Der Unterschied der chemischen Bestandteile und biologischen Aktivitäten der Rohproduktscheiben und des dampfbehandelten Weinprodukts aus Cistanche Deserticola

1. Einleitung

Cistanche deserticolaist eine gängige traditionelle chinesische Medizin und wird in China und Japan seit vielen Jahren allgemein als Stärkungsmittel verwendet, allgemein bekannt als „Wüstenginseng“.Cistanche deserticolawurde erstmals um 100 v. Chr. in „Shennongs Kräuterklassiker der Materia Medica (Shen Nong Ben Cao Jing)“ als Spitzennote erwähnt und zur Behandlung verschiedener Krankheiten eingesetzt, darunter Nierenversagen, Impotenz, weibliche Unfruchtbarkeit, krankhafte Leukorrhoe und starke Metrorrhagie (Weiße). , Kältegefühl in den Lenden und Knien und chronische Verstopfung bei älteren Menschen [1]. Bisher wurden mehrere Hauptbestandteile isoliert, darunter Polysaccharide [2, 3], Phenylethanoidglykoside (PhGs) [1, 4], Iridoide [1] und Liganden [1, 5]. Darunter,PhGs und Polysaccharidesind die wichtigsten biologisch aktiven Bestandteile inCistanche deserticola[6–9]. Moderne pharmakologische Experimente haben das bewiesenCistancheDeserticolakann die Produktion von Testosteron steigern und Spermien schützen, die Zellproliferation stimulieren und das Zellüberleben verbessern, indem es deutliche Aktivitäten für die sexuelle Potenz zeigt, das Gedächtnis verbessert, Anti-Aging, das Abfangen freier Radikale und den Neuroprotektionsmechanismus verbessert [10–13].

NATÜRLICHE CISTANCHE TUBULOSA TRADITIONELLE CHINESISCHE KRÄUTER PHGS75 % ECH 30 % ACT 12 %

Um die Toxizität zu verringern und/oder die Wirkung zu verstärken, sollten die meisten traditionellen chinesischen Kräuter vor der Verschreibung verarbeitet werden. Zu den traditionellen Prozessschritten gehören die Reinigung, der Wasserprozess (Mahlung in Wasser, Dämpfen und Rösten) und der freie Prozess (Erhitzen unter Rühren mit Wein, Essig, Salz oder Honig) [14]. Während des Prozesses können sich die chemischen Komponenten verändern: Der relative Gehalt bestimmter Komponenten kann sich ändern oder es können neue Komponenten gebildet werden [15]. Der Prozess von Cistanche deserticola hat eine lange Geschichte und Cistanche deserticola sollte durch Einweichen in Reiswein und Dämpfen verarbeitet werden, wie im Chinesischen Arzneibuch (Ausgabe 2015) beschrieben [16]. Nach der Theorie der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) beeinflusst SPW nachweislich ihre Wirkung auf die Nierenmeridiane [17]. WSCD wird erstmals in „Lei Gongs Abhandlung über die Zubereitung und das Kochen von Materia Medica (Lei Gong Pao Zhi Lun)“ in der nördlichen und südlichen Dynastie Chinas dokumentiert. WSCD eignet sich besser zur Behandlung von Nierenversagen und zum Schutz des Samens, wie in „Taiping Shenghui Fang“ in der Song-Dynastie in China beschrieben. Allerdings liegen bisher keine vergleichenden Studien zu den chemischen Komponenten zwischen RCD und WSCD vor.

Moderne pharmakologische Untersuchungen haben gezeigt, dass WSCD die Niere tonisieren kann, um die Essenz zu sichern, indem es die Hypothalamus-Hypophysen-Gonaden-Achse in unterschiedlichem Ausmaß stimuliert und zur Behandlung von Nierenmangel, wie z. B. Nieren-Yang-Mangel, eingesetzt wird [18]. Allerdings wurden die Unterschiede in den biologischen Aktivitäten zwischen RCD und WSCD bisher nicht erforscht. Um die experimentelle Forschung zu erleichtern, wurde kürzlich das Tiermodell mit Nieren-Yang-Mangel dupliziert, indem Ratten eine hohe Dosis Hydrocortison injiziert wurde, wobei die Ratten Symptome zeigen, die denen des Nieren-Yang-Mangels in der TCM sehr ähnlich sind [19, 20]. . Ratten mit Nieren-Yang-Mangel haben immer einige Symptome wie Gewichtsverlust, verminderte Nahrungsaufnahme, Schwäche, erhöhte Wasseraufnahme und verminderte Aktivität. Anhand dieses Tiermodells wurden die Unterschiede in der ernährenden Wirkung auf die Nieren zwischen RCD und WSCD erkannt und sogar die wissenschaftliche Essenz des traditionellen chinesischen Prozesses enthüllt.

2. Materialien und Methoden

2.1. Materialien und Chemikalien

Die Standardstoffe wie zActeosid, Isoacteosid, Echinacosid, Cistanosid A und 2- Acetylacteosidwurden von Shanghai Yuanye Biotechnology Co. Ltd (Shanghai, China) gekauft. Cistanosid F, Cistanosid C, Osmanthusid B und Tubulosid B wurden von Chengdu Pfeide Biotechnology Co. Ltd (Chengdu, China) gekauft. Die Reinheit aller Standards betrug nicht weniger als 98 %. Methanol und Acetonitril in HPLC-Qualität wurden von Aladdin Chemistry Inc. (Shanghai, China) bezogen. Entionisiertes Wasser wurde unter Verwendung eines MilliQ50 SP-Reagenzwassersystems (Bedford, MA, USA) zur Vorbereitung von Proben und mobilen Lösungen erhalten. Alle anderen in dieser Studie verwendeten organischen Lösungsmittel waren von analytischer Qualität und wurden von Shanghai Chemical Co. Ltd (Shanghai, China) gekauft.

2.2. Probensammlung

Alle rohen Cistanche deserticola (7 Probenchargen) wurden von der Inner Mongolia Medical University in den Provinzen Innere Mongolei und Ningxia gesammelt. Alle wurden von Xiaoqin Wang, dem Professor der Abteilung für Pharmakognosie an der Medizinischen Universität der Inneren Mongolei, als Cistanche deserticola YC Ma identifiziert. Ein Belegexemplar wurde an der School of Pharmacy der Inner Mongolia Medical University hinterlegt. Nach der Sammlung wurden die Blütenstände von Cistanche deserticola entfernt, die Stängel in Scheiben geschnitten und bei Raumtemperatur an der Luft getrocknet. Anschließend wurden die Scheiben in jeder Charge zufällig in zwei Gruppen aufgeteilt: Eine davon ist RCD und die andere wurde zur Herstellung von WSCD verwendet .

Die WSCD wurden im Labor gemäß dem Chinesischen Arzneibuch (Ausgabe 2015) [16] hergestellt, was bedeutet, dass die geschnittenen RCD in einem geschlossenen Behälter 6 Stunden lang in Reiswein eingeweicht wurden, bis sie weich waren, und weitere 12 Stunden lang in einem Wasserbad gedämpft wurden, bis sie weich waren Die Oberfläche wird schwarz und wird bei Raumtemperatur an der Luft getrocknet.

2.3. Hauptkomponentenanalyse (PCA)

Die Hauptkomponentenanalyse (PCA) ist eine hochentwickelte Technik, die häufig zur Reduzierung der Dimensionen multivariater Probleme eingesetzt wird. Es reduziert die Dimensionalität des Originaldatensatzes, indem es die Korrelation zwischen einer großen Anzahl von Variablen anhand einer kleineren Anzahl zugrunde liegender Faktoren erklärt, ohne dass es zu nennenswerten Informationsverlusten kommt. In dieser Studie wurden die Unterschiede zwischen RCD und WSCD durch unbeaufsichtigte PCA unter Verwendung der SIMCA 13.0-Software basierend auf den relativen Peakflächen in der HPLC-Chromatographie ermittelt. Mit Hilfe von PCA wurden die wichtigsten chemischen Einflüsse auf die Klassifizierung verschiedener Proben ermittelt.

2.4. Probenvorbereitung

2.4.1. Extraktpräparat für Tiere

RCD und WSCD wurden aus den gesammelten und vorbereiteten Proben ausgewählt, wie in Abschnitt 2.2 beschrieben.

Luftgetrocknetes und geschnittenes RCD wurde mit einem Pulverisierer (FW135, Tianjin Taisite Instrument Co., Ltd.) pulverisiert, genau 1,0 kg gewogen und 30 Minuten lang in 50 % Ethanol eingeweicht, und die Verhältnisse der Pflanzen wurden bestimmt /Ethanol betrug 1/10 (Gew./Gew.). Anschließend wurde es zweimal jeweils 1 Stunde lang unter Rückfluss extrahiert. Die beiden Extrakte wurden kombiniert und filtriert und das Ethanol wurde unter reduziertem Druck bei 60 °C gewonnen. Der gesamte Rohextrakt von PhGs wurde im Vakuum bei 60 °C getrocknet und mit makroporösem Harz gereinigt. Schließlich wurde der PhG-Extrakt von RCD erhalten und genau abgewogen.

Der PhG-Extrakt von WSCD wurde nach dem gleichen Verfahren oben erhalten.

Die Sedimente aus der Extraktion der PhGs wurden an der Luft getrocknet und zweimal jeweils 1,5 Stunden lang mit 20-fachem Wasser ausgekocht. Die beiden Extrakte wurden kombiniert und 10 Minuten lang bei 4000 U/min zentrifugiert, und der Überstand wurde konzentriert und mit 95 % Ethanol ausgefällt. Nach der Zentrifugation wurde der Niederschlag im Vakuum bei 60∘C getrocknet. Abschließend wurde derPolysaccharid-ExtraktRCD wurde entnommen und genau abgewogen.

Der Polysaccharidextrakt von WSCD wurde nach dem gleichen Verfahren oben erhalten.

Die PhGs und Polysaccharidextrakte von RCD und WSCD waren gemischte Suspensionen in Wasser, wenn die Ratten oral behandelt wurden.

2.4.2. Probenvorbereitung zur Bestimmung von PhGs

Die PhGs-Extrakte in Abschnitt 2.4.1 wurden genau auf 0,15 g abgewogen und durch Ultraschallbehandlung mit 50 ml 50 %iger wässriger Methanollösung für 40 Minuten extrahiert. Nach dem Abkühlen wurde der Gewichtsverlust mit 50 %igem Methanol ausgeglichen. Alle Proben und Lösungsmittel wurden vor der Analyse durch eine 0,45-µm-Membran filtriert. Der Gehalt von vier PhGs in RCD und WSCD wurde mittels HPLC bestimmt, und die Gesamt-PhGs wurden mittels UV-Spektrophotometrie bestimmt.

2.4.3. Probenvorbereitung zur Bestimmung von Polysacchariden

Die Polysaccharidextrakte in Abschnitt 2.4.1 wurden genau auf 0,10 g abgewogen und durch Ultraschallbehandlung mit 50 ml heißem Wasser für 40 Minuten extrahiert; Nach dem Abkühlen wurde der Gewichtsverlust mit Wasser ausgeglichen. Alle Proben und Lösungsmittel wurden vor der Analyse durch eine 0,45-µm-Membran filtriert.

2.5. Chromatographische Bedingungen der HPLC und Bestimmung der vier PhGs

Die chromatographische Trennung wurde in einem UltiMate 3000 HPLC-System (Thermo Fisher Scientific, USA) durchgeführt, das mit einer Doppelgradientenpumpe, einem Säulenfach und einem DAD-Detektor ausgestattet war . Die Daten wurden mit einem ChromeLeon Chromatography Data System gesammelt und verarbeitet. Die Proben wurden auf einem Agilent Zorbax SB-C18 (250mm×4,6 mm, 5 µm) mit einer C18-Vorsäule (4,6 mm×12,5 mm, 5 µm) getrennt. Die mobile Phase bestand aus Acetonitril (A) und 0,1 % Phosphorsäurelösung (B) mit einer Flussrate von 1 ml/min. Die Gradientenelution ist wie folgt: anfänglich 0–13 min, lineare Änderung von AB (5:95, v/v) zu AB (15:85, v/v); 13–25 Min., linearer Wechsel zu AB (20:80, v/v); 25–43 Min., linearer Wechsel zu AB (25:75, v/v). Die Wellenlänge des Detektors wurde bei 330 nm überwacht. Die Säulentemperatur wurde auf 30 °C eingestellt und das injizierte Probenvolumen betrug 10 µL [21]. Die Stammlösung mit vier Referenzstandards wurde durch Auflösen der Referenzstandards in 50 % Methanol auf eine Endkonzentration von 0,20 mg/ml für 2-Acetylacteosid, 0,20 mg/ml für Acteosid, 0,05 mg/ml für Osmanthusid B, und 0,10 mg/ml für Isoacteosid. Die Lösung wurde dann mit drei Wiederholungen auf fünf verschiedene Konzentrationen verdünnt, um Kalibrierungskurven zu erstellen. Der Probengehalt wurde in g/kg Rohgewicht ausgedrückt.

2.6. Bestimmung des Gesamt-PhGs

Die Gesamt-PhGs wurden mithilfe der UV-Spektrophotometrie-Methode bei einer Wellenlänge von 330nm in einem UV1000-Spektrophotometer (Shanghai Tianmei Scientific Instrument Co., Ltd.) bestimmt. Die Stammlösung wurde durch Auflösen von Echinacosid-Standards in 50 % Methanol hergestellt auf eine Endkonzentration von 0,10 mg/ml und dann mit drei Replikaten auf fünf verschiedene Konzentrationen verdünnt, um Kalibrierungskurven zu erstellen.

NATÜRLICHES CISTANCHE TUBULOSA ZUR VERBESSERUNG DER SEXUELLEN FUNKTION PHGS75 % ECH 30 % ACT 12 %

2.7. Bestimmung von Polysacchariden

Die Bestimmung vonPolysaccharidewurde nach der Phenol-Schwefelsäure-Methode durchgeführt. 1 ml der Probenlösung wurde in ein 2{11}} ml-Reagenzglas mit Glasstopfen gegeben, 1 ml 6 %ige Phenollösung und 5 ml konzentrierte Schwefelsäure wurden zugegeben und 5 Minuten lang geschüttelt. Die Mischung wurde 10 Minuten lang in ein kochendes Wasserbad überführt und zur UV-Detektion auf Raumtemperatur abgekühlt. Die Ultraviolettabsorption wurde bei 480 nm in einem UV1000-Spektrophotometer überwacht. Der Referenzstandard wasserfreier D-Glucose wurde genau abgewogen und in destilliertem Wasser auf eine Endkonzentration von 0,10 mg/ml gelöst. Anschließend wurde die Lösung mit drei Wiederholungen auf fünf verschiedene Konzentrationen verdünnt, um Kalibrierungskurven zu erstellen.

2.8. Tierversuche

2.8.1. Tiere und Wohnen

Männliche SD-Ratten mit einer Geschlechtsreife (180-200 g) wurden von der Xinglong (Beijing) Experimental Animal Farm gekauft (Alter: 6 Wochen alt) und die Labortierlizenz war SCXK (Jing):2016-0003. Alle Tierversuche wurden vom Tierforschungsausschuss der Inner Mongolia Medical University genehmigt und gemäß den Richtlinien des National Institute of Health zu den Grundsätzen der Tierpflege (2004) durchgeführt. Alle Tiere wurden in einem Barrieresystem mit einer regulierten Temperatur von 21–23 °C und einer relativen Luftfeuchtigkeit von 40–65 % sowie einem 12-stündigen Dunkel-/Hell-Zyklus gehalten. Den Ratten wurde nach Belieben Futter und Wasser gegeben und sie wurden eine Woche lang an die obige Umgebung gewöhnt.

2.8.2. Dosierung und Probenahme

Die Ratten wurden in einzelne Stoffwechselkäfige überführt und zufällig in 6 Gruppen aufgeteilt (?=10 in jeder Gruppe). Sie erhielten zwei Wochen lang eine intramuskuläre Injektion von 15 mg/kg Hydrocortison-Natriumsuccinat (erworben von Tianjin Biochemical Pharmaceutical Co., Ltd., Tianjin, China), mit Ausnahme von Gruppe 1, der eine gleiche Menge physiologischer Kochsalzlösung injiziert wurde. Am 14. Tag wurden das Körpergewicht, die Nahrungsaufnahme, die Wasseraufnahme, das Urinvolumen und die spontane Aktivität innerhalb von 5 Minuten erfasst, um sicherzustellen, dass das Nieren-Yang-Mangel-Modell erfolgreich durchgeführt wurde. Ab dem 15. Tag wurden 6 Gruppen wie folgt behandelt: Gruppe 1 und Gruppe 2 (Modellgruppe, M) wurden mit einem gleichen Volumen destilliertem Wasser behandelt, Gruppe 3 (PhGs-Extrakt der RCD-Gruppe, PR) wurde mit {{12 }},42 g/kg PhGs-Extrakt von RCD, was etwa 1,8 g/kg der rohen Cistanche deserticola entsprach, und die anderen Gruppen waren gleich, Gruppe 4 (PhGs-Extrakt der WSCD-Gruppe, PW) wurde mit einer Dosis von { {17}},49 g/kg PhGs-Extrakt von WSCD, Gruppe 5 (Polysaccharid-Extrakt der RCD-Gruppe, SR) wurden mit {{20}},18 g/kg dem Polysaccharid-Extrakt von RCD behandelt Gruppe 6 (Polysaccharid-Extrakt der WSCD-Gruppe, SW) wurde mit einer Dosis von 0,22 g/kg des Polysaccharid-Extrakts von WSCD behandelt. Alle Ratten wurden täglich mit einer Magenperfusion behandelt. Nach einem Monat Behandlung wurde den Ratten vor der Blutentnahme 12 Stunden lang das Futter verweigert. Am nächsten Tag wurden alle Ratten betäubt und getötet. Während des Tests wurden die Ratten einmal pro Woche gewogen, um die Dosierung anzupassen, und vor der Tötung erneut gewogen. Blutproben wurden im Eppendorf-Röhrchen mit 10 % EDTA-2Na-Lösung gesammelt. Das Serum wurde durch 15-minütige Zentrifugation bei 2000 U/min abgetrennt und zur weiteren Verwendung bei -80 Grad gelagert. Darüber hinaus wurden Nieren, Hoden, Nebenhoden, Prostata und Samenbläschen entnommen und schnell gewogen. Nach dem Wiegen wurden die Hoden zur Bestimmung von SOD und MDA in flüssigem Stickstoff eingefroren.

2.9. Analyse der hormonellen und antioxidativen Wirkung

Die Testosteron- (T) und Östradiol- (E2) Werte wurden im Qingdao Kechuang Quality Inspection Center mittels Radioimmunitäts- und kolorimetrischer Methode bestimmt. Die gefrorenen Hoden wurden gewogen und mit dem 20-fachen kalter physiologischer Kochsalzlösung (W/W) vermischt. Das durch Gewebehomogenat im Eisbad erhaltene Hodenhomogenisat wurde zentrifugiert, um den Überstand zu erhalten. Der SOD- und MDA-Gehalt des Hodens wurde mit SOD- und MDA-Kits gemäß den Anweisungen bestimmt.

2.10. Statistische Analyse

Die Signifikanz der Unterschiede zwischen den Gruppen wurde mithilfe eines einfaktoriellen ANOVA-Tests und anschließendem Schefe-Test mit einer Signifikanzgrenze von 0.05 unter Verwendung der SPSS-Software 25.0 verglichen. Alle Daten wurden als Mittelwert ± Standardabweichung (SD) (n=3) ausgedrückt.

3. Ergebnisse

3.1. Die Analyse von PhGs-Änderungen nach SPW unter Verwendung von PCA

Um die PhGs-Änderungen nach SPW zu vergleichen, wurden 9 chromatographische Peaks als charakteristische Peaks ausgewählt und identifiziert. Ihre Strukturen sind in Abbildung 1 dargestellt, deren relative Peakflächen zur quantitativen Expression berechnet wurden. Das HPLC-Chromatogramm ist in Abbildung 2 dargestellt und zeigt, dass sich der relative Gehalt der Haupt-PhGs während der SPW geändert hat. Zur Unterscheidung verschiedener Proben wurde eine PCA-Analyse der relativen Peakflächen von 9 Komponenten durchgeführt. RCD und WSCD lagen im Ergebnisdiagramm weit voneinander entfernt (Abbildung 3(a)), was darauf hindeutet, dass die Proben in zwei Cluster eingeteilt wurden. Es wird daher angenommen, dass die Gehalte der chemischen Bestandteile unterschiedlich waren. Um die potenziellen chemischen Marker für die Diskriminierung weiter zu ermitteln, wurde eine erweiterte statistische Analyse durchgeführt, um das Ladungs-Bi-Diagramm zu erstellen (Abbildung 3 (b)). Die Peaks 2, 3, 4, 6 und 7 werden nach SPW abnehmen, während die Peaks 5, 8 und 9 zunehmen, und alle waren die wichtigsten Komponenten zur Unterscheidung zwischen RCD und WSCD. Die relativen Inhalte von Peak 1 variieren nach SPW kaum.

NATÜRLICHES CISTANCHE TUBULOSA ZUR VERBESSERUNG DER SEXUELLEN FUNKTION PHGS75 % ECH 30 % ACT 12 %

3.2. Der Gehalt an Gesamtpolysacchariden und PhGs veränderte sich nach SPW

Wie in Abbildung 3(b) gezeigt, hatten sich 8 Komponenten (5, 8 und 9 erhöht und 2, 3, 4, 6 und 7 verringert) erheblich verändert und hatten einen großen Einfluss auf die Probenclusterung. Unter ihnen waren Isoacteosid und Osmanthusid B am stärksten gestiegen, während 2? -Acetylacteosid und Acteosid nahmen am stärksten ab. Also, der Inhalt von Isoacteosid, Osmanthusid B, 2? -Acetylacteosid und Acteosid wurden durch HPLC bestimmt. Wie in Abbildung 1 gezeigt, war Peak 4 Akteosid, Peak 5 war Isoacteosid, Peak 7 war 2? -Acetylacteosid und Peak 8 war Osmanthusid B. Die Gesamt-PhGs in RCD und WSCD wurden mit der UV-Methode bestimmt und die Gesamtpolysaccharide wurden mit der Phenol-Schwefelsäure-Methode bestimmt, die Ergebnisse sind in Tabelle 1, Isoacteosid, Osmanthusid B, aufgeführt ,Gesamtpolysaccharide und PhGsbei WSCD war im Vergleich zu RCD deutlich angestiegen. 2? -Acetylacteosid und Acteosid waren deutlich zurückgegangen.

3.3. Das Modell des Hydrocortison-induzierten Nieren-Yang-Mangels wurde erstellt

Im Vergleich zur Normalgruppe waren nach zweiwöchiger intramuskulärer Injektion von 15 mg/kg Hydrocortison-Natriumsuccinat das Körpergewicht, die Nahrungsaufnahme und die spontane Aktivität signifikant verringert (P<0.05) and the water intake and urine volume were increased; the results were shown in Table 2. The T and E2 levels in the serum of the model group were lower than normal group as shown in Figure 4. From the above, the kidney-yang deficiency model was successfully made.

3.4. Der Einfluss von Extrakten auf das durchschnittliche Gewicht und den Index der Eingeweide.

Alle Ratten und ihre Eingeweide wurden gewogen und dann der durchschnittliche Eingeweideindex berechnet. Im Vergleich zur N-Gruppe hatte die M-Gruppe die Eingeweidegewichte der Niere, der Samenbläschen, des Nebenhodens und des Hodens signifikant verringert, was auch darauf hinwies, dass das Hydrocortison-induzierte Nieren-Yang-Mangel-Modell erfolgreich durchgeführt wurde. Im Vergleich zur M-Gruppe war in der PW- und SR-Gruppe das gesamte beobachtete Gewicht der Eingeweide gestiegen, in der PR-Gruppe war das Gewicht von Hoden, Nebenhoden, Samenbläschen und Prostatadrüse gestiegen, und in der SW-Gruppe war das Gewicht von Niere, Hoden und Nebenhoden gestiegen und Samenbläschen. Im Vergleich zu den PR-Gruppen schnitt die PW-Gruppe besser in der Niere, den Samenbläschen und der Prostata ab. Es gab keinen signifikanten Unterschied zwischen der SR- und der SW-Gruppe im Gewicht von Hoden, Nebenhoden, Samenbläschen und Prostata. Die Ergebnisse sind in Tabelle 3 dargestellt.

Im Vergleich zur N-Gruppe waren in der M-Gruppe die Eingeweideindizes von Niere, Hoden, Nebenhoden und Samenbläschen verringert. Im Vergleich zur M-Gruppe hatten die PW- und SR-Gruppe den Index der Niere, des Hodens, der Prostata und der Samenblase erhöht, die PR-Gruppen hatten einen erhöhten Index der Hoden, der Prostata und der Samenblase und die SW-Gruppe hatte den Index von Niere, Hoden und Samenbläschen erhöht. Im Vergleich zu den PR-Gruppen schnitt die PW-Gruppe besser in der Niere, den Samenbläschen und der Prostata ab. Die SW- und SR-Gruppen hatten einen ähnlichen Index für Niere, Hoden, Samenbläschen und Nebenhoden. Die Ergebnisse sind in Tabelle 4 dargestellt.

3.5. Der Einfluss des Extrakts auf den Hormonspiegel (T und E2)

Wie in Abbildung 4 dargestellt, waren im Vergleich zur M-Gruppe die T- und E2-Spiegel in allen Behandlungsgruppen (PW-, PR-, SW- und SR-Gruppe) signifikant angestiegen (P<0.05). However, the PW group was better than the PR group in the level T and E2. The SR and SW groups had no significant difference.

3.6. Der Einfluss von Extrakten auf die antioxidative Wirkung

SOD ist ein wichtiges antioxidatives Enzym. MDA ist das Produkt der Lipidperoxidation, das den Grad der oxidativen Schädigung widerspiegelt. Der Gehalt an SOD und MDA beeinflusst das Ausmaß der Oxidations- und Antioxidansfähigkeit. Wie in Abbildung 5 dargestellt, war die antioxidative Wirkung im Vergleich zur M-Gruppe in allen Behandlungsgruppen (PW, PR, SW und SR) verstärkt. Die SW-Gruppe hatte die größte antioxidative Wirkung.

4. Diskussion

Vor der klinischen Anwendung sollten die Rohmaterialien traditionellen chinesischen Verarbeitungstechniken unterzogen werden. Dämpfen ist eine der traditionellen Verarbeitungsmethoden für einige chinesische Heilkräuter, wodurch eine durch die Maillard-Reaktion erzeugte schwarze Farbe entsteht [22], wodurch die Mengen einiger bioaktiver Komponenten [23] und die pharmakologische Aktivität erhöht werden. Wie in der Ausgabe 2015 des Chinesischen Arzneibuchs dokumentiert, ist WSCD als eines der Verarbeitungsprodukte im Hinblick auf die Nierenernährung besser als RCD. In dieser Studie wiesen die PCA-Ergebnisse darauf hin, dass SPW das chemische Profil von RCD verändert hat. Darüber hinaus hatten sich 8 Komponenten in PhGs signifikant verändert. Die Gesamt-PhGs, die Gesamtpolysaccharide, Isoacteosid und Osmanthusid B hatten am stärksten zugenommen, während 2?-Acetylacteosid und Acteosid nach SPW abnahmen. Die Ergebnisse zeigten, dass SPW die chemischen Bestandteile von RCD verändern könnte. Der Gehalt an PhGs mit 1,3,4- trisubstituierten Glucopyranosyleinheiten (wie Acteosid, 2?-Acetylacteosid und Cistanosid C) nahm in WSCD ab, jedoch stiegen die Konzentrationen ihrer Isomere mit 1,3,5- trisubstituierten Glucopyranosyleinheiten (wie Isoacteosid und Tableside B), was darauf hindeutet, dass während der SPW eine Umwandlung chemischer Bestandteile auftreten kann und eine Hydrolysereaktion eine der Ursachen sein wird. Die vorgeschlagenen Umwandlungswege sind in Abbildung 6 dargestellt. Der Anstieg der Polysaccharide nach der SPW wurde auch bei Ginseng berichtet [24].

Es wurde dokumentiert, dass Cistanche deserticola die Niere belebt, den Rückgang des Testosteronspiegels umkehrt und eine antioxidative und entzündungshemmende Wirkung besitzt [25]. PhGs und Polysaccharide waren die beiden wichtigsten biologisch aktiven Bestandteile in Cistanche deserticola. Als PhGs hatten Isoacteosid und Osmanthusid B antioxidative und entzündungshemmende Wirkungen [26, 27]. Daher wurde der Vergleich der pharmakologischen Wirkungen auf den Testosteronspiegel und die antioxidative Wirkung von RCD und WSCD untersucht. Im Modell des Hydrocortison-induzierten Nieren-Yang-Mangels kam es zu einer Störung des endokrinen Systems und zu einem starken Rückgang der Sexualhormonspiegel im Blut. In dieser Studie zeigten die Ergebnisse der Sexualhormonanalyse, dass sowohl RCD als auch WSCD den T- und E2-Spiegel und beides signifikant erhöhen konntenPhGs und Polysaccharidezeigte die Verbesserung der Sexualhormone. Der WSCD war besser als der RCD, insbesondere in PhGs-Extraktgruppen. Die Ergebnisse der Eingeweideindizes zeigten, dass sowohl PhGs als auch Polysaccharide die Eingeweidegewichte und deren Gewichtsindizes verbessern können. In PhGs-Extraktgruppen ist der WSCD bei der Erhöhung der Gewichte und Indizes von Nieren- und Samenbläschen besser als RCD. Darüber hinaus hat Cistanche deserticola eine erhebliche antioxidative Wirkung, insbesondere in den Polysaccharid-Extraktgruppen mit WSCD. Wie oben erläutert, könnten sowohl RCD als auch WSCD das Nieren-Yang-Mangel-Syndrom verbessern; WSCD ist jedoch besser als RCD bei der Erhöhung der Werte von T, E2, der Gewichte und der Indizes von Nebenhoden und Hoden. Die Ergebnisse der pharmakologischen Wirkungsstudie zeigten, dass SPW die chemischen Bestandteile von PhGs verändert und den Gehalt an Polysacchariden erhöht hatte, was wiederum den Sexualhormonspiegel erhöhte und die antioxidative Wirkung verstärkte.

5. Schlussfolgerung

Ziel der Studie war es, die Veränderung der PhGs, der Gesamtpolysaccharide und die pharmakologische Wirkung von RCD und WSCD auf die Nieren-Yang-Mangel-Ratte zu ermitteln, insbesondere auf den Hormonspiegel und die antioxidative Wirkung. Diese Studie hat gezeigt, dass der Prozess traditioneller chinesischer Kräuter ihre chemischen Bestandteile verändern und ihre Bioaktivität beeinflussen kann. Es wird auch bestätigt, dass Rohprodukte und verarbeitete Produkte unterschiedlich vorgeschrieben wurdenntlyin der Klinik.

NATÜRLICHES CISTANCHE TUBULOSA ZUR VERBESSERUNG DER SEXUELLEN FUNKTION PHGS75 % ECH 30 % ACT 12 %