das durchschnittliche schwere Molekulargewicht und der Dispersionskoeffizient von Cistanche Tubulosa CLP1 und Cistanche Tubulosa CLP2 wurden ermittelt. Cistanche-Neutralzucker CLP1 und Cistanche-Säurezucker CLP2 wurden durch Hochleistungsgelpermeationschromatographie bestimmt. Die Ergebnisse der Berechnung der Retentionszeit und des Molekulargewichts sind in Tabelle 2 aufgeführt. Das Verhältnis des hohen durchschnittlichen Molekulargewichts zum zahlenmittleren Molekulargewicht wurde verwendet, um die Breite der Molekülverteilung anzuzeigen. Das Verhältnis des schweren durchschnittlichen Molekulargewichts zum zahlenmäßigen durchschnittlichen Molekulargewicht wird verwendet, um die Breite der Molekülverteilung anzuzeigen.
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