Wirksamkeit der Kombinationsbehandlung von Laminaria Japonica- und Cistanche Tubulosa-Extrakten beim Haarwachstum

Kontakt: emily.li@wecistanche.com

Kyungha Shin1# et al

Da der Haarausfall auf der Kopfhaut in letzter Zeit auch bei jungen Menschen zugenommen hat und die Lebensqualität der Menschen ernsthaft beeinträchtigt, ist dies der FallHaarwuchs-stimulierende Wirkung von Laminaria japonica-Extrakt (LJE) undCistanche tubulosaExtrakt (CTE) untersucht. Nach Bestätigung der anagenen Phase der Follikel unter Rasur wurde männlichen C57BL/6-Mäusen 3 % Minoxidil dermal aufgetragen oder die Kombinationen aus LJE und CTE oral verabreicht.Cistanche tubulosaExtrakt)für 21 Tage. Minoxidil förderte das Nachwachsen der Haare und erhöhte die Aktivitäten der -Glutamyl-Transpeptidase ( -GTP) und der alkalischen Phosphatase (ALP). Darüber hinaus erhöhte Minoxidil die Spiegel des epidermalen Wachstumsfaktors (EGF) und des vaskulären endothelialen Wachstumsfaktors (VEGF). Co-Administration von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)bei 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE (Cistanche tubulosaExtrakt)übte synergistisch fördernde Wirkungen auf das Haarwachstum aus, vergleichbar mit 3 Prozent Minoxidil. LJE erhöhte vorzugsweise die ALP-Aktivität, während CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)erhöhte sowohl -GTP- und ALP-Aktivitäten als auch EGF- und VEGF-Expressionen. In-vivo-Air-Pouch-Entzündungsmodell, Carrageenan-induzierte vaskuläre Exsudation und erhöhte Stickoxid- und Prostaglandin-E2-Konzentrationen in den Exsudaten wurden durch die gleichzeitige Verabreichung von LJE und CTE synergistisch unterdrückt（Cistanche tubulosaExtrakt). Außerdem wurde die Infiltration von Entzündungszellen durch die Kombinationsbehandlung wesentlich gehemmt. Die Ergebnisse legen nahe, dass eine kombinierte orale Behandlung mit LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)unangemessene Dosen und Verhältnisse verhindern Haarausfall und verbessern Alopezie, die teilweise durch ihre entzündungshemmenden Aktivitäten vermittelt werden könnte.

Schlüsselwörter Haarwuchs, Entzündung, Laminaria japonica,Cistanche tubulosa, Kombinationsbehandlung

Cistanche tubulosaExtrakt hat viele Funktionen

In letzter Zeit nimmt der Haarausfall auf der Kopfhaut sogar bei jungen Menschen zu, was die Lebensqualität einer Person ernsthaft beeinträchtigt. Obwohl Kahlköpfigkeit nicht zu den Gesundheitsproblemen gehört, kann sie zu tiefgreifendem psychisch unangenehmem sozialem Stress führen. Daher ist es von großem Interesse, neue präventive und/oder therapeutische Materialien für Haarausfall und Haarwachstum zu entwickeln. Trotz des Milliarden-Dollar-Marktes gibt es einige wenige derzeit wirksame Produkte [1].
Haarfollikel bauen sich während zyklischer Perioden von Wachstum (Anagen), Regression (Katagen), Ruhe (Telogen) und Haarausfall (Exogen) um [2]. Während der Katagenphase durchlaufen viele der Follikelzellen den programmierten Zelltod (Apoptose) [3], wodurch die Follikelgröße reduziert wird, wenn die Follikel in das Telogen eintreten. Die Aktivierung selten zyklischer epithelialer Stammzellen, die sich in der Wulstregion der Follikel befinden, führt zu einer follikulären Regeneration zu Beginn der nächsten Anagenphase [4]. Stammzellnachkommen bilden während des frühen Anagens eine neue follikuläre Matrix, und der Haarschaft und die innere Wurzelscheide werden von diesen relativ undifferenzierten Matrixzellen abgeleitet [5]. Es ist allgemein bekannt, dass die Größe des Haarfollikels und die Dauer der Anagenphase die Größe (Durchmesser) bzw. Länge des Haarschafts bestimmen. Dieses zyklische Haarwachstum wird durch verschiedene Wachstumsfaktoren reguliert.

Minoxidil, Finasterid und Propecia sind im Handel erhältlich, um den Haarausfall zu verlangsamen und das Nachwachsen der Haare zu erleichtern. Minoxidil ist ein Vasodilatator, der eine Nebenwirkung zur Erleichterung ausübtHaarwuchs[6] was auf seine nährstoffliefernden und kaliumkanalöffnenden Aktivitäten zurückzuführen sein könnte [7,8]. Minoxidil ist neben anderen Haarausfallbehandlungen bei androgener Alopezie wirksam, obwohl seine Wirksamkeit innerhalb von Monaten nach Absetzen der Behandlung verschwindet. Im Vergleich dazu wurden Finasterid und Propecia, Therapeutika gegen gutartige Prostatahyperplasie und Prostatakrebs, in vielen Ländern für androgenetische Alopezie (männlicher Haarausfall) zugelassen. Finasterid und Propecia sind synthetische Antiandrogene, die die Typ-II-5--Reduktase hemmen, ein Enzym, das Testosteron in Dihydrotestosteron (DHT) in den Papillenzellen am unteren Ende der Haarfollikel umwandelt [9].

Laminaria japonica, Undaria pinnatifida und Cladosiphon okamuranus, die in vielen Ländern weit verbreitet sind, werden seit langem als Therapeutika in der orientalischen Medizin verwendet. In früheren Studien war Fucoidan, ein Sulfat-Polysaccharid-Komplex, aus den Meeresalgen extrahiert und identifiziert worden, und es wurde bestätigt, dass es antioxidative, antikoagulative, krebshemmende und entzündungshemmende Aktivitäten besitzt [10,11]. Danach wurden positive Wirkungen von Fucoidan auf entzündliche Erkrankungen, Ischämie, Immundysfunktion und Tumore nachgewiesen [12,13]. Auf der anderen Seite,Cistanche tubulosaExtrakt (CTE) wird in China auch häufig für traditionelle Medikamente verwendet. CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)verbessert die Durchblutung durch Senkung des Cholesterinspiegels im Blut [14]. Kürzlich wurde berichtet, dass CTE die Produktion von Tumor-Nekrose-Faktor (TNF-) und Interleukin-4 (IL-4) verringert, die Hauptfaktoren für die Produktion von Stickoxid (NO) im Entzündungsweg sind [fünfzehn]. Wir haben auch gezeigt, dass Fucoidan aus Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)synergistisch abgeschwächte Entzündung in vitro und in vivo [16]. Insbesondere wurde gezeigt, dass eine enge Assoziation zwischen Hautentzündung (insbesondere Tränendrüsenentzündung) und Alopezie besteht [17]. Somit zeichnen sich entzündungshemmende Aspekte der Alopeziebehandlung ab [18].
Basierend auf den Verbesserungsaktivitäten zu Durchblutung und Entzündung untersuchen wir die kombinierte Wirksamkeit von LJE und CTE（Cistanche tubulosa Extrakt)anHaarwuchsund zugrunde liegenden Mechanismus(se), im Vergleich zu 3 Prozent Minoxidil (Hyundai Pharmaceutical, Seoul, Korea), ein bekannterHaarwuchsVerstärker.

Cistanche tubulosaExtrakt ist gut fürHaarwuchs

Materialen und Methoden

Materialien

LJE und CTE (Cistanche tubulosaExtrakt)wurden von Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Korea) bezogen. Getrocknetes Pulver von Laminaria japonica wurde 24 Stunden lang bei 60oC in gereinigtem Wasser extrahiert, durch eine 0,45-μm-Membran filtriert, desinfiziert und sprühgetrocknet.Cistanche tubulosawurde in 80-prozentigem Ethanol extrahiert, desinfiziert, konzentriert und getrocknet. LJE und CTE (Cistanche tubulosaExtrakt)wurden bei 4°C gehalten, gemischt (1:3) und vor Gebrauch in gereinigtem Wasser gelöst und in einem Volumen von 5 ml/kg oral verabreicht.
Tiere
Männliche C57BL/6-Mäuse fürHaarwuchsStudie und männliche ICR-Mäuse für die Entzündungsstudie wurden von Daehan Biolink (Eumseong, Korea) gekauft und in einem Raum mit konstanten Umgebungsbedingungen (23 ± 2 °C; 45-65 % relative Luftfeuchtigkeit; 12- Stunden Licht) untergebracht -Dunkelzyklus; 150-300 Lux Helligkeit). Pelletfutter und gereinigtes Wasser standen ad libitum zur Verfügung. Alle Tierversuche wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der Chungbuk National University (CBNU), Korea, genehmigt und gemäß den Standard Operation Procedures (SOP) des Laboratory Animal Research Center, CBNU, durchgeführt.

Behandlung für Haarwuchs

Nach Bestätigung der Anagenphase durch Beobachtung einer homogen-rosa Hautfarbe in der Rückenhaut von C57BL/6-Mäusen (6 Wochen alt, n=8/Gruppe) nach dem Abschneiden in der Telogenphase wurden die Haare rasiert [1,19 ,20]. Ab dem nächsten Tag wurden Mäuse ohne sichtbare Kratzer ausgewählt und oral verabreicht
behandelt mit LJE (18 oder 54 mg/kg), CTE (54 oder 162 mg/kg) oder deren Mischung (18 plus 54 oder 54 plus 162 mg/kg) einmal täglich für 21 Tage. Niedrige Dosen von LJE (18 mg/kg) und CTE (54 mg/kg) stammen aus geschätzten Humandosen von 100 mg/Körper (70 kg) und 300 mg/Körper nach Oberflächentranslation des Körpergewichts (Km{{14} } für Mensch/Km=3 für Maus). Hohe Dosen von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)wurden auf 3-fach eingestellt, allein oder in Kombination, um maximale synergistische Wirkungen zu bewerten [16]. Minoxidil (3 Prozent, 0,2 ml) wurde einmal täglich topisch auf die rasierte Haut im gleichen Zeitplan wie bei der LJE/CTE-Behandlung aufgetragen.

Grobe Beobachtung des Haarwuchses

An Tagen in Intervallen von 3- Tagen nach dem Rasieren und während der Behandlung wurden die Mäuse leicht mit Diethylether anästhesiert, und es wurden Fotos von ihrem Hintern gemacht. Das Verhältnis des Haarnachwuchses (nachgewachsener Bereich/rasierter Bereich) auf den Fotografien wurde unter Verwendung eines computergestützten Bildanalysesystems (Imageinside, Daejeon, Korea) analysiert.

Mikroskopische Untersuchung der Haarfollikel

An den Tagen 14 und 21 wurden die Mäuse durch tiefe Anästhesie mit Diethylether getötet und ihre Rückenhaut entfernt [1]. Die Rückenhaut wurde in zwei Teile geschnitten. Formalin-fixierte, Paraffin-eingebettete Gewebeschnitte (5 μm Durchmesser) eines Teils wurden mit Hämatoxylin-Eosin gefärbt, um die Anzahl der Haarfollikel und den histologischen Befund zu untersuchen. Der andere Teil des Gewebes wurde für den Enzymassay und den Immunoassay in flüssigem Stickstoff eingefroren.

Assay der Enzymaktivität

Hautgewebe wurde in 4 Volumina Phosphatpuffer (pH 7,4) homogenisiert. Das Homogenat wurde bei 3,000 U/min für 20 min zentrifugiert und der Überstand wurde zum Assay von -Glutamyl-Transpeptidase (-GTP) und alkalischer Phosphatase (ALP)-Aktivitäten unter Verwendung von p-Nitrophenylphosphat (PNPP)-DEAV als verwendet Substrat [1,21].

Cistanche tubulosa

Quantifizierung von Wachstumsfaktoren

Der epidermale Wachstumsfaktor (EGF) und der vaskuläre endotheliale Wachstumsfaktor (VEGF) wurden unter Verwendung von ELISA-Kits (Enzyme-Linked Immunosorbent Assay) (R&D Systems, Minneapolis, USA) gemäß den Anweisungen des Herstellers quantifiziert [1,22].

Behandlung von Entzündungen

ICR-Mäuse (7 Wochen alt, n=8/Gruppe) wurden oral mit LJE (18 oder 54 mg/kg), CTE, behandelt（Cistanche tubulosaExtrakt)(54 oder 162 mg/kg) oder deren Mischung (18 plus 54 oder 54 plus 162 mg/kg) einmal täglich für 7 Tage [16]. Am 1. Tag von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)Behandlung wurden den Mäusen subkutan 10 ml sterile Luft in die Rückseite injiziert, um einen Beutel zu bilden [16,23,24]. Nach 2 und 5 Tagen wurde der Beutel erneut mit 5 ml Luft injiziert. Eine Stunde nach dem letzten LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)Behandlung wurde 1 ml Carrageenan (1 Prozent in Kochsalzlösung; Sigma-Aldrich, St. Louis, USA) oder dessen Vehikel (Kochsalzlösung) in den Beutel injiziert.

Analyse der Exsudate

Der Atembeutel wurde 6 Stunden nach der Carrageenan-Injektion mit 1 ml kalter Kochsalzlösung gewaschen, und das Nettovolumen der Spülflüssigkeit wurde aufgezeichnet [16]. Die Gesamtzahl an Entzündungszellen, einschließlich Neutrophilen, Monozyten und Lymphozyten, wurde unter Verwendung eines Kolterzählers bestimmt.

Die Konzentrationen von NO und Prostaglandin E2 (PGE2) wurden jeweils durch Griess-Reagenz (Sigma-Aldrich) und Enzymimmunoassay (EIA) unter Verwendung eines Correlate-EIA-Kits (Assay Designs, Ann Arbor, USA) bestimmt [16].

statistische Analyse

Die Daten sind als Mittelwert ± Standardfehler dargestellt. Die statistische Signifikanz wurde durch eine Einweg-Varianzanalyse bestimmt, gefolgt von einem Post-hoc-Tukey-Mehrfachvergleichstest. P-Werte<0.05 were="" considered="" to="" be="" statistically="">

Ergebnisse

Die Anwendung von Minoxidil (3 Prozent), einem Referenzmaterial, erleichterte dies deutlichHaarwuchsvon C57BL/6-Mäusen, die eine nahezu vollständige Abdeckung (92,4 Prozent) des rasierten Bereichs (Abbildungen 1, 2B) zeigten, verglichen mit 29,2 Prozent bei normalem Wachstum (Abbildungen 1, 2A) am Tag 21. Obwohl weniger wirksam als die Anwendung von Minoxidil , orale Behandlung von LJE erleichtert auch dieHaarwuchs, was zu einer Abdeckung von 33,5 bzw. 69,1 Prozent bei 18 bzw. 54 mg/kg führte (Abbildungen 1, 2C, 2D). CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)war auch wirksam bei der VerbesserungHaarwuchsund erreichten eine Abdeckung von 73,6 bzw. 80,4 Prozent bei 54 bzw. 162 mg/kg (Abbildungen 1, 2E, 2F). Insbesondere Kombinationstherapie mit hohen Dosen von LJE (54 mg/kg) und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)(162 mg/kg) deutlich verbessertHaarwuchsab Tag 12, vergleichbar mit der Wirkung von Minoxidil (Abbildungen 1, 2H), jedoch niedrige Dosen von LJE (18 mg/kg) und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)(54 mg/kg) üben nur in der frühen Phase einen synergistischen Effekt aus (Figuren 1, 2G).

Abbildung 1. Zeitlicher Verlauf des Haarwachstums bei Mäusen, die mit Minoxidil oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oder behandelt wurdenCistanche tubulosaExtrakt (CTE). ,

○normal; ● Anwendung von Minoxidil (3 Prozent); Δ, 18 mg/kg LJE; ▼, 54 mg/kg LJE; □, 54 mg/kg CTE; ■, 162 mg/kg CTE; ◇, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; ◆, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaExtrakt).

Abbildung 2. Repräsentative Gesamtbefunde des Haarwachstums von Mäusen, die mit Minoxidil oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oder behandelt wurdenCistanche tubulosaExtrakt (CTE) am Tag 21.

A, normal; B, Anwendung von Minoxidil (3 Prozent); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaExtrakt); F, 162 mg/kg CTE; G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaExtrakt).

Im Vergleich zu normalen Haarfollikeln (Abbildung 3A) verbesserte die Anwendung von Minoxidil die Integrität der Haarfollikel und zeigte größere Follikel und dickere Haarschäfte (Abbildung 3B). Solche Effekte wurden auch in der Haut von Mäusen gefunden, die mit LJE und/oder CTE behandelt wurden（Cistanche tubulosaExtrakt)(Abbildungen 3C-3H). Insbesondere die haarfollikelstärkende Wirkung einer Kombinationsbehandlung von LJE und CTE (Cistanche tubulosaExtrakt)war vergleichbar mit der von Minoxidil.

Abbildung 3. Repräsentative mikroskopische Befunde des Haarwachstums von Mäusen, die mit Minoxidil oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oder behandelt wurdenCistanche tubulosaExtrakt (CTE) am Tag 21.

A, normal; B, Anwendung von Minoxidil (3 Prozent); C, 18 mg/kg LJE; D, 54 mg/kg LJE; E, 54 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaExtrakt); F, 162 mg/kg CTE（Cistanche tubulosaExtrakt); G, 18 mg/kg LJE plus 54 mg/kg CTE; H, 54 mg/kg LJE plus 162 mg/kg CTE

Die Anwendung von Minoxidil erhöhte die Aktivität von -GTP, das die Haarfollikel in die Anagenphase induziert, an den Tagen 14 und 21 um 90-120 Prozent im Vergleich zum Niveau normaler Haut (Abbildung 4). LJE (54 mg/kg) verstärkte auch die Enzymaktivität, obwohl es starke Schwankungen gab. CTE übte ähnliche Wirkungen aus und verstärkte signifikant die -GTP-Aktivität an Tag 14. Interessanterweise kombinierte Behandlung von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)erhöhte die Enzymaktivität weiter höher als bei alleiniger Verwendung der Extrakte.
Die ALP-Aktivität, ein Marker für Knochenwachstum und Angiogenese, nahm an den Tagen 14 und 21 nach der topischen Anwendung von Minoxidil in der Haut signifikant zu (Abbildung 5). LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)erhöhten auch die ALP-Aktivität nach oraler Gabe dosisabhängig. Bemerkenswerterweise wurde die Enzymaktivität durch die Kombinationsbehandlung mit LJE und CTE synergistisch verstärkt.

Abbildung 4. Wirkungen von Minoxidil (MXD, 3 Prozent) oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oderCistanche tubulosaExtrakt (CTE) (in mg/kg) auf -Glutamyltranspeptidase ( -GTP)-Aktivität an den Tagen 14 (A) und 21 (B) der Behandlung.

* Signifikant unterschiedlich zur normalen (Nor) Kontrolle (P<>

Abbildung 5. Wirkungen von Minoxidil (MXD, 3 Prozent) oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oderCistanche tubulosaExtrakt (CTE) (in mg/kg) auf die Aktivität der alkalischen Phosphatase (ALP) an den Tagen 14 (A) und 21 (B) der Behandlung.

* Signifikant unterschiedlich zur normalen (Nor) Kontrolle (P<>

In der Analyse von EGF, einem bekanntenHaarwuchsFaktor erhöhte die Anwendung von Minoxidil den EGF-Spiegel um das 3,5-fache der normalen Kontrolle an beiden Tagen 14 und 21 (Fig. 6). LJE (18 mg/kg) erhöhte EGF nur am 21. Tag, während CTE (162 mg/kg) seine Produktion an den Tagen 14 und 21 stark hochregulierte. Es ist interessant festzustellen, dass die Kombinationsbehandlung von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)selbst bei niedrigen Dosen zeigten sich ausgeprägte synergistische Wirkungen.

Die Behandlung mit Minoxidil erhöhte auch den VEGF-Spiegel um 50-80 Prozent über den Kontrollwert (Abbildung 7). Obwohl LJE unwirksam war, CTE (Cistanche tubulosaExtrakt)übte bemerkenswerte verstärkende Wirkungen aus. Außerdem Kombinationstherapie von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)zeigte eine synergistische Aktivität in der frühen Phase am Tag 14.

Abbildung 6. Wirkungen von Minoxidil (MXD, 3 Prozent) oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oderCistanche tubulosaExtrakt (CTE) (in mg/kg) auf den Gehalt an epidermalem Wachstumsfaktor (EGF) an den Tagen 14 (A) und 21 (B) der Behandlung.

* Signifikant unterschiedlich zur normalen (Nor) Kontrolle (S<>

Abbildung 7. Wirkungen von Minoxidil (MXD, 3 Prozent) oder Laminaria japonica-Extrakt (LJE) und/oderCistanche tubulosaExtrakt (CTE) (in mg/kg) auf den Gehalt des vaskulären endothelialen Wachstumsfaktors (VEGF) an den Tagen 14 (A) und 21 (B) der Behandlung.

* Signifikant unterschiedlich zur normalen (Nor) Kontrolle (P<>

Die Injektion von Carrageenan in die Lufttasche der ICR-Maus erhöhte das Exsudatvolumen innerhalb der Tasche um das 6-fache des Kontrollniveaus (Tabelle 1). Eine solche erhöhte Exsudation wurde durch die Behandlung mit LJE (18 und 54 mg/kg) oder CTE signifikant abgeschwächt（Cistanche tubulosaExtrakt)(54 und 162 mg/kg). Bemerkenswerterweise verringerte die Kombinationsbehandlung mit LJE und CTE das Exsudatvolumen im Vergleich zu den Einzeleffekten weiter. Die Zahl der Entzündungszellen wurde durch Carrageenan-Injektion drastisch erhöht: 34,6-, 4,2- und 24,9-fache Kontrollniveaus für Neutrophile, Monozyten bzw. Lymphozyten (Tabelle 1). LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)reduzierte signifikant die Entzündungszellen in dosisabhängiger Weise, wobei LJE CTE etwas überlegen war（Cistanche tubulosaExtrakt). Erwartungsgemäß wurden synergistische Wirkungen bei der Infiltration von Entzündungszellen durch die gleichzeitige Verabreichung von LJE und CTE erzielt（Cistanche tubulosaExtrakt).
Parallel zur Infiltration von Entzündungszellen in die Tasche stiegen auch die NO- und PGE2-Gehalte in der Tasche nach der Carrageenan-Injektion drastisch an (Tabelle 1). Im Vergleich zur milden Wirkung von LJE, CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)senkte deutlich die NO-Konzentration. Kombinationsbehandlung von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)senkte den NO-Spiegel weiter dosisabhängig. Auf ähnliche Weise wurde der erhöhte PGE2-Spiegel durch die Kombinationstherapie von LJE und CTE synergistisch unterdrückt (Tabelle 1).

Diskussion

Der menschliche Kopf hat durchschnittlich 100.000 Haarfollikel. Im Laufe eines Lebens wächst und fällt jeder Follikel etwa 20 Mal, was einen täglichen Haarausfall von 100 Strähnen zeigt [25]. Haarausfall einschließlich Alopezie und Glatzenbildung ist ein belastender Zustand für Männer und Frauen, insbesondere in der modernen Gesellschaft. Daher ist es von großer Bedeutung, neue Therapien zu entwickeln, die Haarausfall verhindern und das Nachwachsen der Haare fördern. In dieser Hinsicht hat die Alternativmedizin das Interesse der Forscher geweckt.

Alterungsbedingte morphologische, histochemische und biochemische Aspekte des männlichen Haarausfalls wurden durch eine Reihe von Studien an Stumpfschwanzmakaken aufgedeckt. Bei der männlichen Glatzenbildung war die Telogenphase verlängert, während die Anagenphase verkürzt war. Daher wird davon ausgegangen, dass für die Verbesserung des Haarausfalls die Aufrechterhaltung der Haarfollikelverlängerung, die vom frühen Anagen bis zum mittleren Anagen auftritt, sehr wichtig ist [26]. In der vorliegenden Studie haben wir dies demonstriertHaarwuchs-Fördernde Aktivität einer Kombinationsbehandlung LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt). Am wichtigsten ist jedoch, dass die kombinierte Verschreibung von LJE (54 mg/kg) und CTE (162 mg/kg) trotz oraler Verabreichung der Extrakte eine hervorragende Haarwachstumsaktivität zeigte. Bemerkenswerterweise war die Wirkung der Kombinationstherapie vergleichbar mit der dermalen Anwendung einer hohen Konzentration (3 Prozent) einer gereinigten Verbindung Minoxidil, obwohl die Konzentrationen der Wirkstoffe von LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)in der Haut nach oraler Verabreichung wurde nicht bestätigt.
In der radelnden Maushaut ist die -GTP-Aktivität während des Anagens ausgeprägt, aber während des Telogens stark vermindert [27]. In der Haut kommt das Enzym ausschließlich in den äußeren und inneren Wurzelscheiden der Haarfollikel unterhalb der Ebene der Talgdrüsen vor, in denen -GTP fehlt [27]. Im Vergleich dazu wird ALP in den Talgdrüseneinheiten prominent exprimiert, und die Aktivität nimmt im Bereich des Haarwachstums zu. ALP als angiogener Faktor verbessert die Nährstoffversorgung der dermalen Papillen und induziert dadurch die Dicke während des Anagens [28]. Es wurde jedoch bestätigt, dass die ALP-Aktivität in der alopezischen Haut abnahm [21]. In der mechanistischen Studie verstärkte die Referenzverbindung Minoxidil die Aktivität von -GTP und ALP deutlich, was darauf hindeutet, dass Minoxidil dies erleichtertHaarwuchsnicht nur durch die Induktion von Haarfollikeln
zur Anagenphase, sondern auch durch Verbesserung des Blutflusses durch Angiogenese. Da LJE die ALP-Aktivität erhöhte, wird vorgeschlagen, dass LJE eine vorteilhafte Wirkung auf zeigtHaarwuchsdurch sein angiogenes Potenzial, wie aus einer früheren Studie gefolgert wurde, hat Fucoidan, ein Wirkstoff von LJE, eine durchblutungsverbessernde Wirkung [29]. Im Vergleich dazu CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)verstärkte sowohl die -GTP- als auch die ALP-Aktivität, was auf seine Wirkungen auf die Induktion der Anagenphase sowie auf die Verbesserung des Blutflusses hindeutet. Aufgrund der synergistischen Wirkungen auf -GTP- und ALP-Enzyme wird angenommen, dass durch die gleichzeitige Verabreichung von LJE und CTE ein stärkeres Haarwachstum erreicht werden kann（Cistanche tubulosaExtrakt).
Es ist bekannt, dass verschiedene Zytokine und Wachstumsfaktoren, einschließlich EGF und VEGF, an der Regulierung der Haarmorphogenese und des Haarwachstums beteiligt sind [30,31]. Es ist von Interesse festzustellen, dass von dermalen Papillenzellen abgeleitete Faktoren chemotaktische Aktivitäten auf die umgebenden Zellen haben, was wiederum zur Förderung von führtHaarwuchs[32]. EGF wird in Verbindung mit der Entwicklung von Haarfollikeln exprimiert [33,34]. Obwohl die Expression sowohl von EGF als auch seines Rezeptors (EGFR) in der äußeren Wurzelscheide mit Abschluss des Follikelwachstums herunterreguliert wird, erholt sich ihre Expression, wenn die Follikelzellen in die Anagenphase eintreten. VEGF spielt eine wichtige Rolle bei der Angiogenese während der Entzündungsreaktion und der Tumorentwicklung [35]. Insbesondere das Gefäßnetzwerk ist eng mit dem Haarwachstumszyklus verbunden [36-38]. Daher wurde bestätigt, dass die Genexpression von VEGF entsprechend dem menschlichen Haarzyklus variiert [39].

Aus den Ergebnissen der vorliegenden Studie wird erklärt, dass dieHaarwuchs-fördernde Wirkung von Minoxidil kann auf seine potenzielle Hochregulierung von EGF und VEGF zurückzuführen sein, die das Follikelwachstum sowie die Angiogenese erleichtern. Obwohl LJE die VEGF-Expression nicht beeinflusste, erhöhte es den EGF-Gehalt in der Haut nach oraler Verabreichung. Im Vergleich dazu CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)war bei der Expression von sowohl EGF als auch VEGF wirksam. Insbesondere LJE und CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)übten additive Wirkungen auf die Expression der Wachstumsfaktoren aus.

Zusätzlich zur Verlängerung der Haare wurde die Integrität der Haarfollikel nach der Behandlung mit Minoxidil, LJE und/oder CTE bemerkenswert verbessert（Cistanche tubulosaExtrakt)bei der mikroskopischen Untersuchung. In der frühen Phase des Haarausfalls und der Glatzenbildung bei menschlichen Patienten und Tiermodellen war die Integrität der Follikel beeinträchtigt und die Dicke des Haarschafts reduziert, während sich die follikuläre Integrität und Schaftdicke bei regenerierenden Haaren erholten. Interessanterweise wurden solche positiven Wirkungen auf die Integrität und das Nachwachsen von Haarbestandteilen mit der oralen Verabreichung von LJE plus CTE erzielt（Cistanche tubulosaExtrakt), bei der die Wirkung mit der topischen Anwendung einer hohen Konzentration von Minoxidil vergleichbar war. Daher wird erwartet, dass die Kombination zur oralen Einnahme von LJE plus CTE（Cistanche tubulosaExtrakt)Im Vergleich zur dermalen Anwendung von Minoxidil könnte eine Verschreibung relativ bequem sein.
Im Maus-Alopezie-Modell ist eine Steroid-sensitive Lymphozyten-Infiltration um die Haarfollikel herum üblich und zeigt ein ähnliches Muster wie die Immuntherapie von menschlicher Alopezie mit Tränendrüsenentzündung [17,40]. In der vorliegenden Studie wurde die Carrageenan-induzierte Hautentzündung durch LJE und CTE deutlich abgeschwächt（Cistanche tubulosaExtrakt)Behandlung; dh die vaskuläre Exsudation und die Infiltration von Entzündungszellen wurden synergistisch unterdrückt. In der quantitativen Analyse wurden die wichtigsten Entzündungsmediatoren NO und PGE 2 nach gleichzeitiger oraler Verabreichung von LJE und CTE im Wesentlichen kontrolliert (Cistanche tubulosaExtrakt). Da LJE eine stärkere entzündungshemmende Aktivität als halbgereinigtes Fucoidan aufwies [16], wird interessanterweise angenommen, dass es neben Fucoidan einen oder mehrere zusätzliche Wirkstoffe in LJE geben könnte.

Zusammengenommen weisen die Ergebnisse auf eine kombinierte orale Behandlung mit LJE und CTE hin（Cistanche tubulosaExtrakt)verbessert Haarausfall durch Hochregulierung von Wachstumsfaktoren und damit verbundenen Enzymaktivitäten und teilweise über entzündungshemmendes Potenzial. Daher wird eine Kombination aus LJE und CTE vorgeschlagen（Cistanche tubulosaExtrakt)Unangemessene klinische Dosen und Verhältnisse könnten ein mögliches Rezept für Patienten mit Haarausfall sein.

Cistanche tubulosaProdukte extrahieren

Danksagungen

Diese Forschung wurde finanziell von der Leading Industry Development for Economic Region des Chungcheong Leading Industry Office, dem Korea Institute for Advancement of Technology (KIAT) und dem Ministry of Knowledge Economy (MKE) und teilweise vom High Value-Added Food Technology Development Program unterstützt , Ministerium für Landwirtschaft, Ernährung und ländliche Angelegenheiten (MAFRA; Zuschussnummer 113034-3).

Interessenkonflikt

Die Autoren erklären, dass kein finanzieller Interessenkonflikt besteht, um diese Ergebnisse zu veröffentlichen.

Aus: 'Wirksamkeit der Kombinationsbehandlung von Laminaria japonica- und Cistanche tubulosa-Extrakten beim Haarwuchs' vonKyungha Shin1# et al

--- Lab Anim Res 2015: 31(1), 24-32http://dx.doi.org/10.5625/lar.2015.31.1.24

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