abstrakt

Hintergrund: Panax Ginseng ist ein wunderbares pflanzliches Heilmittel für alle Beschwerden des Körpers. Vielleicht heißt es deshalb Panax, was „Heilmittel für alles“ bedeutet. Melanin ist ein Pigment, das unserer Haut Farbe verleiht; Eine erhöhte Melaninproduktion kann jedoch zur Tumorbildung führen. Die Exposition des Menschen gegenüber ultravioletter B-Strahlung hat aufgrund der zunehmenden Sonneneinstrahlung aufgrund der globalen Erwärmung erheblich zugenommen. Infolgedessen wurde bei allen Hautfarben und -typen ein Phänomen namens Lichtalterung beobachtet. Als Folge dieses Phänomens wird eine Reihe von Enzymen namens Matrix-Metalloproteinasen erhöht, die als Abbauenzyme für extrazelluläre Matrixproteine, hauptsächlich Kollagen, dienen, was zu einem Kollagenabbau und einer frühen Faltenbildung führt.

Relevanten Studien zufolge ist Cistanche ein weit verbreitetes Kraut, das als „das Wunderkraut, das das Leben verlängert“ bekannt ist. Sein Hauptbestandteil ist Cistanosid, das verschiedene Wirkungen hat, wie z. B. antioxidative, entzündungshemmende und die Immunfunktion fördernde Wirkung. Der Mechanismus zwischen Cistanche und Hautaufhellung liegt in der antioxidativen Wirkung von Cistanche-Glykosiden. Melanin in der menschlichen Haut entsteht durch die durch Tyrosinase katalysierte Oxidation von Tyrosin. Die Oxidationsreaktion erfordert die Beteiligung von Sauerstoff, sodass die sauerstofffreien Radikale im Körper zu einem wichtigen Faktor werden, der die Melaninproduktion beeinflusst. Cistanche enthält Cistanosid, ein Antioxidans, das die Bildung freier Radikale im Körper reduzieren und so die Melaninproduktion hemmen kann.

Klicken Sie auf Cistanche Chemist Warehouse für Bleaching

Für mehr Information:

david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501

Methoden: Daher haben wir in unserer Studie die Maus-Melanomzelllinie B16/F10 verwendet, um die Hemmung der Melanogenese durch Extrakt aus koreanischem Roten Ginseng (KRG) in vitro zu untersuchen, und haarlose HRM-2-Mäuse, die künstlichem ultraviolettem B ausgesetzt wurden, um das zu untersuchen Wirksamkeit von KRG in vivo. Wir haben eine 3-prozentige Creme mit rotem Ginseng-Extrakt hergestellt und deren Wirkung auf die menschliche Haut bewertet.

Abschluss: Daher kommen wir zu dem Schluss, dass KRG ein ausgezeichnetes Hautaufhellungs- und Anti-Aging-Produkt ist.

·2019 Die Koreanische Gesellschaft für Ginseng. Veröffentlichungsdienste von Elsevier BV Dies ist ein Open-Access-Artikel

1. Einführung

Melanin ist eine Verbindung, die für die Pigmentierung der Haut verantwortlich ist, und die Vielfalt der Hautfarben beim Menschen ist auf die Menge an Melanin produzierenden Zellen in der Haut zurückzuführen [1]. Der für die Bildung von Melanin verantwortliche Prozess wird Melanogenese genannt. Bei diesem Prozess bindet a-Melanozyten-stimulierendes Hormon (a-MSH) an seinen Rezeptor (d. h. den Melanocortin-1-Rezeptor) und führt zu erhöhten cAMP-Spiegeln, die wiederum den Mikrophthalmie-assoziierten Faktor (MITF) über verschiedene Wege, beispielsweise zyklisch, aktivieren Adenosinmonophosphat (cAMP)-Antwortelement-Bindungsprotein, extrazellulär regulierte Kinase und Proteinkinase B (AKT), was zu dessen Abbau führt. Durch diesen Abbau wird der geschwindigkeitsbestimmende Schritt im Prozess der Melanogenese (dh die Wirkung des Enzyms Tyrosinase, TYR) beeinträchtigt und aktiviert. TYR ist für die Umwandlung von Tyrosin in L-3,4-Dihydroxyphenylalanin (L-DOPA) verantwortlich, das Melanin bildet. Tyrosinase-verwandtes Protein 1 (TRP-1) und Tyrosinase-verwandtes Protein 2 (TRP-2) sind weitere nachgeschaltete Faktoren von TYR und MITF, die aktiviert werden und an der Melaninbildung beteiligt sind. Folglich ist TYR während des gesamten Prozesses der wichtigste Bestandteil der Regulierung der Melaninproduktion in Hautzellen [2-4].

Panax Ginseng ist ein Wunderkraut, das in Ostasien seit über 1,{1}} Jahren häufig konsumiert wird, da es viele positive Auswirkungen auf die Gesundheit hat. Es ist in verschiedenen Formen erhältlich, darunter Getränke, Kapseln und Tabletten [5,6]. Frühere Studien haben die bemerkenswerte Wirkung von Ginseng gezeigt, wenn er zur Verringerung des Auftretens verschiedener Arten von Tumoren, vieler geistiger Anomalien, Diabetes, Bluthochdruck, Hyperlipidämie und Entzündungen eingesetzt wird [7-13]. Insbesondere auf der koreanischen Halbinsel gehören Ginsengpräparate zur normalen Ernährung. Im Handel ist Ginseng in Form von ganzem Ginsengwurzelextrakt, einzelnen Ginsenosid-Extrakten oder Kapseln erhältlich. Ginsenoside sind die aktiven Bestandteile der gesamten Ginsengwurzel, die für die wirksamen gesundheitsfördernden Eigenschaften von Ginseng verantwortlich sind [14].

Es gibt viele Studien zu den Auswirkungen einzelner Ginsenoside auf die Melaninproduktion und das Melasma [15]. Derzeit gibt es jedoch keine Studie, die über die antimelanogene Wirkung des koreanischen Roten Ginseng-Extrakts (KRG) auf die Melaninproduktion berichtet und dessen hautaufhellende und Anti-Aging-Wirkung, insbesondere beim Menschen, untersucht hat. Daher untersuchten wir die TYR-Hemmung und die Hemmung der Melaninproduktion durch KRG in vitro in der B16/F10-Melanomzelllinie mittels einer mechanistischen Untersuchung der an diesem Prozess beteiligten Wege. Unsere Ergebnisse zeigten, dass KRG die TYR-Aktivität deutlich hemmte und den Melaningehalt über den MITF-Abbauweg verringerte. Darüber hinaus ergab unsere In-vivo-Studie unter Verwendung eines mit Ultraviolett B (UVB) bestrahlten haarlosen Mausmodells (HRM-2) zur Lichtalterung und Hyperpigmentierung, dass die Produktion von Melanin in HRM-2-Mäusen durch das Modell erheblich und deutlich reduziert wurde Anwendung von KRG (150 und 300 mg/kg). Darüber hinaus zeigte die 3-prozentige Creme mit rotem Ginseng-Extrakt beim Menschen hervorragende Anti-Falten- und Hautaufhellungseigenschaften. Daher kamen wir zu dem Schluss, dass KRG und KRG-Formulierungen als Creme in der Kosmetikindustrie als Hautaufheller und Anti-Aging-Mittel nützlich sein sollten.

2. Materialien und Methoden

2.1. Chemikalien und Reagenzien

Dulbeccos modifiziertes Eagle-Medium (WelGene Co, Korea); fötales Rinderserum (WelGene Co., Korea); Streptomycin und Penicillin (Lonza, MD, USA); TRIzol-Reagenz (Invitrogen, Carlsbad, CA, USA); OligodT-, MITF-, TYR-, TRP-1-, TRP-2- und b-Actin-Primer wurden von (Bioneer, Daejeon, Korea) erhalten. 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid wurde von Sigma-Aldrich bezogen. Es wurden Antikörper gegen MITF, TYR, TRP-1 und TRP-2 erhalten (Santa Cruz Biotechnology, Santa Cruz, Inc., TX, USA). Pilz-TYR und L-DOPA wurden von Sigma (St. Louis, MO, USA) gekauft. Alle anderen Reagenzien waren von örtlicher Analysequalität.

2.2. Probenvorbereitung

2.3. Bewertung der Stabilität von Creme mit rotem Ginseng

(1) pH-Test

Der pH-Wert der Creme mit rotem Ginseng wurde an den Tagen 1, 7, 15 und 30 des 30-tägigen Experiments gemessen. Der pH-Wert der Creme mit rotem Ginseng war leicht sauer und zeigte im Laufe der 30 Tage nahezu keine Veränderung (Tabelle 2).

(2) Verfärbungstest

Der Grad der Verfärbung der Creme mit rotem Ginseng wurde an den Tagen 1, 7, 15 und 30 gemessen. Während des Versuchszeitraums von 30- Tagen wurde keine Farbveränderung beobachtet (ergänzende Abbildung 1).

(3) Patch-Test

Um eine allergische Reaktion auf Ginseng-Creme zu überprüfen, wurde 1 ml roter Ginseng-Creme auf den dorsalen zentralen Rückenbereich (1 cm × 1 cm) der Freiwilligen aufgetragen und die Hautreaktion nach 24 Stunden bewertet. Verschiedene Arten von Hautreaktionen wurden bewertet, wie in der Ergänzungstabelle gezeigt. 3A-B, und es wurden keine Erytheme, Ödeme oder unerwünschte Reaktionen beobachtet. Daher wurde diese Creme weiter auf weitere Parameter auf der Haut getestet. Darüber hinaus wurde der Grad der Hautreizung bewertet, wie in der Ergänzungstabelle gezeigt. 4, um den primären Hautreizungsindex zu ermitteln.

2.4. Behandlungsschema mit einer Creme mit rotem Ginseng und Bewertung der Auswirkungen auf den Öl- und Feuchtigkeitsgehalt, die Elastizität und die Aufhellung der Haut

Um die Auswirkungen von Creme mit rotem Ginseng auf den Ölgehalt, den Feuchtigkeitsgehalt, die Elastizität und die Aufhellung der Haut zu beurteilen, untersuchten 10 Frauen (ungefähr 40 Jahre alt, Nichtraucherinnen, ohne Vorgeschichte von Hauterkrankungen oder Gesichtsbehandlungen) wurden in zwei Gruppen mit jeweils fünf Personen aufgeteilt: die Kontrollgruppe, in der Creme ohne roten Ginseng-Extrakt aufgetragen wurde (nicht-KRG), und die Versuchsgruppe, in der Creme mit rotem Ginseng-Extrakt aufgetragen wurde (KRG-behandelte Gruppe). Die Anzahl der Personen wurde mit der Statistiksoftware G*Power 3.1 omicX berechnet; Der Signifikanzkoeffizient betrug 0,05, die Trennschärfe 80, die Anzahl der Gruppen 2 und die Anzahl der wiederholten Messungen 6.

Die Creme wurde 3e5 Sekunden lang auf den T-Zonenbereich (1) des Gesichts aufgetragen, der sich 1 cm über dem oberen Teil der Mitte des T auf der Stirn zwischen den Augenbrauen und auf der rechten und linken Seite befindet. Die U-Zone (2) wurde horizontal von der Nase und vertikal nach unten vom Schwanz des Auges gezeichnet, wie in der ergänzenden Abbildung 2 dargestellt. Um die Messbedingungen zu standardisieren, wurde die Untersuchung bei 24 °C ±1 °C und 55 Prozent durchgeführt ± 10 Prozent relative Luftfeuchtigkeit.

2.5. Zellkultur

2.6. Zellfreier TYR-Hemmungstest

Der Assay wurde unter Verwendung eines leicht modifizierten Protokolls durchgeführt, wie zuvor beschrieben [3]. Kurz gesagt, 10 ml KRG wurden dreifach in eine 96--Wellplatte gegeben und mit 60 ml 50 mmol/L Phosphatpuffer auf Eis (pH 6,8) gemischt. Anschließend wurden 20 ml 0,9 mg/ml L-DOPA in jede Vertiefung gegeben. Schließlich wurden 10 ml Pilz-TYR in jede Vertiefung gegeben und die Platte wurde 10 Minuten lang bei 27 °C inkubiert. Nach der Inkubation wurde die Dopachromproduktion spektrophotometrisch bei 450 nm unter Verwendung eines Mikroplattenlesegeräts (Versamax; Molecular Devices, LLC, CA, USA) gemessen; In diesem Experiment wurde Kojisäure als Positivkontrolle verwendet [16].

2.7. Melanin-Hemmungstest

2.8. Tierversuch und Gruppierung

2.9. UVB-Bestrahlung und Induktion der Photoalterung

2.10. Wirkung auf die Melaninproduktion in HRM-2-Mäusen

2.11. Messung von Hautfalten 

Der Grad der durch UVB induzierten Hautalterung wurde durch Beobachtung der Faltenbildung gemessen. Um die Faltenbildung zu beurteilen, wurden die HRM{{0}}-Mäuse in Woche 5 durch die intraperitoneale Injektion von Chloralhydrat (0,1 ml 7-prozentiges Chloralhydrat/25 g Maus) anästhesiert . Die UVB-Exposition und die Probenbehandlung wurden im vorherigen Abschnitt beschrieben. Hautfalten wurden in den Wochen 3, 4 und 5 mit dem DETAX System II (MIXPAC) und Double-Stick Disc (3M Healthcare, Deutschland) nach UVB-Bestrahlung beurteilt. Double-Stick Disc (besprüht mit DETAX System II) wurde auf die Haut der Maus geklebt und nach 2e3 Minuten entfernt. Bandscheibenfalten wurden anhand des Bewertungssystems von Bissett [17] bewertet: Grad 0, keine Falten; Grad 1, mehrere flache Falten; Grad 2, einige Falten; und Grad 3, einige tiefe Falten. Nachdem die Scheibe entfernt und die Haut mit 70-prozentigem Ethanol gereinigt worden war, wurde die Haut mit einem USB-Digitalmikroskop (× 400; CE FOROHS, China) fotografiert und eine visuelle Analyse der Hautfalten durchgeführt.

2.12. Enzyme-linked Immunosorbent Assay

2.13. Histologische Beobachtung der Haut

Die aus jeder Versuchsgruppe extrahierten Hautgewebe wurden 48 Stunden lang in 10-prozentiger Formalinlösung fixiert und dann mit Hämatoxylin und Eosin nach der Methode von Cardiff [18] angefärbt, um die epidermale Dicke zu bestimmen. Zur Kollagenvisualisierung wurde die Trichomfärbung nach Masson nach etablierten Protokollen durchgeführt [19].

2.14. RNA-Extraktion und Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion

Die Gesamt-RNA wurde aus den B16/F10-Zellen und der UVB-ira-erweiterten Mäusehaut extrahiert, nachdem sie mit KRG behandelt und mit a-MSH unter Verwendung von TRIzol gemäß den Anweisungen des Herstellers stimuliert wurden. RNA (2 mg) wurde mit OligodT (Bioneer Co., Daejeon) 10 Minuten lang bei 70 °C getempert und 5 Minuten lang auf Eis gekühlt, unter Verwendung einer Reverse-Transkriptase-Vormischung (Bioneer Co., Daejeon) in 20 ml der Reaktionsmischung revers transkribiert , und 90 Minuten lang bei 42,5 Grad in einem Thermocycler laufen lassen. Die Reaktion wurde bei 95 Grad für 5 Minuten beendet, um die Reverse Transkriptase zu inaktivieren. Die Reverse-Transkriptase-Polymerase-Kettenreaktion (PCR) wurde an Aliquots von cDNA durchgeführt, die aus der Reverse-Transkriptase-Reaktion (RT) in einem PCR-Vormix (Bioneer Co, Daejeon) erhalten wurden. Die PCR-Produkte wurden dann auf einem 1-prozentigen Agarosegel einer Elektrophorese unterzogen, mit Ethidiumbromid angefärbt und mit ImageQuant LAS 500 (GE Healthcare Life Sciences, Seoul, Südkorea) sichtbar gemacht. Die Intensität der Bandendichten wurde auf die der Glycerinaldehyd-3--Phosphatdehydrogenase (GAPDH) normalisiert, und die Primersequenzen sind in der Ergänzungstabelle aufgeführt. 1. Die Expression von MMP-2, MMP-9 und Interleukin (IL)-1b wurde mithilfe einer quantitativen Echtzeit-PCR unter Verwendung eines Applied Biosystems 7500 Real-Time PCR-Systems analysiert ( Angewandte Biosysteme, USA).

2.15. Western-Blot-Analyse

2.16. statistische Analyse

Für weitere Informationen: david.deng@wecistanche.com WhatApp:86 13632399501