Wie behandelt Echinacosid aus Cistanche die Parkinson-Krankheit?

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Teil I.: Neuroprotektive Wirkungen und verwandte Mechanismen von Echinacosid bei MPTP-induzierter PDParkinson-Krankheit(PD)Mäuse

Zhen-Nian Zhang'*Zhen Huil Chang Chen Yan Liang Li-Li Tang'Su-Lei Wang Cheng-Cheng Xul Hui Yang'Jing-SiZhang²Yang Zhao

Ziel: Erforschung der neuroprotektiven Wirkung und der damit verbundenen Mechanismen vonEchinacosid (ECH)VonCistanchein 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP)-induziertenParkinson-Krankheit(PD) Mäuse. Methoden: Die Parkinson-Krankheit wird bei Mäusen durch MPTP induziert und das Neuroverhalten von Mäusen in verschiedenen Gruppen beobachtet. Dann werden Immunhistochemie und Western Blot-Analyse verwendet, um die Expression von Tyrosinhydroxylase (TH) und α-Synuclein in der Substantia nigra (SN) zu messen. Der Gehalt an Dopamin (DA) und anderen Neurotransmittern im Gehirn wird durch Hochleistungsflüssigkeitschromatographie nachgewiesen. Die Expression von Nervenwachstumsfaktoren und Entzündungsfaktoren in SN bei Mäusen in jeder Gruppe wird durch quantitative Polymerase-Kettenreaktion gemessen. Schließlich wird die Expression von oxidativen stressbezogenen Parametern in jeder Gruppe gemessen. Ergebnisse: Im Vergleich zur Modellgruppe ist die Pole-Climbing-Zeit bei Mäusen in moderater und hochdosierterEchinacosidGruppen ist signifikant reduziert (P< 0.01).="" the="" rotarod="" staying="" time,="" as="" well="" as="" fore="" and="" hind-limb="" strides,="" shows="" a="" significant="" increase="" (p="">< 0.01),="" as="" does="" spontaneous="" activity="" (p="">< 0.01).="" moreover,="" the="" expression="" levels="" of="" th,="" da,="" glial="" cell="" line-derived="" neurotrophic="" factor,="" and="" brain-derived="" neurotrophic="" factor="" in="" sn="" in="" mice="" show="" significant="" increases="" in="" these="" two="" groups="" (p="">< 0.01).="" the="" content="" of="" superoxide="" dismutase,="" catalase,="" and="" glutathione="" peroxidase="" indicates="" significant="" increases="" in="" the="" low,="" moderate,="" and="" high-dose="">EchinacosidGruppen (P< 0.01),="" and="" the="" content="" of="" mda="" was="" reduced="" (p="">< 0.01).="" in="" the="" high-dose="">Echinacosid-Gruppe ist die Expression von Interleukin (IL) 6 und Tumornekrosefaktor-α signifikant reduziert (P< 0.01),="" while="" the="" expression="" of="" il-10="" shows="" a="" marked="" increase="" (p="">< 0.01)="" alongside="" a="" decrease="" in="" the="" expression="" of="" α-synuclein="" (p="">< 0.01).="" conclusion:="">EchinacosidVonCistancheverbessert neurobehaviorale Symptome beiParkinson-KrankheitMäuse und erhöht signifikant die Expression von TH und DA. Die neuroprotektive Wirkung korreliert möglicherweise mit entzündungshemmenden und antioxidativen Wirkungen, fördert die Expression von Nervenwachstumsfaktoren und reduziert die Ansammlung von α-Synuclein.

Cistanche zur Behandlung der Parkinson-Krankheit

Schlüsselwörter: Parkinson-Krankheit, MPTP, Echinacosid,α-Synuclein, oxidativer Stress, Neuroprotektion, BDNF, GDNF, IL-6, TNF-α, IL-10

Einleitung

Parkinson-Krankheit (PD)ist eine chronische und fortschreitende neurodegenerative Erkrankung. Ein typisches pathologisches Merkmal vonParkinson-Krankheitist die Bildung von Lewy-Körpern, in denen α-Synuclein und Ubiquitin die Hauptbestandteile sind. Obwohl die Pathogenese vonParkinson-KrankheitIst noch nicht vollständig geklärt, immer mehr Beweise deuten darauf hin, dass Umweltfaktoren, oxidativer Stress, mitochondriale Dysfunktion, Herunterregulierung neurotropher Faktoren, Immunentzündungen, erregende Aminosäuretoxizität, Kalziumüberladung und andere pathologische Mechanismen interagieren und am Auftreten oder der Entwicklung vonParkinson-Krankheit. Studien deuteten darauf hin, dass Risikofaktoren wie erhöhter oxidativer Stress und mitochondriale Dysfunktion zu Fehlfaltungen und abnormaler Aggregation von α-Synuclein führen können. Dies wiederum kann oxidativen Stress und mitochondriale Dysfunktion verschlimmern. Diese Faktoren können miteinander interagieren und die Wirkung von Verletzungen kontinuierlich verstärken, was schließlich zu fortschreitender Degeneration und zum Tod von dopaminergen Neuronen führt.3 Wenn man bedenkt, dass kein Medikament das Fortschreiten vonParkinson-Krankheitgegenwärtig, kombiniert mit der Pathogenese und den pathologischen Kernmerkmalen vonParkinson-Krankheit, das auf α-Synuclein abzielt, kann eine wichtige Richtung für die Suche nach Medikamenten anzeigen, die das Fortschreiten der Krankheit verzögern und die neuroprotektiven Wirkungen untersuchen können.

Jüngste Studien zeigten, dassEchinacosid(ECH)VonCistanchehat eine breite Palette von pharmakologischen Wirkungen, einschließlich entzündungshemmender, antioxidativer und neuroprotektiver Funktionen; Darüber hinaus kann es zur Verbesserung von Lernen und Gedächtnis beitragen, Leberschutz und Immunregulation bieten und Anti-Tumor-Effekte bieten.5 Bestehende Studien, die von der vorliegenden Studiengruppe durchgeführt wurden, bestätigten auch, dassEchinacosid VonCistanchekann möglicherweise einen abnormalen Gang im 1-Methyl-4-phenyl-1,2,3,6-tetrahydropyridin (MPTP)- verbessernParkinson-KrankheitMäusemodell. Es kann auch die Expression von Bax/Bcl-2 signifikant reduzieren und die Reduktion von dopaminergen Neuronen im Striatum hemmen sowie die Aktivierung von Mikroglia und neuen Arten von Gliazellen hemmen.6–10 In der Pathogenese vonParkinson-KrankheitDie Aktivierung von Mikroglia kann viele neurotoxische Substanzen wie Chemokine, Entzündungsfaktoren und reaktive sauerstofffreie Radikale absondern und die Schädigung der Neuronen durch oxidativen Stress, Entzündungen und die Induktion von Apoptose verschlimmern. Forscher haben herausgefunden, dass in der MPTP-induziertenParkinson-KrankheitMäusemodell, das die Aktivierung von Mikroglia hemmt, kann den Tod von dopaminergen Neuronen verhindern.8 Zellmodelle zeigten, dassCistancheEchinacosidkann in der Lage sein, die Expression von Entzündungsfaktoren, die durch 6-Hydroxydopamin induziert werden, zu reduzieren. Es gibt jedoch nur wenige Berichte über die Auswirkungen vonEchinacosid VonCistancheund die damit verbundenen therapeutischen Mechanismen zur Clearance von α-Synuclein, dem pathologischen Kernprodukt inParkinson-Krankheit. In der vorliegenden Studie wurde die Eliminierung von α-Synuclein weiter untersucht, indem bestehende Studien kombiniert wurden, wobei die neuroprotektiven Mechanismen von ECH (entzündungshemmender, antioxidativer Stress) und die Verstärkung des aus Gliazellen abgeleiteten Nervenwachstumsfaktors (GDNF) und des vom Gehirn abgeleiteten Nervenwachstumsfaktors (BDNF) berücksichtigt wurden.

Werkstoffe und Apparate

Versuchstiere:Die experimentelle Gruppe umfasste 108 acht Wochen alte männliche C57BL/6J-Mäuse (spezifisch-pathogenfrei (SPF) mit einem Gewicht von 20–22 g. Vier Mäuse wurden pro Käfig bei 22°C–25°C gehalten. Die Mäuse wurden vom Shanghai Center for Laboratory Animals, Chinese Academy of Sciences, zur Verfügung gestellt, das an der Nanjing University of Chinese Medicine (Nanjing, China) untergebracht ist. Die Tiere wurden gemäß den Richtlinien der National Institutes of Health in einem SPF-Raum mit einer Temperatur von 22 ° C - 25 ° C, 55% relativer Luftfeuchtigkeit und unter einem circadianen Rhythmus von 12 Stunden human behandelt. Die Mäuse hatten freien Zugang zu Nahrung und Wasser. Primäre Reagenzien: Die primären Reagenzien, die in der aktuellen Studie verwendet wurden, waren wie folgt: MPTP (Sigma-Aldrich, Artikelnummer: M0896), monoklonaler Antikörper gegen Tyrosinhydroxylase (TH) (Sigma-Aldrich Company), Alexa Fluor 555 Anti-Kaninchen-Antikörper (Biyuntian Institute of Biotechnology), Alexa Fluor 488 Anti-Kaninchen-Antikörper (Biyuntian Institute of Biotechnology), Selegilin (Sigma-Aldrich), Anti-Meerrettichperoxidase (HRP)-Ziegen-Anti-Kaninchen-Sekundärantikörper (Biyuntian Institute of Biotechnologie), kaninchenpolyklonaler α-Synuclein-Antikörper (Cell Signaling Technology), HRP-Ziegen-Anti-Mäuse-Sekundärantikörper (Biyuntian Institute of Biotechnology) undCistancheEchinacosid(Chengdu Linghangzhe Biotechnologie Co., Ltd.). Herstellung von MPTP: 100 mg MPTP-Pulver wurden zu 10 ml 0,9% normaler Kochsalzlösung gegeben, gründlich geschüttelt und gemischt, um Licht zu vermeiden, und dann in 10 1,5 ml Eppendorf-Röhrchen aufgeteilt und bei –20 °C gelagert. Vor der Anwendung wurde die Lösung einmal verdünnt, um eine Endkonzentration von 5 mg/ml zu erreichen.

Experimentelle Methoden

Gruppierung von Versuchstieren:Die 108 C57BL/6J-Mäuse wurden nach dem Zufallsprinzip in sechs Gruppen mit jeweils 18 Mäusen eingeteilt. Die Details der Gruppierung waren wie folgt: die normale Kontrollgruppe (die normale Kochsalzlösungsgruppe, MPTP-Gruppe, niedrig dosierteEchinacosidGruppe [die EL-Gruppe], moderate DosisEchinacosidGruppe [die EM-Gruppe], hochdosiertEchinacosid B. Gruppe [die EH-Gruppe] und die selegiline Gruppe [die SL-Gruppe]). Modellierung der Versuchstiere und Medikamente: Die MPTP-Dosis für die intraperitoneale Injektion betrug 30 mg / kg / d an sieben aufeinanderfolgenden Tagen. Die Dosis des Selegilin-Gavage betrug 1 mg/kg/d. Die Dosis vonEchinacosidin den Gruppen EL, EM und EH betrug 10 mg/kg/d, 20 mg/kg/d bzw. 30 mg/kg/d. Unter diesen Gruppen wurden die Mäuse in der normalen Kochsalzgruppe intragastrisch mit 0,1 ml Kochsalzlösung verabreicht und während des Modellierungszeitraums intraperitoneal mit 0,1 ml Kochsalzlösung injiziert. Die Gavage wurde in der Drei-Dosen-Dosis begonnenEchinacosidGruppen und die SL-Gruppe, 3 Tage vor der MPTP-Injektion, und die Mäuse erhielten 7 Tage nach Beendigung der MPTP-Injektion weiterhin eine Untersuchung.

Referenzen

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