In-vitro-Anti-Aging-Aktivitäten von ethanolischen Extrakten aus rosa Rambutan (Nephelium Lappaceum Linn.) für Hautanwendungen Teil 1

abstrakt

Die Hautalterung ist durch Merkmale wie Falten, Elastizitätsverlust, Schlaffheit, raues Aussehen, Melasma und Sommersprossen gekennzeichnet. Mehrere Arten der Forschung haben sich auf die Vorbeugung und Behandlung der Hautalterung mit vielen natürlichen Inhaltsstoffen konzentriert. Ziel dieser Studie war es, die Anti-Aging-Aktivitäten der ethanolischen Extrakte von Pink Rambutan (PR) (Nephelium lappaceum Linn.) aus Blättern (L), Zweigen (B), Samen (S) und Schalen gegen Hautalterung zu bewerten reife (R) und junge (Y) Früchte. Die Extraktionsausbeuten des gesamten Pink Rambutan (PR), das durch Mazeration (M) und Soxhlet-Extraktion (Sox) unter Verwendung von 95 Prozent Ethanol als Lösungsmittel extrahiert wurde, lagen zwischen 10,62 Prozent und 30 ,63 Prozent . Flavonoide wurden als wichtigste sekundäre Pflanzenstoffe in fast allen PR-Extrakten gefunden. Die PR-YM- und PR-Y-Sox-Extrakte ergaben den höchsten Gesamtphenolgehalt im Folin-Ciocalteu-Assay von 67,60 ± 4,38 mgGAE/g und den Gesamtflavonoidgehalt im modifizierten kolorimetrischen Aluminiumchlorid-Assay von 678,72 ± 23,59 mgQE/g. Die PR-LM-Extrakte zeigten die drei höchsten antioxidativen Aktivitäten; Abfangen freier Radikale (SC50 von 0.320 ± 0.{{40}}70 mg/ml) , Hemmung der Lipidperoxidation (LC50 von 0,274 ± 0,029 mg/ml) und Metallchelatbildungsaktivität (MC50 von 0,203 ± 0,021 mg/ml). Alle PR-Extrakte zeigten bei 0,01 und 0,1 mg/ml keine Zytotoxizität gegenüber B16F10-Zellen bzw. menschlichen Hautfibroblasten. Ebenso zeigte der PR-R-Sox-Extrakt die höchste Anti-Melanogenese auf B16F10-Zellen (52,7 ± 0,9 Prozent) und die Pilz-Tyrosinase-Hemmaktivität (IC50 von 0,04 ± 0,02 mg/ml), die deutlich vergleichbar war mit Kojisäure (p < 0,05). Der PR-Y-Sox-Extrakt zeigte Kollagenbiosynthese durch die Sirius-Red-Methode und die Stimulation von Anti-Aging-Genen (Sirt1 und Foxo1) auf menschlichen Hautfibroblasten durch die RT-PCR-Methode, die den Standards ʟ-Ascorbinsäure und ähnelte Resveratrol bzw. Diese Studie legt nahe, dass die PR-R-Sox- und PR-Y-Sox-Extrakte als natürliche Anti-Aging-Wirkstoffe zur Aufhellung und Anti-Falten-Wirkung in der Kosmetik-, Cosmeceutical- und Pharmaindustrie weiterentwickelt werden können. 2023 Der/die Autor(en). Herausgegeben von Elsevier BV im Auftrag der King Saud University.

Glykosid von Cistanche kann auch die SOD-Aktivität im Herz- und Lebergewebe erhöhen und den Gehalt an Lipofuscin und MDA in jedem Gewebe erheblich reduzieren, wodurch verschiedene reaktive Sauerstoffradikale (OH-, H₂O₂ usw.) effektiv abgefangen und vor verursachten DNA-Schäden geschützt werden durch OH-Radikale. Cistanche-Phenylethanoidglykoside haben eine starke Fähigkeit, freie Radikale abzufangen, eine höhere Reduktionsfähigkeit als Vitamin C, verbessern die Aktivität von SOD in der Spermiensuspension, reduzieren den MDA-Gehalt und haben eine gewisse schützende Wirkung auf die Funktion der Spermienmembran. Cistanche-Polysaccharide können die durch D-Galaktose verursachte Aktivität von SOD und GSH-Px in Erythrozyten und Lungengewebe experimentell seneszierender Mäuse steigern, außerdem den Gehalt an MDA und Kollagen in Lunge und Plasma verringern und den Gehalt an Elastin erhöhen eine gute Abfangwirkung auf DPPH, verlängert die Zeit der Hypoxie bei seneszenten Mäusen, verbessert die Aktivität von SOD im Serum und verzögert die physiologische Degeneration der Lunge bei experimentell seneszenten Mäusen. Bei der zellulären morphologischen Degeneration haben Experimente gezeigt, dass Cistanche über eine gute antioxidative Fähigkeit verfügt und hat das Potenzial, ein Medikament zur Vorbeugung und Behandlung von Hautalterungskrankheiten zu sein. Gleichzeitig hat Echinacosid in Cistanche eine erhebliche Fähigkeit, freie DPPH-Radikale abzufangen, reaktive Sauerstoffspezies abzufangen und den durch freie Radikale verursachten Kollagenabbau zu verhindern, und hat auch eine gute Reparaturwirkung auf Schäden durch freie Thymin-Radikalanionen.

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1. Einleitung

Weltweit wächst die alternde Bevölkerung schneller als alle anderen Altersgruppen. Die Weltgesundheitsorganisation schätzt, dass die Weltbevölkerung über 60 Jahre und älter im Jahr 2050 2,1 Milliarden betragen wird und mit häufigen Erkrankungen wie Arthrose, Diabetes, Hörverlust, Alzheimer-Krankheit, chronisch obstruktiven Lungenerkrankungen (COPD), Depressionen und Demenz konfrontiert sein wird , Krebs sowie neurologische und kardiovaskuläre Erkrankungen (Darawsha et al., 2021, WHO, 2021). Die Haut ist eines der sichtbarsten Organe im Alterungsprozess. Hautalterung hängt mit der sozialen Kommunikation zusammen, denn gutes Aussehen hinterlässt einen guten Eindruck und stärkt das Selbstvertrauen. Die Hautalterung wird durch Umwelt- oder externe Faktoren wie Luftschadstoffe, Xenobiotika, UV-Strahlung und Rauchen sowie durch interne Faktoren wie Genetik, Zellstoffwechsel, Hormone und Stoffwechselprozesse beeinflusst (Darawsha et al., 2021). Viele neuere Forschungen konzentrieren sich auf die Erhaltung gesunder Haut durch Verzögerung, Vorbeugung und Behandlung der Hautalterung, um das Erscheinungsbild der Haut durch Regeneration und Stimulierung natürlicher physiologischer Prozesse zu verbessern und die Haut vor Alterung zu schützen.

Die reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) aus dem zellulären oxidativen Stress können den apoptotischen Zelltod auslösen, indem sie entzündliche Prozesse und deren Signalwege aktivieren, die Metalloproteinasen (MMPs)-Spiegel erhöhen, ungesättigte Lipide abbauen und die Strukturen der Fibrillen verändern Proteine, darunter Kollagene und Elastin, die aufgrund der Hautalterung entstehen (Miastkowska und Sikora, 2018, Darawsha et al., 2021). Nach der Melanogenese ist Melanin ein polyphenolisches Pigment, das in Melanosomen von Melanozyten produziert wird, die sich in den Augen, Haaren und der Haut von Tieren befinden und die durch ultraviolette Strahlung geschädigte Haut schützen können (Ali und Naaz, 2018). Tyrosinase ist das kupferhaltige Enzym, das durch Hydroxylierungs- und Oxidationsreaktionen L-Tyrosin in L-Dopa und L-Dopa in Odopaquinon-H plus umwandeln kann und dann über Zwischenstufen schließlich zu Melanin gelangt (Solano, 2018). Die ROS spielen auch eine wichtige Rolle bei der Regulierung des zellulären oxidativen Stresses in Melanozyten, bei denen es sich um dendritische Zellen handelt, die in der Basalschicht der Epidermis der Haut lokalisiert sind. Die Entzündungsmediatoren in der Haut wie Interleukin (IL), Prostaglandin E2, Tumornekrosefaktor und Interferon-Gamma, die hauptsächlich von Th-Zellen, Lymphozyten, dendritischen Zellen und Monozyten sezerniert werden, regulieren die stimulierende Tyrosinaseaktivität und die Hochregulierung von TYRP{{11 }} und TYRP-2-Expression und Förderung der Melanozytenproliferation, die mit der Melaninproduktion zusammenhängt (Fu et al., 2020). Allerdings führt die Überproduktion und hohe Anreicherung von Melanin zu Hautalterung wie Melasma, Sommersprossen, dunklen Flecken, Lentigo und Hyperpigmentierungsstörungen, was ästhetisch unerwünscht sein kann (Ali und Naaz, 2018).

Sirtuine sind nukleäre Nicotinamid-Adenin-Dinukleotid (NAD plus)-abhängige Klasse-III-Histondeacetylasen, die die Seneszenz und Apoptose der Zellen sowie das Zellwachstum regulieren, indem sie p53, Forkhead-Transkriptionsfaktoren (FOXOs) und den Peroxisomen-Proliferator-aktivierten Gamma-Rezeptor (PPAR-c) steuern Regulierungen des Stoffwechsels, der Zelldifferenzierung, des Überlebens und des Alterns. (Sohn et al., 2021). SIRT1, SIRT6 und selten SIRT7 in der Sirtuin-Familie wurden für dermatologische Probleme reguliert, darunter Hautentzündungen, Hautinfektionen, Krebs, Autoimmunerkrankungen, erbliche dermatologische Erkrankungen, insbesondere Hautalterung (Son et al., 2021). Außerdem ist FOXO1 ein Transkriptionsfaktor, der im Zytoplasma lokalisiert ist. SIRT1 deacetyliert FOXO1 und aktiviert die FoxO1-Transkription auf mehreren Wegen wie MAPK (Mitogen-aktivierte Proteinkinase), Proteinkinase (AKT) und pankreatischen und duodenalen Homöobox-1 (Pdx1)-Wegen (Sin et al., 2015) . Die Erhöhung der Sirt1- und Foxo1-mRNA-Expression reguliert den Glukosestoffwechsel, die DNA-Reparatur, den Neuroprotektion, die Differenzierung, den Gefäßschutz und die Insulinsekretion. und verringert Alterung und altersbedingte Krankheiten wie oxidativen Stress, Zellalterung, Neurodegeneration, Entzündungen, Insulinresistenz, Herz-Kreislauf-Erkrankungen, Adipositas und Lebersteatose sowie Hautalterung (Son et al., 2021).

Das Pharmaceuticals (Drugs) and Cosmetics Act von 1940 definiert ein Arzneimittel als „alle Arzneimittel zur inneren oder äußeren Anwendung durch Menschen oder Tiere sowie alle Substanzen, die dazu bestimmt sind, zur Diagnose, Behandlung, Linderung oder Vorbeugung verwendet zu werden.“ Jede Krankheit oder Störung bei Menschen oder Tieren. „Kosmetisch ist jeder Artikel, der dazu bestimmt ist, gerieben, gegossen, besprenkelt oder aufgesprüht, in einen beliebigen Teil des menschlichen Körpers eingeführt oder darauf aufgetragen zu werden, um ihn zu reinigen, zu verschönern, die Attraktivität zu steigern oder ihn zu verändern Erscheinungsbild und umfasst alle Artikel, die als Bestandteil von Kosmetika verwendet werden sollen. Kosmezeutika sind kosmetisch-pharmazeutische Hybride, die die Gesundheit und Schönheit durch Inhaltsstoffe verbessern sollen, die die biologischen Texturen und Funktionen der Haut beeinflussen (Joshi und Pawar, 2015). Derzeit Anti-Aging Kosmetika, Cosmeceuticals und Pharmazeutika enthalten Wirkstoffe, die freie Radikale wie Vitamin E, Vitamin C, Glutathion und Coenzym Q10 neutralisieren und die Hautalterung durch Falten und Melasma verzögern, wie etwa Nukleinsäuren, Proteinhydrolysate, Algenextrakte, Pflanzenöle und Phytohormone , Zytokine und Neuropeptide (Kim et al., 2015, Miastkowska und Sikora, 2018) sowie Polyphenole und Flavonoide aus verschiedenen natürlichen Pflanzenextrakten wie den Extrakten von Vigna subterranean, Stichopus japonicus, Citrus aurantifolia, Ananus comosus und Manihot esculenta (Chutoprapat et al., 2020; Ding et al., 2020 Boonpisuttinant et al., 2022, Jampa et al., 2022).

Rosa Rambutan oder Ngo See Chom Pu (Nephelium lappaceum L.) ist eine Pflanze aus der Familie der Sapindaceae, der einheimischen Pflanze des Distrikts Klung, Provinz Chanthaburi, im östlichen Teil Thailands. Rosa Rambutan-Früchte (PR) sind süß und haben einen guten Geschmack. Sie haben eine dünne Schale mit einer gelblich-rosa Schale und einen hellrosa Stachel mit einer hellgrünen Spitze, was sich von den anderen Arten wie Ngo Rongrien und Ngo Nasarn unterscheidet, die hellrote Schalen und Stacheln haben. Die wichtigsten sekundären Pflanzenstoffe in Rambutanpflanzen sind Ellagsäure, Corilagin, Geraniin, Quercetin und Rutin (Phuong et al., 2019, Phuong et al., 2020). Es wurde zuvor berichtet, dass die Schalen von Rambutan anderer Arten einen hohen Gehalt an phenolischen Verbindungen aufweisen und viele biologische Aktivitäten aufweisen, wie zum Beispiel DPPH-Radikalfänger, entzündungshemmend, antiviral, krebsbekämpfend und antibakteriell (Chingsuwanrote et al ., 2016; Hernández-Hernández et al., 2019; Rohman, 2017; Sukmandari et al., 2017; Thitilertdecha und Rakariyatham, 2011). Für die Extrakte des Rosa Rambutan gibt es jedoch keinen wissenschaftlichen Bericht über biologische Aktivitäten, insbesondere Anti-Aging-Wirkung für Hautgesundheit und ästhetische Zwecke. Daher zielte die aktuelle Studie darauf ab, das Potenzial von PR-Extrakten in Hautanwendungen in Kosmetika, Cosmeceuticals und Pharmazeutika zu bewerten und zu bewerten. Die Untersuchungen der biologischen Anti-Aging-Aktivitäten in vitro, einschließlich der Tyrosinase-Hemmung und der Antimelanogenese, der Kollagenbiosynthese und der Stimulierung der Sirt1- und Foxo1-mRNA-Expression sowie der drei antioxidativen Aktivitäten sowie der Zytotoxizität auf menschliche Hautfibroblasten, zeigen die Wirksamkeit und Sicherheit der PR-Extrakte, die zu natürlichen Hautpflegeprodukten weiterentwickelt werden können.

2. Materialien und Methoden

2.1. Vorbereitung und Extraktion

Die fünf Teile von Pink Rambutan (PR), einschließlich Blätter (L), Zweige (B), Samen (S) und Schalen von reifen (R) und jungen (Y) Früchten, wurden von Juni bis Juni im Distrikt Klung, Chantaburi, Thailand, gesammelt August 2017. Die Belegexemplare wurden von einem Botaniker im Forest Herbarium of Thailand identifiziert und im Herbarium (Code: RSPG-RMUTT-0102) für innovative Naturprodukte der Thai Wisdom Research Unit, Fakultät für Integrative Medizin, RMUTT, registriert , Pathum Thani, Thailand. Alle Teile des Pink Rambutan wurden geschnitten, mit Leitungswasser gewaschen, bei 60 Grad in einem Heißluftofen getrocknet und mit einer Mühle zu Pulver gemahlen. Alle Bestandteile des Pink Rambutans wurden durch Mazeration und Soxhlet-Extraktion unter Verwendung von 95-prozentigem Ethanol als Lösungsmittel extrahiert. Dieses Lösungsmittel wird am häufigsten für die Extraktion von Heilpflanzen verwendet, da es sicher und wirtschaftlich ist. Kurz gesagt, 10 g jedes PR-Pulvers wurden durch (1) extrahiert: Mazeration (M) in 100 ml 95-prozentigem (v/v) Ethanol (Bangkok Alcohol Industrial, Thailand) unter Schütteln bei 200 U/min bei Raumtemperatur (25 ± 2 Grad) für 48 Stunden; und (2): die Soxhlet-Extraktion (Sox) mit 100 ml 95-prozentigem (v/v) Ethanol bei 80 ± 5 Grad C für 24 Stunden. Danach wurden die Extrakte zunächst durch Watte filtriert und anschließend durch ein an eine Vakuumpumpe angeschlossenes Filterpapier geleitet. Die Filtrate wurden gesammelt, gepoolt und mit einem Rotationsverdampfer getrocknet. Die PR-Rohextrakte wurden in Glasflaschen aufbewahrt und bis zur Verwendung bei 4 Grad im Kühlschrank aufbewahrt. Die Extraktionsausbeuten wurden auf Basis des Trockengewichts ermittelt. Das 95-prozentige Ethanol wurde vor den Experimenten als Lösungsmittel zum Auflösen der PR-Extrakte verwendet.

2.2. Phytochemikalien, Gesamtphenole und Flavonoide sowie Quercetingehalt

Phytochemikalien wie Anthrachinone, Alkaloide, Carotinoide, Glykoside, Flavonoide, Tannine und Xanthone der PR-Extrakte wurden wie zuvor beschrieben untersucht (Boonpisuttinant et al., 2022). Die qualitativen Ergebnisse werden als (plus) für das Vorhandensein und (-) für das Fehlen von sekundären Pflanzenstoffen ausgedrückt. Der Gesamtphenolgehalt (TPC) wurde mit dem Folin-Ciocalteu-Assay wie zuvor beschrieben bestimmt (Boonpisuttinant et al., 2022). Kurz gesagt, 50 lL der PR-Extrakte, 75 lL Folin-Ciocalteu-Reagenz (Sigma-Aldrich, USA) und 75 lL 7,5 Prozent (Gew./Vol.) Na2CO3 (Loba Chemie, Indien) wurden in einen {{13} }Well-Mikrotiterplatte, vorsichtig gemischt und dann 90 Minuten lang bei Raumtemperatur an einem dunklen Ort inkubiert. Anschließend wurden die Absorptionen bei der Wellenlänge von 725 nm mit einem Mikroplatten-Lesegerät gemessen. Die Phenolgehalte wurden anhand der Standardkurve von Gallussäure (Sigma-Aldrich, USA) berechnet. Die Ergebnisse wurden in mg Gallussäureäquivalenten (GAE)/g Extrakt angegeben.

Der Gesamtflavonoidgehalt (TFC) wurde mit der Methode des modifizierten Aluminiumchlorids nach Shraim et al. bestimmt. (2021). Kurz gesagt, 50 lL der PR-Extrakte, 25 lL 10-prozentiges AlCl3 (BDH Prolabo Chemicals, Belgien) und 100 lL 5-prozentiges NaNO2 (Loba Chemie, Indien) wurden in eine 96--Well-Mikrotiterplatte gegeben. Nach 5-minütiger Inkubation wurden den Platten 25 l 1 M NaOH (BDH Prolabo Chemicals, Belgien) zugesetzt. Die Reaktion wurde durch 10-minütige Inkubation bei Raumtemperatur ermöglicht. Anschließend wurden die Absorptionen bei der Wellenlänge von 450 nm mit einem Mikroplatten-Lesegerät gemessen. Der Flavonoidgehalt wurde anhand der Standardkurve von Quercetin (Sigma-Aldrich, USA) berechnet. Die Ergebnisse wurden in mg Quercetin-Äquivalenten (QE)/g Extrakt angegeben.

Der Quercetingehalt in den PR-Extrakten wurde mit der HPLC-Methode untersucht (Shaikh und Jain, 2018). Kurz gesagt wurde eine genau abgewogene Menge des Standard-Quercetins in Methanol in einem 100-ml-Messkolben gelöst, um eine Stammlösung von 1000 lg/ml zu erhalten. Die Standardlösungen wurden anschließend 2-fach seriell auf 3,125 mg/ml verdünnt. Zur Probenvorbereitung wurden 2,5 g der Extrakte in 25 ml Methanol in 25 ml des Messkolbens gelöst, um 1,000 mg/ml zu erhalten. Die gesamte Analyse wurde auf einem Agilent 1260 Infinity HPLC-System (Waters, Milford, MA, USA) durchgeführt, das mit einem Photodiodenarray-Detektor ausgestattet war. Die verwendete analytische Säule war eine Agilent Zorbax Extended Column C18 (5 l × 100 mm × 4,6 mm) mit einer mobilen Phase aus Methanol: 0,1 Prozent Orthophosphorsäure (75:25) bei einer Flussrate von 0,6 ml/min. Die Säulentemperatur wurde bei 25 Grad gehalten und die Detektionswellenlänge auf 370 nm eingestellt. Alle Lösungen und Lösungsmittel wurden durch einen 0,22-lm-Filter filtriert und entgast. Das Probeninjektionsvolumen betrug 10 lL und die Laufzeit betrug 8 Minuten.

2.3. Antioxidative Aktivität

2.3.1. Aktivität zum Abfangen freier Radikale

Die freie Radikalfängeraktivität der PR-Extrakte wurde mit der 2,2-Diphenyl-1-picrylhydrazyl (DPPH)-Methode von Boonpisuttinant et al. untersucht. (2019). Eine Menge von 100 μl der PR-Extrakte oder ʟ-Ascorbinsäure (Sigma-Aldrich, USA) als Positivkontrolle und 100 μl einer 0,1 mg/ml DPPH-Lösung (Sigma-Aldrich, USA) in absolutem Ethanol wurden zugegeben 96-Well-Mikroplatte. Nach 30-minütiger Inkubation bei Raumtemperatur an einem dunklen Ort wurden die Absorptionen bei der Wellenlänge von 515 nm mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen. Die Prozentsätze der DPPH-Radikalfängeraktivität wurden nach der folgenden Formel berechnet:

Prozent DPPH-Radikalfängeraktivität {{0}}[A0 -A1/A0]×100 (1)

Dabei ist A0 die Absorption der Kontrolle und A1 die Absorption der Proben. Die Konzentrationen, die eine 50-prozentige Abfangwirkung bewirken (SC50), wurden dann aus der Grafik berechnet, die zwischen der prozentualen Abfangwirkung freier Radikale und den Probenkonzentrationen aufgetragen ist.

2.3.2. Hemmung der Lipidperoxidation

Die Hemmung der Lipidperoxidation der PR-Extrakte wurde mit der Eisenthiocyanat-Methode von Boonpisuttinant et al. untersucht. (2019). Eine Menge von 50 lL der PR-Extrakte oder a-Tocopherol (Sigma-Aldrich, USA) als Positivkontrolle und 50 lL Linolsäure in 50 Prozent (v/v) DMSO (Sigma-Aldrich, USA) wurden zugegeben 96-Well-Mikroplatte. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von 50 lL 5 mM NH4- SCN und 50 lL 2 mM FeCl2 gestartet. Nach 60-minütiger Inkubation bei 37 Grad an einem dunklen Ort wurden die Absorptionen bei einer Wellenlänge von 490 nm mit einem Mikroplatten-Lesegerät gemessen. Die Prozentsätze der Lipidperoxidationshemmung wurden nach der folgenden Formel berechnet:

Dabei ist A0 die Absorption der Kontrolle und A1 die Absorption der Proben. Die Konzentrationen, die eine 50-prozentige Hemmung der Lipidperoxidation bewirken (LC50), wurden aus der Grafik berechnet, die zwischen der prozentualen Hemmung der Lipidperoxidation und den Probenkonzentrationen aufgetragen ist.

2.3.3. Metallchelatbildung

Die Metallchelatbildung der PR-Extrakte wurde mit der Eisenionenchelatisierungsmethode (FIC) von Boonpisuttinant et al. untersucht. (2019). Eine Menge von 50 lL der PR-Extrakte oder EDTA (Loba Chemie, Indien) als Positivkontrolle, 1 mg/ml FeCl2 und 50 lL 1 mg/ml Ferrozin in 1 Prozent HCl (TCI, USA) wurden hinzugefügt eine 96-Well-Mikroplatte. Nach 60-minütiger Inkubation bei Raumtemperatur an einem dunklen Ort wurden die Absorptionen bei der Wellenlänge von 570 nm mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen. Die Prozentsätze der Metallchelatisierung wurden nach der folgenden Formel berechnet:

Dabei ist A0 die Absorption der Kontrolle und A1 die Absorption der Proben. Die Konzentrationen, die eine 50-prozentige Metallchelatbildung (MC50) bewirken, wurden aus der Grafik berechnet, die zwischen der prozentualen Metallchelatbildung und den Probenkonzentrationen aufgetragen ist.

2.4. Hemmung der Pilztyrosinase

Die Pilztyrosinase-Hemmaktivität der PR-Extrakte wurde mit der modifizierten Dopachrom-Methode untersucht (Boonpisuttinant et al., 2022). Eine Menge von 50 lL der PR-Extrakte oder Kojisäure (Sisco Research Laboratories (SRL), Indien) als Positivkontrolle, 50 lL von 0,1 mg/ml L-Tyrosin (Sigma- Aldrich, USA), 50 lL 0,1 mM Phosphatpuffer und 50 lL 0,1 mg/ml Pilztyrosinase (Sigma-Aldrich, USA) wurden zu einer 96-Well-Mikrotiterplatte gegeben. Vor und nach 60-minütiger Inkubation bei 37 °C an einem dunklen Ort wurden die Absorptionen bei der Wellenlänge von 450 nm mit einem Mikroplatten-Lesegerät gemessen. Der Prozentsatz der Pilz-Tyrosinase-Hemmung wurde nach der folgenden Formel berechnet:

Prozent Pilztyrosinase-Hemmung=[(A – B)-(C – D)]/=(A – B)×100 (4)

Dabei ist A die Absorption der Blindprobe nach der Inkubation, B die Absorption der Probe vor der Inkubation, C die Absorption der Proben nach der Inkubation und D die Absorption der Proben vor der Inkubation. Die Konzentrationen, die eine 50-prozentige Tyrosinase-Hemmung bewirken (IC50 mg/ml), wurden aus der Grafik berechnet, die zwischen der prozentualen Tyrosinase-Hemmung und den Probenkonzentrationen aufgetragen ist

2.5. In-vitro-Anti-Aging-Aktivitäten an Zellkulturen

2.5.1. Zellkulturen

Mausmelanome (B16F10) und menschliche Hautfibroblasten wurden verwendet, um die Anti-Melanogenese, Kollagenbiosynthese und Anti-Aging der Sirt1- bzw. Foxo1-mRNA-Expression zu untersuchen. Diese beiden Zellen wurden von der American Type Culture Collection (ATCC), Virginia, USA, bezogen. Die Zellen wurden in Dulbecco's Modified Eagle Medium (DMEM) (Sigma-Aldrich Biotechnology, St. Louis, MO, USA) kultiviert, ergänzt mit 10 Prozent fötalem Rinderserum (FBS) (Sigma-Aldrich Corporation, St. Louis, MO, USA). ), 100 IE/ml Penicillin und 100 mg/ml Streptomycin (Gibco BRL, Gaithersburg, USA) unter Standardbedingungen bei 37 °C im 5-Prozent-CO2-Inkubator vor den Experimenten.

2.5.2. Zytotoxizitätstest an menschlichen Hautfibroblasten

Die verschiedenen Konzentrationen der PR-Extrakte wurden auf Zytotoxizität auf murinen Melanomen (B16F10) und menschlichen Hautfibroblasten durch das 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl untersucht )-2,5-Diphenyltetrazoliumbromid (MTT)-Assay wie der zuvor beschriebene Boonpisuttinant et al. (2022). Die menschlichen Hautfibroblasten mit einer Dichte von 1 × 104 Zellen pro Vertiefung wurden in 96--Wellplatten ausplattiert, das Volumen mit DMEM auf 180 lL eingestellt und 24 Stunden lang bei 37 Grad unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Anschließend wurden die Extrakte in verschiedenen Konzentrationen zugegeben. Die Zellen wurden 24 Stunden lang bei 37 Grad C unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Danach wurden die Zellen dreimal mit 10 mM PBS bei pH 6,8 gewaschen und mit 1 ml 0,5 mg/ml MTT-Lösung (Sigma-Aldrich, USA) versetzt. Nach 3-stündiger Inkubation bei Raumtemperatur wurde die MTT-Lösung entfernt und 100 l Dimethylsulfoxid (DMSO) in jede Vertiefung gegeben. Die Platten wurden 15 Minuten lang vorsichtig bei 200 U/min geschüttelt. Die Extinktionen der Lösungen bei der Wellenlänge 570 nm wurden mit einem Mikroplatten-Lesegerät gemessen. Die Prozentsätze der Zelllebensfähigkeit wurden nach der folgenden Formel berechnet:

Dabei ist AKontrolle die Extinktion der Kontrolle und A Probe die Extinktion der Proben.

2.5.3. Anti-Melanogenese auf B16F10-Zellen

Die Anti-Melanogenese der PR-Extrakte auf B16F10-Zellen wurde mit der zuvor von Boonpisuttinant et al. beschriebenen Methode untersucht. (2022). Die B16F10-Zellen mit einer Dichte von 2,5×105 Zellen pro Vertiefung wurden in 6--Vertiefungsplatten ausgesät und über Nacht bei 37 Grad unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Anschließend wurden die Extrakte in einer Konzentration von 0,01 mg/ml zugegeben. Als Positivkontrolle wurde Kojisäure verwendet. Die Zellen wurden 72 Stunden lang bei 37 Grad unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Danach wurden die Überstände in den sauberen Mikrofugenröhrchen gesammelt, während die Zellen dreimal mit 10 mM Phosphatpuffer-Kochsalzlösung (PBS) bei pH 6,8 gewaschen, in 200 l 10-prozentiger NaOH gelöst und 1 Stunde bei 60 Grad inkubiert wurden . Die Extinktionen der Überstände und Zelllysate bei der Wellenlänge 450 nm wurden mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen. Die prozentualen Anteile des Melaningehalts wurden nach folgender Formel berechnet:

2.5.4. Kollagenbiosynthese auf menschlichen Hautfibroblasten

Die Kollagenbiosynthese der PR-Extrakte wurde nach der zuvor von Boonpisuttinant et al. beschriebenen Methode untersucht. (2022). Die menschlichen Hautfibroblasten mit einer Dichte von 5× 105 Zellen pro Vertiefung wurden in 6-Vertiefungsplatten ausgesät und über Nacht bei 37 Grad unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Anschließend wurden die Extrakte in einer Konzentration von 0,1 mg/ml zugegeben. Als Positivkontrolle wurde ʟ-Ascorbinsäure verwendet. Die Zellen wurden 24 Stunden lang bei 37 Grad unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Danach wurden die Zellen dreimal mit 10 mM PBS bei pH 6,8 gewaschen und mit 1 ml einer 0,1-prozentigen (Gew./Vol.) Siriusrot-Lösung (Sigma-Aldrich, USA) in gesättigter Pikrinsäure (Sisco Research Laboratories (SRL)) versetzt ), Indien) und dann 1 Stunde bei Raumtemperatur inkubiert. Der Farbstoff wurde entfernt und die Platten wurden fünfmal mit 1 ml 10 mM HCl (Merck Millipore, Deutschland) gewaschen. Anschließend wurden die Zellen durch Zugabe von 1 ml 0,1 M NaOH aufgelöst. Die Extinktionen der Überstände und Zelllysate bei der Wellenlänge 450 nm wurden mit einem Mikroplattenlesegerät gemessen. Die Prozentsätze der Kollagenmenge wurden nach folgender Formel berechnet:

Dabei war Csample der Kollagengehalt der Proben und Ccontrol der Kollagengehalt der Kontrolle.

2.5.5. Stimulation von Anti-Aging-Genen auf menschlichen Hautfibroblasten

Die Stimulation der Anti-Aging-Gene (Foxo1 und Sirt1) der PR-Extrakte wurde durch die RT-PCR bestimmt, wie zuvor von Polouliakh et al. beschrieben. (2020). Die menschlichen Hautfibroblasten mit einer Dichte von 5 × 105 Zellen pro Vertiefung wurden in 6--Vertiefungsplatten ausgesät und über Nacht bei 37 °C unter einer 5-prozentigen CO2-Atmosphäre inkubiert. Anschließend wurden die Extrakte in einer Konzentration von 0,01 mg/ml zugegeben. Nach 24-stündiger Inkubation wurde die Gesamt-RNA mit NucleoSpin RNA Plus (Macherey Nagel, Düren, Deutschland) gemäß den Anweisungen des Herstellers extrahiert. Die Menge an Gesamt-RNA wurde mit einem Qubit 2.0-Fluorometer (Invitrogen, Massachusetts, USA) quantifiziert. Die spezifischen Primer für RT-PCR, einschließlich Foxo1, Sirt1 und b-Actin, wurden von Macrogen Oceania, Australien, bezogen. Die Sequenzen der spezifischen Primer wurden befolgt; Foxo1: 5′-GAC GCC GTG CTA CTC GTT-3′ (Vorwärts) und 5′-CGG TTC ATA CCC GAG GTG-3′ (Rückwärts); Sirt1: 5′ -TAG CCT TGT CAG ATA AGG AAG GA-3′ (Vorwärts), 5′ -ACA GCT TCA CAG TCA ACT TTG T-3′ (Rückwärts); und b-Actin: 5′ TCA TGC AGT GTG ACG TTG ACA TCC GT-3′ (Vorwärts), 5′ -CCT AGA AGC ATT TGC GGT GCA CGA TG -3′ (Rückwärts). Die PCR-Mischungen enthielten 1x SuperScriptTM III One-Step RT-PCR System mit PlatinumTM Taq DNA Polymerase Supermix (Invitrogen, Massachusetts, USA), 250 nM spezifische Primer und 2 µg RNA. Alle RT-PCR-Reaktionen wurden auf TProfessional Basic Gradient 070–601 (Biometra GmbH, Göttingen, Deutschland) unter den folgenden Amplifikationsbedingungen durchgeführt: 60 °C 30 Minuten für reverse Transkription; dann 40 Zyklen bei 94 Grad für 15 Sekunden Denaturierung, 55 Grad C für 30 Sekunden Annealing und 68 Grad für 30 Sekunden Verlängerung; und schließlich bei 68 Grad C für 5 Minuten. Nach RT-PCR-Prozessen wurden die PCR-Produkte dann auf einem 1,5-prozentigen Agarosegel, gemischt mit dem Novel Juice 6x DNA Loading Buffer (GeneDireXTM, China), aufgetrennt, mit einem Transilluminator betrachtet und dann mit Quantity One 4.6.8 (Basis) fotografiert. (Bio-Rad Laboratories, Inc., Kalifornien). Anschließend wurde die Bandendichte mit Image J (Version 1.47, National Institutes of Health, Bethesda, MD, USA) quantifiziert und auf das Housekeeping-Gen b-Actin normalisiert.

2.6. statistische Analyse

Alle Experimente wurden als Mittelwert ± Standardabweichung (SD) der unabhängigen Experimente (n {{0}}) ausgedrückt. Statistische Unterschiede wurden durch die ANOVA mit dem Tukey-Test analysiert (p < 0,05). Die Beziehungen zwischen den Bioaktivitäten wurden mit dem Pearson-Korrelationskoeffizienten getestet.

3. Ergebnisse

3.1. Die Extraktionsausbeuten, physikalischen Eigenschaften und phytochemischen Inhalte der PR-Extrakte

Die Extraktionsausbeuten, physikalischen Eigenschaften und phytochemischen Inhalte der PR-Extrakte sind in Tabelle 1 aufgeführt. Die Extraktionsausbeuten der PR-Extrakte lagen zwischen 10,62 Prozent und 30,63 Prozent. Die wichtigsten phytochemischen Bestandteile der PR-Extrakte waren Flavonoide. Außergewöhnlich ist, dass die rosa Rambutan-Extrakte aus Samen (PR-SM und PR-S-Sox) keine Flavonoide enthielten, sondern nur Glykoside als sekundäre Pflanzenstoffe enthielten. Lediglich die PR-Extrakte aus den reifen und jungen Schalen durch die Mazeration (M) zeigten das Vorhandensein von Xanthonen, einem hitzelabilen Polyphenol. Darüber hinaus schienen die Extraktionsausbeuten der PR-Extrakte durch die Soxhlet-Extraktion (Sox) höher zu sein als durch die Mazeration (M).

3.2. Gesamtphenol- (TPC), Flavonoid- (TFC) und Quercetingehalt der PR-Extrakte

Der PR-Extrakt aus Schalen junger Früchte durch Mazeration (PRY-M) ergab mit dem FolinCiocalteu-Assay den höchsten Gesamtphenolgehalt von 67,60 ± 4,38 mgGAE/g, während der PR-Extrakt aus Schalen junger Früchte nach dem Die Soxhlet-Extraktion (PR-Y-Sox) ergab mit dem modifizierten kolorimetrischen Aluminiumchlorid-Assay den höchsten Gesamtflavonoidgehalt von 678,72 ± 23,59 mgQE/g (Abb. 1) (p < 0,05). Die PR-BM-, PR-SM- und PR-S-Sox-Extrakte zeigten jedoch keinen Phenolgehalt. Es zeigte sich, dass alle PR-Extrakte den durch die HPLC-Analyse ermittelten Quercetingehalt aufwiesen. Darüber hinaus ergab der PR-Extrakt aus Schalen reifer Früchte durch Mazeration (PR-RM) den höchsten Quercetingehalt von 190,10 ± 0,28 lg/ml. (Abb. 2).

3.3. Antioxidative und Pilztyrosinase-hemmende Aktivitäten der PR-Extrakte

Tabelle 2 zeigt die drei antioxidativen Aktivitäten, einschließlich der Aktivität zum Abfangen freier Radikale durch die DPPH-Methode, der Hemmung der Lipidperoxidation durch die Eisenthiocyanat-Methode; die Metallchelatbildung nach der FIC-Methode; und die Pilztyrosinase-Hemmung der PR-Extrakte. Die meisten PR-Extrakte mit Ausnahme der PR-LM-, PR-BM- und PR-S-Sox-Extrakte zeigten eine überlegene Aktivität zum Abfangen freier Radikale mit dem SC5{{10}}-Bereich von 0.{ {18}}23 – {{20}}.045 mg/ml, was vergleichbar mit Standard-ʟ-Ascorbinsäure (SC50 von 0 war. 036 ± 0.{{40}}03 mg/ml) bei p < 0.05. Darüber hinaus zeigte der PR-LM-Extrakt die höchste Lipidperoxidationshemmung mit dem LC50 von 0.274 ± 0.029 mg/ml und die Metallchelatbildungsaktivität mit dem MC50 von 0,203 ± 0,021 mg/ml, was vergleichbar mit Standard-a-Tocopherol (LC50 von 0,122 ± 0,015 mg/ml) bzw. EDTA (MC50 von 0,518 ± 0,034 mg/ml) war (p < 0,05). Alle PR-Extrakte zeigten eine Hemmwirkung auf Pilztyrosinase, während der PR-R-Sox-Extrakt mit einem IC50 von 0,04 ± 0,02 mg/ml die höchste Aktivität zeigte, was mit der Standard-Kojinsäure vergleichbar war (IC50 von 0,02 ± 0,01 mg). /ml) (p < 0,05).

3.4. Zytotoxizität der PR-Extrakte

Fig. 3 showed the cytotoxicity on the B16F10 cells (A) human skin fibroblasts by the MTT assay of the PR extracts. All of the PR  extracts at the concentrations of 0.01 and 0.1 mg/mL had no cytotoxicity on the B16F10 cells and human skin fibroblasts, respectively since they gave>80 Prozent relative Lebensfähigkeit im Vergleich zur unbehandelten Gruppe. Dennoch galten die höheren Konzentrationen aller PR-Extrakte als zytotoxisch für diese Zellen. Die höhere Konzentration als die von 1 mg/ml wurde nicht getestet, da sie sich nicht vollständig im Lösungsmittel lösen konnte.

3.5. Anti-Melanogenese der PR-Extrakte

In this study, there is a screening method from many samples,  therefore we highlight only the highest concentration that had no cytotoxicity on both cells and might have the highest anti-melanogenesis activity. This concentration is the highest concentration that showed no cytotoxicity on the B16F10 cells after being treated with the PR extracts and kojic acid (>80 Prozent Zelllebensfähigkeit) (Daten nicht gezeigt). Abb. 4 zeigt die Anti-Melanogenese der PR-Extrakte auf murinen Melanomzellen (B16F10) bei einer Konzentration von 0,01 mg/ml. Alle PR-Extrakte zeigten Antimelanogenese auf B16F10-Zellen. Die PR-Extrakte werden aus Blättern, Zweigen, Samen sowie reifen und jungen Früchten durch Soxhlet-Extraktion gewonnen (PR-L-Sox, PR-B-Sox, PR-S-Sox, PR-R-Sox und PR-Y-Sox). ) zeigte die höchste Anti-Melanogenese von 50,6–54,1 Prozent, was der Standard-Kojinsäure (37,9 ± 3,9 Prozent) um etwa das 1,5-fache deutlich überlegen war, wohingegen die Aktivität der RB-M- und PR-YM-Extrakte mit der vergleichbar war Standard-Kojisäure (p < 0,05).

3.6. Stimulation der Kollagenbiosynthese der PR-Extrakte

Alle PR-Extrakte mit einer Konzentration von {{0}},1 mg/ml zeigten die Stimulation der Kollagenbiosynthese auf den menschlichen Hautfibroblasten, bestimmt durch die Sirius-Red-Methode. Die Konzentration von 0,1 mg/ml der PR-Extrakte und ʟ-Ascorbinsäure ist die höchste Konzentration, die keine Zytotoxizität auf die menschlichen Hautfibroblasten zeigte. Die PR-Extrakte aus Blättern und Zweigen durch die Soxhlet-Extraktion (die PR-LM- und die PR-BM-Extrakte) zeigten die höchste Kollagenbiosynthese (16,46 ± 0.{{20}}7 Prozent und 14,66 ± 0,09 Prozent), was etwa zweifach niedriger war als die Standard-ʟ-Ascorbinsäure (34,07 ± 0,03 Prozent) (p < 0,05) (Abb. 5).

3.7. Stimulation von Anti-Aging-Genen

Abb. 6 zeigt die Stimulation von Anti-Aging-Genen, einschließlich Sirt1- und Foxo1-Genen, auf den menschlichen Hautfibroblasten der PR-Extrakte bei 0.01 mg/ml wurde durch die RT-PCR-Technik bestimmt. Die Konzentration von {{20}}.01 mg/ml der PR-Extrakte und Resveratrol ist die höchste Konzentration, die keine Zytotoxizität auf die menschlichen Hautfibroblasten zeigte. Interessanterweise zeigten die PR-L-Sox-, PR-S-Sox-, PRR-M-, PR-R-Sox-, PR-YM- und PR-Y-Sox-Extrakte mit 0,01 mg/ml die höchste Stimulation des Foxo1-Anti-Aging mRNA-Expression (495 bp), die dem Standard-Resveratrol um etwa das Zweifache überlegen war (p < 0,05). Andererseits zeigten die PR-S-Sox- und PR-Y-Sox-Extrakte die höchste Stimulation der Sirt1-Anti-Aging-mRNA-Expression (160 bp), die niedriger war als die von Resveratrol (p < 0,05). Obwohl fast alle PR-Extrakte eine Stimulierung der Anti-Aging-Genexpression zeigten, stimulierten die PR-R-Sox- und PR-BM-Extrakte die Sirt1- bzw. Foxo1-Expression nicht.

4. Diskussion

In der Regel wurden mehrere natürliche Pflanzen auf ihre sekundären Pflanzenstoffe, bioaktiven Verbindungen und biologischen Eigenschaften untersucht, um neue vielversprechende natürliche Inhaltsstoffe für Medikamente, Nahrungsergänzungsmittel und kosmetische Anwendungen zu finden. Rosa Rambutan ist eine der lokalen Früchte im Bezirk Klung, Provinz Chanthaburi, Thailand. Es gibt einige wissenschaftliche Berichte über seine biologischen und pharmazeutischen Aktivitäten, insbesondere seine Anti-Aging-Wirkung. In dieser Studie wurden die fünf Teile von Pink Rambutan, darunter Blätter, Zweige, Samen und Schalen aus reifen und jungen Früchten, durch Mazeration und Soxhlet-Extraktion unter Verwendung von 95-prozentigem Ethanol als Lösungsmittel extrahiert. Mehrere neu entdeckte sekundäre Pflanzenstoffe, darunter Quercetin, die Sekundärmetaboliten von Pflanzen sind, wurden auf ihre Anti-Aging-Wirkung in Zellen, Tieren und Menschen untersucht (Phuong et al., 2020). Den Ergebnissen dieser Studie zufolge waren Flavonoide die wichtigsten sekundären Pflanzenstoffe der PR-Extrakte. Es wurde zuvor berichtet, dass die Extrakte der anderen Rambutan-Arten sekundäre Pflanzenstoffe enthielten, darunter Flavonoide, Tannine und Carotinoide, die mit ihren antioxidativen Eigenschaften korrelierten (Rohman, 2017). Das Fehlen von Xanthonen bei der Soxhlet-Extraktion könnte auf hohe Temperaturen zurückzuführen sein (Yuvanatemiya et al. 2022, Sankeshwari et al., 2018). Quercetin ist eine der am häufigsten vorkommenden Phenol- und Flavonoidverbindungen, die in vielen Obst- und Gemüsesorten sowie in Rambutan vorkommt (Phuong et al., 2020). In dieser Studie kann die höhere Temperatur (80 °C) des Soxhlet-Verfahrens eine nicht hitzelabile Substanz, einschließlich Quercetin, mehr extrahieren als das Kaltverfahren. Die mittels HPLC-Analyse ermittelte Quercetinmenge kann als Marker zur Qualitätskontrolle der PR-Extrakte im Produktionsmaßstab verwendet werden. Der Pearson-Korrelationskoeffizient (R2) zwischen dem TFC und dem TPC der PR-Extrakte betrug 0,825, was eine sehr starke Beziehung klassifiziert (R2=± 0,80 bis ± 1,00) (p < 0,01), was bedeutet Wenn die TFC erhöht wird, würde auch die TPC dramatisch erhöht. Darüber hinaus betrug der R2-Koeffizient zwischen dem TPC und dem Quercetingehalt der PR-Extrakte 0,650, was einen starken Zusammenhang darstellt (R2=± 0,60 bis ± 0,79) (p < 0,05). Der Unterschied in den Extraktionsausbeuten, sekundären Pflanzenstoffen sowie TPC, TFC und Quercetin der PR-Extrakte könnte durch die Lösungsmittel, Extraktionsprozesse und Temperaturen beeinflusst werden (Chutoprapat et al., 2020). Mehrere Studien haben ergeben, dass Flavonoid- und Phenolverbindungen sowie Quercetin ein breites Spektrum an biologischen und pharmazeutischen Aktivitäten haben, darunter antimikrobielle, antioxidative, entzündungshemmende und Anti-Aging-Wirkung (Panche et al., 2016, Shahidi). und Yeo, 2018, Musika et al., 2021, Wang et al., 2022).

Wie bereits erwähnt, können radikale Sauerstoffspezies (ROS) altersbedingte Schäden auf Zell- und Gewebeebene verursachen und die chronologische und umweltbedingte Alterung beschleunigen, die durch Falten und atypische Pigmentierung gekennzeichnet ist (Papaccio et al., 2022). Natürliche Antioxidantien können freie Radikale abfangen, was zu einer verminderten entzündungshemmenden Wirkung, zur Vorbeugung von Krebs, Diabetes und Hirnerkrankungen, zur Senkung von Blutdruck und Arteriosklerose sowie zur Verlangsamung der Hautalterung führt (Miracle Uwa, 2{{20}) }17). Das Abfangen freier Radikale, die Hemmung der Lipidperoxidation und die Metallchelatbildung wurden umfassend als Systeme zur Untersuchung der antioxidativen Aktivität natürlicher Produkte untersucht. Zum Abfangen freier DPPH-Radikale werden die ungeraden Elektronen in DPPH-Molekülen durch die Aufnahme eines Wasserstoffatoms von Antioxidantien reduziert, um zu Hydrazinmolekülen zu werden (Ionita, 2021). Die Lipidperoxidationsmethode basiert auf der Oxidation von Kupfer(II)- zu Kupfer(III)-Ionen, die durch eine Linolsäureemulsion geleitet werden (Bakir et al., 2017), während die Metallchelatbildungsmethode auf der Oxidation von Kupfer(II) basiert. um einen Eisen-Ferrozin-Komplex zu bilden (Wong et al., 2014). Das Vorhandensein von Flavonoiden und Phenolen in den PR-Extrakten dieser Studie könnte zu den drei antioxidativen Aktivitäten beigetragen haben. Es wurde festgestellt, dass die phenolischen Verbindungen (z. B. Corilagin, Ellagsäure, Geraniin und Quercetin) aus den Rambutan-Extrakten eine antioxidative Aktivität durch DPPH-Radikalfänger und Lipidperoxidationshemmung aufweisen (Hernández-Hernández et al., 2019, Phuong et al., 2019, Monrroy et al., 2020, Araujo et al., 2021). Dies ähnelt den früheren Berichten, dass die Schalenextrakte der anderen Rambutan-Arten einen hohen TPC- und TFC-Gehalt aufweisen und stärkere antioxidative Aktivitäten wie ABTS, DPPH, O2-Scavenger, Eisen-Reduktions-Assay-Leistung (FRAP) zeigen ), Chelatbildner und Lipidperoxidation (Lourith et al., 2017, Rohman, 2017, Monrroy et al., 2020). Interessanterweise zeigte der R2-Koeffizient zwischen der Metallchelatbildung und der Hemmung der Lipidperoxidation der PR-Extrakte eine sehr starke positive Korrelation von 0,953, was eine starke Beziehung auf einem signifikanten Niveau von p < 0,01 klassifiziert.

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