Abstrakt

Ziel: Erforschung des möglichen Mechanismus of Cistanche-GesamtglykosideAnentzündliche Darmerkrankung(IBD) durch Netzwerkpharmakologie und tierexperimentelle Forschung. Methoden: Die Pubchem-Datenbank und Literatur wurden verwendet, um die dreidimensionalen Strukturen der sieben Hauptwirkstoffe in Cistanche-Gesamtglykosiden zu sammeln. Erhalten Sie Informationen zu wirkstoffbezogenen Zielen und IBD-bezogenen Genzielen über Datenbanken wie PharmMapper, UniProt und GeneCards. Zeichnen Sie dann ein Venn-Diagramm zwischen den Wirkstoffzielen von Cistanche und den Zielen von IBD, um die Schnittpunkte zu erhalten, und laden Sie die Schnittpunkte in die String-Datenbank für die Screening-Analyse der Protein-Protein-Interaktion (PPI) hoch. Verwendung der DAVID-Datenbank zum Vergleich der Wirkstoffe von Cistanche-Gesamtglykosiden bei IBD

Ziele, die schützende Wirkungen ausüben, wurden analysiert vonGenontologie (GO)funktionelle Anreicherung und Anreicherung des Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG)-Signalwegs. Mit der Software Cytoscape3.8.0 wurde ein „Wirkstoff-Zielweg-Netzwerk“ aufgebaut, um die Gesamtzahl vorherzusagenCistanche. Ziele und Wege von Glykosiden bei der Behandlung von IBD. Zur weiteren Überprüfung wurde ein IBD-Mausmodell erstellt. Ergebnisse: Es gibt 254 Ziele der gesamten Wirkstoffe von Cistanche, die eine schützende Wirkung auf IBD haben, und 30 Kernziele wurden durch PPI-Analyse herausgesucht. GO-Funktionsanreicherung und KEGG-Signalweganreicherung ergaben, dass Cistanche-Gesamtglykoside hauptsächlich Krebspfade, mTOR-Signalpfade, TGF-Signalpfade, JAK-STAT-Signalpfade, AMPK-Signalpfade usw. regulieren und dadurch Zellsignalisierung, Proliferation, Differenzierung und Apoptose beeinflussen können. Eine Rolle spielen. Die Ergebnisse von Tierversuchen zeigen, dass Cistanche-Gesamtglykoside den Gewichtsverlust und Stuhlblutungen bei IBD-Mäusen wirksam lindern, den Krankheitsaktivitätsindex senken und die Expression von zwei Zielproteinen in der Milz, mTOR und TGF-, wirksam hemmen können. Durch die Sequenzierung des 16S-rDNA-Amplikons von Mäusefäkalien zur funktionellen Annotation des PICRUSt2-Gens ergab die Analyse, dass Cistanche-Gesamtglykoside die IBD-Erkrankung und die Zellwand-/Zellmembran-/Hüllenbiogenese, den Lipidstoffwechsel, Zuckerstoffwechselprozesse und die damit verbundene Abwehrsignaltransduktion bei Mäusen regulieren . Es besteht eine enge Beziehung zum Leitmechanismus, die mit den Ergebnissen der Netzwerkpharmakologie übereinstimmt. Fazit: Cistanche-Gesamtglykoside können mehrere Komponenten und mehrere Ziele passieren

Punkte und mehrere Wege können IBD wirksam verhindern, was neue Methoden und neue Ideen zur Aufklärung der klinischen Anwendung von Cistanche bei der Behandlung von IBD liefert. Sein spezifischer Mechanismus und seine Materialbasis müssen durch eingehendere experimentelle Forschung überprüft werden.

Schlüsselwörter:Cistanche-Gesamtglykoside; Netzwerkpharmakologie;Entzündung;

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Eine Besonderheit ist die entzündliche Darmerkrankung (IBD).chronische entzündliche Darmerkrankungmit unbekannter Ursache, einschließlich zwei Subtypen: Morbus Crohn (CD) und Colitis ulcerosa (Colitis ulcerosa, UC) [1]. Bis zum Jahr 2017 wurde weltweit bei 6,8 Millionen Menschen IBD diagnostiziert, und die weltweite Inzidenz und Prävalenz nimmt von Jahr zu Jahr zu. Die Prävalenz von IBD ist in Nordamerika und Westeuropa höher [2-3]. Von 199{21}} bis 2019 stieg die Inzidenzrate von IBD in China von 1,45/100,000 auf 3,62/100,000, mit einem Gesamtanstieg von 149,66 %; Die Sterblichkeitsrate sank von 0,47/100,000 auf 0,33/100,000, mit einem Gesamtrückgang von 29,79 %[4]. Da Chinas Bevölkerung altert, wird ein geringfügiger Anstieg der hohen Inzidenz älterer Patienten eine enorme Belastung für das Medizin- und Gesundheitssystem darstellen.

CISTANCHE-ERGÄNZUNGSMITTEL ZUR VERSTOPFUNGSLINDERUNG

Studien haben gezeigt, dass eine Ernährungsregulierung dazu beitragen kann, Symptome wie Bauchschmerzen oder Durchfall bei IBD-Patienten zu lindern und deren Komplikationen zu reduzieren; Es kann auch die Zusammensetzung und Funktion von Darmmikroorganismen regulieren, die Darmhomöostase beeinflussen und normale Darmfunktionen aufrechterhalten [5]. Als Nahrungsmittel- und Heilpflanze mit langer Geschichte wird Cistanche in der traditionellen chinesischen Medizin häufig zur Behandlung von Darmerkrankungen eingesetzt. Es wird auch angenommen, dass es vielfältige Auswirkungen auf die Gesundheit hat, weshalb es im Bereich der gesunden Ernährung große Aufmerksamkeit erregt hat [6-7 ]. Im Jahr 2020 wurde Cistanche (Wüste) als lebensmittel- und arzneimittelhomologe Substanz aufgeführt und Pilotproduktions- und Betriebsarbeiten wurden gestartet [6-7]. Als Nahrungsmittel kann Cistanche IBD im täglichen Leben verhindern; Als medizinisches Material kann es die Symptome während der Behandlung von IBD lindern und hat einen gewissen wirtschaftlichen und medizinischen Wert.

Einige Wissenschaftler haben herausgefunden, dass wässriger Extrakt aus Wüsten-Cistanche das Immunsystem stimulieren, die Immunaktivität regulieren und entzündlichen Darmerkrankungen vorbeugen kann [8]. Jia et al. [9] fanden heraus, dass aus Cistanche extrahiertes Echinacosid (ECH) die DSS-induzierte Kolitis bei Mäusen lindern kann; ECH kann den Zelltod verhindern und die Schleimhaut verbessern, indem es die Proliferation von Darmepithelzellen stimuliert und TGF- hochreguliert. Gewebereparatureffekt[10]. ECH kann auch LPS-induzierte Apoptose und Entzündung in Darmepithelzellen von Ratten lindern, indem es das Expressionsniveau des mTOR/STAT3-Signalwegs hemmt [11]. Darüber hinaus kann Verbascosid im Körper als Fänger freier Radikale wirken, das Fortschreiten der durch 2,4-Dinitrobenzolsulfonsäure (DNBS) induzierten Kolitis bei Ratten verlangsamen und Gewebeschäden reduzieren [12].

CISTANCHE-ERGÄNZUNGSMITTEL ZUR VERSTOPFUNGSLINDERUNG

Netzwerkpharmakologie ist ein interdisziplinäres Fach, das Bioinformatik, Biochemie, Pharmakologie und Computerwissenschaften integriert. Es nutzt Big Data, Bioinformatik und Computertools, um den komplexen Arzneimittelstoffwechsel in Organismen zu analysieren und zu simulieren. Die Vorhersage von Wirkmechanismen und Arzneimittelwirksamkeit bietet wichtige Unterstützung für die Entwicklung neuer Arzneimittel und die Optimierung bestehender Arzneimittel [13-14]. Der Kern der Netzwerkpharmakologie besteht darin, ein Netzwerkmodell zwischen Arzneimitteln und Molekülen in Organismen zu etablieren, um die Wechselbeziehungen zwischen Arzneimitteln und Zielproteinen, Stoffwechselwegen, Zellsignalwegen usw. aufzudecken [15]. Mit der kontinuierlichen Weiterentwicklung von Wissenschaft und Technologie wird die Netzwerkpharmakologie weiterhin eine wichtige Rolle in der Medizin spielen und zur Verbesserung der Lebensqualität und Gesundheit der Patienten beitragen.

Studien haben gezeigt, dass Cistanche-Gesamtglykoside die durch LPS induzierte Entzündungsreaktion von BV2-Zellen wirksam hemmen können [16], das Fortschreiten von Leberkrebs hemmen [17], die Leber schützen [18] und das Gedächtnis und die Wahrnehmung verbessern können [19-20 ] und widerstehen der Alterung [ 21] und anderen Funktionen. Derzeit gibt es nur wenige Forschungsberichte über die Wirkung von Cistanche-Gesamtglykosiden bei entzündlichen Darmerkrankungen. Diese Studie untersucht den Wirkungsmechanismus von Cistanche-Gesamtglykosiden bei entzündlichen Darmerkrankungen auf der Grundlage von Netzwerkpharmakologie und Tierversuchen und liefert neue Methoden und Ideen für deren klinische AnwendungBehandlung von IBD.

1 Materialien und Instrumente

1.1 Reagenzien

Dextran-Natriumsulfat (DSS, relatives Molekulargewicht 36 000 ~ 50 000), American MP Company; Testkit für Urin und okkultes Blut im Stuhl, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute; absolutes Ethanol, Sinopharm Chemical Reagent Co., Ltd.; Xylol, Shanghai Ling Feng Chemical Reagent Co., Ltd.; PBS-Puffer, RNA-Extraktionslösung, Erststrang-Reverse-Transkriptions-Kit, 2× Echtzeit-quantitative PCR-Amplifikations-Vormischungslösung, RTQPCR-Primer, Wuhan Sevier Biotechnology Co., Ltd.; steriles und enzymfreies Wasser,

HyClone USA.

CISTANCHE-ERGÄNZUNGSMITTEL ZUR VERSTOPFUNGSLINDERUNG

1.2 Hauptinstrumente und Ausrüstung

KZ-III-FP Niedertemperaturmühle, Wuhan Sevier Biotechnology Co., Ltd.; Hochgeschwindigkeitszentrifuge CT15RE, HITACHI Company of Japan; CFX-Fluoreszenz-quantitatives PCR-Instrument, Bio-rad Company aus den Vereinigten Staaten; SW-CJ-1FD Ultra-Clean-Werkbank, Suzhou Antai Air Technology Co., Ltd.; NanoDrop2000 Ultraspurenspektrophotometer, Thermo Company, Deutschland; FBZ2001-up-p Standardreagenz-Reinwassermessgerät, Qingdao Fulham Technology Co., Ltd.; INFINITE MNANO Multifunktions-Mikroplatten-Reader, TECAN, Switzerland Company, UV1600 UV-Spektrophotometer, Shanghai Miputa Instrument Co., Ltd.

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