Langfristige B-Zell-Depletion ist mit der Regeneration der Nierenfunktion assoziiert

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Susanne V. Fleig, et al

Abstrakt

Hintergrund:ChronischNiereErkrankung(CKD) ist eine häufige Erkrankung, die die Sterblichkeit und das Risiko kardiovaskulärer und anderer Morbiditäten unabhängig von der zugrunde liegenden Nierenerkrankung erhöht. Chronische Entzündungen fördern die Nierenfibrose. Kürzlich wurden renale B-Zell-Infiltrate bei chronischer Nierenerkrankung beschrieben verschiedener Ätiologien jenseits der Autoimmunität.

Methoden:Wir untersuchten hier B-Zellen und Indikatoren der tertiären Lymphoidstrukturbildung in humanen Nierenbiopsien. Die Nierenfunktion wurde während einer langfristigen B-Zell-Depletion bei menschlichen Patienten mit membranöser Nephropathie und mit CKD unbekannter Ursache untersucht.

Ergebnisse:Zytokinprofile der Bildung tertiärer lymphoider Strukturen wurden im menschlichen Niereninterstitium in einer Reihe von nachgewiesenNiereKrankheiten. Komplexe B-Zell-Strukturen, die mit der Bildung tertiärer lymphoider Organe vereinbar sind, waren bei menschlicher membranöser Nephropathie offensichtlich. Hier war die B-Zelldichte nicht signifikant mit dem Schweregrad der Proteinurie assoziiert, aber mit einer schlechteren Ausscheidungsfunktion der Nieren. Proteinurie-Reaktionen traten meistens innerhalb der ersten 6 Monate der B-Zelldepletion auf. Im Gegensatz dazu Erholung der AusscheidungNiereFunktionwurde nur nach 18 Monaten kontinuierlicher Therapie beobachtet, was mit einem strukturellen Prozess übereinstimmt. Renale tertiäre lymphatische Strukturen wurden auch ohne Autoimmunerkrankung nachgewiesenNiereErkrankung. Um zu untersuchen, ob eine B-Zell-Depletion CKD in einer breiteren Population beeinflussen kann, haben wir eine Bewertung vorgenommenNiereSpaßction bei neurologischen Patienten mit CKD (ChronischNiereErkrankung)unbekannter Herkunft. In dieser Kohorte stieg die eGFR innerhalb von 24 Monaten nach der B-Zell-Depletion signifikant an.

Fazit:Langfristige B-Zell-Depletion verbunden mit signifikanter Verbesserung der AusscheidungNiereFunktionbei menschlicher CKD (ChronischNiereErkrankung). Kinetik und Mechanismen der renalen B-Zell-Aggregation sollten weiter untersucht werden, um den Einfluss von B-Zellen und ihren Aggregaten als therapeutische Ziele zu stratifizieren.

SCHLÜSSELWÖRTER:Krebs, Zellmigration, Leber/Hepatozyten

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1 | EINLEITUNG

B-Zellen können nicht-lymphoide Organe einschließlich der Niere direkt infiltrieren. Eine anhaltende Entzündung kann organisierte Strukturen hervorrufen, die T-Zellen und Lymphgefäße enthalten und der Definition von tertiär-lymphatischen Strukturen (TLS) entsprechen.1,2 TLS ähneln in Zellzusammensetzung und -architektur Lymphknoten, sind jedoch durch das Wirtsorgan begrenzt und verdrängen das Organparenchym. B-Zellen werden durch das lokale Stroma-exprimierte Chemokin CXCL13 (alternativer Name: B-Zell-Lockstoff 1) rekrutiert.1–3 Sie sezernieren ihrerseits Lymphotoxine, einschließlich Lymphotoxin B (LTB),4 die die perivaskuläre Stroma-Differenzierung in Richtung Lymphgewebe, fibroblastische retikuläre Zellen und follikuläre dendritische Zellen fördern Zellen5,6, wodurch die neue lymphoide Struktur gefestigt wird.7

In der Niere wurde TLS bei einer Reihe von Autoimmunerkrankungen berichtet, einschließlich ANCA-assoziierter Glomerulonephritis, renalem systemischem Lupus erythematodes, membranöser Glomerulopathie und Ig-Anephritis.8–12 Komplexe B-Zell-Infiltrate traten auch bei Alloimmunität auf, nämlich Abstoßung von Nierentransplantaten, sowohl bei Menschen als auch bei Mausmodellen .13–16 In jüngerer Zeit wurden renale TLS in Abwesenheit eines analloimmunen Stimulus beschrieben, beispielsweise während der Langzeitnachsorge einer murinen Ischämie-Reperfusionsverletzung1,16 und bei schwerer humaner Pyelonephritis.17

Die therapeutische B-Zell-Depletion ist in einer Reihe von Antikörper-vermittelten Verfahren klinisch erfolgreichNiereKrankheiteneinschließlich renaler Transplantatabstoßung und glomerulärer Phritiden. Bei der membranösen Nephropathie, einer häufigen Ursache des nephrotischen Syndroms, erreicht die B-Zell-Depletion durch Rituximab beispielsweise ähnliche Remissionsraten wie frühere Protokolle wie das Ponticelli-Regime und Calcineurin-Inhibitoren.18–20 Die aktuelle Evidenz umfasst mehrere kontrollierte Studien21,22 sowie eine Reihe von Fallserie. Derzeit wird die Depletion von autooralen Antikörpern und damit die Aufhebung der nachgeschalteten angeborenen Immunaktivierung und Gewebezerstörung als der Hauptwirkungsmechanismus angesehen. Die B-Zell-Depletion durch Rituximab löste auch diffuse B-Zell-Infiltrate in den humanen Nieren-Allotransplantaten auf,14 während die kurzzeitige B-Zell-Depletion anscheinend unwirksam für die TLS-Auflösung war, wenn auch bei sehr begrenzten Patientenzahlen.23 Im Gegensatz dazu verschwand TLS in einem murinen SLE-Modell nach Langzeit-B zellabbauende Therapie.24

Es ist denkbar, dass diffuse B-Zell-Infiltrate und TLS auch ohne Antikörper-vermittelte Immunität die Organfunktion beeinträchtigen können. Wenn sich renales TLS inchronisch bildetNiereErkrankung(CKD) verschiedener Ätiologien sollte eine langfristige B-Zell-Depletion auch Patienten zugute kommen, bei denen keine Antikörper-vermittelte Nierenerkrankung diagnostiziert wurde. Wir untersuchten hier die B-Zell-Infiltration und Marker der TLS-Bildung bei menschlicher Glomerulonephritis und bewerteten die Entwicklung vonNiereFunktionwährend langfristiger B-Zell-Depletion bei membranöser Glomerulonephritis und CKD unbekannten Ursprungs.

2|MATERIAL UND METHODEN

2.1|Studienpopulationen

Datenanalysen wurden nach Zustimmung der Ethikkommission (MHH 2018‐8172 und 2019‐8275) gemäß der Deklaration von Helsinki durchgeführt. In der Abteilung für Nephrologie wurden Patienten mit histologischer Diagnose membranöse Glomerulopathie aus der elektronischen Akte mit den stationären Abrechnungscodes „membranöse Glomerulonephritis“ und „nephrotisches Syndrom aufgrund membranöser Nephropathie“ 2015–2019 und aus den Akten der spezialisierten nephrologischen Ambulanzen identifiziert. Das Fehlen einer längeren Nachbeobachtung unter den Respondern war auf den kürzlichen Beginn der Therapie (n=6), den Verlust der Nachbeobachtung (n=3), das Fehlen von Nachbeobachtungsdaten für Monat 18 (mit gut Reaktion in Monat 24, n=1) und Beginn der Hämodialyse (n=1). Bei jedem Patienten wurde nach B-Zell-Depletion mindestens eine B-Zell-Messung durchgeführt, die negativ war. Die Unterlagen der Klinik für Neurologie der Medizinischen Hochschule Hannover wurden auf Patienten durchsucht, die seit 2012 für 24 Monate oder länger mit B-Zell-Depletion mit Rituximab behandelt wurden. Patienten mit Nierenbiopsiebefunden, die auf eine Vaskulitis hinweisen, wurden ausgeschlossen (n=2). Von 65 identifizierten Patienten hatten 13 zu Beginn der Therapie eine geschätzte glomeruläre Filtrationsrate (eGFR) von 70 ml/min/1,73 m2 oder weniger und wurden in diese Analyse aufgenommen.

Laborwerte der Medizinischen Hochschule Hannover wurden vor Beginn der Rituximab-Behandlung und danach in den angegebenen Intervallen erhoben. Die eGFR wurde anhand des Chronic berechnetNiereErkrankungEpidemiology Collaboration (CKD-EPI)-Formel25 wurden Proteinurien durch Dipstick-Analyse in der Neurologie-Kohorte und als Protein/Kreatinin-Verhältnis in Spot-Urinproben bei den nephrologischen Patienten gemessen.

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2.2|Gen-Array-Datenanalyse

Die tubulointerstitielle LTB- und CXCL13-Expression wurde in öffentlichen Datensätzen aus der europäischen cDNAbank-Kohorte, dem Nephrotic Syndrome Study Network und dem Vasculitis Clinical Research Consortium26 analysiert, die am NCBI erhalten wurden (GSE104948 und GSE104954).

2.3|Immunfärbung, Konfokalanalyse und Quantifizierung des B-Zellinfiltrats bei membranöser Glomerulopathie

Bei allen verfügbaren Biopsien und einer Nephrektomieprobe von einem Patienten mit Oxalose wurde eine Immunfärbung mit Anti-CD20 (1:50; Klon L26; Agilent) von 3 µm entwachsten und rehydrierten in Paraffin eingebetteten Nierenbiopsieschnitten durchgeführt durchgeführt für 90 min nach hitzeinduzierter Epitopdemaskierung mit T‐Ethylendiamintetraessigsäurepuffer (pH 9,0, Zytomed Systems), endogener Peroxidaseaktivität (3 % H2O2) und Proteinblockierung (Zytomed). Negativkontrollen ohne Primärantikörper wurden in alle Färbeprotokolle eingeschlossen. Für den Nachweis wurde das Meerrettichperoxidase-Polymersystem ZytoChem Plus (Maus/Kaninchen; Zytomed) vor 3,3'-Diaminobenzidin-Chromogen (Zytomed) und Gegenfärbung mit Hämalum verwendet. Auf CD20 gefärbte Hellfeld-Objektträger wurden bei 40-facher Originalvergrößerung (Aperio CS2, Leica Microsystems) gescannt. Der immungefärbte Bereich wurde in einem pixelbasierten Ansatz mit einem interaktiv eingestellten Schwellenwert unter Verwendung einer Open-Source-Bildanalyseplattform (QuPath, Version 0.1.2, https://qupath.github.io/) quantifiziert.27 Derselbe Schwellenwert wurde für alle verwendet Abschnitte. Jeder Schnitt wurde von zwei Pathologen, die für Färbung, Diagnose und Fall verblindet waren, auf Färbungsqualität, Schwellenwert und Annotationskorrektheit kontrolliert. Artefakte (z. B. Gewebefalten, Chromogenunregelmäßigkeiten) wurden von der Analyse ausgeschlossen. Die Gruppen wurden nach B-Zelldichten über und unter dem Median zu Beginn der Therapie eingeteilt.

Ausgewählte Proben wurden für die konfokale Bildgebung mit sekundärem Ziegen-Antimaus-AF488 (Invitrogen) und Cy3-konjugiertem Anti-SMA (1A3, Sigma) gefärbt. Kerngegenfärbung mit 4,6-Diamidino-2-phenylindol (DAPI, Invitrogen) wurde aufgetragen, und die Objektträger wurden in Immunoselectantifading-Eindeckmedien (Dianova) eingespannt. Die Bilder wurden mit einem konfokalen Lasermikroskop Leica TCS SP8 und einem 20× Multiimmersionsobjektiv (Leica) aufgenommen. Die Analyse wurde mit NIH ImageJ und GIMP (Version 2.8) durchgeführt.

2.4|Statistiken

Die statistische Analyse wurde unter Verwendung von Prism 8 durchgeführt. Die Daten sind als Mittelwert ± SEM ausgedrückt. Der Test für die Gaußsche Verteilung wurde unter Verwendung des D'Agostino- und Pearson-Tests durchgeführt. Zwei Variablen wurden unter Verwendung von t-Tests oder Kruskal-Wallistest für nicht normalverteilte Stichproben verglichen. Mehrfachvergleiche wurden unter Verwendung von Einweg-ANOVA mit Mehrfachvergleichstests nach Dunn oder Dunnett wie angegeben durchgeführt. Die multivariable Regression wurde unter Verwendung von SAS 9.4 (SAS Institute) durchgeführt. p-Werte unter 0,05 wurden als signifikant angesehen, p-Werte werden wie folgt angegeben:*p < 0,05,="" **p="">< 0,01,="" ***p=""><>

3|ERGEBNISSE

3.1|B-Zell-Infiltrate und Mediatoren der lymphoiden Gewebeorganisation bei menschlichen Nierenerkrankungen

Die Immunfärbung für den B-Zellmarker CD20 und den Strukturmarker SMA wurde in menschlichen Nierenbiopsien mit membranöser Nephropathie bewertet (Abbildung 1A). Frühere Befunde von B-Zell-Infiltraten bestätigend,9,10 ergaben sich zusätzlich organisierte Strukturen, die der Definition von TLS entsprechen.

Um ein breiteres Spektrum an Nierenerkrankungen anzugehen, wurden die Mediatoren der TLS-Bildung CXCL131,8 und Lymphotoxin B (LTB)7,9 im Niereninterstitium in Genexpressionsdatensätzen von 195 menschlichen Biopsien analysiert (Abbildung 1B, C26). Erwartungsgemäß nahmen beide bei stark entzündlichen Zuständen wie sichelförmiger Glomerulonephritis, renalem systemischem Lupus erythematodes und IgA-Nephropathie im Vergleich zu gesunden Nieren von lebenden Organspendern zu. Darüber hinaus gab es auch einen signifikanten Anstieg chronischer Erkrankungen, einschließlich diabetischer Nephropathie und membranöser Glomerulopathie.

Diese Messungen stimmen mit dem Vorhandensein tertiärer lymphoider Strukturen im Menschen übereinNiereErkrankung,nämlich membranöse Glomerulopathie.

3.2|B-Zell-Infiltrate bei membranöser Glomerulopathie gehen mit einer verminderten Ausscheidungsfunktion der Nieren einher

Um die funktionelle Relevanz von B-Zell-Infiltraten bei membranöser Nephropathie zu untersuchen, bewerteten wir deren Ausmaß durch digital unterstützte Bildanalyse (Abbildung 2A, B). Die Patienten wurden nach B-Zell-Infiltrathäufigkeit zu Beginn der B-Zell-Depletionstherapie eingeteilt. Proteinurie, eine Hauptmanifestation der membranösen Glomerulopathie, unterschied sich nicht signifikant zwischen den Gruppen (Abbildung 2C), weder im Stadium der membranösen Glomerulopathie (2,1 ± 0,8 vs. 2,5 ± 0,7, p{{10 }} .3, Mann-Whitney-Test). Allerdings sind reichlichere B-Zell-Infiltrate im Nierengewebe mit einer signifikant schlechteren Ausscheidung verbundenNiereFunktion(Abbildung 2D).

Dies legt die Hypothese nahe, dass B-Zell-Infiltrate über die Induktion von Proteinurie hinaus funktionell relevant sein könnten.

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3.3|Auswirkung einer langfristigen B-Zell-Depletion bei membranöser Glomerulopathie

Als nächstes untersuchten wir die funktionellen Folgen einer langfristigen B-Zell-Depletion in dieser Kohorte mit membranöser Nephropathie. In unserer Einrichtung der Tertiärversorgung wurden 35 Patienten mit membranöser Glomerulopathie mit einer B-Zell-Depletion behandelt, hatten eine Nachbeobachtung von mindestens 12 Monaten und eine initiale GFR darüber 15 ml/min/1,73 m2 und wurden in diese Analyse einbezogen. Ähnlich wie in früheren Berichten reduzierten 80 Prozent die Proteinurie um mehr als 25 Prozent innerhalb von 12 Monaten nach der ersten Rituximab-Verabreichung und wurden gemäß der Definition der MENTOR-Studie als Responder eingestuft21 (Tabelle 1). Die Abnahme der Proteinurie bei Respondern war nach 6 Monaten B-Zell-Verarmung nachweisbar (Fig. 3A).

Wenn die B-Zell-Akkumulation pathophysiologisch relevant ist, sollte eine langfristige Depletion die eGFR über die Auswirkungen auf die Proteinurie hinaus verbessern. In der Tat,Nierenfunktionquantifiziert durch eGFR verbesserte sich, erreichte aber erst nach 18 Monaten eine Signifikanz (Abbildung 3B). Wir befassten uns ferner mit klinischen Faktoren, die die Wiederherstellung der Nierenfunktion beeinflussen können. Das Absetzen von Calcineurin-Inhibitoren kann die eGFR verbessern, und diese Medikamente wurden 54 Prozent unserer Kohorte zu verschiedenen Zeiten vor der Verabreichung von Rituximab verschrieben. Diese Therapie war jedoch nicht signifikant mit der Wiederherstellung der Ausscheidungsnierenfunktion verbunden (Tabelle 2). Auch die deutliche Verzögerung der eGFR-Verbesserung spricht gegen hämodynamische Effekte.

Frühere Immunsuppression und Alter, sowohl bei der Diagnose als auch bei der ersten B-Zell-Depletion, waren negativ mit der Erholung der Nieren assoziiert. Die Verbesserung der eGFR korrelierte signifikant umgekehrt mit dem Alter bei der Diagnose (Abbildung 3C). Alter und frühere Therapien, aber nicht die Zeit von der Diagnose bis zur B-Zell-Depletion, blieben ein signifikanter Faktor in der multivariablen linearen Regressionsanalyse (Tabelle 3).

Diese Ergebnisse zeigen eine funktionelle Verbesserung bei langfristiger B-Zell-Depletion bei membranöser Glomerulopathie beim Menschen.

3.4|Verbesserung der Nierenfunktion mit langfristiger B-Zell-Depletion bei CKD unbekannter Ursache

B-Zell-Infiltrate wurden bei einer Vielzahl von Nierenerkrankungen jenseits der membranösen Nephropathie gefunden. Als Beispiel für nicht primär Antikörper‐vermittelteNiere Erkrankung, entdeckten wir ein großes tertiäres lymphatisches Organ einschließlich eines Keimzentrums in einer Nephrektomieprobe eines Patienten mit Oxalose (Abbildung 4A). Wenn funktionell relevant, sollte ihre Entfernung über eine gut definierte Autoimmunerkrankung hinaus von Nutzen sein.

Um dieser Hypothese auf den Grund zu gehen, untersuchten wir stationäre eGFR-Patienten mit chronischer B-Zell-Depletion für neurologische Erkrankungen mit einer eGFR von 70 ml/min/1,73 m2 oder weniger. Wie in den Methoden beschrieben, wurden Patienten mit einer formellen Diagnose einer Nierenerkrankung, nämlich Glomerulonephritis, ausgeschlossen. Klinische und Laborcharakteristika sind in Tabelle 4 dargestellt. Die eGFR stieg nach zwei Jahren Therapie signifikant an (Abbildung 4B). Der Anstieg wird aufgrund der verbesserten neurologischen Funktion und Muskelmasse sehr wahrscheinlich sogar unterschätzt.

Diese Daten deuten darauf hin, dass eine chronische B-Zell-Depletion einen günstigen Effekt bei CKD haben könnte (ChronischNiereErkrankung)unabhängig von einer bestimmten pathologischen Entität.

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4|DISKUSSION

Unsere Daten zeigen eine Verbesserung inNiereFunktionmit langfristiger B-Zell-Depletion. Angesichts der Tatsache, dass sich organisierte B-Zell-Infiltrate bei einer Reihe von Nierenerkrankungen verschiedener Ätiologien entwickeln, ermutigen diese Ergebnisse ihre weitere Untersuchung als therapeutische Ziele jenseits von Autoimmunerkrankungen.

Bei der membranösen Glomerulopathie beobachteten wir eine Verbesserung der AusscheidungNiereFunktionnach 18 Monaten B-Zell-Depletion. Dies stimmt mit anderen Berichten überein.28–31 Eine NoeGFR-Verbesserung wurde bei den mit Rituximab behandelten Teilnehmern der MENTOR-Studie berichtet.21 Diese Patienten erhielten jedoch ihren letzten Verlauf der B-Zell-Depletion im 6. Monat der Studie. Ähnliche Überlegungen gelten für die GEMRI-TUX-Studie, die eine stabile exkretorische Nierenfunktion nach 6 Monaten berichtete22, und die Rituximab-Einzeldosis, die in der STARMEN-Studie verabreicht wurde.32 Dies unterstreicht die Notwendigkeit ausgedehnter Beobachtungen des Therapieerfolgs bei membranöser Nephropathie nach B-Zell-Depletion. Unsere Daten von Patienten mit CKD (ChronischNiereErkrankung)unbekannten Ursprungs schlagen vor, dass dies auch für andere Formen von Nierenerkrankungen gelten könnte, wie von murinen experimentellen Modellen nahegelegt.16 Es stimmt mit der signifikanten Hochregulierung der TLS-Genexpression überein, die in unserer Analyse auch bei inhumanem RPGN, IgA-Nephropathie und diabetischer Nephropathie gefunden wurde. Ein besseres Verständnis der Mechanismen der TLS-Bildung, einschließlich der Wechselwirkung mit Blutgefäßen und organspezifischen Hinweisen1,9,16, ist erforderlich, um therapeutische Ansätze über die B-Zell-Depletion hinaus zu erweitern.

Therapieschemata bei membranöser Nephropathie haben sich in den letzten Jahren schnell entwickelt.20,33 Die Proteinurie-Ansprechrate in unserer Tertiärversorgungskohorte entspricht ähnlichen Berichten28,29,34 und war höher als bei anderen, die niedrigere Rituximab-Dosen erhielten.30,35 In Übereinstimmung mit früheren Studien ist kein einzelnes klinisches Merkmal mit einer Proteinurie-Reaktion auf Rituximab verbunden. Wichtig ist, dass, ähnlich wie in den meisten36, aber nicht allen Berichten35, eine niedrigere eGFR die Proteinurie-Reaktion in keinem fortgeschrittenen Alter negativ beeinflusste.37 Unsere derzeitige Analyse ist durch unvollständige PLA2R-Messungen begrenzt, die mit einer Proteinurie-Reaktion bei membranöser Glomerulonephritis in Verbindung gebracht wurden.22,35,38 Begleitmedikation einschließlich Kortikosteroiden, die auch zusammen mit Rituximabinfusionen verabreicht werden, kann das Ansprechen beeinflusst haben. Der Entzug von Calcineurin-Inhibitoren kann die Nierenfunktion akut verbessern, wie für membranöse Nephropathie in der MENTOR-Studie und anderen berichtet wurde.21,31,39 Calcineurin-Inhibitoren sind Teil kombinierter immunsuppressiver Ansätze auch bei schwerer membranöser Nephropathie.31,32 Sie fördern bekanntermaßen Nierenfibrose.40,41 Es ist beruhigend, dass sie eine langfristige Erholung der Nierenfunktion bei Patienten unserer Kohorte nicht ausschlossen. Insgesamt stärken unsere Beobachtungen den Beweis einer effektiven Reduzierung der Proteinurie und einer geringen Rate an unerwünschten Ereignissen während der B-Zell-Depletion bei primärmembranöser Glomerulopathie.

In einer Reihe experimenteller und klinischer Studien wirkte sich Alterung nachteilig auf die Nierenregeneration aus.42–44 Biologisch gealterte Nieren stehen vor der Herausforderung, genügend Zellteilungen für eine funktionelle Regeneration bereitzustellen. Darüber hinaus wurde eine verstärkte glomeruläre Alterung bei glomerulären Erkrankungen einschließlich membranöser Glomerulopathie beschrieben.42,45 Obwohl uns nicht bekannt ist, dass bei membranöser Glomerulopathie zuvor über eine negative Korrelation von Alter und Regeneration berichtet wurde, stimmen unsere Daten mit den Ergebnissen von Patienten mit nephrotischem Syndrom überein andere Ätiologien einschließlich minimal veränderter Krankheit und fokaler und segmentaler Glomerulosklerose.46 Hier wurde eine verbesserte eGFR nach 1 Jahr B-Zell-Depletion ausschließlich bei jüngeren Patienten, hauptsächlich Kindern, beobachtet. Unsere Daten sprechen für einen altersabhängigen Regenerationsfaktor nach erfolgreicher Therapie auch bei membranöser Glomerulopathie. Unsere Responder-Kohorte umfasste Patienten im Alter von 28–73 Jahren bei der Diagnose und 33–77 Jahren bei der ersten Rituximab-Therapie, mit einer Verzögerungszeit zwischen Diagnose und B-Zell-Depletion von 0–318 Monaten (Mittelwert 77 Monate). Diese Werte sind erwartungsgemäß stark korreliert. Die große Altersspanne ermöglichte es uns, mit der Untersuchung zu beginnen, ob eine Verzögerung der Therapie zu einer beeinträchtigten eGFR-Verbesserung beitrug. Unsere Daten weisen nicht auf eine nachteilige Wirkung einer verzögerten Rituximab-Therapie hin.

Unsere Studie ist auch durch die Tatsache eingeschränkt, dass es zu wenige Patienten mit Biopsiematerial für B-Zell-Färbung und Langzeit-Follow-up für einen quantitativen Zusammenhang mit dem Ausmaß der eGFR-Reaktion gab (n=7). Wir verwendeten eine computergestützte Quantifizierung des gesamten Objektträgers, um maximale Informationen über die Häufigkeit von B-Zellen in der Niere zu erhalten. Aufgrund ihrer verstreuten Natur spiegelt jedoch selbst ein vollständiger Biopsiekern möglicherweise nicht das gesamte Ausmaß wider. Fortschritte in der Bildgebung und möglicherweise antigenspezifischen Kontrastmitteln könnten in Zukunft neue Ansätze zur Quantifizierung und Längsschnittüberwachung von B-Zell-Infiltraten bei Nierenerkrankungen bieten.

Zusammenfassend schlagen unsere Daten eine zusätzliche Begründung für die Verwendung einer langfristigen B‐Zell‐Depletion vorNiereKrankheitenB. durch Zerstörung lokaler B‐Zell‐dominierter Strukturen. Um diesen Ansatz zu validieren, sind erweiterte kontrollierte Studien einschließlich serieller histologischer Untersuchungen erforderlich. Unsere Ergebnisse können eine systematische Analyse der Nierenfunktionsentwicklung in weiteren Kohorten fördern.

DANKSAGUNGEN

Wir bedanken uns für die Unterstützung durch die MHH Core Unit Genomics Ingene Array Data Preparation und die Core Unit Laser Microscopy, D. Kijas und E. Christians with immunostaining. SvV wurde von der Deutschen Forschungsgemeinschaft unterstützt.

AUTORENBEITRÄGE

Susanne V. Fleig, Christoph Schröder, Hermann Haller, Thomas Skripuletz und Sibylle von Vietinghoff gestalteten die Forschung. Susanne V. Fleig, Franz Felix Konen, ChristophSchröder, Jessica Schmitz, Stefan Gingele, Jan HinrichBräsen und Svjetlana Lovric erhoben Daten. Franz FelixKonen, Christoph Schröder, BMWS, und Sibylle vonVietinghoff analysierten die Daten. Susanne V. Fleig, Franz Felix Konen, Christoph Schröder und Sibylle von Vietinghoff haben das Manuskript mit Hilfe aller Koautoren geschrieben, alle Autoren haben das Manuskript gelesen und freigegeben.

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Aus: 'Long-term B cell depletion assoziiert mit der Regeneration der Nierenfunktion' vonSusanne V. Fleig, et al

---Immunentzündungsdis. 2021;9:1479–1488.

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