Synergistische entzündungshemmende Wirkung von Laminaria Japonica Fucoidan und Cistanche Tubulosa-Extrakt
Mar 03, 2022
Kontakt: Audrey Hu WhatsApp/hp: 0086 13880143964 E-Mail:audrey.hu@wecistanche.com
Abstrakt
DasAntiphlogistikumWirkungen von Fucoidan uCistanche tubulosa (CT)-Extrakt wurden im Vitro-Makrophagen-Kultursystem und im In-vivo-Carrageenan-induzierten Air-Pouch-Entzündungsmodell untersucht.Cistanche TubulosaExtrakt hemmte die Stickoxidproduktion von aktivierten RAW 264.7-Makrophagenzellen, während Fucoidan inaktiv war. In-vivo-Air-Pouch-Entzündungsmodell, Carrageenan-induzierte vaskuläre Exsudation und erhöhte Stickoxid- und Prostaglandin-E2-Konzentrationen in den Exsudaten wurden durch die gleichzeitige Verabreichung von Fucoidan oder synergistisch unterdrücktCistanche TtubulosaExtrakt. Darüber hinaus wurde die Gewebeentzündung durch die Kombinationstherapie wesentlich abgeschwächt. Es gab jedoch keinen synergistischen Effekt gegen dieentzündlichZellinfiltration, obwohl Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt reduzierte jeweils deutlich die Zellzahlen. Daher wird vorgeschlagen, dass Fucoidan die Infiltration von blockiertentzündlichZellen, während CT(Cistanche tubulosa)-Extrakt hemmt die Aktivierung der Zellen und dass ihre kombinierte Behandlung ein vielversprechender Kandidat für die Linderung verschiedener Arten von Entzündungen sein könnte.
Schlüsselwörter: Carrageenan, Entzündung, Fucoidan, Cistanche tubulosa-Extrakt.
Als Immunantwort gegen fremde Antigene setzen Makrophagen entzündungsfördernde Zytokine wie Tumor-Nekrose-Faktor- (TNF-), Interleukin-1 (IL-1), IL-6 und andere frei [1,2]. Solche Zytokine induzieren einen chemotaktischen Einstrom von Granulozyten, Monozyten, Lymphozyten und Mastzellen in geschädigtes Gewebe, was die Antigenentfernung und Gewebewiederherstellung fördert [3,4]. Eine übermäßige Infiltration und Aktivierung der Zellen verschlimmert jedoch Gewebeverletzungen, was zu Ödemen (Gefäßexsudation) und Schmerzen führt, die bekannte Phänomene von Entzündungen sind.
TNF- ist ein wichtiger Faktor für die Induktion der Stickoxidsynthase (iNOS)-Genexpression in mehreren Zelllinien. Die iNOS-Aktivierung führt zur Stickoxid (NO)-Produktion[5-7], die nicht nur mehrere physiologische Funktionen wie Bakterizid und Vasodilatation moduliert sondern verursacht auch Entzündungen [8,9]. Nach einer Gewebeverletzung erzeugt der Abbau von Zellmembran-Phospholipiden durch Phospholipasen Arachidonsäure. Arachidonsäure wird weiter durch Cyclooxygenase (COX) zu Prostaglandinen (PGs) abgebaut [10]. Eine übermäßige Menge an PGE2, das von COX-II gebildet wird, induziert mehrere Zytokine für Entzündungen. Da sowohl NO als auch PGE2 als Hauptfaktoren für Entzündungen und Schmerzinduktion wirken, sind die TNF- und COX-II-PGE2-Wege die Hauptströme des Entzündungsprozesses, die durch Kortikosteroide und nichtsteroidale Substanzen gehemmt werdenAntiphlogistikumMedikamente (NSAIDs) bzw. [10,11].
Auch wenn es mehrere Steroide und NSAIDs für die Therapie entzündlicher Erkrankungen gibt, können diese Medikamente Nebenwirkungen auf das Immunsystem, den Magen-Darm-Trakt, die Nieren, die Leber, das zentrale Nervensystem, den Blutdruck und das Herz-Kreislauf-System haben [12-14 ]. Daher ist es notwendig, die Nebenwirkungen chemischer Therapeutika zu minimieren, indem man sie ersetzt oder in Kombination mit Naturprodukten verwendet.
Fucoidan, ein Sulfat-Polysaccharidkomplex aus Meeresalgen wie Laminaria japonica und Cladosiphonokamuranus, der in vielen Ländern weit verbreitet ist, wird seit langem als Therapeutikum in der orientalischen Medizin verwendet. In früheren Studien wurde gezeigt, dass Fucoidan antioxidative, gerinnungshemmende, krebshemmende undAntiphlogistikumAktivitäten [15,16]. Dementsprechend ziehen die vorteilhaften Wirkungen von Fucoidan bei entzündlichen Erkrankungen, Ischämie, Immundysfunktion und Tumoren die Aufmerksamkeit der Forscher auf sich [17,18]. Auf der anderen Seite,Cistanche tubulosa(CT) wurde in China auch häufig für traditionelle Medikamente verwendet. Es wurde berichtet, dass CT-Extrakt die Produktion von TNF-á und IL-4 senkt, die Hauptfaktoren für die NO-Produktion im Entzündungsweg sind [19].
Solche früheren Erkenntnisse veranlassten uns, die kombinatorische Wirksamkeit von Fucoidan und CT zu untersuchen(Cistanche tubulosa)Extrakt auf die 2 Hauptwege der Entzündung. Um den Wirkungsmechanismus aufzuklären, analysierten wir NO und PGE2 in den Exsudaten einer Carrageenan-induzierten Luftsackentzündung [20].
Materialen und Methoden
Materialien
Halbgereinigtes Fucoidan und Wasserextrakt von CT(Cistanche tubulosa)wurden von Misuba RTech Co., Ltd. (Asan, Korea) bezogen. Fucoidan und CT-Extrakt wurden bei 4 °C aufbewahrt, gemischt (1:3) und vor der Verwendung in gereinigtem Wasser gelöst und in einem Volumen von 5 ml/kg oral verabreicht
Zellkultur und NO-Quantifizierung
Die murine Makrophagen-Zelllinie RAW 264.7 wurde von der American Type Culture Collection (Manassas, USA) erworben und in Dulbecco's modifiziertem Eagle's Medium (Sigma, St. Louis, USA) kultiviert, das 10 % fötales Rinderserum und Antibiotika [100 U/ml Penicillin ( Sigma) und 100 ug/ml Streptomycin (Sigma)]. Die Zellen wurden in einer befeuchteten 5-prozentigen CO2-Atmosphäre bei 37 °C inkubiert.
Bewertung der Wirkungen von Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt auf die Sekretion von NO, RAW 264.7-Zellen (1×106 Zellen/mL) wurden mit Fucoidan oder CT-Extrakt (1–320 µg/mL) für 5 min inkubiert, gefolgt von Interferon- (IFN- , 10 U/ml) und Lipopolysaccharid (LPS, 10 ug/ml) für 24 Stunden. In unseren vorläufigen Studien wurde bestätigt, dass die Behandlung mit IFN-plus LPS zur Aktivierung von RAW 264.7-Zellen die Lebensfähigkeit der Zellen bis zu 24 Stunden nicht beeinträchtigte und dass Fucoidan und CT-Extrakt bis zu 1 mg/ml nicht zytotoxisch waren. Als Indikator für NO wurde die Konzentration von Nitrit (NO2–), dem Oxidationsprodukt von NO, gemessen. Das Kulturmedium wurde mit einem gleichen Volumen Griess-Reagenz (1 Prozent Sulfanilamid, 0,1 Prozent Naphthylethylendiamid in 2,5 Prozent Phosphorsäure) [21] gemischt und 10 Minuten bei Raumtemperatur inkubiert. Die Nitritkonzentration wurde bei 540 nm analysiert, wobei NaNO2 zur Erstellung einer Standardkurve verwendet wurde.
Tiere und Behandlung
Männliche ICR-Mäuse (7 Wochen alt) wurden von Daehan Biolink (Eumseong, Korea) gekauft und in einem Raum mit konstanten Umgebungsbedingungen (22 ± 2 °C; 40-70 % relative Luftfeuchtigkeit; 12- Stunden Licht) untergebracht -Dunkelzyklus; 150-300 Lux Helligkeit). Pelletfutter und gereinigtes Wasser standen ad libitum zur Verfügung. Alle Tierversuche wurden vom Institutional Animal Care and Use Committee (IACUC) der Chungbuk National University (CBNU), Korea, genehmigt und gemäß den Standard Operation Procedures (SOP) des LaboratoryAnimal Research Center, CBNU, durchgeführt.
Die Mäuse (n=8/Gruppe) wurden oral mit Fucoidan (18 oder 54 mg/kg), CT, behandelt(Cistanche tubulosa)Extrakt (54 oder 162 mg/kg) oder deren Mischung (18 plus 54, 54 plus 162 oder 90 plus 270 mg/kg) einmal täglich für 7 Tage. Niedrige Dosen von Fucoidan (18 mg/kg) und CT-Extrakt (54 mg/kg) stammen aus geschätzten Humandosen von 100 mg/Körper (70 kg) und 300 mg/Körper nach Oberflächentranslation des Körpergewichts (Km{{14 }} für Mensch/Km=3 für Maus). Hohe Dosen von Fucoidan und CT-Extrakt wurden auf das 3-Fache eingestellt, allein oder in der Mischung, und die Mischung mit der höchsten Dosis wurde auf das 5-Fache festgelegt, um maximale synergistische Wirkungen zu bewerten.
Am 1. Tag von Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extraktbehandlung wurden Mäusen subkutan 10 ml sterile Luft in die Rückseite injiziert, um einen Beutel zu bilden [22,23]. Nach 2 und 5 Tagen wurde der Beutel erneut mit 5 ml Luft injiziert. Eine Stunde nach der letzten Behandlung wurde 1 ml Carrageenan (1 Prozent in Kochsalzlösung; Sigma) oder sein Vehikel (Kochsalzlösung) in den Beutel injiziert.
Analysen der Exsudate
Der Luftbeutel wurde 6 Stunden nach der Carrageenan-Injektion mit 1 ml kalter Kochsalzlösung gewaschen, und das Nettovolumen der Spülflüssigkeit wurde aufgezeichnet. Die Gesamtzahlen an Entzündungszellen, Neutrophilen, Monozyten und Lymphozyten wurden unter Verwendung eines Kolterzählers bestimmt. Die Konzentrationen von NO und PGE2 wurden durch Griess-Reagenz (Sigma) bzw. Enzymimmunoassay (EIA) unter Verwendung eines Correlate-EIA-Kits (Assay Designs, Ann Arbor, AnnArboUSA) bestimmt.
Histopathologische Untersuchung
Beutelauskleidungsgewebe wurde entfernt und in neutraler Formalinlösung fixiert. In Paraffin eingebettete Gewebeschnitte wurden mit Hämatoxylin-Eosin gefärbt und unter einem Lichtmikroskop auf entzündliche Läsionen untersucht.
statistische Analyse
Die Ergebnisse sind als Mittelwert ± SE dargestellt. Experimentelle Gruppenvergleiche wurden durch Einweg-Varianzanalyse, gefolgt von einer Tukey-Test-Korrektur, durchgeführt. Ein P-Wert<0.05 was="" considered="" statistically="">
Ergebnisse
In vitro RAW 264.7-Zellkultur, IFN- und LPS-Behandlung erhöhten die NO-Produktion stark (Fig. 1). Die Vorbehandlung mit Fucoidan (1–320 µg/ml) hatte keinen Einfluss auf die NO-Freisetzung aus der Makrophagen-Zelllinie (Abbildung 1A). Im Vergleich dazu CT(Cistanche tubulosa)Extrakt (32–320 µg/mL) unterdrückte signifikant die NO-Produktion, was darauf hindeutetAntiphlogistikumAktivität (Abbildung 1B).
Die Injektion von Carrageenan in die Lufttasche der Maus erhöhte das Exsudatvolumen innerhalb der Tasche deutlich (Abbildung 2). Eine solche erhöhte Exsudation wurde durch Behandlung mit Fucoidan (18 mg/kg) und CT abgeschwächt(Cistanche tubulosa)Extrakt (54 und 162 mg/kg). Insbesondere die Kombinationsbehandlung von Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt verringerte das Exsudatvolumen im Vergleich zu den einzelnen Wirkungen weiter, obwohl höhere Dosiskombinationen (54 plus 162 mg/kg und 90 plus 270 mg/kg) keine zusätzliche Wirksamkeit gegenüber der niedrigsten Dosiskombination (18 plus 54 mg/kg) zeigten. (Abbildung 2A). Der NO-Gehalt im Beutel nahm nach der Carrageenan-Injektion ebenfalls drastisch zu (Abbildung 2B). Im Vergleich zur milden Wirkung von Fucoidan, CT(Cistanche tubulosa)Extrakt senkte die NO-Konzentration deutlich. Die Kombinationsbehandlung von Fucoidan und CT-Extrakt verringerte den NO-Spiegel weiter dosisabhängig. Ebenso wurde der erhöhte PGE2-Gehalt durch die Kombinationstherapie von Fucoidan und CT synergistisch unterdrückt(Cistanche tubulosa)Extrakt (Abbildung 2C). Parallel zu den Entzündungsmediatoren im Beutel stieg die Zahl der Entzündungszellen durch Carrageenan-Injektion drastisch an: 37,8-, 4,8- und 24,1-fache der Kontrollwerte für Neutrophile, Monozyten bzw. Lymphozyten (Tabelle 1). . Allerdings Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt reduzierte signifikant die Entzündungszellinfiltration, wobei Fucoidan dem CT-Extrakt etwas überlegen war. Unerwarteterweise wurde durch die gleichzeitige Gabe von Fucoidan und CT kein synergistischer Effekt bei der Entzündungszellinfiltration erzielt(Cistanche tubulosa)Extrakt.
Wie aus der Infiltration entzündlicher Zellen in den Exsudaten geschlossen wurde, wies das subkutane Gewebe um die Luftpolster schwere entzündliche Läsionen auf (Abbildung 3). Es wurden enorm viele Zellen in dem verdickten subkutanen Gewebe beobachtet, das Carrageenan ausgesetzt war (Abbildung 3B), verglichen mit den nahezu normalen Merkmalen bei Kontrolltieren (Abbildung 3A). Solche entzündlichen Läsionen wurden durch die Behandlung mit Fucoidan (Figuren 3C und 3D) oder CT bemerkenswert abgeschwächt(Cistanche tubulosa)extrahieren (Abbildungen 3E und 3F). Bemerkenswerterweise wurden durch die Kombinationstherapie mit Fucoidan und CT höhere entzündungshemmende Wirkungen erzielt(Cistanche tubulosa)extrahieren (Abbildungen 3G-3I)
Diskussion
Unter Verwendung eines In-vivo-Carrageenan-induzierten Air-Pouch-Entzündungsmodells induziert die Injektion von Luft in den Rücken von Nagetieren die Proliferation von Zellen, die sich auf der Oberfläche des Hohlraums schichten, um eine Struktur ähnlich der Synovialis zu bilden. In diesem Modell erhöhte die Injektion von Carrageenan-induzierter entzündlicher Zellinfiltration das Exsudat, was auf eine Gefäßleckage hinweist. Der Luftsack dient als Reservoir für Entzündungszellen und Mediatoren, die in der sich lokal ansammelnden Flüssigkeit leicht gemessen werden können.
Unter den verschiedenen Entzündungsmediatoren, die Gefäßpermeabilität induzieren können, ist bekannt, dass NO und PGE2 Hauptfaktoren sind, die an der Pathogenese vieler Entzündungserkrankungen beteiligt sind [24,25]. Sie sind auch als Mediatoren der Schmerzinduktion und -wahrnehmung bekannt [10,11]. iNOS, das in verschiedenen Zelltypen durch Stimulation mit TNF- und/oder LPS während einer Entzündung exprimiert und aktiviert wird, produziert hohe, anhaltende NO-Konzentrationen [3, 5-7]. NO ist ein wichtiges regulatorisches Molekül in verschiedenen physiologischen Funktionen, wie Vasodilatation, die zu Gefäßleckagen führt [8,9]. PGE2, das aus Arachidonsäure über Cox erzeugt wird, trägt zur Entwicklung vieler entzündlicher Erkrankungen bei [26,27] und Die Überproduktion von PGE2 als Reaktion auf verschiedene entzündliche Stimulationen ist mit der Hochregulierung des COX-II-Spiegels und dem Fortschreiten der Entzündung verbunden [28]. Daher wurden TNF- -NO- und COX-II-PGE2-Wege als zwei Hauptströme von Entzündungsprozessen betrachtet, die durch Inhibitoren von iNOS (Kortikosteroiden) bzw. COX (NSAIDs) blockiert werden [22,29].
In der vorliegenden Studie die gleichzeitige Verabreichung von Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt reduzierte das Exsudatvolumen im Beutel, was darauf hindeutet, dass sie eine unterdrückende Aktivität gegen Gefäßleckagen besitzen (Abbildung 2A). Im Vergleich zu den individuellen Wirkungen von jedem Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt, verstärkte sich die Kombinationsbehandlung weiter, was bedeutet, dass die Wirkung der beiden Verbindungen synergistisch ist. Solche synergistischen Wirkungen zwischen Fucoidan und CT-Extrakt wurden durch ihre Aktivitäten auf die NO- und PGE2-Spiegel in den Exsudaten gestützt ( 3B und 2C ).
Interessanterweise wurde jedoch bestätigt, dass Fucoidan die Aktivierung von Makrophagen im In-vitro-Assay nicht direkt hemmt (Abbildung 1A). In ähnlicher Weise war das Hemmpotential von Fucoidan auf die NO- und PGE2-Akkumulation im Bioassay relativ geringer als das von CT(Cistanche tubulosa)extrahieren (Abbildungen 2B und 2C). Ein solcher Wirkungsmechanismus von Fucoidan unterscheidet sich von einer direkten Inaktivierung der Zellen durch CT-Extrakt (Abbildung 1B). Im Vergleich dazu übte Fucoidan eine hohe Wirksamkeit auf die Hemmung der Infiltration von Entzündungszellen in die Beutel aus (Tabelle 1). Fucoidan war dem CT-Extrakt bei der Blockierung der Migration von Neutrophilen, Monozyten und Lymphozyten zu den durch Carrageenan induzierten Gewebeverletzungsstellen überlegen. Interessanterweise gab es keinen synergistischen Antimigrationseffekt, was auf unterschiedliche Wirkungsmechanismen zwischen Fucoidan und CT-Extrakt hindeutet: dh Fucoidan blockiert die Infiltration von Entzündungszellen, während CT(Cistanche tubulosa)Extrakt hemmt die Aktivierung der Zellen.
Polymorphonukleäre Zellen, insbesondere Neutrophile, sind die wichtigsten zellulären Komponenten, die an durch Carrageenan induzierten akuten Entzündungsstellen rekrutiert werden. Darüber hinaus spielen auch nachfolgende Entzündungszellen wie Makrophagen und Lymphozyten eine zentrale Rolle im Entzündungsprozess, indem sie Zytokine sezernieren [22,30,31]. Bei Vorbehandlung mit Fucoidan oder CT(Cistanche tubulosa)Extrakt wurde die Anzahl der weißen Blutkörperchen, die in die mit Carrageenan injizierten Luftbeutel wanderten, deutlich unterdrückt. Dieses Ergebnis stimmte mit einer Wirkung überein, die durch Kortikosteroide wie Dexamethason, aber nicht durch NSAIDs einschließlich Indomethacin erzielt würde [23,30]. Daher wird angenommen, dass Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt haben zum Teil eine Eigenschaft von Steroiden.
Zusätzlich zu der blockierenden Wirkung auf die Chemotaxis von Entzündungszellen weist CT(Cistanche tubulosa)Extrakt schien die Aktivierung von Makrophagen zu unterdrücken. Dies wurde durch seine inhibitorischen Wirkungen auf NO in vitro und in vivo bestätigt, das der wichtigste Entzündungsmediator ist, der von Makrophagen produziert wird. Somit ist die Wirkung von CT(Cistanche tubulosa)Extrakt auf Makrophagen könnte auf eine Unterdrückung der mRNA-Expression und/oder eine direkte Hemmung der iNOS-Aktivität in diesen Zellen zurückzuführen sein.
PGE2 ist auch einer der wichtigsten Entzündungsmediatoren. Es nimmt parallel zum Gewebeödem zu, das durch NSAIDs, COX-Inhibitoren, unterdrückt wird [21,22]. Carrageenan kann die PGE2-Produktion steigern, indem es COX-II-mRNA und COX-II-Protein im Pouch-Exsudat induziert [32]. In diesem Modell erhöhte Carrageenan signifikant die Menge an PGE2 und wurde durch CT wesentlich unterdrückt(Cistanche tubulosa)Extrakt. Es ist interessant festzustellen, dass dieses Ergebnis mit einer Wirkung übereinstimmt, die durch ein NSAID Indomethacin erzielt würde [23]. Daher wird aus den Ergebnissen gefolgert, dass CT-Extrakt die zusätzliche Eigenschaft von NSAIDs hat. Zusammengenommen wird angenommen, dass CT(Cistanche tubulosa)Extrakt übte sowohl Corticosteroid- als auch NSAID-ähnliche Wirkungen im Carrageenan-induzierten Entzündungsmodell aus, und Fucoidan verstärkte dieAntiphlogistikumWirkungen von CT-Extrakt durch Blockieren der Infiltration von Entzündungszellen.
Obwohl die Definition des genauen Wirkungsmechanismus weiterer Studien bedarf, ist eine Mischung aus Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa) extrahieren deutlich abgeschwächte Entzündungszeichen durch Blockieren der TNF-NO- und COX-II-PGE2-Wege bei Carrageenan-induzierter Luftbeutelentzündung. Diese Befunde belegen, dass eine Kombinationsbehandlung von Fucoidan und CT(Cistanche tubulosa)Extrakt könnte ein vielversprechender Kandidat für die Linderung verschiedener Arten von Entzündungen sein, die auf Kortikosteroide oder NSAIDs ansprechen.
Verweise
1. Tag R. Nebenwirkungen von TNF-Inhibitoren bei rheumatoider Arthritis. Lancet 2002; 359(9306): 540-541.
2. Feldmann M., Brennan FM, Maini RN. Rolle von Zytokinen bei rheumatoider Arthritis. Annu Rev. Immunol. 1996; 14: 397-400.
3. Eigler A, Sinha B, Hartmann G, Endres S. Zähmung von TNF: Strategien zur Zurückhaltung dieses proinflammatorischen Zytokins. Immunol Today 1997;18(10): 487-492.
4. Ershler WB, Keller ET. Altersbedingte erhöhte Interleukin-6-Genexpression, Krankheiten im fortgeschrittenen Alter und Gebrechlichkeit. Annu Rev Med2000; 51: 245-270.
5. Adams V, Nehrhoff B, Späte U, Linke A, Schulze PC, Baur A, Gielen S, Hambrecht R, Schuler G. Induktion der iNOS-Expression im Skelettmuskel durch IL-1- und NFκB-Aktivierung: ein in vitro-Andin vivo-Studie. Cardiovasc Res 2002; 54(1): 95-104.
6. QW Xie, R. Whisnant, C. Nathan. Promoter des Mausgens, das Calcium-unabhängige Stickoxid-Synthase codiert, verleiht Induzierbarkeit durch Interferon und bakterielles Lipopolysaccharid. JExpMed 1993; 177(6): 1779-1784.
7. Yui Y, Hattori R, Kosuga K, Aizawa H, Hiki K, Kawai C. Reinigung der Stickoxidsynthase aus Rattenmakrophagen. J BiolChem 1991; 266(19): 12544-12547.
8. Marletta MA, Yoon PS, Iyengar R, Leaf CD, Wishnok JS.Makrophagenoxidation von L-Arginin zu Nitrit und Nitrat: Stickstoffmonoxid ist ein Zwischenprodukt. Biochemie 1998; 27(24): 8706-8711.
9. Moncada S, Palmer RM, Higgs EA. Stickoxid: Physiologie, Pathophysiologie und Pharmakologie. Pharmacol. Rev. 1991; 43(2):109-142.
10. Pang L, Hoult JR. Zytotoxizität gegenüber Makrophagen von Tetrandrin, einem Alkaloid gegen Silikose, begleitet von einer Überproduktion von Prostaglandinen. Biochem Pharmacol 1997; 53(6): 773-782.
11. Hunskaar S, Hole K. Der Formalintest bei Mäusen: Dissoziation zwischen entzündlichen und nicht entzündlichen Schmerzen. Schmerz 1987; 30:103-114.
12. Lester RS, Knowles SR, Shear NH. Die Risiken der systemischen Anwendung von Kortikosteroiden. Dermatol Clin 1998; 16(2): 277-288.
13. Lichtenstein DR, Syngal S, Wolfe MM. NichtsteroidalAntiphlogistikumMedikamente und Magen-Darm-Trakt. Das zweischneidige Schwert. Arthritisrheuma 1995; 38(1): 5-18.
14. Mukherjee D, Nissen SE, Topol EJ. Risiko kardiovaskulärer Ereignisse im Zusammenhang mit selektiven COX-2-Hemmern. JAMA 2001; 286(8):954-959.
15. Feldman SC, Reynaldi S, Stortz CA, Cerezo AS, Damont EB. Antivirale Eigenschaften von Fucoidan-Fraktionen aus Leathesiadifformis. Phytomedizin 1999; 6(5): 335-340.
16. Wang J, Zhang Q, Zhang Z, Song H, Li P. Potenzielle antioxidative und gerinnungshemmende Kapazität von Fucoidan-Fraktionen mit niedrigem Molekulargewicht, die aus Laminaria japonica extrahiert wurden. Int. J. Biol. Macromol2010; 46(1): 6-12.
17. Bojakowski K, Abramczyk P, Bojakowska M, Zwoliñska A, Przybylski J, Gaciong Z. Fucoidan verbessert den renalen Blutfluss im frühen Stadium der renalen Ischämie/Reperfusionsverletzung bei der Ratte. JPhysiol Pharmacol 2001; 52(1): 137-143.
18. Li N, Zhang Q, Song J. Toxikologische Bewertung von Fucoidan, das aus Laminaria japonica in Wistar-Ratten extrahiert wurde. Lebensmittel ChemToxicol 2005; 43(3): 421-426.
19. P. Yamada, R. Iijima, J. Han, H. Shigemori, S. Yokota, H. Isoda. Inhibitorische Wirkung von aus Cistanche tubulosa isoliertem Acteosid auf die Freisetzung chemischer Mediatoren und die Produktion von entzündlichen Zytokinen durch RBL-2H3- und KU812-Zellen. PlantaMed 2010; 76(14): 1512-1518.
20. Shin S, Jeon JH, Park D, Jang JY, Joo SS, Hwang BY, Choe SY, Kim YB.AntiphlogistikumEffekte eines Ethanolextrakts von Angelica gigas in einem Carrageenan-Air-Pouch-Entzündungsmodell.Exp Anim 2009; 58(4): 431-436.
21. Hevel JM, Marletta MA. Stickoxid-Synthase-Assays. MethodenEnzymol 1994; 233: 250-258.
22. Romano M., Faggioni R., Sironi M., Sacco S., Echtenacher B., DiSanto E., Salmona M., Ghezzi P. Rolle des Tumornekrosefaktors. Mediators Inflamm 1997; 6(1): 32-38.
23. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. LimitedAntiphlogistikumWirksamkeit der Cyclooxygenase-2-Hemmung bei Carrageenan-Air-Pouch-Entzündung. Br. J. Pharmacol. 1999; 126(5): 1200-1204.
24. Guslandi M. Stickoxid und entzündliche Darmerkrankungen. Eur. J. Clin. Invest. 1998; 28(11): 904-907.
25. Ritchlin CT, Haas-Smith SA, Li P, Hicks DG, Schwarz EM. Mechanismen der TNF- -- und RANKL-vermittelten Osteoklastogenese und Knochenresorption bei Psoriasis-Arthritis. J Clin Invest 2003;111(6): 821-831.
26. Minghetti L. Cyclooxygenase-2 (COX-2) bei entzündlichen und degenerativen Hirnerkrankungen. J Neuropathol Exp Neurol 2004;63(9): 901-910.
27. St-Onge M, Flamand N, Biarc J, Picard S, Bouchard L, Dussault AA, Laflamme C, James MJ, Caughey GE, Cleland LG, Borgeat P, Pouliot M. Characterization of prostaglandin E2 generation through the cyclooxygenase (COX){ {3}} Signalweg in menschlichen Neutrophilen.Biochim Biophys Acta 2007; 1771(9): 1235-1245.
28. Choi YH, Park HY.AntiphlogistikumWirkungen von Spermidin in Lipopolysaccharid-stimulierten BV2-Mikrogliazellen. JBiomed Sci2012; 19:31.
29. Wallace JL, Chapman K, McKnight W. LimitedAntiphlogistikumWirksamkeit der Cyclooxygenase-2-Hemmung bei Carrageenan-Air-Pouch-Entzündung. Br. J. Pharmacol. 1999; 126(5): 1200-1204.
30. Oliveira de Melo J, da Conceição Torrado Truiti M, Muscará MN, Bolonheis SM, Dantas JA, Caparroz-Assef SM, Cuman RK, Bersani-Amado CA.AntiphlogistikumAktivität von Rohextrakt und Fraktionen von Nectandra falcifolia-Blättern. Biol Pharm Bull2006; 29(11): 2241-2245.
31. RC Zanardo, V Brancaleone, E Distrutti, S Fiorucci, G Cirino, JL Wallace. Schwefelwasserstoff ist ein endogener Modulator der Leukozyten-vermittelten Entzündung. FASEB J 2006; 20(12): 2118-2120.
32. JL Masferrer, BS Zweifel, PT Manning, SD Hauser, KM Leahy, WG Smith, PC Isakson, K SeibertAntiphlogistikumund nonulc erogen. Proc Natl Acad Sci USA 1994; 91(8): 3228-3232.
