Optimierung des Extraktionsprozesses von Polysaccharid aus Cistanche Deserticola durch Response-Surface-Methode

Zielsetzung:Bestimmung der optimalen Bedingungen für die Extraktion von Polysacchariden aus Cistanche deserticola durch Heißwasserextraktion. Methoden: Die Heißwasserextraktionsmethode wurde ausgewählt, um Polysaccharide aus Cistanche deserticola deserticola zu extrahieren, Cistanche deserticola deserticola wurde als Rohmaterial verwendet und die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola deserticola wurde als Antwortwert verwendet. Die optimalen Einzelfaktor-Bedingungen wurden durch Einzelfaktor-Experimente ermittelt und die Ergebnisse der Einzelfaktor-Experimente wurden durch die Response-Surface-Methodik optimiert. Ergebnis: Die experimentellen Ergebnisse zeigen, dass die optimalen Bedingungen für die Heißwasserextraktionsmethode sind: Flüssigkeits-zu-Material-Verhältnis von 45:1 (ml:g), Heißwasserextraktionstemperatur von 100 Grad, Zeit von 130 Minuten und Ethanol-Ausfällungskonzentration von 100 Prozent . Unter diesen Bedingungen betrug die Polysaccharid-Extraktionsrate von Cistanche deserticola 11,207 Prozent, was sehr nahe am Vorhersagewert von 11,609 Prozent der Response-Surface-Methode lag. Schlussfolgerung: Das Experiment beweist, dass die optimierten Bedingungen der Polysaccharidextraktion aus Cistanche deserticola durch die Reaktionsoberflächenmethode sinnvoll und zuverlässig sind, was eine zuverlässige Grundlage für den nächsten Schritt der industriellen Produktion bieten kann.

Schlüsselwörter: Cistanche deserticola; Heißwasserextraktionsmethode; Polysaccharide; Extraktionsrate; Antwortoberflächenmethode; Verhältnis von Flüssigkeit zu Material; Temperatur; Zeit; Konzentration der Alkoholausfällung

Wichtigste chemische Bestandteile von Cistanche deserticola

Cistanche deserticola deserticola in der Inneren Mongolei ist ein mehrjähriges Kraut, das im Allgemeinen im Klima und in trockenen Wüsten wächst und einen hohen medizinischen Wert hat. Cistanche deserticola genießt den Ruf des Wüstenginsengs, da es in der Geschichte der Verschreibungen von Stärkungsmitteln in der traditionellen chinesischen Medizin am häufigsten vorkommt. Cistanche deserticola deserticola in der Inneren Mongolei enthält eine Vielzahl chemischer Bestandteile, darunter hauptsächlich Phenethylalkoholglykoside, Polysaccharide, Flavonoide usw. Darüber hinaus gibt es Aminosäuren, anorganische Spurenelemente usw. Einer seiner Hauptbestandteile, Polysaccharide, wirkt immunmodulatorisch Wirkung, kann die Lymphozytenproliferation unterstützen, die Immunfunktion des Körpers verbessern und Makrophagen aktivieren, mit einer regulierenden Wirkung auf die Immunaktivität. Cistanche deserticola Deserticola-Polysaccharid hat auch die Wirkung von Antioxidation, Anti-Aging, Linderung von Müdigkeit, Beruhigung des Darms und Katharsis, Verbesserung der Symptome der Parkinson-Krankheit, Verbesserung von Lernen und Gedächtnis, Schutz der Nerven, Antiviren- und Antitumorwirkung. Derzeit wird in Alxa, Innere Mongolei, eine Reihe von Nadel-Cistanche deserticola gepflanzt und verarbeitet. Die industrielle Vertriebskette wurde verbessert. Es handelt sich um eine gute Ertragsernte, die sich zur lokalen Stützpfeilerindustrie entwickelt hat. In Kombination mit der Industrie zur Bekämpfung der Wüstenbildung hat es die lokale Wüstenbildungsumgebung wirksam gemildert und bietet umfassende Entwicklungsaussichten. Unter ihnen ist die pharmakologische Wirkung von Polysacchariden in Cistanche deserticola deserticola zu einem Forschungsschwerpunkt geworden, und die Frage, wie die Extraktionsrate von Cistanche deserticola deserticola-Polysacchariden in der Inneren Mongolei verbessert werden kann, ist zu einem wichtigen Bindeglied geworden. In diesem Experiment wurde die Heißwasserextraktionsmethode zur Extraktion von Polysacchariden ausgewählt. Derzeit umfassen die Methoden zur Extraktion von Polysacchariden die mikrowellenunterstützte Extraktion, die ultraschallunterstützte Extraktion und die enzymunterstützte Extraktion. Die mikrowellenunterstützte Extraktionsmethode kann zu einer ungleichmäßigen Erwärmung medizinischer Materialien führen, was zur Deaktivierung der Komponenten führt. Die ultraschallunterstützte Methode eignet sich am besten für die Extraktion von Polysacchariden aus Pflanzen mit hohem Feuchtigkeitsgehalt, während in unserem Labor getrocknete medizinische Materialien verwendet werden, was nicht geeignet ist. Die enzymatische Extraktion erfordert hohe experimentelle Anforderungen und komplexe Vorgänge, daher wird für den nächsten Forschungsschritt die einfachste und stabilste Wasserextraktionsmethode ausgewählt. Anschließend wurde die Response-Surface-Methodik hauptsächlich verwendet, um die besten Extraktionsbedingungen für die Polysaccharid-Extraktion aus Cistanche-Deserticola zu erkunden und technische Unterstützung für die Industrialisierung der Polysaccharid-Produktion aus Cistanche-Deserticola in der Inneren Mongolei bereitzustellen. Es bietet theoretische Unterstützung für die weitere Untersuchung des Polysaccharids Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei.

Wichtigste chemische Bestandteile von Cistanche deserticola

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1 Material und Methoden

1.1 Testmedikamente und Reagenzien

Cistanche deserticola deserticola (Inner Mongolia Hongkui Cistanche Group Co., Ltd., Produktionschargennummer: PDD 236305955677); D wasserfreier Glucosestandard (China Foods Limited und Drug Identification Institute, Chargennummer: 11508 201602); Ethanol (Xilong Chemical, Produktionschargennummer U1000510 500 ml), konzentrierte Schwefelsäure (Sigma, Produktionschargennummer 7664 93 9 in den Vereinigten Staaten) und Phenol (Sigma, Produktionschargennummer 108 95 2 in den Vereinigten Staaten) sind häufig verwendete Laborreagenzien, die alle analytisch rein sind.

1.2 Instrumente und Ausrüstung

Keyili Swing High-Speed ​​Universal Crusher (Zhejiang Yili Industry and Trade Co., Ltd., Modell: QE-1000); Elektrischer Windtrockenofen (Shanghai Yiheng Scientific Instrument Co., Ltd., Modell: DHG 9240A); Xinyue sichtbares Spektrophotometer (Beijing Puxi General Instrument Co., Ltd., Modell: T6); Automatische Mehrröhrchen-Balance-Zentrifuge (Shanghai Luxiangyi Centrifuge Instrument Co., Ltd., Modell: TD5M); Dreizweck-Wassertank mit konstanter Temperatur (Tianjin Taist Instrument Co., Ltd., Modell: SHHW21-600A Typ II); Elektronische Waage [Auhaus Instruments (Changzhou) Co., Ltd., Modell: PX224ZH].

Cistanche deserticola-Experiment

2 Methoden

2.1 Heißwasserextraktion und Extraktion von Polysacchariden

Zuerst wurde Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei bei 65 Grad getrocknet und dann mit einer Mühle zerkleinert und mit einem 60-Mesh-Sieb gesiebt. Alle Teile, die das 60-Mesh-Sieb passierten, konnten verwendet werden. Wiegen Sie 10 g Cistanche-Deserticola-Pulver genau ab und weichen Sie es je nach Temperatur und Zeit für die Heißwasserextraktion in heißem Wasser ein. Der erhaltene Extrakt wurde 10 Minuten lang mit einer Geschwindigkeit von 3000 U/min (mit einem Radius von 18 cm) zentrifugiert, um den Überstand zu erhalten. 95-prozentiges Ethanol, das das Dreifache des Volumens des Überstands ausmachte, wurde in den Überstand gegossen und gut gemischt. Danach ließ man es 12 Stunden lang mit Alkohol absetzen. Der Niederschlag wurde durch Zentrifugation bei einer Geschwindigkeit von 3000 U/min (mit einem Radius von 18 cm) für 2 Minuten zurückgehalten und mit wasserfreiem Ethanol gewaschen. Wenn sich Ethanol auf natürliche Weise verflüchtigt, bildet es das rohe Polysaccharid von Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei.

2.2 Erstellung von Standardkurven

Pipettieren Sie 0 1mg/ml Standard-Glukoselösung und verdünnen Sie diese separat auf 10 μ G/ml, 20 μ G/ml, 30 μ G/ml, 40 μ G/ml, 50 μ G/ml, 60 μ G/ml, 70 μ G/ml, 80 μ G/ml, 90 μ G/ml, unter Verwendung der Phenol-Schwefelsäure-Methode unter Verwendung eines Spektrophotometers λ Messen Sie die Absorption bei 490 nm. Die lineare Beziehung zwischen der Massenkonzentration von Glucose und der Absorption beträgt Y=0.015X-0.012, R2=0.995.

Abbildung 1 Glukose-Standardkurve

2. 3 Das Verhältnis von Flüssigkeit zu Material beeinflusst die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Das Polysaccharid von Cistanche deserticola wurde durch 95-prozentige Ethanolfällung bei 90 Grad, 120 Minuten und 90 Grad in heißem Wasser extrahiert. Das Verhältnis von Flüssigkeit zu Material wurde auf 10 ∶ 1, 20 ∶ 1, 30 ∶ 1, 40 ∶ 1, 50 ∶ 1 und 60 ∶ 1 (ml ∶ g) eingestellt.

2.4 Die Extraktionszeit mit heißem Wasser beeinflusst die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Das Polysaccharid von Cistanche deserticola wurde mit einem Verhältnis von Flüssigkeit zu Material von 40 ∶ 1 (ml ∶ g), einer Extraktionstemperatur von 90 Grad und 95 Prozent Ethanol als experimentellen Fixbedingungen extrahiert. Die Heißwasserextraktionszeit wurde als Variable verwendet und die Experimente wurden mit 30 Minuten, 60 Minuten, 90 Minuten, 120 Minuten, 150 Minuten bzw. 180 Minuten durchgeführt. Der Polysaccharidgehalt wurde bestimmt und die Extraktionsrate berechnet.

2. 5 Einfluss der Heißwasserextraktionstemperatur auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola

Das Polysaccharid von Cistanche deserticola wurde unter den festgelegten Bedingungen eines Flüssigmaterialverhältnisses von 40 ∶ 1 (ml ∶ g), einer Extraktionszeit von 150 Minuten und einer 95-prozentigen Ethanolfällung extrahiert. Die Heißwasserextraktionstemperatur wurde als Variable eingestellt und das Experiment wurde bei 60 Grad, 70 Grad, 80 Grad, 90 Grad und 100 Grad durchgeführt. Der Polysaccharidgehalt wurde bestimmt und die Polysaccharid-Extraktionsrate berechnet.

2 .6 Die Ethanolkonzentration beeinflusst die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Die Extraktion von Polysacchariden aus Astragalus membranaceus der Inneren Mongolei wurde bei einem Flüssigkeit-zu-Material-Verhältnis von 40:1 (ml:g), einer Heißwasserextraktionszeit von 150 Minuten und einer Heißwasserextraktionstemperatur von 100 Grad durchgeführt. Die Ethanol-Fällungskonzentration wurde für Experimente auf 60 Prozent, 70 Prozent, 80 Prozent, 85 Prozent, 90 Prozent, 95 Prozent und 100 Prozent eingestellt. Der Polysaccharidgehalt wurde gemessen und die Extraktionsrate berechnet.

2.7 Reaktionsoberflächen-Optimierungsdesign

Nach Abschluss des obigen Einzelfaktor-Experiments werden die aus dem obigen Einzelfaktor-Experiment erhaltenen Ergebnisse als optimales Niveau bestimmt und der Entwurf zur Optimierung der Reaktionsoberfläche durchgeführt. Die spezifischen Pegeleinstellungen sind in Tabelle 1 aufgeführt.

Tabelle 1: Einstellung des Einzelfaktorniveaus des Cistanche-Deserticola-Polysaccharid-Extraktionsprozesses in der Inneren Mongolei

Vier Faktoren und drei Ebenen Die Versuchsplanung erfolgt mit der Software Design Exper11 gemäß den Entwurfsprinzipien von Box Benhnken. Der Testplan und die Ergebnisse der Reaktionsoberfläche sind in Tabelle 2 aufgeführt.

Tabelle 2 Reaktionsoberflächen-Designschema und Reaktionswerte

Verwenden Sie die Software Design Exper11, um eine multiple Regressionsanpassung an den aus diesem Experiment erhaltenen Datenzeilen in Tabelle 1 durchzuführen. Schließlich wurde die Extraktionsrate (Y) von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei ermittelt. Die Simulationsgleichung für die quadratische multiple Regression Y{{2} } plus 9.300-0.339A plus 2.08{{10}}B plus 0.250C plus {{26} }.337D plus 0.232AB-0.046AC plus 0.079AD-0 283BC-0 096BD-0 046CD plus 0.076A2-0 282B2-0 130C2 plus 0,190 D2, R2=0,943. Siehe Tabelle 3. Die Software „design exper11“ wurde verwendet, um die Auswirkungen zweier beliebiger Bedingungen auf die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei zu analysieren und zu vergleichen, mit dem Verhältnis von A-Flüssigkeit zu Material, der Temperatur der B-Heißwasserextraktion, die Konzentration von C-Ethanol und die Zeit der D-Heißwasserextraktion als wesentliche Einflussfaktoren. Siehe Abbildungen 6-11.

3. Ergebnisse

3.1 Das Verhältnis von Flüssigkeit zu Material beeinflusst die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Unter den gleichen Bedingungen der Extraktionstemperatur, der Extraktionszeit und der Alkoholfällungskonzentration zeigte die Extraktionsrate des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei einen Aufwärtstrend zwischen dem Flüssigkeit-zu-Material-Verhältnis von 10 ∶ 1 bis 40 ∶ 1 und erreichte das Maximum Wert bei 40 ∶ 1. Danach nahm die Extraktionsrate des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei mit der weiteren Erhöhung des Flüssigkeits-zu-Material-Verhältnisses ab. Daher beträgt das Flüssigkeit-zu-Material-Verhältnis 40:1 (ml:g), was der optimale Wert ist, der für dieses Experiment ausgewählt wurde. Siehe Abbildung 2.

Abb. 2 Einfluss des Flüssigmaterialverhältnisses auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

3.2 Einfluss der Extraktionszeit mit heißem Wasser auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola

Unter den Bedingungen des Flüssigmaterialverhältnisses, der Extraktionstemperatur und der 95-prozentigen Ethanolfällung zeigte die Extraktionsrate des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei einen Aufwärtstrend im Gradienten der Wasserbadzeit von 30 bis 180 Minuten und erreichte den Maximalwert, als die Die Heißwasserextraktionszeit betrug 150 Minuten. Die Extraktionsrate stabilisierte sich allmählich und stieg nicht an, als die Heißwasserextraktionszeit verlängert wurde. Daher wurde für dieses Experiment die optimale Extraktionszeit von 150 Minuten gewählt. Siehe Abbildung 3.

Abb. 3 Einfluss der Extraktionszeit mit heißem Wasser auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

3. 3 Einfluss der Heißwasserextraktionstemperatur auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola

Unter der Voraussetzung des gleichen Flüssigkeitsmaterialverhältnisses, der gleichen Extraktionszeit und der gleichen Alkoholausfällungskonzentration korrelierte die Extraktionsrate des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei positiv mit der Temperatur, wenn die Heißwasserextraktionstemperatur 60–100 Grad betrug und den Maximalwert erreichte 100 Grad. Daher wurde für dieses Experiment 100 Grad als optimale Extraktionstemperatur gewählt. Siehe Abbildung 4.

Abb. 4 Einfluss der Heißwasserextraktionstemperatur auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

3.4 Die Ethanolkonzentration beeinflusst die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Unter den gleichen Bedingungen des Flüssigkeitsmaterialverhältnisses, der Extraktionszeit und der Extraktionstemperatur zeigte die Extraktionsrate des Polysaccharids einen Aufwärtstrend, wenn die Ethanolkonzentration zwischen 60 und 95 Prozent lag, und erreichte den höchsten Punkt, als die Konzentration 1669 · World Traditional betrug Die chinesische Medizin lag im Juni 2023, Band 18, Ausgabe 12 bei 95 Prozent. Danach nahm mit der Erhöhung der Ethanolkonzentration die Extraktionsrate des rohen Polysaccharids aus Cistanche deserticola deserticola ab. Daher ist eine Konzentration von 95 Prozent Ethanol die optimale Voraussetzung für dieses Experiment. Siehe Abbildung 5.

Abb. 5 Einfluss der Ethanolkonzentration auf die Extraktionsrate von Polysaccharid aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

3.5 Ergebnisse und Analyse des Box-Behnken-Tests

Die Ergebnisse der Varianzanalyse sind in Tabelle 3 dargestellt.

Tabelle 3 Ergebnisse der Varianzanalyse der Regressionsgleichung des Polysaccharids Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei

Je größer die Steigung der Antwortfläche ist, desto empfindlicher reagiert der Antwortwert auf die Änderung der Einflussbedingungen. Gemäß der Steigungsgröße von Abbildung 6-11 ist die Extraktionstemperatur der größte Faktor, der die Extraktionsrate des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei beeinflusst, was mit den Ergebnissen der ANOVA übereinstimmt.

Abbildung 6 Reaktion auf die Wechselwirkung zwischen Flüssigkeits-Material-Verhältnis und Heißwasserextraktionstemperatur

Abbildung 7 Reaktion auf die Wechselwirkung zwischen Flüssigkeits-Material-Verhältnis und Heißwasserextraktionszeit

Abbildung 8 Reaktion auf die Wechselwirkung zwischen Materialflüssigkeitsverhältnis und Ethanolkonzentration

Abbildung 9 Reaktion auf die Wechselwirkung zwischen Heißwasserextraktionstemperatur und Heißwasserextraktionszeit

Abbildung 10 Reaktionsflächendiagramm der Wechselwirkung zwischen Heißwasserextraktionstemperatur und Ethanolkonzentration

Unter Bezugnahme auf die am besten geeigneten Extraktionsbedingungen und unter Berücksichtigung der tatsächlichen Situation in unserem Labor wurde der endgültige optimierte Extraktionsplan wie folgt festgelegt: Flüssigkeits-Feststoff-Verhältnis 45:1 (ml:g), Extraktionstemperatur 100 Grad, Ethanolkonzentration 100 Prozent und Extraktionszeit 100 Minuten. Die Extraktionsrate von Polysacchariden aus Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei betrug 11,207 Prozent, was sehr nahe am vorhergesagten Wert von 11,609 Prozent lag.

Abbildung 11 Reaktion auf die Wechselwirkung zwischen Heißwasserextraktionszeit und Ethanolkonzentration

4. Diskussion

Im Experiment wurde festgestellt, dass die Polysaccharidausbeute von niedrig auf hoch abnahm und dann bei den Flüssigkeits-zu-Material-Verhältnissen von 20:1, 30:1, 40:1, 50:1 und 60:1 wieder abnahm ( siehe Abbildung 2). Allerdings ist die Gesamtveränderung mit einem Flüssigkeit-zu-Material-Verhältnis von 20:1 bis 60:1 nicht groß. Die Ausbeute an Polysacchariden stieg nur um 5 Prozent, während sich die eingesetzte Wassermenge um das Doppelte erhöhte. Bei der industriellen Produktion führt die großtechnische Herstellung von Polysacchariden zu einer Verschwendung von Wasserressourcen. Es wird empfohlen, ein Flüssigkeits-zu-Material-Verhältnis von 20:1 (ml:g), eine Extraktionstemperatur von 100 Grad, eine Ethanolkonzentration von 100 Prozent und eine Extraktionszeit von 100 Minuten zu wählen. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass die Prozessparameter des Cistanche-Deserticola-Polysaccharids in der Inneren Mongolei durch die Reaktionsoberflächenmethode ermittelt wurden, die effizient, stabil und durchführbar ist. Xiao Dao'an [21] verwendete die Anthron-Schwefelsäure-Methode und orthogonale Experimente, um eine Polysaccharid-Extraktionsrate von 8,17 Prozent zu erhalten, wenn das Material-Flüssigkeits-Verhältnis 1:25 betrug, die Temperatur 60 Grad betrug und die Extraktionszeit 30 Minuten betrug. Yang Wen et al. [11] extrahierten Polysaccharide aus Cistanche deserticola durch Ultraschallverfahren kombiniert mit Enzymolyse. Unter Verwendung von Einzelfaktor- und Orthogonaltests betrug die Extraktionsrate 5,14 Prozent. Lianle et al. [22] verwendeten Einzelfaktor- und orthogonale Tests, um die optimalen Extraktionsbedingungen für die Polysaccharid-Extraktionsrate von Cistanche deserticola von 18,90 Prozent zu bestimmen.

Chinesische Kräuter-Cistanche

Derzeit werden bei den Methoden zur Gewinnung von Polysacchariden aus Cistanche deserticola nur Einzelfaktortests und orthogonale Tests verwendet und nur der Einfluss eines einzelnen Faktors auf die Versuchsergebnisse berücksichtigt. Die Prozessparameter von Cistanche-Deserticola-Polysacchariden aus der Inneren Mongolei werden durch die Reaktionsoberfläche definiert, die den Einfluss verschiedener Faktoren und das Zusammenspiel zweier Faktoren auf den Ertrag vollständig berücksichtigen kann, wodurch das einseitige orthogonale Design nach der Behandlung eines einzelnen Faktors vermieden wird Tests. Und im Vergleich zu anderen Polysaccharid-Extraktionsmethoden ist dieses Experiment kostengünstiger, hat eine höhere Polysaccharid-Ausbeute, ist sicher und eignet sich für die Herstellung in großen Fabriken. Der Nachteil dieses Experiments besteht darin, dass zur Bestimmung des Gehalts an Polysacchariden die Phenol-Schwefelsäure-Methode verwendet wurde, deren Durchführung nicht nur komplex ist, sondern auch durch andere Substanzen beeinflusst wird, was zu einer geringen Genauigkeit führt. Später können neue Methoden zur Bestimmung von Polysacchariden ausgetauscht oder Verunreinigungen entfernt werden, um den Versuch zu verbessern. Cistanche deserticola in der Inneren Mongolei ist nicht nur vorteilhaft für die Wüstenumgebung in der Inneren Mongolei, sondern hat auch einen hohen medizinischen und gesundheitlichen Wert. Allerdings beschränkt sie sich derzeit nur auf die Grundlagenforschung. Es besteht die Hoffnung, dass die folgende eingehende Forschung zum Cistanche-Deserticola-Polysaccharid durchgeführt wird und weitere Anwendungen in neuen Arzneimitteln, Gesundheitsprodukten, Lebensmitteln und anderen Aspekten erfolgen.

Cistanche-Extrakt-Pulver

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