Die Vorteile von Acteosid - Glioblastom behandeln

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TAE WOONG HWANG;DONG HUN KIM; DA BI KIM1;TAE WON JANG;GUN‑HWA KIM;MINHO MOON;KYUNG AH YOON;DAE EUN CHO;JAE HO PARK;JWA‑JIN KIM

1. Einleitung

Glioblastomist die häufigste Art von bösartigem primärem Hirntumor und der invasivste und verheerendste primäre Hirntumor (1,2) mit einer mittleren Überlebensrate von ~18 Monaten bei aggressiver multimodaler Therapie. Aktuelle Behandlungsentscheidungen sind begrenzt und umfassen Bestrahlung, Chemotherapie und Operation in Kombination mit dem alkylierenden Wirkstoff Temozolomid (TMZ) (3,4). Trotz der Verfügbarkeit von aggressiven Therapien, Patienten mitGlioblastomhaben im Allgemeinen eine schlechte Prognose (5). TMZ ist das wichtigste Chemotherapeutikum, das in der klinischen Behandlung von bösartigen Erkrankungen eingesetzt wirdGlioblastom(6-8); als Alkylierungsmittel in der Reihe ist es in der Lage, die Blut-Hirn-Schranke zu durchdringen (9-11). Während des Fortschreitens des malignen Glioblastoms und einer ausgedehnten Invasion im gesamten Gehirn verringert eine stetig zunehmende Arzneimittelresistenz gegen TMZ seine therapeutische Wirksamkeit (12,13). Dementsprechend sollen neuartige Therapeutika entgegenwirkenGlioblastomwerden dringend gesucht.

Frühere Studien haben berichtet, dass Gliomzellen als Reaktion auf TMZ einen Zelltod durch Autophagie oder einen programmierten Zelltod vom Typ II erfahren (14,15). Die Autophagie kann durch 3‑Methyladenin (3‑MA) gehemmt werden, indem die Mikrotubuli-assoziierte leichte Kette 3 des Proteins 1 (LC3)‑I in LC3‑II umgewandelt und somit reduziert wirdGlioblastomZelltod (16,17); Die Rolle der Autophagie hängt jedoch vom zellulären Kontext ab. Mit Ausnahme einer zytotoxischen Rolle während der TMZ-Wirkung ist die Induktion der Autophagie durch zellulären Stress ein zytoprotektiver Prozess, der stressinduzierte zytoplasmatische Aggregate, Organellen und Makromoleküle in Säugetierzellen durch das lysosomale System eliminiert. Zellen, die an der Aufrechterhaltung der Homöostase beteiligt sind, erhalten wiederum Energie durch diese katabolischen Prozesse (18,19). Die komplexen Rollen der Autophagie deuten darauf hin, dass ein Autophagie-Aktivator in Kombination mit einer TMZ-Behandlung durch Induktion krebshemmende Wirkungen haben kannGlioblastomZellautophagie, ohne schädliche Wirkungen auszuüben oder normalen Geweben Vorteile zu verschaffen. Bemerkenswert ist, dass TMZ in Kombination mit Vitamin D synergistische therapeutische Wirkungen gezeigt hat, einschließlich einer unterdrückten Zelllebensfähigkeit und einer verbesserten AutophagieGlioblastomZellen. Darüber hinaus hat sich gezeigt, dass die Kombination von TMZ und Vitamin D in vivo krebshemmende Wirkungen ausübt, einschließlich einer verringerten Tumorgröße und einer verlängerten Überlebensrate. Diese Studien legen nahe, dass eine Kombinationsbehandlung synergistische Antikrebswirkungen über autophagische Mechanismen bei TMZ-basierten Arzneimitteln haben kannGlioblastomTherapie (15).

Acteosidist ein Phenylethanoidglykosid, das in mehreren tonisierenden traditionellen chinesischen Kräutermedizinen weit verbreitet ist (20,21). Eine Reihe von pharmakologischen Wirkungen, darunter antioxidative, krebshemmende, entzündungshemmende, antinephritische und antimetastatische Wirkungen, wurden in Verbindung gebrachtActeosid(22-24). Das haben frühere Studien gezeigtActeosidhat schützende Wirkungen gegen Tetrachlorkohlenstoff- und D-Galactosamin-induzierte Leberschäden. Die Mechanismen, die den Schutzwirkungen von Acteosid zugrunde liegen, hängen wahrscheinlich mit seiner Fähigkeit zusammen, die P450-vermittelte Bioaktivierung und die Wirkung des Abfangens freier Radikale, die durch Tetrachlorkohlenstoff-Exposition induziert werden, zu hemmen (25,26).

Daher deuten Beweise darauf hin, dass beides der Fall istActeosidund TMZ induzieren Antikrebswirkungen durch Zelltod. Ihre Assoziation und Antikrebswirkungen im Zusammenhang mitGlioblastomsind noch zu klären. Daher war das Ziel der vorliegenden Studie, die synergistische Antikrebswirkung von zu verifizierenActeosidkombiniert mit TMZ inGlioblastomTherapie. Ein Zellviabilitätsassay wurde durchgeführt, um die Antikrebswirkungen der Kombinationsbehandlung bei C6 zu analysierenGlioblastomZellen (eine RatteGlioblastomZelllinie) und die Ergebnisse wurden mit denen nach der Behandlung mit TMZ allein verglichen. Um den Mechanismus des Zelltods weiter zu untersuchen, der durch die gleichzeitige Behandlung mit verursacht wirdActeosidund TMZ, Apoptose und Autophagie-bezogene Gene in C6-Zellen untersucht.

Acteosid Antitumor

2. Materialien und Methoden

Zellkultur:

Die C6-RatteGlioblastomZelllinie wurde von der American Type Culture Collection (Rockville, MD, USA) erworben. Die Zellen wurden unter sterilen Bedingungen bei 37 °C in einer feuchten Umgebung mit 5 Prozent CO2 in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM), ergänzt mit 10 Prozent fötalem Rinderserum (FBS) und 1 Prozent Antibiotika und Antimykotika (alle Welgene, Daegu , Südkorea).

Pflanzenmaterial:

Abeliophyllum distichum Nakai [Gutschein-Nr. Park1001(ANH)] wurde im Themenpark Misun-hyang, Seongbul-Mountain Recreation Forest, Korea, gesammelt.

Kallus-Induktion:

Zur Induktion der Kallusbildung (27) wurden 1 cm2 große Blattexplantate aus den frischen Pflanzen isoliert. Das Explantat wurde auf Murachige- und Skoog-Medium (4 % Saccharose, 0,9 % Agar, ergänzt mit 1 mg/l Naphthalinessigsäure und 1 mg/l 2,4‑Dichlorphenoxyessigsäure, pH 5,7) kultiviert 25˚C. Der Kallus wurde 20 Tage später induziert. Eine ausreichende Menge anActeosidwurde durch Subkultur zur Abtrennung und Reinigung erhaltenActeosidaus dem Kallus (Abb. 1). Verschiedene Chargen gereinigtActeosidwurden in jedem Experiment verwendet. Jedes Experiment wurde dreimal unter Verwendung einer anderen Charge durchgeführt.

Isolierung und Reinigung:

Die Ethylacetatfraktionen wurden im Vakuum eingeengt und als Probe für die Reinigung von Acteosid verwendet.Acteosidwurde mit dem Accelerated Chromatographic Isolation System (Isolera™ Spektra, Biotage, Uppsala, Schweden) unter Verwendung von SNAP KPHOSPHO‑SIL und SNAP Ultra Cartridges (Biotage) isoliert und gereinigt. DasActeosidaus dem Kallus gereinigt wurde unter Verwendung des Standard-Acteosids durch HPLC-PDA-Analyse quantitativ analysiert. Schließlich wurde Akteosid mit einer Reinheit von mindestens 95 Prozent aus dem Kallus gewonnen und als Probe für eine Chemotherapie auf Temozolomid-Basis verwendetGlioblastom.

3-(4,5-Dimethylthiazol-2-l)-,5-Diphenyltetrazoliumbromid (MTT)-Assay:

Um die halbmaximale TMZ-Hemmkonzentration (IC50-Wert) gegen C6-Zellen zu identifizieren, wurden 1 x 104 Zellen in Einzelzellsuspensionen in einzelne Vertiefungen von 96-Well-Platten ausgesät und vor der TMZ-Behandlung bei der angegebenen Temperatur 24 h bei 37 °C inkubiert Konzentrationen (1, 5, 10 und 20 mM) bei 37 °C für 24 h. Nach der Bestimmung des TMZ-IC50-Wertes von 5 mm wurden die Zellen für 24 h mit 5 mM TMZ, 50 µM, behandeltActeosid, oder eine Kombination der beiden (5 mM TMZ und 50 µMActeosid). MTT-Lösung (5 mg/ml) wurde zu jeder Vertiefung (10 &mgr;l) gegeben und bei 37°C für 2 h kultiviert. Anschließend wurde das Medium entfernt und DMSO wurde in einem Volumen von jeweils 200 &mgr;l zugegeben und bei Raumtemperatur für 30 min umgesetzt. Die Extinktion bei 595 nm wurde gemessen, um die Lebensfähigkeit der Zellen zu bestimmen.

Wundheilungsassay:

Eine C6-Zellsuspension in 1 ml wurde in einer Platte mit 12 Vertiefungen kultiviert und bis zur Konfluenz gezüchtet. Die Zellen wurden mit TMZ behandelt,Acteosid, oder TMZ plusActeosidund dann mit einer sterilen 10-µl-Pipettenspitze angekratzt, um eine künstliche Wunde zu erzeugen. Um 0 und 24 h nach der Wunde wurden digitale Bilder des Wundheilungsprozesses mit einem inversen Mikroskop aufgenommen. Die Zellmigration wurde quantifiziert, indem die Größe der Narbe bei 0 und 24 h unter Verwendung der Bildanalysesoftware ImageJ 1.43u/Java1.6.0_22 Software (NIH, Bethesda, Maryland, USA) gemessen wurde. Jedes Experiment wurde dreimal durchgeführt und die Messungen wurden dreifach durchgeführt.

Immunoblot:

Die C6-Zellen wurden mit TMZ behandelt,Acteosid, oder TMZ plusActeosidfür 24 Std. Die Zellen wurden auf Eis mit dem RIPA-Lysepuffer (25 mM Tris-HCl, pH 7,5, 15 0 mM NaCl, 1 % Nonidet P-40, 1 % Natriumdesoxycholat, 0,1 % SDS) lysiert ergänzt mit Protease- und Phosphatase-Inhibitoren-Cocktail (Roche, Basel, Schweiz) für 30 min. Nach 15-minütiger Zentrifugation bei 18.341 xg bei 4 °C wurde der Überstand erhalten. Die Proteinkonzentration wurde mit Bradford Protein Assays (Bio‑rad, Hercules, CA, USA) bestimmt. Gleiche Mengen an Gesamtproteinen (30 µg) wurden in einzelne Vertiefungen geladen und mittels Elektrophorese über eine 10-15-prozentige SDS-PAGE fraktioniert. Die Proteine ​​wurden auf Polyvinylidendifluoridmembranen (EMD Millipore, Bedford, MA, USA) elektrotransferiert. Nach Inkubation in Blockierungslösung mit 5 % fettfreier Milch in Tween/Tris-Puffer-Kochsalzlösung für 30 Minuten bei Raumtemperatur. Die Blots wurden mit 1:1 000-verdünnten Primärantikörpern (Kat.-Nr. 9662, Caspase 3; Cell Signaling Technology, Inc., Danvers, MA, USA), B0-Zell-Lymphom 2 (sc- 7382, Bcl-2), Bcl-2-assoziiertes X-Protein (Kat.-Nr. 2772, Bax), phosphoryliertes (p-)p53 (sc-101762), Gesamt-p53 (sc-6243), ‑Aktin (Kat.-Nr. 2772, Bax). 4970; alle; Santa Cruz Biotechnology, Inc., Dallas, TX, USA), LC-3 (L8918, Sigma; Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland), Rab7 (Kat.-Nr. 9367, Cell Signaling Technology, Inc. ), p62 (Kat. Nr. 114), p‑p38 (Kat. Nr. 9211), total‑p38 (Kat. Nr. 9212), p‑c‑Jun N‑terminale Kinase (Kat. Nr. 9251, S ‑JNK), total‑JNK (Kat. Nr. 9252), p‑extrazelluläre signalregulierte Kinase (Kat. Nr. 9101, p‑ERK), total‑ERK (Kat. Nr. 9102; alle Cell Signaling Technology, Inc .) über Nacht bei 4˚C. Anschließend erfolgte die Inkubation mit Meerrettichperoxidase-konjugierten sekundären Antikörpern (1:2, 000; LF-SA8001A, Ziege-Anti-Maus-IgG-HRP) oder LF-SA8002A (Ziege-Anti-Kaninchen-IgG-HRP), AB Frontier, Seoul, Korea.) für 2 h bei Raumtemperatur. Die Proteine ​​wurden dann sichtbar gemacht, indem sie Chemi‑Doc (Bio‑Rad Laboratories, Inc., Hercules, CA, USA) ausgesetzt wurden.

Immunfluoreszenzfärbung:

Lysosomal‑assoziiertes Membranprotein 1 (LAMP1) und LC3 sind Marker für lysosomal und Autophagie. Die Zellen (1 × 10 5 Zellen/Vertiefung) wurden auf sterilisierten Glasdeckgläsern (BD Biosciences, Franklin Lakes, NJ, USA) in dreifacher Ausfertigung präpariert. Nach der Behandlung mit TMZ,Acteosid, oder TMZ plusActeosidfür 24 h wurden die Zellen in 4 % Paraformaldehyd für 3 0 min fixiert, mit 5 % normalem Hühnerserum (S-3000; Vector Laboratories, Inc., Burlingame, CA, USA), 0,1 % Triton X blockiert -100 und dann 1 h zur Permeabilisierung und zur Blockierung unspezifischer Protein-Protein-Wechselwirkungen inkubiert. Die Zellen wurden dann mit Anti‑LAMP1 (1:200; sc‑19992, Santa Cruz Biotechnology, Inc.) und Anti‑LC3 (1:400; PM036, MBL International, Woburn, MA, USA) über Nacht bei 4° inkubiert C. Die Zellen wurden dann zweimal mit PBS gewaschen und für weitere 2 h im Dunkeln mit einer Mischung aus Alexa Fluor 488 und 594 sekundären Antikörpern (1:200; Alexa Fluor 488 (A‑11008) und 594 (A‑11007) inkubiert, Thermo Fisher Scientific, Inc., Waltham, MA, USA) und erneut mit PBS gewaschen. Die Kerne wurden mit 4,6-Diamidino-2-Phenylindol (Sigma; Merck KGaA) angefärbt und anschließend zweimal mit PBS gewaschen. Die Objektträger wurden dann montiert und Bilder wurden unter einem konfokalen Lasermikroskop LSM-700 aufgenommen.

Abbildung 1. Chemische Struktur von Acteosid.

Durchflusszytometrie.

Die Zellen wurden auf Mitotracker Green und MitoSOX durch Durchflusszytometrie unter Verwendung eines FACSCanto II-Durchflusszytometers, wie vom Hersteller (BD Biosciences) angegeben, analysiert. Nach zwei Waschgängen mit PBS wurden die Zellen in 4 % Paraformaldehyd für 3 0 min bei Raumtemperatur fixiert und mit 0,25 % Triton X-100 in PBS für 20 min permeabilisiert. Die Zellen wurden mit primären Antikörpern über Nacht bei 4 °C (1:200) und dann mit sekundären Antikörpern für 1 h auf Eis gefärbt. Nach zwei Waschgängen mit PBS wurden die Zellen in 4 % Paraformaldehyd fixiert und sofort getestet. Die Durchflusszytometriedaten wurden mit 10 000-Zellen gesammelt und mit der Software FlowJo 7.6.1 (Tree Star, Inc., Ashland, OR, USA) analysiert.

Statistische Analyse:

Alle Daten wurden mit GraphPad Prism 5.0 analysiert und sind als Mittelwert ± Standardfehler des Mittelwerts dargestellt. Die Daten wurden mit einer Einweg-Varianzanalyse mit Tukeys Mehrfachvergleichs-Post-hoc-Test für den Vergleich von Mittelwerten zwischen mehreren Gruppen analysiert. P<0.05 was="" considered="" to="" indicate="" a="" statistically="" significant="">

Cistanche Echinacosid: Anti-Apoptose

3. Ergebnisse

3.1 Co-Behandlung mit TMZ und Acteosid-SuppressorenGlioblastomZellproliferation und Migration.

Kombinierte Behandlung mit TMZ uActeosidhemmte die Lebensfähigkeit von C6-Zellen. TMZ verringerte die Lebensfähigkeit der Zellen in dosisabhängiger Weise (Abb. 2A), während Acteosid allein bei keiner Behandlungsmenge eine signifikante Wirkung hatte (Abb. 2B). Nach 24-stündiger Inkubation in einem Kulturmedium, das TMZ mit oder ohne Acteosid enthielt, wurde ein MTT-Assay durchgeführt, um die Zytotoxizität verschiedener Behandlungsstufen zu vergleichen. TMZ unterdrückte signifikant die Zelllebensfähigkeit, wohingegen Acteosid das Zellwachstum nicht signifikant unterdrückte. Die kombinierte Behandlung mit TMZ und Acteosid reduzierte die Lebensfähigkeit der Zellen deutlich (Abb. 2C). Die alleinige Anwendung von TMZ oder Acteosid reduzierte die Wundheilungsfähigkeit (Abb. 3A). Der Wundabstand (Prozent) wurde unter Verwendung der in Fig. 3A gezeigten Ergebnisse mit der ImageJ-Software gemessen. Der Wundabstand nahm nach der Kombinationsbehandlung (Abb. 3B) im Vergleich zu jeder Einzelbehandlung signifikant zu. Diese Ergebnisse zeigen, dass die gleichzeitige Behandlung mit TMZ und Acteosid ein wirksamer Inhibitor von warGlioblastomZellproliferation und Migration.

3.2 Acteosid und TMZ beeinflussen die Apoptose in C6-Zellen synergistisch.

Die Ergebnisse der Western-Blot-Analyse zeigten, dass die Konzentrationen von gespaltener Caspase-3, Bax und phosphoryliertem p53 nach einer Kombinationsbehandlung mit TMZ und niedriger und die Konzentrationen von Bcl-2 niedriger warenActeosidals nach einer Behandlung mit TMZ allein (Abb. 4A).Acteosid‑vermittelte mitochondriale Funktion und die Erzeugung von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS), die Schlüsselmediatoren der apoptotischen Signalübertragung sind, wurden dann in den TMZ‑behandelten C6‑Zellen beobachtet. Um die mitochondriale Masse zu verifizieren, wurde eine fluoreszenzaktivierte Zellsortierungsanalyse mit MitoTracker Green durchgeführt. Mitbehandlung mit TMZ uActeosidführte zu einer höheren mitochondrialen Masse als die Behandlung mit TMZ allein (Abb. 4B). Die ROS-Erzeugung war nach der gleichzeitigen Behandlung mit TMZ und Acteosid signifikant höher als nach der Behandlung mit TMZ allein (Abb. 4C). Diese Ergebnisse legen nahe, dass die ROS-Erzeugung und die mitochondriale Funktion bei der durch die Behandlung mit TMZ plus Acteosid induzierten Apoptose wichtig sind. Die gleichzeitige Behandlung mit TMZ und Acteosid induziert Autophagie in C6-Zellen. Es wurde berichtet, dass TMZ Autophagie induziert (28,29); Daher untersuchte die vorliegende Studie das Ausmaß, in dem Autophagie durch TMZ plus Acteosid-Behandlung induziert wurde. Die C6-Zellen wurden mit TMZ mit oder ohne Acteosid behandelt; nach 24 h, und die Zellen wurden für Immunfluoreszenz gefärbt, um LAMP1 und LC3 als Marker der Autophagie nachzuweisen. Höhere Expressionsniveaus von LAMP1 und LC3 wurden nach der Kombinationsbehandlung beobachtet (Fig. 5A). Die Autophagie-bezogene Proteinexpression wurde ebenfalls untersucht, und es wurde festgestellt, dass TMZ die Umwandlung von LC3-I zu LC3-II induziert, was eine Signatur der Autophagosomenbildung ist. Nach der gleichzeitigen Behandlung mit TMZ und Acteosid wurde eine höhere Umwandlungsrate von LC3-I zu LC3-II beobachtet als nach der Behandlung mit TMZ allein. Die Expressionsniveaus von Rab7 und p62 zeigten eine Autophagie-Induktion in den TMZ-behandelten Zellen an (Abb. 5B). Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die gleichzeitige Behandlung mit TMZ und Acteosid den autophagischen Prozess in verstärktGlioblastomZellen.

3.3 Acteosid induziert die Genexpression des MAPK-Signalwegs bei einer TMZ‑basierten Behandlung.

Frühere Studien haben gezeigt, dass TMZ den MAPK-Weg reguliert, einschließlich p38, JNK und ERK (30). Daher untersuchte die vorliegende Studie, obActeosidbeeinflusst die TMZ-bezogene MAPK-Genexpression. Die C6-Zellen wurden mit oder ohne TMZ behandeltActeosid. Nach 24 h führte die TMZ-Behandlung zu höheren Expressionsniveaus von p‑p38, p‑JNK und p‑ERK. Die Expression von TMZ‑regulierten Genen war nach der Behandlung mit TMZ plus Acteosid signifikant höher als nach der Behandlung mit TMZ allein (Abb. 6). Darauf deuten diese Beobachtungen hinActeosidbeeinflusst TMZ-basierte therapeutische Mechanismen über den MAPK-Signalweg.

Acteosid-Anti-Glioblastom

Diskussion

Die Ergebnisse der vorliegenden Studie belegen, dass die kombinierte Behandlung mit TMZ mitActeosidbietet therapeutisches Potenzial fürGlioblastomBehandlung und belegen, dass eine Chemosensibilisierung auf eine Kombination aus TMZ undActeosidkann durch Autophagieverstärkung auftreten. Als Mutation vonGlioblastomZellen können zu einer Inaktivierung des apoptotischen Signalwegs führen, der Induktion von Autophagie durch TMZ plusActeosidDie gemeinsame Behandlung kann eine alternative Methode für darstellenGlioblastomTherapie. Ob die Autophagie jedoch der einzige Mechanismus für istGlioblastomTherapie mit TMZ plusActeosidDie Mitbehandlung ist noch zu klären.

Autophagie ist ein wesentlicher zellulärer Mechanismus für den Abbau von Proteinen und zytoplasmatischen Organellen. Der katabole Vorteil der induzierten Autophagie kann unter Stressbedingungen wichtig sein; Daher kann die Induktion der Autophagie ein adaptiver Mechanismus zur Verhinderung des Zelltods sein (31-33). Frühere Studien haben berichtet, dass eine reduzierte Autophagie mit Krebs korreliert (34-36). Darüber hinaus werden mehrere Proteine ​​und Signalwege, die mit der Autophagie assoziiert sind, während der malignen Transformation dereguliert, was zu einer Verringerung der autophagischen Aktivität führt. Hohe Expressionsniveaus von LC3 wurden auch mit erhöhten Überlebensraten bei Patienten mit in Verbindung gebrachtGlioblastommit schlechten Leistungswerten (37,38). In ähnlicher Weise weisen die Ergebnisse der vorliegenden Studie darauf hin, dass die Wiederherstellung der normalen Autophagie eine latente Strategie für sein könnteGlioblastomTherapie, und kann als Mechanismus zur Einschränkung des abnormalen Tumorzellwachstums dienen.

Bei normaler Autophagie werden bestimmte zytoplasmatische Komponenten innerhalb von Autophagosomen isoliert, die dann mit einem Lysosom fusionieren, um abgebaut und recycelt zu werden (39,40). Wenn die Autophagie hochreguliert ist, übertreffen die Autophagosomenbildungsraten die lysosomalen Abbauraten; Dieser Zustand wird als autophagischer Stress bezeichnet. Wenn Stress oder abnormale Autophagie anhalten, kann der Zelltod durch Energiemangel oder Veränderungen im Beclin-1/Bcl-2-Gleichgewicht eintreten. Apoptose kann auch durch Autophagosomen-Hyperaktivität ausgelöst werden, die zytoplasmatische Organellen, einschließlich der Mitochondrien oder des endoplasmatischen Retikulums, verschlingt (41). Es wurde vermutet, dass allgemeine Autophagie den Zelltod während des normalen Zytoplasma- und Organellenumsatzes in gesunden Zellen induzieren kann. Dabei „kannibalisiert“ sich die Zelle von innen heraus, ein Schlüsselmerkmal des programmierten Zelltods vom Typ II. Obwohl die Mechanismen, durch dieActeosidverstärkt die therapeutische Wirkung von TMZ-basiertenGlioblastomTherapie noch vollständig aufgeklärt werden müssen, könnten die krebshemmenden Wirkungen der in der vorliegenden Studie untersuchten Kombinationsbehandlung mit diesen autophagischen Mechanismen in Verbindung gebracht werden.

Acteosidist ein aus Pflanzen gewonnenes Phenylethanoidglykosid (22,26). Frühere Studien haben über die verschiedenen biologischen Aktivitäten von Acteosid berichtet. Die Veränderungen der Expressionsniveaus von gespaltener Caspase-3 und LC3 in der vorliegenden Studie zeigen, dass die Behandlung mit einer Kombination aus TMZ undActeosidinduzierte Apoptose und Autophagie in C6-Zellen (Fig. 4 und 5). Es wurde gezeigt, dass die Kombinationsbehandlung eine synergistische Wirkung auf hatGlioblastomZellen. Obwohl andere mögliche Mechanismen dieser synergistischen Wirkungen noch aufgeklärt werden müssen, identifizierte die vorliegende Studie die Induktion der Autophagie als einen entscheidenden tumoriziden Mechanismus vonActeosidChemosensibilisierung während TMZ-basierterGlioblastomTherapie.

Acteoside behandeln Glioblastom

Verweise

1. Friedman HS, Kerby T und Calvert H: Temozolomid und Behandlung von malignem Gliom. Clinic Cancer Res 6: 2585-2597, 2000.

2. Mrugala MM und Chamberlain MC: Krankheitsmechanismen: Temozolomid undGlioblastom-schau in die Zukunft. Nat Clin Pract Oncol 5: 476-486, 2008.

3. Agarwala SS und Kirkwood JM: Temozolomid, ein neuartiges Alkylierungsmittel mit Aktivität im Zentralnervensystem, kann die Behandlung von fortgeschrittenem metastasierendem Melanom verbessern. Onkologe 5: 144-151, 2000.

4. Stevens MF, Hickman JA, Stone R, Gibson NW, Baig GU, Lunt E und Newton cG: Antitumor Imidazotetrazines. 1. Synthese und Chemie von 8‑Carbamoyl‑3‑(2‑chlorethyl)imidazo[5,1‑d]‑1,2,3,5‑tetrazin‑4(3 H)‑on, einem neuartigen Breitband-Antitumor Agent. J. Med. Chem. 27: 196-201, 1984.

5. Fulda S: Zelltod‑basierte Behandlung vonGlioblastom. Zelltod dis 9: 121, 2018.

6. Chen PH, Shen WL, Shih CM, Ho KH, Cheng CH, Lin CW, Lee CC, Liu AJ und Chen KC: Der CHAC1-inhibierte Notch3-Weg ist an der Temozolomid-induzierten Gliom-Zytotoxizität beteiligt. Neuropharmakologie 116: 300-314, 2017.

7. Oshiro S, Tsugu H, Komatsu F, Ohmura T, Ohta M, Sakamoto S, Fukushima T und Inoue T: Wirksamkeit der Temozolomid-Behandlung bei Patienten mit hochgradigem Gliom. Anticancer Res 29: 911-917, 2009.

8. Van den Bent MJ: Adjuvante Behandlung von hochgradigen Gliomen. Ann Oncol 17 (Suppl 10): x186-x190, 2006.

9. Shen W, Hu JA und Zheng JS: Mechanismus der Temozolomid-induzierten Antitumorwirkung auf Gliomzellen. J Int Med Res 42: 164-172, 2014.

10. Barciszewska AM, Gurda D, Głodowicz P, Nowak S und Naskręt-Barciszewska MZ: Ein neuer epigenetischer Mechanismus der Temozolomid-Wirkung in Gliomzellen. PLoS One 10: e0136669, 2015.