Erforschung des Wirkmechanismus von Cistanche-Gesamtglykosiden bei entzündlichen Darmerkrankungen auf der Grundlage von Netzwerkpharmakologie und Tierversuchen Ⅲ

3 Ergebnisse und Analyse

3.1 Analyse der Gesamtglykosidziele und Krankheitsziele von Cistanche tubulosa

Importieren Sie die dreidimensionalen Strukturdateien vonWirkstoffein die PharmMapper-Datenbank, um die entsprechenden Zielpunkte für verschiedene Inhaltsstoffe zu erhalten. Die UniProt-Datenbank wurde verwendet, um die Proteinnamen- und Gennameninformationen für jedes Ziel zu erhalten. Durch die Kombination der den sieben Komponenten entsprechenden Zielpunkte wurden insgesamt 354 Ziele ermittelt. In der GeneCards-Datenbank wurden relevante Gene mit dem Stichwort „Entzündliche Darmerkrankung“ gesucht, die Suchergebnisse sortiert und schließlich 7851 Ziele ermittelt. Zeichnen Sie mithilfe von Ereignissen online ein Venn-Diagramm, um den Schnittpunkt der Wirkstoffziele von Cistanche tubulosa und der Zielpunkte von IBD zu erhalten. Wie in Abbildung 1 dargestellt, sind 254 Ziele des Wirkstoffs vonCistanche tubulosadie eine schützende Wirkung auf IBD haben, wurden erhalten.

Abb.2 PPI-Netzwerkdiagramm gemeinsamer Ziele

Abb.5 Komponenten-Ziel-Pfad-Netzwerk

Abb.7 Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa regulieren die mRNA der TGF- und mTOR-Signalwege bei IBD-Mäusen herunter

3.4 Die Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa verbessern den DSS-induzierten DAI-Score

Die Testergebnisse zeigten, dass mit Ausnahme der CZ-Gruppe die anderen drei Gruppen unterschiedlich starke Gewichtsverluste und okkultes Blut im Stuhl aufwiesen (Abbildung 6). Unter ihnen wies die DSS-Kontrollgruppe die höchste Körpergewichtsverlustrate, das stärkste Stuhlblut, den höchsten DAI und offensichtliche Stuhlblutungen am 6. Tag auf. Nach der Intervention mit Cistanche tubulosa-Gesamtglykosiden sank der DAI-Score allmählich und die Situation mit okkultem Blut nahm allmählich ab. Die HZ-Gruppe hatte die geringste Körpergewichtsverlustrate und die geringste Menge an verstecktem Blut im Kot. Die Ergebnisse zeigten, dass die Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa die durch entzündliche Darmerkrankungen verursachten physiologischen Reaktionen verbesserten.

CISTANCHE-ERGÄNZUNGSMITTEL FÜR IBD-BEHANDLUNG PHGS75 % ECH 30 % ACT 12 %

3.5 Die Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa regulieren die IBD herunter

Expression von mTOR- und TGF-Signalwegen in der Milz von Mäusen mTOR- und TGF-Signalwege sind zwei wichtige Signalwege, die Entzündungsreaktionen aktivieren. Die Expression von mTOR und TGF- im Milzgewebe von Mäusen wurde mittels qRT-PCR nachgewiesen. Die Ergebnisse zeigten, dass die mRNA-Expression von mTOR und TGF- bei den Mäusen der DSS-Kontrollgruppe im Vergleich zu denen bei normalen Mäusen signifikant erhöht war. Im Vergleich zu den DSS-Kontrollmäusen und zu Cistanche tubulosa war die Expression von mTOR und TGF- bei Mäusen nach der Intervention von Cistanche tubulosa signifikant verringert. Unter ihnen wies die Gruppe mit der hohen Dosis den deutlichsten Rückgang auf, und das Expressionsniveau stimmte im Wesentlichen mit dem der normalen Gruppe überein (Abbildung 7). Die Ergebnisse zeigten, dass die Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa die Expression der mTOR- und TGF-Signalwege herunterregulierten.

Abb.8 Heatmap der PICRUSt2-funktionalen Häufigkeitsclusterung

3.6 PICRUSt2 funktionale Annotationsanalyse

PICRUSt2 ist ein Bioinformatik-Tool zur Vorhersage der metagenomischen Funktion basierend auf biologischen 16S-rRNA-, ASV-Baum- und ASV-Geninformationen in der Greengene-Datenbank. Für die Funktionsvorhersage wurde eine ausgewählte COG-Datenbank verwendet. Die Ergebnisse zeigten, dass die Funktionen der Darmflora hauptsächlich die RNA-Verarbeitung umfassen. Struktur und Dynamik des Chromatins; Zellzykluskontrolle, Zellteilung, Chromosomensegmentierung; Verteidigungsmechanismus; Signalisierung der Zellwand-/Zellmembran-/Hüllenbiogenese; Zellen Es hat mehr als 20 Funktionen wie die extrazelluläre Struktur; intrazellulärer Transport, Sekretion und Vesikeltransport; Energieerzeugung und -umwandlung; Kohlenhydrattransport und Stoffwechsel. Wählen Sie die 15 am häufigsten vorkommenden Merkmale und ihre Häufigkeitsinformationen in jeder Stichprobe ausFür die Informationen wird eine Heatmap (Abbildung 8) erstellt und aus verschiedenen Funktionsebenen geclustert.

Im Vergleich zur CZ-Gruppe hatten die Mäuse der DZ-Kontrollgruppe COG1132 (Multidrug-Transportsystem vom ABC-Typ), COG0745 (DNA-Bindungsreaktionsregulator), COG1131 (Multidrug-Transportsystem vom ABC-Typ) und COG1961 (ortsspezifische DNA-Rekombinase). die DNA-Invertase Pin), COG0438 (Glycosyltransferase beteiligtin der Zellwandbiosynthese), COG0534 (Na +-getriebenMultidrug-Efflux-Pumpe), COG0642 (Signaltransduktions-Histidinkinase), COG1595 (DNA-gesteuerte RNA-Polymerase, spezialisierte Sigma-Untereinheit), COG0463 (Endonuklease), COG4974 (ortsspezifische Rekombinase XerD), COG2207 (AraC-Typ-DNA-Bindungsdomäne und AraC - enthaltende Proteine), COG1136 (ABC-Typ-Lipoprotein-Exportsystem).) und COG1309 (DNA-bindender Transkriptionsregulator) funktionelle Genexpressionsanomalien. Diese Gene sind hauptsächlich beteiligt an: V: Abwehrmechanismus; T: Signaltransduktionsmechanismus; M: Zellwand-/Zellmembran-/Hüllenbiogenese; I: Lipidtransport und Stoffwechsel; K: Transkription; L: Replikation, Rekombination und Reparatur.

Nachdem diesen sechs Funktionen Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa verabreicht wurden, entsprachen die Ausprägungen dieser verschiedenen physiologischen Funktionen denen der normalen Gruppe. Im Vergleich zu Mäusen in den Gruppen CZ und DZ wiesen Mäuse in der HZ-Gruppe eine hohe Expression der Gene COG1028 (Familie der kurzkettigen Alkoholdehydrogenase) und COG0451 (Nukleosid-Phosphat-Zucker-Epimerase) auf. Diese beiden Gene hängen mit I zusammen: Lipidtransport und Stoffwechsel. Und M: Die Zellwand-/Zellmembran-/Hüllen-Biogenesefunktionen sind eng miteinander verbunden. Daher wird spekuliert, dass die Gesamtglykoside von Cistanche tubulosa den Schaden von IBD-Mäusen regulieren könnten, indem sie den Lipidstoffwechsel, den Glukosestoffwechsel und die damit verbundenen Abwehrsignaltransduktionsmechanismen bei Mäusen regulieren.