Physiologische Vorteile der neuartigen Selenabgabe über Nanopartikel Teil 2

2.2. Auswirkungen von Selen-Nanopartikeln auf die Fruchtbarkeit

Unfruchtbarkeit ist eine multifaktorielle Erkrankung, die in den letzten Jahrzehnten weltweit bei jungen Männern und Frauen zugenommen hat [76]. Zeitgenössische Erkenntnisse zeigen, dass Fortpflanzungsstörungen häufig mit genetischen, Lebensstil- und Umweltfaktoren verbunden sind, einschließlich Ernährungsgewohnheiten, dem Konsum von Freizeitdrogen, Alkohol- und Koffeinkonsum sowie der Belastung durch Umweltschadstoffe während des natürlichen Alterns [77,78] (siehe Abbildung). 2).

Unfruchtbarkeit ist ein häufiges Problem bei Paaren im gebärfähigen Alter. Es bezieht sich auf die Unfähigkeit, nach vielen Jahren der Ehe in jedem Alter schwanger zu werden. Immunität ist der Schlüssel zur Erhaltung einer guten Gesundheit, aber viele Menschen sind sich nicht bewusst, dass es auch einen Zusammenhang zwischen Immunität und Unfruchtbarkeit gibt. In diesem Artikel wird der Zusammenhang zwischen Unfruchtbarkeit und Immunität vorgestellt, um den Menschen ein besseres Verständnis dieses Themas zu ermöglichen.

Zunächst einmal bezieht sich Immunität auf die Fähigkeit, einer äußeren Invasion zu widerstehen und den Körper vor Schaden zu schützen. Das körpereigene Immunsystem kann Viren, Bakterien, Pilze und andere schädliche Substanzen erkennen und beseitigen, um das Gleichgewicht und die Gesundheit des Körpers aufrechtzuerhalten. Unfruchtbarkeit wird normalerweise durch eine Anomalie oder Funktionsstörung des männlichen und weiblichen Fortpflanzungssystems verursacht. Der Grund dafür könnte im Immunsystem liegen.

Eine mögliche Ursache ist, dass das Immunsystem gesunde Spermien oder Eizellen angreift, ein Zustand, der als Autoimmununfruchtbarkeit bekannt ist. Wenn das Immunsystem überaktiv ist, verwechselt es Spermien oder Eizellen mit fremden Eindringlingen und greift sie an. Dieser Zustand führt bei Frauen in der Regel zu wiederkehrenden Fehlgeburten.

Das Immunsystem greift auch den Embryo an, was zu wiederholten Fehlgeburten führt. Die meisten Fehlgeburten werden durch einen Angriff des Immunsystems des Embryos verursacht. Dieser Zustand wird als embryoimmune Unfruchtbarkeit bezeichnet.

Eine weitere mögliche Ursache ist ein überschwächtes Immunsystem, das nicht ausreichend auf schädliche Substanzen reagieren kann. Dieser Zustand kann dazu führen, dass Bakterien, Viren und andere schädliche Substanzen in den Körper eindringen und Gesundheit und Fruchtbarkeit gefährden. Darüber hinaus kann eine übermäßige Unterdrückung des Immunsystems zu einer Immunschwäche und Unfruchtbarkeit führen.

Daher ist die Aufrechterhaltung eines guten Immunsystems sehr wichtig. Einige einfache Dinge können dabei helfen, Ihr Immunsystem zu stärken, z. B. die Aufrechterhaltung eines gesunden Lebensstils, eine ausreichende Ernährung, die Bewältigung von Stress und ausreichend Bewegung. Darüber hinaus sind regelmäßige Gesundheitskontrollen und die rechtzeitige Behandlung von Krankheiten von entscheidender Bedeutung für die Aufrechterhaltung einer guten Immunität.

Insgesamt ist der Zusammenhang zwischen Immunität und Unfruchtbarkeit komplex. Während das Immunsystem eine Ursache für Unfruchtbarkeit sein kann, ist die Aufrechterhaltung eines gesunden Immunsystems auch entscheidend für die Aufrechterhaltung einer guten Fruchtbarkeit. Obwohl es derzeit keinen sicheren Weg zur Heilung von Unfruchtbarkeit gibt, kann die Aufrechterhaltung eines guten Immunsystems das Risiko einer Unfruchtbarkeit wirksam verringern. Unter diesem Gesichtspunkt müssen wir die Immunität verbessern. Cistanche kann die Immunität deutlich verbessern, denn Cistanche ist reich an einer Vielzahl antioxidativer Substanzen, wie Vitamin C, Carotinoiden usw. Diese Inhaltsstoffe können freie Radikale abfangen und oxidativen Stress reduzieren. Verbessern Sie die Widerstandskraft des Immunsystems.

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Chronische Krankheiten, einschließlich Diabetes, sind häufig durch eine unregulierte Produktion von ROS und daraus resultierende oxidative Schäden gekennzeichnet, die mit DNA-Fragmentierung, Zytotoxizität und dem Tod von Spermien verbunden sind. Dies trägt zur Unfruchtbarkeit bei, die durch SeNPs in Mausmodellen durch einen Mechanismus abgeschwächt werden könnte, der die Hemmung der Lipidperoxidation und die daraus resultierende DNA-Schädigung umfasst [79]. Ein weiterer Faktor, der dazu beiträgt, ist, dass Frauen in entwickelten Ländern dazu neigen, die Geburt und Empfängnis über den Höhepunkt der Fruchtbarkeit hinaus hinauszuzögern, obwohl die Annahme, dass die menschliche Fruchtbarkeit mit zunehmendem Alter abnimmt, allgemein anerkannt ist [77].

Umfangreiche Untersuchungen haben Fortpflanzungsstörungen und Unfruchtbarkeit mit einem niedrigen Se-Status/Se-Mangel in Verbindung gebracht, während die Ergebnisse assistierter Reproduktionstechnologien (ARTs) bei Tieren und Menschen mit angemessenen Se-Serumspiegeln mit positiven Ergebnissen bei der Empfängnis verbunden waren, was darauf hindeutet, dass ein angemessener Se-Spiegel vorhanden ist wesentlich für die reproduktive Gesundheit [65,80–82]. Dieses Wissen hat das zeitgenössische Forschungsinteresse auf die Erforschung der Se-Supplementierung sowohl in experimentellen Tiermodellen als auch in der Tierhaltungspraxis gelenkt, um die Fortpflanzungsfähigkeiten zu verbessern. Bemerkenswerterweise konzentrierte sich ein erheblicher Teil dieser Art von Forschung auf Se in Form von SeNPs, da es im Vergleich zu anderen Se-Formen (wie bereits erwähnt) eine hohe Bioverfügbarkeit und relativ geringe Toxizität aufweist. Daher wird in diesem Abschnitt der Übersicht die Verwendung detailliert beschrieben von SeNPs in der Fruchtbarkeitsforschung.

In-vitro-Fertilisation (IVF) ist eine häufig verwendete Technik in verschiedenen Tierhaltungsindustrien, beispielsweise in der Geflügelindustrie, um die gewünschten genetischen Eigenschaften zu verbessern und die Anzahl der Nachkommen zu erhöhen. Eine der größten Herausforderungen für eine erfolgreiche IVF bei Tieren ist das Scheitern der Eizellenreifung – ein entscheidender Schritt vor der Befruchtung, aufgrund der Sauerstoffexposition, die sich in einem erhöhten oxidativen Stress der Eizellen äußert [71,83]. Studien haben gezeigt, dass die Ergänzung mit SeNPs die Reifungsrate in Eizellen in vitro durch eine Hochregulierung der Antioxidantien GPx4 und Superoxiddismutase (SOD) steigerte, wobei der Effekt bei Eizellen, die mit SeNPs von 40 nm behandelt wurden, ausgeprägter war als bei Eizellen von 67 nm relativ größere Oberfläche und ein höherer Grad der zellulären Internalisierung der kleineren SeNPs-Partikel. Interessanterweise verbesserten SeNPs auch die Pluripotenz und die Neuprogrammierung der Eizellen, was sich in der Hochregulierung des Entwicklungskompetenzgens äußerte [71]. Zur weiteren Untermauerung der potenziellen Bioaktivität von per Fahrzeug zugeführtem Se wurden nach der Supplementation mit jeweils 1 µg/ml die In-vitro-Rinder-Oozyten-Reifung, die Oozyten-DNA-Integrität und die GSH-Konzentration, gekennzeichnet durch eine erhöhte Reexpansionsrate von Blastozyten in vitro, nachgewiesen von SeNPs oder Nano-Zinkoxid [83]. Insgesamt unterstreichen diese Berichte die Bedeutung von SeNPs in Prozessen, die direkt mit der In-vitro-Reifung und Befruchtung durch einen Mechanismus der erhöhten antioxidativen Kapazität und der verringerten oxidativen Belastung verbunden sind.

Ein weiterer wichtiger Schritt bei der IVF für Menschen und Tiere ist die Kryokonservierung des Spermas – ein Prozess, der zwangsläufig wiederholte Einfrier- und Auftauzyklen erfordert, was zur Produktion schädlicher ROS führt und oxidativen Stress verursacht, der zusammen die Lebensfähigkeit der Spermien um mehr als 35 Prozent verringert [84]. Unter diesen Bedingungen haben Studien gezeigt, dass eine SeNP-Supplementierung die Gametenqualität während IVF-Eingriffen deutlich verbessert [83,85]. Beispielsweise verzeichnete Rindersperma, das vor der Kryokonservierung mit 0.5 und 1.0 µg/ml SeNPs angereichert wurde, eine verbesserte Spermienmotilität und Membranintegrität nach dem Auftauen mit verringerten DNA-Schäden und, was noch wichtiger ist, einer höheren Fruchtbarkeit Rate als die der Kontrolle [70]. Diese Schutzwirkungen wurden auf die verbesserte Gesamtantioxidationskapazität im Samenplasma zurückgeführt, begleitet von einer verringerten Malondialdehydkonzentration (MDA; ein häufiger Marker für oxidative Schäden an mehrfach ungesättigten Fettsäuren von Zellmembranen) in Gegenwart von ergänztem Se. Daher verbessert die Zugabe eines SeNP-Ergänzungsmittels zu Samen-/Eizellenverlängerern in IVF-Protokollen wahrscheinlich den Antioxidationsstatus, bewahrt die Qualität der Gameten und verbessert letztendlich die Fruchtbarkeitsraten.

Wie bereits erwähnt, könnte eine chronische Exposition gegenüber Umweltschadstoffen zu dauerhaften und irreversiblen Schäden an den Fortpflanzungssystemen durch die Induktion von oxidativem Stress, DNA-Schäden, Verlust der Lebensfähigkeit der Zellen und erhöhter Apoptose führen, die alle durch Se abgeschwächt werden könnten [{{0} }]. Beispielsweise wird Aflatoxin, einem Umweltgift, das aufgrund der Bioakkumulation beim Verzehr landwirtschaftlicher Produkte, einschließlich Milch und Eiern, in Muskeln und Leber vorkommt, krebserregende und immunsuppressive Wirkungen zugeschrieben [87]. Eine kürzlich durchgeführte Studie zeigte, dass SeNPs die Hodenschädigung bei männlichen Mäusen, die Aflatoxin B ausgesetzt waren, abschwächten, da sie die Fähigkeit zum Abfangen freier Radikale erhöhen und die Belastung durch ROS verringern, wodurch Spermatozoen und Hoden vor Lipidperoxidation und Apoptose geschützt werden [88].

Die Bioaktivität von SeNPs zeigte sich auch in einer verbesserten Embryoproduktion, wenn Spermien von Aflatoxin B-exponierten männlichen Mäusen während der In-vitro-Fertilisation mit gesunden Eizellen fusioniert wurden [88]. In ähnlicher Weise zeigte eine andere Studie, dass SeNPs die Nickel-induzierte Nekrose in Samenkanälchen durch Hochregulierung der GPx-Enzymaktivität und Herunterregulierung proapoptotischer Faktoren, die die Caspase-vermittelte Apoptose hemmten, retteten, was das antioxidative Potenzial und die schützende Rolle von SeNPs gegen Hodenschäden, die durch metallische Umweltschadstoffe verursacht werden, demonstriert [89]. In den letzten Jahren wurde der Schwerpunkt verstärkt auf Kombinationstherapien gelegt, bei denen Cisplatin mit Antioxidantien kombiniert wird, um verschiedene Nebenwirkungen, einschließlich Hodenfunktionsstörungen im Zusammenhang mit Unfruchtbarkeit, zu bekämpfen. Interessanterweise verbesserte die Verabreichung von SNP die histologischen Merkmale und das Gewicht der Hoden bei Vorliegen einer Cisplatin-induzierten testikulären Toxizität [90]; Dies zeigt einmal mehr das Potenzial von SeNPs, lebensfähige Spermien zu konservieren.

Ein weiterer Hauptgrund für Unfruchtbarkeit ist das Vorhandensein von Industriechemikalien in vielen Verbraucherprodukten, die endokrine Disruptoren sind, wobei eine langfristige Exposition gegenüber solchen Chemikalien mit Fortpflanzungsstörungen verbunden ist [91,92]. Beispielsweise ist Bisphenol A (BPA) ein mit Kunststoffen in Zusammenhang stehendes Umweltgift und wird mit der Förderung von Unfruchtbarkeit in Verbindung gebracht [77]. Die gleichzeitige Verabreichung von Se an Mäuse, die BPA ausgesetzt waren, verbesserte jedoch die antioxidative Aktivität und verringerte die ER-2-Expression von Genen, die an der Modulation der Apoptose während der Spermatogenese beteiligt sind, wodurch BPA-induzierte Hodenschäden und Toxizität vermieden wurden [93]. Die Schutzwirkung von SeNPs übertraf die von ergänztem (anorganischem) Natriumselenit, was durch die Fähigkeit zur Verringerung proapoptotischer Mechanismen, DNA-Fragmentierung und ausgewählter Genexpressionsniveaus gezeigt wurde, und bot eine wirksame Strategie für den reproduktiven Schutz vor exogenen Toxinen.

Ein weiterer häufiger endokriner Disruptor, der mit Reproduktionstoxizität in Zusammenhang steht und häufig in Konsumgütern verwendet wird, ist Di-n-butylphthalat (DBP). Trächtige weibliche Ratten, die DBP ausgesetzt und mit SeNPs behandelt wurden, brachten männliche Nachkommen mit erhöhten Testosteronspiegeln, verbesserten INSL3- und MR-Genen, die mit der Funktionalität der Leydig-Zellen verbunden sind, verbesserter antioxidativer Kapazität und verringerten MDA-Spiegeln durch die Hemmung der Lipidperoxidation im Vergleich zu diesen zur Welt Tiere, die nur DBP ausgesetzt waren [76]. Daher könnten SeNPs eine potenzielle Schutzergänzung gegen die durch Umweltgifte verursachte Reproduktionstoxizität in der Allgemeinbevölkerung sein, insbesondere in den kritischen Phasen der Schwangerschaft.

2.3. Auswirkungen von Selen-Nanopartikeln auf das Wachstum

Es ist eine wohlbekannte Tatsache, dass Ernährungseingriffe das Wachstum und die Fruchtbarkeitsleistung sowie den antioxidativen Status der Nachkommen beeinflussen [50]. Wichtig ist, dass die steigende Nachfrage nach Fisch und Fleisch als primäre Nahrungsquellen und das Streben nach hochwertigen Lebensmitteln mit vorteilhaften Gesundheitsmerkmalen neue Forschungen zur Ernährungsverbesserung angestoßen haben, um die Welt mit einer verbesserten Lebensmittelqualität bei höheren Produktionsraten zu versorgen [72]. In jüngster Zeit wurde die Aufmerksamkeit auf die Ergänzung mit SeNPs als einen der primären Ernährungsansätze in der Aquakultur-, Landwirtschafts- und Geflügelindustrie gerichtet [94].

Fisch ist in vielen Ländern eine Hauptquelle für tierisches Eiweiß [95]. Allerdings haben die steigende Verbrauchernachfrage und die zunehmende Umweltverschmutzung zu Herausforderungen in der Aquakultur und Ernährungsforschung geführt, die für eine nachhaltige Versorgung mit Fisch und die zukünftige Ernährungssicherheit weltweit von wesentlicher Bedeutung sind [96]. Nilbarsch, reich an Omega--3-Fettsäuren, ist einer der weltweit am häufigsten verzehrten Fische [97]. Studien zur Untersuchung der Ergänzung von Niltilapia mit 1 mg SeNPs/kg Körpergewicht haben eine verbesserte Wachstumsleistung gezeigt, gemessen an einer größeren Gewichtszunahme im Vergleich zur Kontrolle; Diese vorteilhafte Wirkung von SeNPs war jedoch begrenzt, da Fische, denen eine Dosis über oder unter 1 mg/kg verabreicht wurde, keine erhöhte Gewichtszunahme zeigten [72].

Darüber hinaus zeigten mit 1 mg SeNPs/kg Körpergewicht ergänzte Fische ein wünschenswertes Fettsäureprofil und gleichzeitig eine Steigerung des antioxidativen Potenzials, was durch einen höheren Gehalt an mehrfach ungesättigten Fettsäuren bzw. eine deutlich erhöhte GPx-Aktivität gezeigt wurde. Diese Ergebnisse verdeutlichen die Bedeutung der in Tierfuttermitteln verwendeten Se-Dosis und das wachstumsfördernde Potenzial von SeNPs und die Ergebnisse wurden auch in der intensiven Geflügelhaltung bestätigt [65]. In einer weiteren ähnlichen Studie wurden die Wirkungen von SeNPs mit denen der traditionellen Se-Formen (organisch und anorganisch) unter Verwendung von Niltilapia verglichen [51].

Die Ergebnisse dieser Studie zeigten, dass mit SeNPs ergänzte Fische anhand von Messungen des Hämoglobins, der roten Blutkörperchen und der zirkulierenden IgM-Spiegel ein optimales hämatologisches Profil zeigten, was auf eine verbesserte Gesundheit und einen verbesserten immunologischen Status bei der Verwendung dieser Form von Nahrungs-Se hindeutet. Darüber hinaus verbesserten SeNPs gleichzeitig die SOD-, Katalase- (CAT) und GPx-Aktivitäten und reduzierten die MDA-Spiegel in der Leber, was auf eine verbesserte antioxidative Abwehr in der Leber schließen lässt, was mit einer früheren Studie übereinstimmt [72]. Darüber hinaus verbesserten SeNPs die Darmgesundheit, was durch eine größere Zottenlänge und die Anzahl der Becherzellen in der Dickdarmschleimhaut nachgewiesen wurde, was auf eine effizientere Verdauung und Verwertung der Nahrung sowie einen verbesserten Schleimhautschutz für den darunter liegenden Darm hinweist.

Wichtig ist, dass Untersuchungen auch gezeigt haben, dass diätetisches Selen das Darmmikrobiom positiv verbessert, indem es die Häufigkeit nützlicher Bakterien erhöht und das Wachstum unerwünschter Krankheitserreger begrenzt [98]. Im Vergleich zu anderen metallischen Nanopartikeln wie Silber- und Goldnanopartikeln mit antimikrobiellen Eigenschaften sind SeNPs relativ weniger toxisch, da sie für Stoffwechselprozesse von wesentlicher Bedeutung sind und im biologischen System vorhanden sind [99,100].

Broilervögel, die mit 0,9 mg SeNPs/kg Körpergewicht gefüttert wurden, wirkten sich auf die Gattung der Darmbakterien aus und verbesserten die Darmgesundheit, was eine erhöhte Häufigkeit nützlicher Bakterien, einschließlich Lactobacillus und Faecalibacterium, zeigte; ein Phänotyp, der mit einer günstigen Metabolitenproduktion, einschließlich Butyrat, verbunden ist [101]. Unter denselben Bedingungen der Nahrungsergänzung wurde auch die Produktion kurzkettiger Fettsäuren gesteigert, was mit einer verbesserten Immunität und Funktion der Dickdarmschleimhaut verbunden war, mit einer entsprechenden Verringerung des Risikos für Entzündungen, Diabetes und IBD. Zusammengenommen deuten diese Ergebnisse auf die mögliche Anwendung von SeNPs in Geflügelfutter hin, um durch die Veränderung der Darmmikrobiota positive Gesundheitsergebnisse zu erzielen.

Die globale Erwärmung führt zu einem Anstieg der Meerestemperatur, der sich negativ auf Wachstum, Stoffwechsel und verschiedene physiologische Funktionen von Wassertieren auswirkt und letztendlich die Überlebensraten verringert. Unter diesen Bedingungen erhöht der beteiligte Mechanismus die Produktion freier Radikale und verringert Gewebeschäden, die durch eine SeNP-Supplementierung abgeschwächt werden könnten [102]. Darüber hinaus ergab eine aktuelle Studie, dass eine SeNP-Supplementierung Hitzestress lindert und die thermische Toleranz bei Regenbogenforellen verbessert, indem die GPx- und CAT-Aktivitäten hochreguliert werden und die Glutamat-Glutamin-Signalwege aktiviert werden, die mit einer verringerten ROS-Produktion und Entzündung einhergehen [103]. Mikroskopisch gesehen war die Phospholipidmembran der Regenbogenforelle aufgrund der SeNP-induzierten Abschwächung oxidativer Schäden integraler. Eine weitere ähnliche Studie zeigte, dass SeNPs die Proteinreparatur förderten und die Apoptose bei Regenbogenforellen durch die Hochregulierung von Hitzestressproteinen und die Herunterregulierung von proapoptotischen Proteinen und der Cholesterinsynthese hemmten [104].

In der Agrarindustrie verbesserten SeNPs den Hitzestress bei unterentwickelten Ferkeln, was durch erhöhte Plasma-SOD-, CAT- und GPx-Aktivitäten, erhöhte entzündungshemmende IL-10-Zytokine und verringerte Werte des Oxidationsbiomarkers MDA gekennzeichnet ist [68]. In einer weiteren aktuellen Studie wurde die Rolle von SeNPs bei der Verbesserung der Widerstandsfähigkeit von Pflanzen gegen biologischen Stress nachgewiesen, um den Einsatz chemischer Pestizide einzuschränken, bei denen eine potenzielle Toxizität für den Menschen ein inhärentes Risiko darstellt [105]. Darüber hinaus verbesserten SeNPs die Resistenz gegen das Eindringen von Krankheitserregern in Melonenpflanzen durch erhöhte SOD- und CAT-Aktivitäten und deren mRNA-Spiegel zusammen mit erhöhten APX- und POD-Aktivitäten, was auf eine verbesserte Antioxidationskapazität und das Auffangen von ROS schließen lässt [106]. Die verstärkte Photosynthese in Melonen ging mit der Entdeckung einer erhöhten Häufigkeit von Mitochondrien und Chlorophyll sowie einer nachweisbaren Verdickung der Zellwände einher. Zusammengenommen zeigten diese Ergebnisse die Bedeutung von SeNPs bei der Vermittlung der Hitzestresstoleranz durch eine verbesserte antioxidative Kapazität sowie die Toleranz gegenüber thermischem und biologischem Stress und verbesserten so die Lebensfähigkeit biologischer Organismen.

Zahlreiche Studien haben dokumentiert, dass mütterliche Ernährungseingriffe mit SeNP-Supplementierung das Wachstum und die Fruchtbarkeitsleistung sowie den Antioxidantienstatus der Nachkommen beeinflussen [52,107]. Im Vergleich zu Natriumselenit und Selenhefe steigerten SeNPs die Eiproduktion, das Eigewicht und das Futterverwertungsverhältnis bei Legehennen am wirksamsten, begleitet von einer deutlich erhöhten Se-Konzentration in Eiern, GPx1-Leber-mRNA-Spiegeln und Serum-GPx-Aktivität sowie niedrigeren MDA-Spiegeln [66]. Interessanterweise erhöhten SeNPs die Toleranz von Legehennen gegenüber Deoxynivalenol (DON; ein Pilztoxin), höchstwahrscheinlich durch einen Mechanismus der SeNP-vermittelten Steigerung der antioxidativen Aktivität [65]. So zeigten Legehennen, die DON ausgesetzt waren und mit SeNP-ergänztem Futter gefüttert wurden, eine erhöhte antioxidative Abwehr und Immunantwort auf DON, gekennzeichnet durch verbesserte GPx-Werte, höhere Eierproduktion und Schutz vor oxidativen Schäden und der Häufigkeit weichschaliger oder rissiger Eier.

Obwohl eine angemessene Wärmemenge für die Embryonalentwicklung und das Wachstum von entscheidender Bedeutung ist, könnten hohe Inkubationstemperaturen die Schlupffähigkeit und Wachstumsleistung von Broilern beeinträchtigen [65]. Dennoch erhöhte die In-ovo-Injektion von SeNPs während der späten Inkubationszeit bei Broilern die antioxidative Kapazität deutlich und schwächte den oxidativen Stress ab, was sich in einem verringerten Cortisolspiegel und einem erhöhten T3/T4-Verhältnis äußerte, was auf einen verringerten Hitzestress und einen erhöhten Schilddrüsenhormonstoffwechsel hindeutet. Auch diese Ergebnisse unterstreichen die Bedeutung und potenzielle Anwendung der SeNP-Supplementierung zur Verbesserung der Lebensmittelproduktion und -qualität in der Geflügelindustrie.

2.4. Auswirkungen von Selen-Nanopartikeln auf Krankheiten und die menschliche Gesundheit

Wie bereits erwähnt, besitzt Se entzündungshemmende und antioxidative Eigenschaften. Daher hat eine Reihe von Forschungsarbeiten die Auswirkungen von Se speziell in Form von SeNPs auf die Linderung von Krankheiten, einschließlich diabetischer Nephropathie [108], Alzheimer-Krankheit [61] und Leukämie [109], in vitro und in Tiermodellen untersucht.

Die häufigsten chronischen Krankheiten im Zusammenhang mit dem natürlichen Altern, darunter Diabetes, Alzheimer-Krankheit (AD), Herz-Kreislauf-Erkrankungen und Krebs, sind durch eine erhöhte ROS-Produktion, oxidativen Stress und chronische Entzündungen gekennzeichnet. Bei diabetischen Ratten reduzierten SeNPs nachweislich proinflammatorische Marker, einschließlich der IL-1- und TNF-Spiegel sowie der renalen MDA-Spiegel, was zu einem geringeren oxidativen Stress führt, was durch verbesserte Nierenfunktionen aufgrund niedrigerer Serumharnstoff- und Kreatininspiegel sowie reduzierter Glukosespiegel angezeigt wird [108]. Darüber hinaus zeigte Resveratrol (RSV), eine natürlich in Trauben vorkommende Chemikalie mit neuroprotektiven Eigenschaften, maximale therapeutische Wirkung gegen AD, wenn es Ratten in einem RSV-SeNPs-Cocktail verabreicht wurde [110]. Im Hinblick auf die biologischen Wirkmechanismen könnte die synergistische Wechselwirkung von RSV und SeNPs die Lipidperoxidation besser abschwächen, Störungen der Mitochondrienmembran lindern und die Konzentration antioxidativer Enzyme in von AD betroffenen Gehirngeweben wiederherstellen. Ratten mit AD, denen der RSV-SeNPs-Cocktail verabreicht wurde, zeigten verbesserte AD-Symptome, die sich in verbesserten Acetylcholinspiegeln und einer gestörten Bildung von A-Aggregaten zeigten, begleitet von einer erhöhten Clearance von A-Peptiden, wodurch die lokalen Entzündungsreaktionen gehemmt wurden.

Der potenzielle therapeutische Nutzen der SeNP-Aktivität gegen oxidativen Stress und Entzündungen wurde auch in einem Modell von oxidativen Herzschäden und Fibrose, die durch niedrige Schilddrüsenhormonspiegel bei Ratten mit Schilddrüsenunterfunktion induziert werden, nachgewiesen [111]. Hier schwächten SeNPs, die mit 150 µg/kg verabreicht wurden, Herzfibrose und Hypertrophie von Kardiomyozyten durch erhöhte CAT- und SOD-Aktivitäten und Thiolspiegel ab, wobei die MDA-Spiegel im Herzgewebe gedämpft wurden. In ähnlicher Weise verbesserten SeNPs, Natriumselenit und Selenomethionin in einem Modell für die Dysfunktion und Schädigung vaskulärer Endothelzellen bei Ratten, die durch Homocystein induziert wurden, den vaskulären Phänotyp durch die Wiederherstellung lokaler GPx1- und GPx4-Spiegel [112]. Bemerkenswert ist, dass SeNPs unter diesen Bedingungen im Vergleich zu anderen Se-Formen eine geringere Toxizität aufwiesen und gleichzeitig ein ähnliches Maß an Gefäßschutz aufrechterhielten. Die geringere Toxizität von SeNPs wurde in einer anderen Studie bestätigt, in der die LD50 von SeNPs in Mausmodellen um das 18-fache höher war als die von Selenit, mit geringerer Se-Retention [113]. Dennoch reduzierten SeNPs bei Verabreichung in der gleichen Dosis wie Selenit nicht nur die TBARS-Spiegel (ein weiterer sekundärer Marker für Lipidperoxidation), sondern erhöhten auch die GSH-Spiegel.

Zusätzlich zu den therapeutischen Eigenschaften von SeNP bei chronischen Krankheiten wird berichtet, dass der Vehikeltransport von Se entweder synergistische Effekte mit Krebsmedikamenten zeigt oder eine für Krebszellen spezifische Antikrebsaktivität zeigt, was auf eine geringere Toxizität und Kollateralschäden an gesunden Zellen und Geweben schließen lässt. Beispielsweise förderten SeNPs die Schwellung und Zelllyse in Zellen der akuten myeloischen Leukämie (AML) durch Stillstand des Zellzyklus und Apoptose und zeigten gleichzeitig eine minimale Toxizität für hämatopoetische Stammzellen und T-Zellen [109]. Bemerkenswert ist, dass die in dieser Studie verwendeten SNPs in Nanoröhren eingebettet waren, die aus Triple-Helix-D-Glucan (BFP)-Polysaccharid bestanden, das aus einem schwarzen Pilz extrahiert wurde, was die Adhäsion an biologisches Gewebe förderte und folglich die Absorptions- und Retentionsraten von BFP-SeNP erhöhte. In ähnlicher Weise wurden in Goldnanokäfigen eingekapselte SeNPs bei Bestrahlung in Zielgewebe freigesetzt und stimulierten die lokale Apoptose aufgrund einer ROS-induzierten mitochondrialen Dysfunktion, wenn sie zusammen mit einem Krebsmedikament verwendet wurden, was auf eine mögliche gezielte Freisetzung von SeNPs schließen lässt [64]. Wichtig ist, dass SeNPs die Eliminierungseffizienz von Krebszellen im Vergleich zu normalen gesunden Zellen steigerten, was durch eine andere Studie bestätigt wurde [114]. Darüber hinaus wurde die Verstärkung der selektiven Apoptose durch SeNPs auch bei Brustkrebs unter experimentellen Kulturbedingungen nachgewiesen, bei denen SeNPs 24 Stunden vor der Bestrahlungsbehandlung in vitro zu Brustkrebszellen hinzugefügt wurden [115].

Untersuchungen haben gezeigt, dass SeNPs, die an Folat (FA) gebunden wurden, bevor sie mit dem Krebsmedikament Rutheniumpolypyridyl (RuPOP) beladen wurden, die Selektivität von SeNPs in einem krebsspezifischen Medikamentenverabreichungssystem effektiv steigerten, sodass RuPOP nur in einem bestimmten Zeitraum freigesetzt wurde saure Mikroumgebung (z. B. der Magen), um die Arzneimittelfreisetzung bei Bedarf zu erleichtern [116]. Insgesamt deuten diese Ergebnisse auf die potenzielle Anwendung von SeNPs als synergistische Krebsbehandlung hin, da sie selektiv den Tod von Krebszellen fördern, wahrscheinlich durch die Aktivierung von SeNPs beim Stillstand des Zellzyklus in der G2/M-Phase, metabolischen Stress und eine erhöhte intrazelluläre ROS-Produktion Krebszellen. Zusätzlich zur apoptotischen Aktivität von SeNPs gegen Krebszellen weisen an Quercetin (Qu) und Acetylcholin (ACh) konjugierte SeNPs eine antibakterielle Aktivität gegen multiresistente Superbakterien (MDRs) auf, indem sie bei der Adhäsion irreversible Schäden an der bakteriellen Zellwand verursachen (63).

Wie bereits erwähnt, könnten SeNPs die negativen Auswirkungen von Umweltgiften und Chemikalien, die häufig in kommerziellen Produkten vorkommen, auf die Fruchtbarkeit abschwächen, und ihre positiven Auswirkungen könnten auch bei anderen Krankheiten nachgewiesen werden. Selen-Nanopartikel könnten die durch das Pestizid Cypermethrin (CYP) verursachte Neurotoxizität und motorische Defizite bei Ratten wiederherstellen, indem sie den oxidativen Stress aufgrund des CYP-Metabolismus in der Leber abmildern, der zu ROS und oxidativem Stress führt [117]. Neurotoxische Mäuse, die mit SeNPs behandelt wurden, zeigten normale Verhaltensergebnisse, die mit erhöhten GABA- und Glutathionspiegeln sowie niedrigeren MDA- und Entzündungsmarkerwerten (TNF- und IL-1) verbunden waren, wodurch die übermäßige CYP-induzierte Erregung verhindert wurde neuronales System. Darüber hinaus schützten SeNPs die Leber und die Nieren vor den toxischen Wirkungen des weit verbreiteten Analgetikums Paracetamol, indem sie die DNA-Integrität aufrechterhielten und die antioxidative Kapazität der Leber verbesserten, was histologisch durch reduzierte oxidative Leberläsionen und die Wiederherstellung der hepatischen Zellstruktur bestätigt wurde [62]. .

Interessanterweise untersuchte eine aktuelle Studie die mögliche analgetische Wirkung von SeNPs bei entzündlichen Erkrankungen, da Entzündungen die Freisetzung von Entzündungsmediatoren fördern, die nozizeptive Neuronen erregen, was zu lokalen Entzündungen und Schmerzen führt [118]. Trotz der entzündungshemmenden Aktivität der SeNPs, die durch reduzierte Leukozytenzahlen und proinflammatorische Zytokine, einschließlich Prostaglandin-, TBAR- und NOx-Marker, unterstützt wird, hatten SeNPs keinen Einfluss auf die nozizeptive Schwelle in Rattenmodellen.

2.5. Synthese von Selen-Nanopartikeln

Der tägliche Bedarf an Se, den der Körper benötigt, kann durch den Verzehr von mit Se angereicherten Lebensmitteln, einschließlich Gemüse, Getreide und Fleisch, gedeckt werden. Dennoch kann es sein, dass der tägliche Bedarf an Se nicht ausreichend durch die Nahrungsaufnahme allein gedeckt wird [119]. Im Vergleich zu den herkömmlichen auf dem Markt erhältlichen Se-Supplementierungsformen übertreffen SeNPs die organischen und anorganischen Se-Formen hinsichtlich Bioaktivität und Toxizität. Angesichts der potenziellen Anwendung von SeNPs in der Aquakultur-, Geflügel- und Nahrungsergänzungsmittelindustrie könnten SeNPs zu einer neuartigen Form der Se-Supplementierung werden [76]. Es gibt mehrere Wege zur Synthese von SeNPs, wobei die häufigsten Arten die chemische Synthese unter Verwendung verschiedener Reagenzien und die Biosynthese unter Beteiligung von Pflanzen oder Mikroorganismen zur Herstellung des eingekapselten Spurenelements sind [120]. Für die chemische Methodik sind die Herstellungsmethoden von SeNPs und die Charakterisierungsmethoden beider Synthesemethoden im Allgemeinen standardisiert. Die Vorbereitung für die Biosynthese von SeNPs variiert jedoch stark in Abhängigkeit von der Art der verwendeten Pflanzen und Mikroorganismen, die hier zusammengefasst und diskutiert werden.

Für die Herstellung von SeNPs durch chemische Synthese umfasste das in den meisten Studien verwendete Standardprotokoll die Zugabe von 1 ml einer 25 mM NaSe-Lösung zu 4 ml Glutathion (GSH) derselben Konzentration, die 15 mg Rinderserumalbumin (BSA) enthielt. nach Zugabe eines stabilisierenden Polymers und pH-Einstellung auf 7,2 [41,117]. Es ist erwähnenswert, dass die Größe und Oberflächenladung von SeNPs manipuliert werden könnte, indem der pH-Wert der Lösung und die im Herstellungsprozess verwendete BSA-Menge geändert werden [3,121]. Die endgültige Lösung, die das SeNP-Produkt enthielt, wurde durch Dialyse gegen doppelt destilliertes Wasser für 4 Tage gereinigt und das Wasser täglich ersetzt, um das Nebenprodukt GSH vom Endprodukt zu isolieren. Die Morphologie und Identität des Endprodukts wurden mithilfe von Röntgenbeugung charakterisiert und verifiziert, indem eine kleine mit Phosphorwolframsäure (2 Prozent) gefärbte Probe auf ein Kupfergitter gelegt und die Probe unter dem Transmissionselektronenmikroskop (TEM) betrachtet wurde. Bei einer anderen Herstellungsmethode wurde Selendioxid (SeO2) in destilliertem Wasser gelöst, das 0,2 Prozent Polyvinylpyrrolidon (PVP) enthielt, um eine selenige Säurelösung zu erhalten, die beim Abkühlen in einem Eisbad klar wurde [118]. Die Zugabe eines eiskalten 0.1 mol/L Reduktionsmittels, Kaliumborhydrid, löste eine Farbänderung in der SeO2-Lösung von klar zu gelb-orange aus, was auf die Bildung von SeNPs hinweist. Ähnlich wie bei der zuvor erwähnten Charakterisierungsmethode wurde die resultierende Lösung, die SeNPs enthielt, dann mithilfe dynamischer Lichtstreuung (DLS) und elektrophoretischer Lichtstreuung (ELS) charakterisiert, um den Zetapotentialwert zu bestimmen und die Morphologie der SeNPs bereitzustellen. Ein höheres Zetapotential, unabhängig vom Vorzeichen (d. h. plus/−), weist auf die Stabilität der Partikel hin und äußert sich in einem erhöhten Widerstand gegen Aggregation. Dies wird durch einen niedrigeren Wert des Zetapotentials erklärt, was bedeutet, dass die Anziehungskräfte die Abstoßung zwischen den Teilchen übersteigen könnten und die Dispersion aufbrechen und kleine Klumpen/Massen bilden könnte. Daher ist ein angemessener Zetapotentialwert entscheidend für die Bildung und Stabilität von SeNPs [122].

Für die Biosynthese von SeNPs verwendeten mehrere Studien eine Technik ähnlich den chemischen Synthesen (oben beschrieben), verwendeten jedoch stattdessen Pflanzen und Ascorbinsäure als chemisches Reduktionsmittel [76,113,123]. Wasserlösliche und natürliche Polymerpolysaccharide wie Chitosan, Konjak-Glucomannan, Akaziengummi, Carboxymethylcellulose, Glucan aus Pflanzen wie dem schwarzen Pilz [109] und Lentinus Edodes (Shiitake-Pilz) [114] sowie Pflanzenwurzeln, einschließlich Withania somnifera [79] wurden eingesetzt, da sie ausgezeichnete Stabilisatoren bei der Synthese dispergierter kolloidaler SeNPs sind [123]. Mit diesem Protokoll hergestellte Selen-Nanopartikel verwendeten eine selenige Säurelösung in einer Mischung, die Polysaccharide wie Zellulose enthielt, was eine wässrige Se/Zellulose-Suspension ergab, die mit Ascorbinsäure gemischt wurde. Die Ascorbinsäurelösung wurde langsam in die Se/Cellulose-Suspension gegeben und kräftig gerührt, bis die Suspension ihre Farbe von Weiß zu Ziegelrot/Orange änderte, während sich die Se/Cellulose-Kolloide und SeNPs zu bilden begannen. Das Endprodukt könnte dann abgetrennt, durch Dialyse gereinigt und mit Wasser und 70-prozentigem Ethanol gewaschen werden, um überschüssige Ascorbinsäure und andere Nebenprodukte mit niedrigem Molekulargewicht zu entfernen, und dann mithilfe eines Sprühtrocknungsverfahrens getrocknet werden, um Restfeuchtigkeit zu entfernen.

In einer weiteren ähnlichen Studie, die die antimikrobielle Wirkung von SeNPs gegen Superbakterien untersuchte, wurde Quercetin (Qu) verwendet, ein essentielles pflanzliches Flavonoid, das aufgrund seiner inhärenten antibakteriellen Eigenschaften in vielen Früchten, Blumen und Gemüse vorkommt, und aufgrund seiner Fähigkeit auch ein Acetylcholin (ACh)-Neurotransmitter verbinden sich mit dem Rezeptor auf der Bakterienzellwand und fördern so die Bindung von Qu-ACh-SeNPs an Bakterien [63]. Zur Synthese von Qu-ACh-SeNPs wurde NaSe mit in Methanol und ACh-Chlorid gelöstem Qu in Gegenwart von Essigsäure 10 Minuten lang unter kalten Bedingungen gemischt. Nach der Zugabe eines Reduktionsmittels, Natriumborhydrid, wurde die Mischung kräftig gerührt. Die endgültige rote Lösung wurde zentrifugiert, um den roten Niederschlag zu sammeln, gefolgt von wiederholtem Waschen mit PBS, um das endgültige komplexe Qu-ACh-SeNP-Produkt zu erhalten.

Bei der Synthese von SeNP können auch bakterielle Zelllysate [124] oder anaerober körniger Schlamm, der Bakterien enthält, genutzt werden, um selenitbildende biogene SeNPs biologisch zu reduzieren [3]. Zu den Schritten für dieses Protokoll gehört das Sammeln körniger Schlammbiofilme aus einem anaeroben Schlammdeckenreaktor zur Behandlung von Papierfabrikabwasser, die dann bei der mikrobiellen Umwandlung von löslichen Se-Oxyanionen in unlösliches elementares Se verwendet werden können, das in biogene SeNPs eingebaut wird, was durch das Auftreten von bestätigt wird eine rot gefärbte Substanz. Mechanistisch gesehen synthetisierten die Bakterien SeNPs entweder durch Selenit-Denitrifizierung unter Beteiligung von Nitratreduktasen und zellulären Cofaktoren (vorhanden in E. coli), durch Reduktion von Se(IV)-Verbindungen unter Beteiligung von Nitritreduktasen (vorhanden in Rhizobium) und durch Selenatreduktase, die an der chemischen Reduktion beteiligt ist Selenat oder Selenitreduktion durch reduzierte Thiole wie GSH (vorhanden in eukaryotischen Zellen, Cyanobakterien und den -, - und -Gruppen der Proteobakterien) [60]. Dieses Verfahren hat den zusätzlichen potenziellen Vorteil, dass es angesichts der zunehmenden Bedenken hinsichtlich der Se-Toxizität bei Wassertieren die Einleitung von Se-kontaminiertem Schlamm in die Gewässer verringert [57]. Interessanterweise erwiesen sich biogene SeNPs beim Vergleich der LC50-Werte als 3,{12}fach weniger toxisch als Selenit und 10-fach weniger toxisch als chemisch synthetisierte SeNPs in Zebrafischembryonen [3].

Trotz der geringeren Toxizität biogener SeNPs im Vergleich zu chemisch synthetisierten SeNPs besteht ein mit dieser Syntheseart verbundenes Risiko darin, dass aufgrund ihrer kolloidalen Struktur eine erhebliche Menge biogener SeNPs im Bioreaktor verbleiben könnte, was zu einer Freisetzung in die aquatische Umwelt führt [3]. Dennoch sind biogene SeNPs aufgrund des Vorhandenseins extrazellulärer Polymersubstanzen weniger toxisch und weisen eine geringere Bioverfügbarkeit auf, was die Wechselwirkungen zwischen Nanopartikeln und biologischen Organismen verringert. Im Gegensatz zur Verwendung von biologischem Schlamm zur Herstellung biogener SeNPs wurden in anderen Studien Fischorgane wie Kiemen verwendet [57]. In diesen Studien wurden homogenisierte Fischkiemen zentrifugiert, um den Überstand zu sammeln, der mit 200 ml 2 M Natriumselenit gemischt und 36 Stunden lang kontinuierlich geschüttelt wurde. Nach der Zentrifugation wurden die geernteten Pellets getrocknet und bei Raumtemperatur gelagert, damit sie später zu einem groben Kolloid zerkleinert werden konnten, das für die Nahrungsergänzung erforderlich war.

Wie bereits erwähnt, könnten bestimmte SeNPs als Arzneimittelabgabesystem verwendet werden, um die Selektivität der Ladung zwischen erkrankten und gesunden Zellen zu verbessern, wobei bei der Synthese von SeNPs häufig Metallnanokäfige, einschließlich Gold, verwendet werden. Dieser Herstellungsprozess umfasst zwei Schritte: (i) die Synthese von Gold-Nanokäfigen und (ii) das Beladen der Nanokäfige mit seleniger Säure und Phasenwechselmaterialien (PCM) wie Laurinsäure [64]. Zunächst werden Silbernanowürfel von 45 mm durch eine galvanische Austauschreaktion mit HAuCl4 in Goldnanokäfige (AuNCs) umgewandelt. Zweitens wird 1 ml AuNCs in 0,5 ml Methanol, das 0,3 g PCM (Laurinsäure) und 0,2 g selenige Säure enthält, dispergiert und gerührt 5 Stunden lang bei 50 °C erhitzt und dann bei 14 000 U/min zentrifugiert, um in Goldnanokäfigen eingekapselte SeNPs zu erhalten, die dann in 1 ml entionisiertem Wasser redispergiert werden können, um das Endprodukt zu erhalten. In ähnlicher Weise wurden in einer anderen Studie zwei Arten von Selen-Nanopartikeln mit quantenmechanischen Eigenschaften hergestellt, die eine Wachstumshemmung in Krebszellen durch die Induktion von Mitochondrien-vermittelter Apoptose und Nekrose zeigten [125]. Eine weitere Studie untersuchte die therapeutischen Verstärkungseffekte von SeNPs für das Krebsmedikament Rutheniumpolypyridyl (RuPOP) konjugiertes Folat (FA) und SeNPs an RuPOP, wodurch FA-RuPOP-SeNPs entstanden, die auf ähnliche Weise unter Verwendung von Ascorbinsäure, Natriumselenit, und Polysaccharidpolymere [116]. FA-Rezeptoren werden in Krebszellen häufig überexprimiert. Dies ist eine Eigenschaft, die bei der Entwicklung medikamentöser Behandlungen gegen Krebs genutzt werden könnte, um die Abgabe und Aufnahme von FA-RuPOP-SeNPs durch Krebszellen zu erleichtern.

3. Schlussfolgerungen
Die Nahrungsergänzung mit SeNPs hat in der Landwirtschaft und beim Menschen eine Reihe von Vorteilen gezeigt und ist den herkömmlichen chemischen Formen von Se in der Nahrung überlegen. Daher wird es zunehmend als innovative und neuartige Alternative angesehen. In Anbetracht der antioxidativen Eigenschaften von SeNPs aus der Nahrung werden den SeNPs folgende Vorteile zugeschrieben: geringere Toxizität, verbesserte Wachstumsleistung, verbesserte Ernährungsqualität, Immunfunktionen, insgesamt verbesserte Fortpflanzungsleistung, verringerter oxidativer Stress und Entzündungen, verbesserte Hitzebelastung, Neurotoxizität und erhöhte Umweltschadstoffe Resistenz gegen Infektionen, unterstützende Wirkung bei der Chemotherapie, selektive Apoptose von Krebszellen, selektive Abgabe von Krebsmedikamenten und antibakterielle Wirkung gegen Superbakterien.

Aufgrund inhärenter biologischer und umweltbedingter Schwankungen sowie des unterschiedlichen (Ausgangs-)Se-Status für Tiere und Menschen in verschiedenen Regionen der Welt sind jedoch noch weitere Studien erforderlich, um die pharmakologische Aktivität und sichere Dosierungen aufzuklären. Die oben genannten Vorteile in Kombination mit den vielfältigen Synthesewegen, die zur Entwicklung maßgeschneiderter SeNPs für den Einsatz in der Intensivlandwirtschaft und als potenzielle Therapeutika für menschliche Pathologien genutzt werden, machen diese Form von Se zu einem erstklassigen Kandidaten für weitere Forschung. Zusätzlich zu den begrenzten Toxizitätsdaten mangelt es jedoch derzeit an vollständigen pharmakokinetischen Daten, einschließlich der SeNP-Aufnahme im Vergleich zur Halbwertszeit und dem Metabolismus sowie der Akkumulation der SeNPs oder eines Metaboliten im Gewebe im Vergleich zur Dosierung. Sobald eine vollständigere pharmakokinetische Studie für optimale Formen von SeNPs verfügbar ist, werden weitere Tests dieser optimalen Se-Abgabesysteme umfangreiche zukünftige Studien am Menschen unter Verwendung randomisierter Kontrollstudien erfordern.

Autorenbeiträge:

Konzeptualisierung, PKW und GA; Software, AM, AA und J.-YS; Validierung, AA und AM; Untersuchung, AA; Ressourcen, AA; Datenkuration, AA und AM; Schreiben – Originalentwurfsvorbereitung, AA und AM; Schreiben – Rezension und Bearbeitung, PKW, J.-YS und GA; Visualisierung, AM; Aufsicht, PKW und GA; Fördermitteleinwerbung, PKW Alle Autoren haben die veröffentlichte Version des Manuskripts gelesen und sind damit einverstanden.

Finanzierung:

Diese Forschung wurde vom Australian Research Council mit der Fördernummer „DP200102670“ (vergeben an PKW) finanziert.

Erklärung des Institutional Review Board:

Gilt nicht für Studien, an denen weder Menschen noch Tiere beteiligt sind.

Danksagungen:

Wir danken Belal Chami für die Lektüre der Entwurfsversionen dieses Manuskripts und für das kritische Feedback.

Interessenskonflikte:

Die Autoren geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht.

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