Ergebnisse der deutschen Studie zur chronischen Nierenerkrankung (GCKD) unterstützen den Zusammenhang zwischen der relativen Telomerlänge und der Sterblichkeit in einer großen Kohorte von Patienten mit mittelschwerer chronischer Nierenerkrankung
Mar 12, 2022
Kontakt: Audrey Hu WhatsApp/hp: 0086 13880143964 E-Mail:audrey.hu@wecistanche.com
Federica Fazzini1, Claudia Lamina1, Julia Raschenberger & et al.
Kidney International (2020) 98, 488–497; https://doi.org/10.1016/j.kint.2020.02.034
Copyright ª 2020, Internationale Gesellschaft für Nephrologie. Veröffentlicht von Elsevier Inc. Dies ist ein Open-Access-Artikel unter der CC BY-Lizenz
Es ist bekannt, dass die Telomerlänge umgekehrt mit dem Altern assoziiert ist und als Marker für altersbedingte Krankheiten vorgeschlagen wurde. Der Telomerabbau kann durch oxidativen Stress und Entzündungen beschleunigt werden, die beide häufig bei Patienten mit chronischer Nierenerkrankung auftreten. Hier untersuchten wir, ob die relative Telomerlänge mit der Sterblichkeit in einer großen Kohorte von Patienten mit chronischer Nierenerkrankung im Stadium G3 und A1-3 oder G1-2 mit offensichtlicher Proteinurie (A3) bei der Aufnahme in die Studie assoziiert ist. Die relative Telomerlänge wurde im peripheren Blut durch eine quantitative PCR-Methode bei 4.955 Patienten aus der GCKD-Studie, einer laufenden prospektiven Beobachtungskohorte, quantifiziert. Von 4.926 Patienten, bei denen wir 354 Todesfälle verzeichneten, war eine vollständige Vier-Jahres-Follow-up-Untersuchung verfügbar. Die relative Telomerlänge war ein starker und unabhängiger Prädiktor für die Gesamtmortalität. Jede Verringerung um 0,1 relative Telomerlängeneinheit war in einem angepassten Modell stark mit einem um 14 Prozent erhöhten Sterberisiko verbunden (Hazard Ratio 1,14 [95-Prozent-Konfidenzintervall 1,06-1,22]). für Alter, Geschlecht, Baseline-eGFR, Albumin/Kreatinin-Verhältnis im Urin, Diabetes mellitus, vorherrschende Herz-Kreislauf-Erkrankung, LDL-Cholesterin, HDL-Cholesterin, Rauchen, Body-Mass-Index, systolischer und diastolischer Blutdruck, C-reaktives Protein und Serumalbumin. Dies führte zu einem um 75 Prozent höheren Risiko für diejenigen im niedrigsten im Vergleich zum höchsten Quartil der relativen Telomerlänge. Der Zusammenhang wurde hauptsächlich von 117 kardiovaskulären Todesfällen (1,20 [1,05-1,35]) sowie 67 Todesfällen aufgrund von Infektionen (1,27 [1,07-1,50]) bestimmt. Somit stützen unsere Ergebnisse eine Assoziation einer kürzeren Telomerlänge mit Gesamtmortalität, kardiovaskulärer Mortalität und Tod aufgrund von Infektionen bei Patienten mit mittelschwerer chronischer Nierenerkrankung.
SCHLÜSSELWÖRTER:chronisches Nierenleiden; Infektionen; Sterblichkeit; relative Telomerlänge
Chronisches Nierenleiden(CKD) ist eine komplexe Krankheit, deren Vererbbarkeit auf 30 bis 70 Prozent geschätzt wird.9–12 In den vergangenen Jahren haben genomweite Assoziationsstudien viele genetische Loci identifiziert, die mit der Nierenfunktion und CNE assoziiert sind.13–17
Index-Einzelnukleotid-Polymorphismen an den identifizierten Loci erklären jedoch nur einen kleinen Teil der Erblichkeit, und zusätzliche genetische Mitwirkende könnten fehlen. Bisher haben nur wenige kleine Studien den Zusammenhang zwischen TL und Nierenerkrankungen untersucht. Einige Studien fanden heraus, dass eine kurze TL mit einer eingeschränkten Nierenfunktion in der Allgemeinbevölkerung18,19 sowie bei Patienten mit Herzinsuffizienz korreliert.20 Wir haben kürzlich signifikant kürzere relative TL (RTL) bei Patienten mit mittelschwerer CKD beschrieben, die eine vorherrschende kardiovaskuläre Erkrankung haben ( CVD),21 sowie eine Assoziation mit der Dauer22 und dem Fortschreiten der CKD.23 Hämodialysebehandelte Patienten mit Nierenversagen weisen im Vergleich zu gesunden Kontrollpersonen eine reduzierte TL auf,24–27 und eine reduzierte TL ist umgekehrt mit der Mortalität assoziiert. 28 Es wurden nur wenige Untersuchungen an nicht-dialysepflichtigen Nierenpatienten durchgeführt.21–23,29,30 Unseres Wissens ist die aktuelle Studie die erste prospektive Studie, die den Zusammenhang zwischen Leukozyten-RTL und Todesursachen in großem Umfang untersucht nicht-dialyseabhängige CKD-Kohorte.
Cistanche-Vorteil: Verbesserung der Nierenfunktion
ERGEBNISSE
Baseline-Charakteristika der Studienpopulation
RTL wurde im peripheren Blut durch ein quantitatives Polymerase-Kettenreaktionsverfahren bei 4955 Patienten aus Deutschland quantifiziertChronisches Nierenleidenlernen. Eine vollständige {{0}}-Jahres-Follow-up war von 4926 Patienten verfügbar. Baseline-Charakteristika dieser 4926 Patienten nach RTL-Quartilen sind in Tabelle 1 angegeben. RTL reichte von einem Minimum von {{10}},40 bis zu einem Maximum von 2,31 (ergänzende Abbildung S1 ), mit einem Mittelwert ± SD von 0,95 ±0,19 und einem Median von 0,92 (1. Quartil ¼ 0,82; 3. Quartil ¼ 1 .05). RTL korrelierte negativ mit dem Alter (r ¼ –{{30}}.36, P < 0,001)="" und="" positiv="" korreliert="" mit="" der="" geschätzten="" glomerulären="" filtrationsrate="" (egfr;="" r="" ¼="" 0,17,="" p="">< 0,001)="" und="" urinalbumin–="" kreatininverhältnis="" (r="" ¼="" 0,05,="" p="">< 0,001).="" als="" wir="" rtl="" nach="" alter="" und="" geschlecht="" anpassten,="" beobachteten="" wir="" keine="" signifikante="" korrelation="" mehr="" mit="" der="" egfr="" und="" dem="" albumin-kreatinin-verhältnis="" im="">
Prospektive Nachsorge und Mortalität
Insgesamt 354 Todesfälle traten während einer medianen Nachbeobachtungszeit von 4 Jahren (1483 Tage) auf. Die Todesursachen waren kardiovaskuläre Erkrankungen einschließlich Myokardinfarkt, koronare Herzkrankheit, plötzlicher Herztod, dekompensierte Herzinsuffizienz, Lungenembolie, Herzklappenerkrankung und ischämischer Schlaganfall (117 Patienten, 33,1 Prozent), Infektionen (67 Patienten, 18,9 Prozent), nicht-ischämische zerebrovaskuläre Erkrankungen Ursachen (9 Patienten, 2,5 Prozent), periphere Gefäßerkrankung (7 Patienten, 2,0 Prozent), Nierenversagen (8 Patienten, 2,3 Prozent), verschiedene andere Ursachen (103 Patienten, 29,1 Prozent) und unbekannte Ursachen ( 43 Patienten, 12,1 Prozent ).
Kumulative Inzidenzdiagramme zeigen, dass die Inzidenz der Gesamtmortalität (Abbildung 1a) mit kürzerer RTL zunimmt, wobei die höchste Inzidenz beim niedrigsten RTL-Quartil liegt. In den kumulativen Inzidenzfunktionskurven von kardiovaskulärer (Abbildung 1b) und Infektionssterblichkeit (Abbildung 1c) war der Unterschied zwischen den Quartilen weniger ausgeprägt, aber die Reihenfolge der Quartile war gleich.
Abbildung 1|Kumulative Inzidenzfunktion für (a) Gesamtmortalität, (b) Mortalität durch Herz-Kreislauf-Erkrankungen (CVD) und (c) Tod durch Infektionen, nach Quartilen (Q) der relativen Telomerlänge (RTL). Q1 ist das Quartil, das Patienten mit der kürzesten RTL umfasst.
Ergebnisse von Cox-Regressionsmodellen mit unterschiedlichen Anpassungen sind in Tabelle 2 aufgeführt und zeigten einen signifikanten Zusammenhang zwischen kürzerer RTL und dem Risiko einer Gesamtmortalität. Kontinuierlich ausgewertet war jede Verringerung um 0,1 RTL-Einheiten mit einem um 16 Prozent erhöhten Sterberisiko in einem alters- und geschlechtsangepassten Modell verbunden (Hazard Ratio [HR], 1,16; 95-Prozent-Konfidenzintervall [KI], 1.08–1.24; P ¼ 1.7e-05). Die Assoziation blieb signifikant nach einer erweiterten Anpassung für eGFR, Albumin-Kreatinin-Verhältnis im Urin, Diabetes mellitus und prävalente kardiovaskuläre Erkrankung (Modell 2: HR, 1,16; 95-Prozent-KI, 1,08–1,24) sowie die zusätzlichen kardiovaskulären Risikofaktoren geringer Dichte Lipoprotein-Cholesterin, High-Density-Lipoprotein-Cholesterin, Rauchen, Body-Mass-Index, systolischer Blutdruck, diastolischer Blutdruck, C-reaktives Protein und Serumalbumin zu Studienbeginn (Modell 3: HR, 1,14; 95-Prozent-KI, 1,06–1,22; P ¼ 3,5e-04). Nichtlineare P-Spline-Analysen sind in Abbildung 2 dargestellt und zeigten eine nahezu lineare Assoziation von RTL mit Gesamtmortalität. Patienten mit der kürzesten RTL (1. Quartil) hatten ein um 75 Prozent höheres Risiko für die Gesamtmortalität im Vergleich zu denen im Quartil mit der längsten RTL (Ergänzungstabelle S1, vollständig angepasstes Modell: HR, 1,75; 95-Prozent-KI, 1,22–2,50). ;P ¼ 0,0024).
Als nächstes haben wir analysiert, was die Assoziation von RTL mit der Gesamtmortalität antreibt (Tabelle 2). Wir bewerteten die 2 häufigsten spezifischen Todesursachen und stellten fest, dass jede Verringerung um 0,1 RTL-Einheiten mit einem um 20 Prozent erhöhten Risiko für kardiovaskulären Tod im vollständig angepassten Modell (HR, 1.2 0; 95 % KI, 1,05–1,35; P ¼ 0,0052). Eine reduzierte RTL war auch signifikant umgekehrt mit dem Tod aufgrund von Infektionen assoziiert. Jede Abnahme von RTL um 0,1 Einheit war mit einem 1,27--fach höheren Risiko für den Tod aufgrund von Infektionen verbunden (HR, 1,27; 95 Prozent-KI, 1,07–1,50; P=0,0051). Betrachtet man die Schätzungen für die verschiedenen Quartile in der Ergänzungstabelle S1, so zeigt sich für Todesfälle durch Infektionen, dass die Schätzungen für jedes der Quartile 1, 2 und 3 im Vergleich zu Quartil 4 ähnlich hoch waren. Die Analyse mit anderen Todesursachen wie sowie unbekannte Todesursachen war offensichtlich zu heterogen und ließ keinen Zusammenhang mit RTL erkennen (Daten nicht gezeigt).
Das Diagramm der skalierten Schoenfeld-Residuen und der Test auf proportionale Gefahrenannahmen deuteten auf keine zeitabhängigen Auswirkungen von RTL auf eines der untersuchten Ergebnisse hin. Die in der Ergänzungstabelle S2 angegebenen Unterverteilungs-HRs sowohl für kardiovaskulären Tod als auch für Todesfälle durch Infektionen sind im Vergleich zu den ursachenspezifischen HRs nur leicht abgeschwächt.
We also evaluated whether the effect of RTL on the 3 different outcomes differed between men and women and for patients with and without diabetes mellitus, but we did not detect a significant interaction for these variables, or for age (all P values of interaction >0.1 in den vollständig angepassten Modellen). Angesichts der Tatsache, dass wir kürzlich einen U-förmigen Zusammenhang zwischen der Dauer von CNE und RTL beobachtet haben,22 haben wir eine Sensitivitätsanalyse durchgeführt, bei der wir zusätzlich die Dauer von CNE zu Studienbeginn angepasst haben, definiert als weniger als 6 Monate, zwischen 6 Monaten und 5 Jahren und mehr als 5 Jahre. Diese zusätzliche Anpassung führte zu nur geringfügigen Änderungen der HRs, die für alle 3 Endpunkte erhalten wurden (Ergänzungstabelle S3).
Cistanche-Vorteil: Verbesserung der Nierenfunktion
DISKUSSION
Die Ergebnisse dieser Studie zeigten eine signifikante Assoziation von RTL mit der Gesamtmortalität in einer nicht-dialyseabhängigen CKD-Kohorte. Eine kürzere RTL war unabhängig von der Nierenfunktion und den traditionellen CVD-Risikofaktoren mit einem höheren Mortalitätsrisiko verbunden. Diese Assoziation wurde durch Todesfälle aufgrund von Herz-Kreislauf-Erkrankungen sowie durch Todesfälle aufgrund von Infektionen vorangetrieben.
Assoziation mit Gesamtmortalität
Vorstudium,5,6,31–35mit wenigen Ausnahmen,36,37 haben einen negativen Zusammenhang zwischen RTL und Gesamtmortalität in der Allgemeinbevölkerung gezeigt. Die bisher größte Studie (n=64.637) wurde von Rode et al. durchgeführt, mit einer adjustierten HR für Mortalität von 1,40 für das Dezil mit dem kürzesten gegenüber dem Dezil mit dem längsten RTL.35In Übereinstimmung mit diesen Ergebnissen zeigte unsere Studie mit jeder Abnahme von 0,1 RTL-Einheiten ein um 14 % höheres Risiko für die Gesamtmortalität, was zu einem um 75 % höheren Risiko für die untersten im Vergleich zu den höchsten führt Quartil von RTL. Unseres Wissens haben nur Carrero et al.28haben die Beziehung zwischen RTL und dem Sterblichkeitsrisiko bei CKD-Patienten untersucht. Sie untersuchten 175 Patienten mit Nierenerkrankungen im Endstadium, die durch Hämodialyse behandelt wurden, von denen 70 während einer medianen Beobachtungszeit von 31 Monaten starben. Die Autoren beobachteten, dass TL das Überleben der Patienten nach zusätzlicher Anpassung für Alter, Geschlecht und Entzündung unabhängig vorhersagte. Die aktuelle Studie dehnt diese Beobachtungen auf die viel größere Gruppe von Personen mit CKD aus, die keine Dialyse benötigen.
Abbildung 2|Angepasste nichtlineare Splines (und 95-Prozent-Konfidenzbänder) für den Zusammenhang zwischen zunehmender relativer Telomerlänge (RTL) und Hazard Ratio (HR) von (a) Gesamtmortalität, (b) kardiovaskulärem Tod und (c) Tod aufgrund von Infektionen . HR wird als Log-Skala auf den Steuern angegeben. Grayline: Anpassungsmodell 1 (adjustiert für Alter und Geschlecht). Blueline: Anpassungsmodell 3 (angepasst an Alter, Geschlecht, geschätzt [Fortsetzung]
Assoziation mit CVD-Mortalität
Bisher haben keine Studien den Zusammenhang zwischen RTL und kardiovaskulärer Sterblichkeit bei CNE-Patienten untersucht, obwohl dies die Haupttodesursache bei diesen Patienten ist. Abhängig von der untersuchten ethnischen Zugehörigkeit und den Datenanpassungsmodellen berichteten einige, aber nicht alle Studien in der Allgemeinbevölkerung über einen Zusammenhang zwischen niedrigen RTL- und CVD-Ergebnissen.33,38–41Eine starke Unterstützung für einen kausalen Zusammenhang kam von einer Mendelschen Randomisierungsstudie, in der festgestellt wurde, dass genetische Varianten, die mit kürzeren RTL assoziiert sind, mit ischämischer Herzkrankheit assoziiert sind.40In der vorliegenden Studie identifizierten wir eine signifikante Assoziation von RTL mit kardiovaskulären Todesfällen, mit einem um 20 % höheren Risiko bei jeder Verringerung von RTL um 0,1 Einheiten oder einem um 75 % höheren Risiko für diese Patienten im Quartil mit der kürzesten TL im Vergleich zum Quartil mit der längsten TL. Dieses Ergebnis steht im Einklang mit unserem früheren Bericht über einen Zusammenhang mit prävalenten kardiovaskulären Ereignissen in dieser Patientenpopulation: Jede Verringerung der RTL um 0,1 Einheiten war signifikant mit einer um 6 Prozent höheren Wahrscheinlichkeit für prävalente kardiovaskuläre Erkrankungen in einem Modell verbunden, das Alter, Geschlecht und Strom berücksichtigt Rauchen, Bluthochdruck, Diabetes-Status, Low-Density-Lipoprotein-Cholesterin, High-Density
Lipoprotein-Cholesterin, C-reaktives Protein, eGFR und Body-Mass-Index.21Die prospektive Nachbeobachtung dieser Patienten in der vorliegenden Untersuchung ergab, dass insbesondere das unterste Quartil von RTL mit einem deutlich erhöhten Risiko assoziiert war, während die anderen 3 Quartile sehr ähnliche Schätzungen zeigten (Abbildung 1b).
Assoziation mit Tod durch Infektionen
Obwohl experimentelle Beweise eine Rolle der Zellseneszenz und kurzer TL bei einer beeinträchtigten Immunantwort unterstützen, sind epidemiologische Studien spärlich, insbesondere bei CNE-Patienten. Helbyet al. führte die größte (n ¼ 75.309) prospektive populationsbasierte Studie durch, die RTL und das Risiko einer Krankenhauseinweisung wegen Infektionskrankheiten und das Risiko eines infektionsbedingten Todes untersuchte. Während der 7-jährigen Nachbeobachtung beobachteten sie ein höheres Infektionsrisiko im Quartil mit der kürzesten im Vergleich zum Quartil mit der längsten RTL.42 Frühere Studien mit kleineren Stichprobengrößen berichteten widersprüchliche Ergebnisse.32,43,44Unsere Ergebnisse bei CKD-Patienten beschreiben zum ersten Mal den Zusammenhang zwischen kurzer RTL und einem höheren Todesrisiko aufgrund von Infektionen in dieser Hochrisikopopulation.
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Möglicher Mechanismus
Der biologische Mechanismus, der dem Zusammenhang zwischen RTL und Sterblichkeit zugrunde liegt, ist noch unklar. Der durch unsere Studie identifizierte Zusammenhang klärt nicht auf, ob die RTL-Verkürzung in ursächlichem Zusammenhang mit kardiovaskulären Erkrankungen und Infektionen steht. Eine genomweite Assoziationsstudie, gefolgt von einer genetischen Risiko-Score-Analyse, bei der Leitvarianten an 7 genetischen Loci kombiniert wurden, zeigte jedoch eine Assoziation der Allele, die mit einer kürzeren RTL assoziiert sind, mit einem erhöhten Risiko einer koronaren Herzkrankheit. Dieser Befund liefert eine mögliche Unterstützung für eine mögliche kausale Rolle von RTL bei kardiovaskulären Erkrankungen.45,46Darüber hinaus könnte die durch Telomerabrieb induzierte zelluläre Seneszenz ein Auslöser von Atherosklerose sowie Arteriosklerose sein. Die Anhäufung von seneszenten Zellen im Gefäß trägt zur atherosklerotischen Plaquebildung und Mediaverkalkungen bei, was zu einer erhöhten arteriellen Steifheit als dominantem Merkmal der urämischen arteriellen Erkrankung führt.47Die meisten Studien haben RTL in der DNA von peripheren Leukozyten gemessen. Es wurde jedoch eine enge Korrelation zwischen Leukozyten- und Aortenwandgewebe-TL gezeigt.48Daher könnte die zelluläre Seneszenz Endothelzellen beeinflussen, was zu einer Funktionsstörung in der Gefäßwand führt und die Adhäsion von Immunzellen fördert, ein primäres Ereignis bei Arteriosklerose. Darüber hinaus aktivieren kurze Telomere p53 und Autophagie in kardialen Vorläuferzellen, wodurch das Gleichgewicht von Ruhe und Proliferation in Richtung Differenzierung und Seneszenz destabilisiert wird, was zu einer Erschöpfung der kardialen Vorläuferzellen führt.49Es wurde gezeigt, dass eine Telomer-Dysfunktion eine tiefgreifende p53--abhängige Unterdrückung der Hauptregulatoren der mitochondrialen Biogenese und Funktion induziert, was zu einer bioenergetischen Beeinträchtigung aufgrund einer beeinträchtigten oxidativen Phosphorylierung und Adenosintriphosphat-Erzeugung führt.50,51
Es gibt auch mehrere Verbindungen zwischen RTL und Infektionen. Der Verlust von Telomeren wurde während der T-Zell-Differenzierung beobachtet,52bei chronischen Virusinfektionen,53und mit dem Alter.54Darüber hinaus wurde über kurze Leukozyten-TL als Risikofaktor bei verschiedenen immunbedingten Erkrankungen berichtet55und Zuckerkrankheit.56Kürzere Leukozyten-TL verursachen eine Zellalterung, die von einer Verringerung der Proliferationskapazität von Immunzellen gefolgt wird. TL kann auch an altersbedingtem Rückgang der Immunfunktion im Zusammenhang mit unzureichender Reaktion auf Impfstoffe und akute Infektionen beteiligt sein.57–59Eine mögliche Rolle von TL bei Infektionen wird auch durch eine kürzlich durchgeführte genomweite Assoziationsstudie in einer chinesischen Bevölkerung gestützt. Dorjee und Kollegen beobachteten einen Zusammenhang zwischen einem TL-reduzierenden Allel und dem Tod aufgrund einer Atemwegsinfektion.60Die RTL-Abnutzung könnte stark durch das Vorhandensein von erhöhtem oxidativem Stress ausgelöst werden, einer häufigen Erkrankung bei CNE.61 Mehrere In-vitro- und In-vivo-Studien zeigten, dass oxidativer Stress den Telomerabbau beschleunigt.62,63Tatsächlich sind Telomere mit ihrem hohen Guaningehalt sehr anfällig für oxidative Schäden,64und durch oxidativen Stress induzierte Einzelstrang-DNA-Brüche könnten ein wichtiger Faktor für die Telomerverkürzung während der DNA-Replikation sein.65
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Starken und Einschränkungen
Zu den Stärken dieser Untersuchung gehören die große Stichprobengröße einer gut definierten Population mit einer medianen Nachbeobachtungszeit von 4 Jahren ohne Verlust der Nachbeobachtungszeit, die Homogenität der Studienpopulation und eine zentralisierte Bewertung von TL und Ergebnismessungen. Insbesondere die Messung von RTL ist von größter Bedeutung, da eine Standardisierung zwischen Labors nicht einfach zu bewerkstelligen ist und daher der Prozess im selben Labor unter genau denselben Bedingungen in Bezug auf Protokoll, Referenzgen, Instrument, Personal66 und DNA durchgeführt werden sollte Extraktionsverfahren.67
Es gibt einige Einschränkungen für diese Studie. Zuerst wurde RTL in peripheren Leukozyten gemessen. Es ist bekannt, dass sich die Geschwindigkeit des Fortschreitens zur Seneszenz zwischen Lymphozyten-Untergruppen unterscheidet. 59Leider waren keine Daten über die Zusammensetzung der Blutzellen im Deutschen verfügbarChronisches NierenleidenStudie, weshalb dieser Aspekt nicht untersucht werden konnte. Es wäre interessant, RTL von verschiedenen Nierenzelltypen zu kennen, aber es ist nicht möglich, es in einer großen epidemiologischen Studie zu erhalten, da dies Gewebematerial aus Biopsien erfordern würde. Die zweite Einschränkung betrifft das Beobachtungsdesign der Studie, das keine Klärung der Kausalität oder des biologischen Mechanismus zulässt. Drittens rekrutierte die Studie hauptsächlich CNI-Patienten im Stadium G3 oder A3, und die Ergebnisse sind möglicherweise nicht auf andere Stadien der CNI übertragbar. Viertens war die Assoziation mit bestimmten Todesursachen möglicherweise durch die statistische Aussagekraft begrenzt, war aber dennoch für die beiden spezifischen Haupttodesursachen vorhanden. Obwohl unsere Analysen sowohl um traditionelle kardiovaskuläre Risikofaktoren als auch um Nierenfunktionsparameter angepasst wurden, können wir schließlich die Möglichkeit einer verbleibenden Verwechslung durch unbekannte oder nicht gemessene Parameter nicht ausschließen
Variablen. Es war jedoch sehr interessant zu sehen, dass die alters- und geschlechtsbereinigten Schätzungen von RTL für verschiedene Endpunkte bei weiterer Anpassung für die anderen Variablen sehr stabil waren, was darauf hindeutet, dass RTL relativ unabhängig von anderen Variablen ist, wenn die Daten für Alter und Geschlecht angepasst werden.
Schlussfolgerungen
Die aus peripheren Blutleukozyten quantifizierte kurze relative TL war während der 4-jährigen Nachbeobachtung bei Patienten mit mittelschwerer CKD unabhängig mit der Gesamtmortalität assoziiert. Diese Assoziation wurde durch Todesfälle aufgrund von Herz-Kreislauf-Erkrankungen sowie durch Todesfälle aufgrund von Infektionen vorangetrieben.
Cistanche-Vorteil: Verbesserung der Nierenfunktion
METHODEN
Studienpopulation
Das DeutschChronisches Nierenleiden study is an ongoing prospective multicenter observational cohort. A detailed description of the study has been published previously.68 Briefly, 5217 patients under regular care by nephrologists were enrolled. Inclusion criteria were moderately reduced kidney function defined as eGFR of 30–60 ml/min per 1.73 m2 (stage G3, A1–A3) or an eGFR >60 ml/min pro 1,73 m2 bei manifester Proteinurie (Stadium G1–G2, A3). Ausschlusskriterien waren nicht-kaukasische ethnische Zugehörigkeit, Organ- oder Knochenmarktransplantation, aktive Malignität innerhalb von 24 Monaten vor dem Screening, New York Heart Association-Stadium-IV-Herzinsuffizienz und rechtliche Anwesenheit oder Unfähigkeit, eine Einwilligung zu erteilen. Die vorgestellten Laborparameter wurden alle aus gesammelten Bioproben in einem Zentrallabor wie zuvor beschrieben gemessen.68 Informationen zu soziodemografischen Faktoren, medizinischer und familiärer Vorgeschichte, Medikation und gesundheitsbezogener Lebensqualität wurden von geschultem Personal durch standardisierte Fragebögen erhoben. Eine vorherrschende kardiovaskuläre Erkrankung zu Studienbeginn war definiert als eine Vorgeschichte mit nicht tödlichem Myokardinfarkt, Koronararterien-Bypass-Operation, perkutaner transluminaler Koronarangioplastie, Schlaganfall und Eingriffen an den Karotisarterien (Carotis-Endarteriektomie und/oder Karotis-Ballon-Angioplastie oder Stent-Implantation).
Alle Teilnehmer gaben eine schriftliche Einverständniserklärung ab, und die Studie wurde von den Ethikkommissionen aller teilnehmenden Institutionen genehmigt und im nationalen Register für klinische Studien (DRKS 00003971) registriert. Alle Methoden wurden in Übereinstimmung mit genehmigten Richtlinien und der Deklaration von Helsinki durchgeführt. Die Datenerfassung und -verwaltung erfolgt über Askimed (https://www.askimed.com) als cloudbasierte Webplattform zur Erfassung und Verwaltung von Fallberichtsformularen und Labordaten.
Klinische Endpunkte während der prospektiven Nachbeobachtung
Wie kürzlich beschrieben, werden 69 Patienten jährlich von geschultem Personal abwechselnd mit persönlichen und telefonischen Besuchen betreut. Während dieser Visiten werden im Rahmen eines strukturierten Interviews Daten zu Krankenhausaufenthalten, Outcome-Ereignissen und Anamnese aktualisiert. Etwaige Krankenhausentlassungsberichte werden von den behandelnden Ärzten und/oder Krankenhäusern eingeholt. Aus diesen Berichten werden von einem geschulten und beaufsichtigten Endpunktausschuss, der sich aus 3 unabhängigen Ärzten zusammensetzt, gemäß einem vorgegebenen Endpunktkatalog kontinuierlich Endpunkte abstrahiert. Aus diesen Meldungen sowie den bei den Standesämtern eingeholten Sterbeurkunden werden Informationen zur Todesursache erhoben, wenn das Studienpersonal über den Tod eines Studienteilnehmers informiert wird.
Die aktuelle Analyse umfasst alle Endpunkte, die bis zum 4--Jahres-Follow-up aufgetreten sind. Wenn ein Patient den 4--Jahres-Follow-up-Besuch verpasste, schlossen wir alle Endpunkte bis 4,5 Jahre nach dem jeweiligen Baseline-Besuch ein. Daher war der Zensurzeitpunkt entweder das 4--Jahres-Follow-up-Datum oder 4,5 Jahre nach dem Ausgangswert. Der primäre Endpunkt war die Gesamtmortalität. Um zu bewerten, ob identifizierte Assoziationen einer bestimmten Todesursache zugeordnet werden konnten, wurden Tod durch kardiovaskuläre Ursachen und Infektionskrankheiten als sekundäre Endpunkte betrachtet. Die Gruppe der kardiovaskulären Todesfälle umfasste Myokardinfarkt, koronare Herzkrankheit, plötzlichen Herztod, dekompensierte Herzinsuffizienz, Lungenembolie, Herzklappenerkrankung und ischämischen Schlaganfall. Auch andere Todesursachen wurden erfasst, jedoch waren diese Untergruppen nicht groß genug, um weitere ursachenspezifische Analysen durchzuführen.
Messung von RTL
Genomische DNA wurde aus Vollblut in einem Zentrallabor mit dem Chemagic Magnetic Separation Module I (PerkinElmer chromagen Technologie GmbH, Baesweiler, Deutschland) extrahiert. Die aktuelle Analyse basierte auf 4926 Patienten, für die RTL-Messungen in Ausgangsblutproben und Daten zur Sterblichkeit verfügbar waren. RTL wurde vierfach unter Verwendung eines quantitativen, auf Polymerase-Kettenreaktion basierenden Assays gemessen, der von Cawthon70 entwickelt und wie zuvor beschrieben modifiziert wurde.71 DNA-Proben wurden in 15--ml-Reaktionen mit 1x Quantifast TM SYBR Green PCR-Mastermix verarbeitet (Qiagen, Hilden, Deutschland), 10 ng DNA, 1 mM Telomer-Primer oder 250 nm Primer des Housekeeping-Gens 36B4. Wir bestimmten das relative Verhältnis der Telomer-Wiederholungskopienzahl (T) zur Einzelkopien-Genkopienzahl (36B4-Gen, kodierend für das ribosomale Phosphoprotein PO, lokalisiert auf Chromosom 12; S). Die T/S-Verhältnisse sind proportional zu einzelnen RTL. Die Automatisierung dieses Hochdurchsatzverfahrens führte zu sehr guten Qualitätskontrollmaßnahmen mit einem niedrigen Inter-Assay-Variationskoeffizienten der T/S-Verhältnisse. Eine im Handel erhältliche DNA, die in allen quantitativen Polymerase-Kettenreaktionsplatten enthalten war, wurde verwendet, um die Leistung des Assays über die gesamte Studie zu überprüfen. Der Interassay-Variationskoeffizient der T/S-Verhältnisse dieser in 112 unabhängigen Experimenten analysierten Probe betrug vor der Normalisierung 9,6 Prozent und ging nach der Normalisierung auf 4,0 Prozent zurück (ergänzende Abbildung S2).
statistische Analyse
Wir verglichen die grundlegenden Merkmale der Teilnehmer (Tabelle 1) unter Verwendung des Kruskal-Wallis-Tests für kontinuierliche Variablen und Chi-Quadrat-Tests für kategoriale Variablen. Kumulative Inzidenzfunktionskurven wurden verwendet, um die kumulative Inzidenz der verschiedenen Todesursachen unter Berücksichtigung des konkurrierenden Risikos abzuschätzen.72 Cox-Proportional-Hazards-Regressionsmodelle wurden durchgeführt, um die Assoziationen von RTL mit 3 Ergebnissen zu bewerten: (i) Gesamtmortalität, ( ii) Tod aufgrund von CVD und (iii) Tod aufgrund von Infektionen. Für beide ursachenspezifischen Endpunkte (ii und iii) wurden Patienten zensiert, wenn der Tod durch eine andere Ursache eintrat. Darüber hinaus wurden Assoziationen mit diesen ursachenspezifischen Endpunkten unter Verwendung der Überlebensregression konkurrierender Risiken untersucht, wobei alle Todesfälle aufgrund anderer Ursachen als konkurrierende Ereignisse betrachtet wurden. Daher werden sowohl ursachenspezifische HRs als auch Unterabteilungs-HRs für Todesfälle aufgrund von kardiovaskulären Erkrankungen oder Infektionen gemeldet. Cox-Proportional-Hazards-Modelle wurden unter Verwendung von 3 verschiedenen Anpassungsebenen angepasst: Modell 1 angepasst für Alter und Geschlecht; Modell 2 zusätzlich adjustiert für Baseline-eGFR, Urin-Albumin-Kreatinin-Quotient, prävalente kardiovaskuläre Erkrankungen und Diabetes; Modell 3 weiter bereinigt um die traditionellen CVD-Risikofaktoren Low-Density-Lipoprotein-Cholesterin, High-Density-Lipoprotein-Cholesterin, Body-Mass-Index, Rauchen, systolischer und diastolischer Blutdruck, C-reaktives Protein und Albumin. Die Auswahl der adjustierten Variablen in den verschiedenen Modellen basierte auf den Unterschieden in den klinischen Merkmalen zwischen den in Tabelle 1 angegebenen RTL-Quartilen. In den Regressionsmodellen wurde RTL kontinuierlich und als kategorialer Prädiktor (in RTL-Quartilen) analysiert. Da erste Ergebnisse insbesondere für niedrige RTL-Werte auf ein höheres Risiko hindeuteten, wird die (ursachenspezifische) HR auch für die Quartile 1, 2 und 3 im Vergleich zu Quartil 4 als Referenz angegeben (Ergänzungstabelle S1). Die weitere nachgelagerte Analyse basierte auf einer visuellen Inspektion des P-Splines, um die Form der Beziehung zwischen RTL und Mortalitätsrisiko abzuleiten. Wir verwendeten den Rangkorrelationskoeffizienten nach Spearman, um die Assoziation zwischen den Studienvariablen zu bewerten. Alle statistischen Analysen wurden mit R 3.3.2 (https://www.r-project.org) durchgeführt; P-Werte<0.05 were="" considered="" statistically="">
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