Koreanischer Roter Ginseng-Extrakt verbessert die Melanogenese beim Menschen und induziert Antiphotoaging-Effekte bei mit ultravioletter Strahlung bestrahlten haarlosen Mäusen, Teil 2
May 16, 2023
3. Ergebnisse
3.1. KRG hemmte die TYR-Aktivität und unterdrückte den Melaningehalt im zellfreien System
Das TYR-Enzym ist am geschwindigkeitsbestimmenden Schritt der Melanogenese beteiligt [20,21]. Um zu überprüfen, ob KRG die Produktion dieses Enzyms unterdrücken konnte, führten wir daher einen zellfreien Pilz-TYR-Assay durch. Wie in Abb. 1A gezeigt, hemmte KRG die TYR-Produktion wirksam. B16/F10-Zellen wurden mit KRG behandelt und mit a-MSH stimuliert, um die Melaninsekretion zu induzieren, und es wurde festgestellt, dass sie durch KRG wirksam unterdrückt wurde, wie in Abb. 1B gezeigt. Als Positivkontrolle wurde in beiden Experimenten Kojisäure, ein bekannter Weißmacher, verwendet.
Relevanten Studien zufolge ist Cistanche ein weit verbreitetes Kraut, das als „das Wunderkraut, das das Leben verlängert“ bekannt ist. Sein Hauptbestandteil ist Cistanosid, das verschiedene Wirkungen hat, wie z. B. antioxidative, entzündungshemmende und die Immunfunktion fördernde Wirkung. Der Mechanismus zwischen Cistanche und Hautaufhellung liegt in der antioxidativen Wirkung von Cistanche-Glykosiden. Melanin in der menschlichen Haut entsteht durch die durch Tyrosinase katalysierte Oxidation von Tyrosin. Die Oxidationsreaktion erfordert die Beteiligung von Sauerstoff, sodass die sauerstofffreien Radikale im Körper zu einem wichtigen Faktor werden, der die Melaninproduktion beeinflusst. Cistanche enthält Cistanosid, ein Antioxidans, das die Entstehung freier Radikale im Körper reduzieren und so die Melaninproduktion hemmen kann.

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3.2. Auswirkungen von KRG auf die mRNA- und Proteinexpression von MITF und TRPs
Die oben genannten Ergebnisse zeigten die Auswirkungen von KRG auf den TYR- und Melaningehalt. Um jedoch den Mechanismus der Melaninhemmung durch KRG aufzuklären, haben wir die Transkription und Translation von Genen untersucht, die mit dem Melanogenese-Weg in Zusammenhang stehen: TRP-1 und TRP-2, TYR und Microphthalmia-associated Transcription Factor (MITF). ). Wie in Abb. 2A und B gezeigt, wurden alle vier Komponenten des Melanogenesewegs durch KRG stark gehemmt. Daher wurde KRG in der In-vitro-Studie als wirksames Aufhellungsmittel bestätigt.

3.3. Auswirkung einer oralen KRG-Supplementierung auf das Körpergewicht und die Nahrungsaufnahme
Die Exposition gegenüber künstlichem UVB führt bei Tieren zu Stress, der zu Appetitlosigkeit führen kann; Daher untersuchten wir die Nahrungsaufnahme und die Ernährungseffizienz von HRM-2-Mäusen, die 5 Wochen lang UVB ausgesetzt, mit Sonnenschutzmitteln behandelt und KRG oral verabreicht wurden. Wie in Abb. 3A gezeigt, gab es keine signifikante Veränderung des Körpergewichts in der Normal-, Kontroll-UVB- oder Behandlungsgruppe. Es wurde auch festgestellt, dass die Nahrungsaufnahme in der Positivkontrolle und in der mit KRG behandelten Gruppe signifikant erhöht war, wie in Abb. 3B dargestellt. Diese Ergebnisse zeigen, dass UVB zwar Stress bei Mäusen hervorrief, die KRG-Behandlung jedoch den Appetit- und Gewichtsverlust bei Mäusen wirksam verhinderte.

3.4. Analyse der Expression faltenbezogener Gene in UVB-bestrahlten HRM-2-Mäusen
Um die Wirkung von KRG auf die Bildung von Hautfalten zu messen, wurden HRM-2-Mäuse mit UVB bestrahlt, um Falten zu induzieren. Nach 5 Wochen Bestrahlung wurden die Hautgewebe isoliert und die Expression faltenbezogener Gene (d. h. IL-1b, MMP-2 und MMP- 9) analysiert. Wie in Abb. 4A und B gezeigt, waren die Proteinexpression von MMP-2, bestimmt durch ELISA, und die mRNA-Expression, bestimmt durch Echtzeit-PCR, in der Positivkontrollgruppe und der KRG-Behandlung signifikant niedriger Gruppen als diejenigen in der UVB-bestrahlten Kontrollgruppe. Die MMP-9- und IL-1b-Spiegel waren in den mit KRG behandelten Gruppen im Vergleich zur UVB-bestrahlten Kontrollgruppe ebenfalls signifikant verringert, wie durch Echtzeit-PCR gezeigt wurde (Abb. 4C und D).
3.5. Auswirkungen von KRG auf die Melanogenese bei UVB-bestrahlten Hautschäden
Um die aufhellende Wirksamkeit von KRG zu bestätigen, wurde der Unterschied in der Melaninbildung in den Wochen 1, 3 und 5 der UVB-Bestrahlung untersucht, indem die Rückenhaut von HRM-2-Mäusen in linke (unbehandelte) und rechte (UVB) unterteilt wurde und probenbehandelte Abschnitte). Wie in Abb. 5A gezeigt, kam es in Woche 1 der UVB-Exposition der Mäuse unter Behandlung mit Sonnenschutzmitteln und KRG bei beiden KRG-Dosen zu keinem signifikanten Rückgang der Melaninproduktion. In Woche 3 kam es zu einem geringfügigen Rückgang der Melaninproduktion in der mit Sonnencreme behandelten Positivkontrollgruppe und den KRG-Gruppen im Vergleich zur UVB-bestrahlten Kontrollgruppe, wie in Abb. 5B dargestellt. Wie in Abb. 5C deutlich zu sehen ist, zeigten die mit Sonnencreme behandelte Positivkontrollgruppe und beide mit KRG behandelten Gruppen in Woche 5 einen signifikanten Rückgang der Melaninproduktion. Diese Ergebnisse zeigten, dass KRG ein wirksames Hautaufhellungsmittel war.

3.6. Analyse der Auswirkungen von KRG auf die Faltenbildung bei HRM-2-Mäusen
Um die Auswirkungen von KRG auf die Bildung und Tiefe von Falten zu bestimmen, wurden HRM-2-Mäuse mit UVB bestrahlt, um eine Photoalterung auszulösen, und die Hautfaltentiefe wurde mit einem 3D-Analysegerät gemessen, wie in den Materialien und Methoden beschrieben Abschnitt (2.11) in den Wochen 3, 4 und 5. Wie in Abb. 6A und B gezeigt, zeigten die mit Sonnencreme behandelte Positivkontrollgruppe und beide mit KRG behandelten Gruppen einen signifikanten Rückgang der Faltenbildung und -tiefe.
3.7. Wirkung von KRG auf die Abnahme der epidermalen Dicke und die Zunahme von Kollagen
UV-Strahlung kann die Dicke der Epidermis erhöhen, wodurch die Haut dicker und rauer wird. Darüber hinaus kann eine kontinuierliche UVB-Exposition die MMPs abbauen und zu einem Kollagenverlust führen, der für eine gute Hautgesundheit unerlässlich ist [22]. Wie in Abb. 7A gezeigt, wurde die durch UVB induzierte epidermale Dicke durch die mit Sonnencreme behandelte Positivkontrollgruppe und beide mit KRG behandelten Gruppen deutlich reduziert. Darüber hinaus wird in Abb. 7B gezeigt, dass die epidermale Dicke, wie durch Hämatoxylin- und Eosin-Färbung sichtbar gemacht wurde, in der mit Sonnencreme behandelten Positivkontrollgruppe und in beiden mit KRG behandelten Gruppen verringert war. Massons Trichomfärbung, die durchgeführt wurde, um die Matrixkomponenten in der Haut von HRM-2-Mäusen sichtbar zu machen, zeigte eine verringerte Färbungsintensität in der UVB-bestrahlten Kontrollgruppe, die auf den Abbau von Kollagenfasern zurückzuführen ist; Im Gegensatz dazu war bei Mäusen, die mit Sonnenschutzmitteln und beiden KRG-Dosen behandelt wurden, die Intensität der Färbung im Vergleich zur UVB-Kontrollgruppe dramatisch erhöht (Abb. 7C). Diese Ergebnisse zeigten deutlich, dass KRG eine sichere und wirksame Behandlung mit hautaufhellender und Anti-Aging-Wirkung ist.

3.8. Auswirkungen von roter Ginsengcreme auf die menschliche Haut
Die Hautelastizität (auch Resilienz genannt) wurde wie in Tabelle 1 gezeigt gemessen. Eine durchschnittliche Steigerung der Resilienz von 0.03386 wurde in der Versuchsgruppe beobachtet, die die Creme mit 3 Prozent Rot erhielt Ginseng. Die Kontrollgruppe, die eine Creme ohne Ginseng erhielt, zeigte eine durchschnittliche Steigerung der Belastbarkeit um 0,0255.
Der Ölgehalt in der Versuchsgruppe war im Vergleich zur Kontrollgruppe, in der der Ölgehalt 45,6 Prozent betrug, auf 67,8 Prozent erhöht, wie in Tabelle 2 dargestellt. Im Detail zeigten die Ergebnisse, dass der Ölgehalt insgesamt um 50 Prozent erhöht war Versuchsgruppen: 46,6 Prozent in der Hemisphäre, 25,4 Prozent in der linken Wange und 32,6 Prozent insgesamt.

Der Feuchtigkeitsgehalt war sowohl in der Kontroll- als auch in der Versuchsgruppe verringert, wie in Tabelle 3 gezeigt. Dies wurde auf die Änderung der Wetterbedingungen zwischen Oktober und November in der Republik Korea zurückgeführt.

Die Veränderung des Hauttons in der Versuchsgruppe betrug durchschnittlich 8,24; im Gegensatz dazu zeigte die Kontrollgruppe einen Anstieg von 2,12 (Tabelle 4). Im Detail war der Hautton der Stirn sowohl in der Kontroll- als auch in der Versuchsgruppe erhöht. In der Versuchsgruppe nahm der Hautton sowohl auf der rechten als auch auf der linken Wange ab; Im Gegensatz dazu nahm der Hautton der Kontrollgruppe sowohl auf der Stirn als auch auf der rechten Wange zu, was darauf hindeutete, dass die Haut dunkler geworden war. Wir kommen daher zu dem Schluss, dass Ginsengcreme die Tendenz der Haut, ihre Farbe zu verlieren, verringert; mit anderen Worten, es verstärkte den aufhellenden Effekt.
Das durchschnittliche Erythem der Haut wurde in der Versuchsgruppe um 33,8 und in der Kontrollgruppe um 3,6 reduziert (Tabelle 5). Diese Ergebnisse deuten stark auf die positive Wirkung des Extrakts aus rotem Ginseng bei der Verbesserung des Gesamtzustands der Haut hin, ohne dass Nebenwirkungen auftreten.
4. Diskussion
Melanozyten sind spezialisierte Melanin produzierende Zellen, die in der Basalschicht der Epidermis vorkommen. Diese Zellen sind an der Produktion und dem Transport von Melanin zu den benachbarten Keratinozyten und der daraus resultierenden Bildung einer gleichmäßigen Hautpigmentierungsschicht beteiligt. Melanin ist ein essentielles Pigment, das zwei Funktionen erfüllt. Die erste und wichtigste Funktion besteht darin, die Haut zu pigmentieren, und die zweite Funktion besteht darin, die Haut vor schädlicher UV-Strahlung zu schützen, indem die Anzahl reaktiver Sauerstoffspezies verringert wird [23,24]. Wenn die Haut UV-Strahlung ausgesetzt ist, wird das Hormon a-MSH aktiviert, das die Produktion von Melanin aus Melanozyten verursacht [25]. Die wichtigsten Regulatoren dieses gesamten Prozesses der Melaninproduktion sind MITF, ein Transkriptionsfaktor für die Regulierung von TYR, und Tyrosin-verwandte Proteine (TRP-1 und TRP-2) [4,26e28]. Diese Komponenten sind an der Produktion von Melanin und der Hautpigmentierung beteiligt.

Die Hautalterung lässt sich grob in zwei Typen einteilen [29]. Das intrinsische (oder endogene) Altern ist ein unvermeidliches Alterungsphänomen, das mit dem Altern des Menschen einhergeht. Die klinischen Merkmale dieser Art der Alterung sind relativ mild und umfassen feine Linien, trockene Haut und verminderte Elastizität [30]. Photoalterung (exogene Alterung) bezieht sich auf das Alterungsphänomen, das bei Haut beobachtet wird, die über einen längeren Zeitraum dem Sonnenlicht ausgesetzt ist. Das für die Schäden verantwortliche Element ist UVB im Sonnenlicht. Dieser Art der Lichtalterung kann vorgebeugt werden, indem man vor dem Aufenthalt in der Sonne handelsübliche Sonnenschutzmittel aufträgt und die Zeit, in der man sich der Sonne aussetzt, minimiert. Die klinischen Merkmale der exogenen Alterung sind schädlich, wie z. B. sehr raue, trockene Haut mit verminderter Elastizität und die Bildung tiefer Falten mit starker Erschlaffung der Haut. Lichtgealterte Haut ist außerdem sehr anfällig für Pigmentierungskrankheiten, wie z. B. Lentigo solaris [31,32].

Wenn die Haut außerdem übermäßigem Sonnenlicht ausgesetzt ist, das UVB enthält, steigt die Menge an extrazellulären MMPs, was zu einem Abbau der Matrixproteine führt, von denen Kollagen ein Hauptbestandteil ist [33]. Kollagen gilt weltweit als unverzichtbares Element für die Hautelastizität, und sein Abbau führt bekanntermaßen zu einer frühen Faltenbildung und verringert die Hautelastizität. Nach UVB-Exposition führt ein Anstieg der MMPs zum Abbau von Kollagen und anderen Substratproteinen [34]. Es handelt sich also um eine Art Wunde, die durch die Sonneneinstrahlung auf der Haut entsteht, und unser Körper bemüht sich, Wunden durch die Synthese von neuem Kollagen zu heilen. Da der Prozess der Wundheilung jedoch nicht immer perfekt verläuft, führt die ständige Einwirkung von UVB-Strahlung auf die Haut zu klinischen Alterserscheinungen, einschließlich Falten.

Obwohl Melanozyten eine große Anzahl löslicher Komponenten freisetzen, gelten Prostaglandin E2, Prostaglandin F2a, adrenocorticotropes Hormon und NO als Regulatoren der Melanogenese [35-38]. Allerdings sind die Auswirkungen von Zytokinen auf den Prozess der Melanogenese recht kompliziert. Beispielsweise sind in der IL-Familie IL-1a/1b und Granulozyten-Makrophagen-Kolonie-stimulierende Faktoren an der Stimulation der Melanogenese beteiligt; IL-6, Transforming Growth Factor Beta 1 (TGF-b1) und Tissue Necrosis Factor a (TNF-a) unterdrücken jedoch die Melaninproduktion. Unsere Ergebnisse zeigten, dass IL-1b in der UVB-bestrahlten Kontrollgruppe erhöht war, durch die KRG-Behandlung jedoch signifikant verringert wurde. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass KRG und KRG-Creme starke antimelanogene und hautaufhellende Eigenschaften aufwiesen und möglicherweise zu einem kommerziell erhältlichen kosmetischen Mittel weiterentwickelt werden

Interessenskonflikte
Danksagungen
Anhang A. Ergänzende Daten
Verweise
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