Zeitliche Dauerhaftigkeit übungsinduzierter Vorteile auf das Hippocampus-abhängige Gedächtnis und die synaptische Plastizität bei weiblichen Mäusen Teil 1

Abstrakt

Bewegung fördert die Neurogenese und Neuroplastizität des Hippocampus, was wiederum die kognitive Funktion fördert. Unsere früheren Studien haben gezeigt, dass freiwillige körperliche Betätigung bei männlichen Mäusen das vom Schiffpocampus abhängige Lernen unter Bedingungen ermöglicht, die bei sesshaften Tieren normalerweise unterhalb der Schwelle für die Bildung von Langzeitgedächtnissen liegen. Eine solche kognitive Verbesserung kann lange nach Beendigung des Trainings aufrechterhalten und durch eine nachfolgende Trainingseinheit unterhalb der Schwelle wieder aktiviert werden, was darauf hindeutet, dass die durch das Training verursachten Vorteile zeitlich dynamisch sind.

Unter Neuroplastizität versteht man die Fähigkeit von Neuronen, sich kontinuierlich an äußere Reize und innere Aktivitäten anzupassen. Diese Fähigkeit spielt eine entscheidende Rolle bei der Gedächtnisbildung und -speicherung. Allerdings hängt die Neuroplastizität eng mit dem Gedächtnis zusammen.

Neuroplastizität entsteht durch synaptische Verbindungen zwischen Neuronen. Wenn wir etwas Neues erhalten, verändern sich die Verbindungen zwischen den Neuronen im Gehirn und bilden neue synaptische Verbindungen. Dieser Prozess erfordert wiederholtes Üben und Wiederholen, um langfristige und stabile synaptische Verbindungen herzustellen. Nur diese langfristige synaptische Verbindung kann das Gedächtnis beeinflussen und speichern.

Auch die Neuroplastizität verändert sich mit dem Alter und der Erfahrung. Die Neuroplastizität ist in jungen Jahren sehr stark und das Gehirn kann sehr schnell neue synaptische Verbindungen bilden, wenn wir neue Dinge lernen. Mit zunehmendem Alter nimmt jedoch die Neuroplastizität ab, was bedeutet, dass es schwieriger wird, neue Informationen zu lernen. Wenn wir jedoch eine positive Einstellung sowie die Bereitschaft und Gewohnheit bewahren, proaktiv neue Dinge zu lernen, können wir dennoch ein gewisses Maß an Neuroplastizität aufrechterhalten. Das bedeutet, dass wir weiter lernen und wachsen und unser Gedächtnis und unsere Intelligenz verbessern können.

Zusammenfassend lässt sich sagen, dass Neuroplastizität und Gedächtnis eng miteinander verbunden sind. Die Aufrechterhaltung einer positiven Einstellung und die Gewohnheit, sich aktiv neues Wissen anzueignen, können uns helfen, eine gute Neuroplastizität aufrechtzuerhalten und dadurch ein besseres Gedächtnis und eine bessere Intelligenz zu erreichen. Lasst uns unablässig lernen, eine positive Einstellung bewahren und unsere Fähigkeiten und Qualitäten ständig verbessern. Es ist ersichtlich, dass wir unser Gedächtnis verbessern müssen. Cistanche deserticola kann das Gedächtnis erheblich verbessern, da Cistanche deserticola ein traditionelles chinesisches Arzneimittel mit vielen einzigartigen Wirkungen ist, darunter die Verbesserung des Gedächtnisses. Die Wirksamkeit von Hackfleisch beruht auf den verschiedenen darin enthaltenen Wirkstoffen, darunter Säure, Polysaccharide, Flavonoide usw. Diese Inhaltsstoffe können die Gesundheit des Gehirns auf verschiedene Weise fördern.

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Bei Frauen müssen das Ausmaß, in dem die Vorteile von Bewegung aufrechterhalten werden können, und die Mechanismen, die dieser Aufrechterhaltung zugrunde liegen, noch definiert werden. Hier untersuchten wir die Trainingsparameter, die erforderlich sind, um die Vorteile des Trainings bei weiblichen C57BL/6J-Mäusen zu initiieren und aufrechtzuerhalten. Mithilfe einer Sub-Threshold-Version der Hippocampus-abhängigen Aufgabe namens Object-Location Memory (OLM) zeigen wir, dass 14 Tage freiwilliger Übung das Lernen unter Sub-Threshold-Erwerbsbedingungen bei weiblichen Mäusen ermöglichen. Nach der anfänglichen Belastung führt eine 7-tägige sitzende Verzögerung zu einer verminderten Leistung, die wieder ausgeglichen werden kann, wenn die Tiere nach der sesshaften Verzögerung zwei Tage lang reaktivierende Übungen erhalten.

Die Beurteilung des Östruszyklus zeigt eine erhöhte Radlaufaktivität während der Östrusphase im Vergleich zur Östrusphase, wohingegen die Östrusphase beim Training oder Test keinen Einfluss auf die OLM-Leistung hatte. Unter Verwendung derselben Trainingsparameter zeigen wir, dass 14 Tage Training die Langzeitpotenzierung verbessern ( LTP) in der CA1-Region des Hippocampus, ein Effekt, der während der gesamten Zahnverzögerung und nach der reaktivierenden Trainingseinheit anhält. Frühere Studien haben eine durch körperliche Betätigung induzierte BDNF-Hochregulierung als Mechanismus vorgeschlagen, der den durch körperliche Betätigung vermittelten Vorteilen für die synaptische Plastizität und Kognition zugrunde liegt.

Unsere Bewertung der Bdnf-mRNA-Expression im Hippocampus nach dem Abrufen des Gedächtnisses zeigt jedoch keinen Unterschied zwischen Belastungsbedingungen und Kontrolle, was darauf hindeutet, dass eine anhaltende Bdnf-Hochregulierung für die Aufrechterhaltung der durch körperliche Betätigung verursachten Vorteile möglicherweise nicht erforderlich ist. Zusammenfassend deuten unsere Daten darauf hin, dass 14 Tage freiwilliges Training bei weiblichen Mäusen dauerhafte Vorteile für die Neuroplastizität und die kognitive Funktion auslösen können, was den ersten Beweis für die zeitliche Dauerhaftigkeit der durch Training verursachten Vorteile bei Frauen liefert.

Schlüsselwörter

Übung; Lernen; HalloPPocampus; Synaptische Plastizität; BDNF; Brunstzyklus.

1. Einleitung

Die Auswirkungen körperlicher Betätigung auf die Unterstützung und Erhaltung der Gehirngesundheit sind gut dokumentiert. Im Gehirn ist der Hippocampus von entscheidender Bedeutung für das Lernen und die Gedächtnisbildung, da eine Störung dieser Gehirnstruktur zu Gedächtnisstörungen führt (Packard & McGaugh, 1996; Riedel et al., 1999; Scoville & Milner, 1957). Daher werden abweichende morphologische und funktionelle Veränderungen im Hippocampus auf kognitive Beeinträchtigungen im Zusammenhang mit Alterung und Krankheitszuständen zurückgeführt (Bettio et al., 2017).

Studien sowohl an Menschen (ten Brinkeet al., 2015; Erickson et al., 2011; Pajonk et al., 2010; Teixeira et al., 2018) als auch an Tiermodellen (Cooper et al., 2018; Neeper et al., 1996; O'Callaghan et al., 2007; Van Praag, 2008) haben die Auswirkungen von Bewegung auf die Unterstützung der strukturellen und funktionellen Integrität des Hippocampus gezeigt, was darauf hindeutet, dass körperliche Bewegung eine wirksame nicht-pharmakologische Intervention bei kognitiven Beeinträchtigungen sowohl bei physiologischen als auch bei pathologischen Zuständen ist (Intlekofer). & Cotman, 2013; Lauretta et al., 2021; Liu et al., 2011; Muscari et al., 2010).

Trotz umfassender Forschung zu den positiven Auswirkungen von Bewegung und der Beziehung zwischen dem Hippocampus und der kognitiven Funktion ist wenig über die zeitliche Dynamik der durch Bewegung verursachten Vorteile bekannt. Das heißt, wie lange muss das Training dauern, um die Funktion des Hippocampus zu verbessern, und wie lange bleiben diese Vorteile bestehen, nachdem das Training aufgehört hat?

Noch weniger Studien haben versucht, die molekularen Mechanismen zu untersuchen, die der Aufrechterhaltung der durch körperliche Betätigung hervorgerufenen Vorteile zugrunde liegen. Angesichts der Tatsache, dass Trainingsprogramme beim Menschen weniger starr und konsistent sind als diejenigen, die in Tierstudien verwendet werden (Lee & Skerrett, 2001), ist es wichtig, Trainingsprotokolle zu entwickeln, die flexibel sind und keine tägliche Trainingsroutine erfordern, aber dennoch die durch körperliche Betätigung hervorgerufenen kognitiven Fähigkeiten aktivieren und aufrechterhalten können Vorteile. In Tierversuchen ist es schwierig, die minimale Trainingsdauer zu ermitteln, die erforderlich ist, um die Vorteile des Trainings zu initiieren und aufrechtzuerhalten, da die Trainingsprotokolle in den verschiedenen Studien erheblich variieren (Loprinzi et al., 2019). Daher bleibt es wichtig, die Belastungsschwelle zu untersuchen, die kognitive Vorteile hervorruft und aufrechterhält, sowie die zugrunde liegenden Mechanismen.

Bewegung fördert Neuroplastizität, Neurogenese und in der Folge Lernen und Gedächtnis durch Mechanismen, die die neurotrophe Wirkung des aus dem Gehirn stammenden neurotrophen Faktors (BDNF) im Hippocampus induzieren (Alomari et al., 2013; Cotman et al., 2007; Cotman & Berchtold, 2002; Ding et al., 2011; Triviño-Paredes et al., 2016; Van Praag, Christie, et al., 1999; Van Praag, Kempermann, et al., 1999). Sowohl bei weiblichen als auch bei männlichen Nagetieren verbessert Bewegung die Verhaltensleistung bei einer Vielzahl von Gedächtnisaufgaben, einschließlich der stark räumlich orientierten, Hippocampus-basierten Aufgaben: Morris Water Maze (MWM), Object-Location-Memory (OLM) und Radialarmlabyrinth sowie andere Hippocampus-basierte Gedächtnisaufgaben wie kontextuelle Angstkonditionierung, passive Vermeidung und Erkennung neuartiger Objekte (Intlekofer et al., 2013; Lambert et al., 2005; O'Callaghan et al., 2007; Van Praag, Christie et al., 1999; Van Praag, Kempermann et al., 1999; Vivar, Potter & Van Praag, 2012).

Bei männlichen Nagetieren haben unsere Studien und andere herausgefunden, dass eine minimale Trainingsdauer von 2 Wochen erforderlich ist, um Lern- und Gedächtnisvorteile zu erzielen, die über eine Zeit der Inaktivität aufrechterhalten und durch die Wiedereinführung einer kurzen, unterschwelligen 2-tägigen Trainingseinheit wieder aktiviert werden können (Berchtold et al., 2010; Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013). Auf molekularer Ebene führt zweiwöchiges Training bei männlichen Ratten zu einer Hochregulierung des aus dem Gehirn des Hippocampus stammenden neurotrophen Faktorproteins (Berchtold et al., 2005).

Nach dem Abfall der erhöhten BDNF-Werte auf den Ausgangswert kann eine anschließende Wiedereinführung einer kurzen, unterschwelligen 2-tägigen Trainingseinheit wieder zu erhöhten BDNF-Werten im Hippocampus führen (Berchtold et al., 2005). Dies deutet darauf hin, dass eine durch körperliche Betätigung vermittelte BDNF-Hochregulation ein potenzieller Mechanismus ist, der langanhaltende neuronale Veränderungen hervorruft, um einen Stimulus mit geringerer Belastungsfrequenz zu ermöglichen, um von diesen Anpassungen zu profitieren und kognitive Vorteile zu ermöglichen.

Die BDNF-Signalübertragung fördert von der Proteinsynthese abhängige Mechanismen, um die Hippocampus-Langzeitpotenzierung (LTP) zu induzieren, ein zelluläres Korrelat von Lernen und Gedächtnis (Panja & Bramham, 2014; Silva, 2003). Daher wird vermutet, dass die Verbesserung der Hippocampus-LTP nach dem Training dem durch Bewegung erleichterten Lernen zugrunde liegt (L. Bettio et al., 2019; Liuet al., 2011). Unseres Wissens hat bisher keine Studie untersucht, ob eine Verbesserung des LTP nach Beendigung des Trainings bei beiden Geschlechtern anhält. Mehrere Studien haben gezeigt, dass körperliche Betätigung die LTP im Gyrus dentatus effizient steigert (Farmer et al., 2004; Van Praag, Christie et al., 1999; Vasuta et al., 2007), es gibt jedoch überraschend wenig Forschung, die untersucht, wie körperliche Betätigung funktioniert moduliert die synaptische Plastizität im CA1-Unterfeld (Cotman et al., 2007), das im Kontext des räumlichen Gedächtnisses als der am meisten untersuchte Bereich im Hippocampus dient (Patten et al., 2015). Daher muss der Zusammenhang zwischen Bewegung und CA1-Plastizität noch untersucht werden.

Mehrere Studien haben die Hypothese gestützt, dass übungsbedingte Vorteile zeitlich dynamisch sind (Berchtold et al., 2005, 2010; Butler et al., 2019; YP Kim et al., 2003). Bei weiblichen Tieren ist unser Verständnis dieses Prozesses weniger ausgeprägt, da die meisten Arbeiten hauptsächlich an männlichen Tieren durchgeführt wurden. Studien zu Lernen und Gedächtnis haben Hinweise darauf geliefert, dass ähnliche Verhaltensergebnisse zwischen den Geschlechtern unterschiedliche neuronale Mechanismen beinhalten könnten (Becker & Koob, 2016; Keiser & Wood, 2019; Sase et al., 2019). Obwohl Daten darauf hindeuten, dass Bewegung die Neuroplastizität und die Kognition bei beiden Geschlechtern verbessert, gibt es eindeutige Belege für die geschlechtsspezifischen Auswirkungen von Bewegung und die zugrunde liegenden Mechanismen.

Bei Unmenschen verbessert Bewegung das Objekt-Ort-Gedächtnis bei Männern und nicht bei Frauen (Colemanet al., 2018). Bei Nagetieren verbessert Bewegung selektiv die Leistung eines Geschlechts bei bestimmten Gedächtnisaufgaben (Barha et al., 2017). Auf molekularer Ebene ist die Verteilung von BDNFa über mehrere Gehirnstrukturen und Subregionen des Hippocampus hinweg bei den Geschlechtern unterschiedlich (Bakos et al., 2009; Franklin & Perrot-Sinal, 2006). Immer mehr Beweise haben auch geschlechtsspezifische Unterschiede in den Funktionen und Mechanismen von BDNF hervorgehoben (Chan & Ye, 2017). Beispielsweise kann das Fortpflanzungshormon Östrogen die BDNF-Expression durch verschiedene Mechanismen regulieren, von denen einer epigenetische Modifikationen am BDNF-Promotor beinhaltet (Fortress et al., 2014; Moreno-Piovano et al., 2014; Chan & Ye, 2017).

Die BDNF-Proteinspiegel im Hippocampus variieren über den Östruszyklus hinweg, wobei die höchste Expression während Östrus und Proöstrus beobachtet wird, was darauf hindeutet, dass Schwankungen der Östrogenspiegel während des Östruszyklus bei Frauen die BDNF-Expression unterschiedlich beeinflussen (Scharfman et al., 2003). Darüber hinaus kann der Brunstzyklus auch Ziele stromabwärts der BDNF-Signalwege im Hippocampus modulieren (Spencer et al., 2008; Spencer-Segal et al., 2011). Auch die Expression mehrerer Gene, die an der Funktion des Hippocampus beteiligt sind, unterliegt im Laufe des Östruszyklus dynamischen Veränderungen (Iqbal et al., 2020). Insgesamt unterstreichen diese Daten die Notwendigkeit, die durch körperliche Betätigung verursachten Vorteile bei Frauen und Männern getrennt zu untersuchen.

Da unsere vorherige Studie die Belastungsschwelle ermittelt hat, die bei männlichen Mäusen die durch körperliche Betätigung gesteigerte kognitive Funktion aktiviert und aufrechterhält (Butler et al., 2019), verwendeten wir dasselbe Übungsparadigma, um die zeitliche Dynamik der durch körperliche Betätigung verursachten Vorteile bei weiblichen Mäusen zu untersuchen. In dieser Studie zeigen wir, dass bei weiblichen Mäusen 14 Tage freiwilliges Training die Bildung eines Langzeitgedächtnisses unter Bedingungen der Objektlokalisierungsspeicherung (OLM) ermöglichen, die unterhalb der Schwelle liegen. Ähnlich wie bei Männern (Butler et al., 2019) bleiben die anfänglichen durch körperliche Betätigung induzierten Vorteile über eine 7-tägige Verzögerungsphase bei sitzender Tätigkeit erhalten und können durch eine kurze 2-tägige Periode reaktivierender körperlicher Betätigung wieder aktiviert werden, um eine Langzeitgedächtnisbildung unter Erwerbsbedingungen unterhalb der Schwelle zu ermöglichen.

Die OLM-Leistung wurde durch die Brunstzyklusphasen zum Zeitpunkt des Trainings oder Tests nicht beeinträchtigt. Allerdings war die freiwillige Radlaufaktivität während der Östrusphase verstärkt. Darüber hinaus zeigen wir, dass körperliche Betätigung die LTP in der CA1-Region des Hippocampus bei Frauen steigert, und dass dieser Effekt auch nach einer sitzenden Verzögerungsperiode anhält, was den ersten Beweis für die zeitliche Dauerhaftigkeit der durch körperliche Betätigung verursachten Neuroplastizität bei Frauen liefert. Zu unserer Überraschung ergab die Beurteilung der Bdnf-Expression im Hippocampus nach dem Abrufen des Gedächtnisses keinen Unterschied zwischen den Versuchsgruppen, was darauf hindeutet, dass eine anhaltende Hochregulierung von BDNF möglicherweise nicht erforderlich ist, um die durch körperliche Betätigung verursachten kognitiven Vorteile aufrechtzuerhalten.

2. Materialien und Methoden

2.1. Tiere

Weibliche, 8- Wochen alte C57BL/6J-Mäuse (Jackson Laboratory) wurden einzeln unter Standardbedingungen gehalten (20 Grad ± 1 Grad; 70 % ± 10 % Luftfeuchtigkeit; 12 Stunden: 12 Stunden Hell-Dunkel-Zyklus) und mit Werbung versorgt freier Zugang zu Nahrung und Wasser. Alle Experimente wurden während der Lichtphase durchgeführt. Alle Experimente wurden gemäß den Richtlinien der National Institutes of Health für Tierpflege und -nutzung durchgeführt und vom Institutional AnimalCare and Use Committee der University of California, Irvine, genehmigt.

2.2. Übungsbehandlung

Die Mäuse wurden in Gruppen eingeteilt ({{0}}–0–0: n=8, 14–0–0: n=7, 14–7–0: n=8, 14–7–2; n=8) und einzeln entweder in Trainingskäfigen (mit Laufrad ausgestattet) oder Sitzkäfigen (Standardkäfig) untergebracht ). Übungskäfige bestehen aus 9,3 Zoll × 13,9 Zoll × 7,7 Zoll (Länge × Breite × Höhe) Polycarbonat und sind mit einem Laufrad mit einem Umfang von 40 cm und einem Durchmesser von 12,7 cm (Lafayette Instruments) ausgestattet.

Der freiwillige Radlauf wurde über einen {{0},110Sensor/Zähler überwacht, der an eine zentrale Schnittstelle angeschlossen war, die mit einem dedizierten PC mit ScurryActivity Monitoring Software (Lafayette Instruments) verbunden war. Die Trainingsparameter bestehen aus einer anfänglichen Trainingsperiode (0 oder 14 Tage), gefolgt von einer sitzenden Verzögerung (0 oder 7 Tage), während der das Laufrad entfernt wurde. Nach dieser Inaktivitätsphase erhielten einige Mäuse eine reaktivierende Übungseinheit, die aus einem 2D-Zugriff auf die Laufräder bestand (siehe Abb. 1).

2.3. Identifizierung des Brunstzyklusstadiums der Maus

Die Phasen des Brunstzyklus wurden täglich etwa zur gleichen Zeit (ca. 10 Uhr morgens) verfolgt und überwacht, beginnend am ersten Tag des Radlaufs. Sowohl die visuelle Beurteilung als auch der Vaginalabstrich wurden einmal täglich durchgeführt, wie von McLean et al. beschrieben. (2012) und Ajayi und Akhigbe (2020). Mit einer Pipette wurden feuchte Vaginalflecken in 5 µL Kochsalzlösung aufgenommen.

Um Scheinschwangerschaftseffekte zu verhindern (Adler & Zoloth, 1970), wurde die Pipettenspitze sorgfältig positioniert, um nicht in die Vaginalöffnung einzudringen. Die Sammelflüssigkeit wurde auf einen Glasobjektträger gegeben und bei RT luftgetrocknet. Sobald der Abstrich vollständig trocken war, wurden die Objektträger mit 0,1 % Kristallviolett-Färbung angefärbt (McLean et al., 2012). Die zytologische Beurteilung wurde entsprechend durchgeführt, um die Phasen des Östruszyklus zu identifizieren (siehe Abb. 2E).

2.4. Subthreshold Object-Location Memory (OLM)-Aufgabe

2.4.1. Gerät: Die unterschwellige, 3-minütige Objektspeicherungsaufgabe (OLM) wurde mit einem Satz von 4 identischen Kammern durchgeführt. Jede Kammer bestand aus weißem Kunststoff mit den Abmessungen 333 mm × 320 mm × 310 mm (Länge × Breite × Höhe) und enthielt ca. 1 cm tiefe Sani-Chips (PJ Murphy Forest Products). An einer Seite jeder Kammer wurde ein vertikaler, mattschwarzer Markierungsstreifen angebracht, der als räumlicher Navigationshinweis diente. Jeder Kontext wurde durch schwaches gelbes Licht (~15 lx) beleuchtet. Das Erkundungsverhalten wurde offline mit der Tracking-Software ANY-maze (Stoelting Co.) aufgezeichnet und bewertet.

2.4.2. Experimentelles Design – OLM-Training, Tests und Analyse wurden wie von Vogel-Ciernia et al. beschrieben durchgeführt. (2015) mit einer auf 3 Minuten angepassten Erfassungsdauer, von der wir zuvor gezeigt haben, dass sie für die Kodierung unterhalb der Schwelle liegt, was zu einer schlechten Leistung sowohl im Kurz- als auch im Langzeitgedächtnis führt (Butler et al., 2019; Intlekofer et al., 2013; Malvaez et al., 2013; McQuown et al., 2011). Vor dem OLM-Training wurden Mäuse behandelt und dann an den experimentellen Kontext gewöhnt. Mäuse wurden an 4 aufeinanderfolgenden Tagen jeweils 2 Minuten lang behandelt, wobei sich die letzten 2 Tage der Handhabung mit der Gewöhnung überschnitten. Die Gewöhnung erfolgte über 6 Tage, in denen die Mäuse 5 Minuten pro Tag dem experimentellen Kontext ausgesetzt waren. Gewöhnungssitzungen wurden mithilfe der Verhaltensanalysesoftware ANY-maze analysiert (um die zurückgelegte Distanz und die Geschwindigkeit zu bestimmen). Eine verringerte Aktivität über Tage hinweg wurde als Indikator für eine erfolgreiche Gewöhnung verwendet (ergänzende Abbildungen S1, S2). Unabhängig vom Trainingsprogramm wurden die Laufräder am Vorabend des OLM-Trainings entfernt, um die unmittelbaren Auswirkungen des Laufradfahrens auf das Verhalten auszuschließen.

Nach der Gewöhnung erhielten die Mäuse eine 3-minütige Aufnahmesitzung, bei der zwei identische Objekte (100- ml mit Zement gefüllte Glasbecher) an unterschiedlichen Orten platziert wurden (Position A1, oben links, Ion A2, oben rechts). Die Objekte wurden 9 cm voneinander, 6 cm von den Seitenwänden und 1 cm von der Vorderwand entfernt platziert. Um das Langzeitgedächtnis zu beurteilen, wurden die Mäuse 24 Stunden nach dem Training einem 5-minütigen Test unterzogen, bei dem ein vertrautes Objekt (ausgeglichen) an einen neuen Ort (Ort A3, unten in der Mitte) bewegt wurde, der 2,5 cm von der Bodenwand entfernt war. Untersucht wurde die Erkundung des Objekts im Roman (Ort A3) im Vergleich zum bekannten/festen Ort (A1).

Die Erkundung wurde nur dann gewertet, wenn der Mauskopf auf das Objekt zeigte und innerhalb von 1 cm kam oder wenn die Nase das Objekt berührte. Die gesamte Erkundungszeit wurde aufgezeichnet (t) und die Präferenz für das neuartige Objekt wurde als Diskriminierungsindex (DI=( Roman − vertraut) / (Roman + vertraut) × 100 %). Für Trainingssitzungen wurde das Objekt, das während der Testsitzung bewegt werden sollte, als neues Objekt verwendet, um einen direkten Vergleich von Trainings- und Test-DI zu ermöglichen.

Mäuse, die erforscht haben<2 s during testing or training were excluded from the study. Mice that showed a preference for either object during training (DI > ± 20) were also excluded. All habituation, training, test, and scoring were performed by experimenters blinded to the experimental groups. Mice were sacrificed 60 min after the test and the dorsal hippocampi were dissected and stored at −80 °C until processing for RT-qPCR.

For more information:1950477648nn@gmail.com