Was ist der Unterschied zwischen wild wachsenden Cistanche und künstlich kultivierten Cistanche in Bezug auf die immunitätssteigernde Aktivität?

Kontakt: Audrey Huaudrey.hu@wecistanche.com

Zhao Bing; Yang Xiumei; Wu Daocheng; Ba Xueli; Li Quanxiao; Tan Yachao; Zhang Ailian

Abstrakt:

Zielsetzung:Vergleich der immunverstärkenden Wirkungen von wild wachsenden Cistanche- und künstlich kultivierten Cistanche-Polysacchariden aus Cistanche (im Folgenden: WCDPS bzw. CCDPS).

Methoden:Verschiedene Dosen (niedrig, mittel und hoch) von WCDPS und CCDPS und Ovalbumin (OVA) wurden subkutan mit ICR-Mäusen immunisiert, OVA-spezifischer Antikörper IgG und die Antikörpersubtypen IgG1 und IgG2a wurden durch ELISA und durch MTT-Methode nachgewiesen. OVA-spezifische Lymphozyten-Proliferationsaktivität, Durchflusszytometrie zum Nachweis des Expressionsniveaus von CD4-plus-T-Zellen und CD8-plus-T-Zellen.

Ergebnisse:Sowohl WCDPS als auch CCDPS können die Expressionsspiegel des OVA-spezifischen Antikörpers IgG und der Antikörpertypisierung IgG1 und IgG2a (P<0.05), and="" there="" is="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" the="" same="" doses="" of="" wcdps="" and="" ccdps="" (f="">0. 05); WCDPS and CCDPS can significantly promote OVA-specific lymphocyte proliferation, and the difference between the same dose is not statistically significant (P>0.05); WCDPS und CCDPS können auch den Anteil an CD4 plus T- und CD8 plus T-Zellen-Untergehalt signifikant erhöhen (P<0.05), and="" the="" difference="" between="" the="" same="" dose="" was="" not="" statistically="" significant="" (p="">0.05), WCDPS und CCDPS hatten keine Wirkung auf das Gewicht der immunisierten Mäuse.

Fazit:Sowohl WCDSP als auch CCDPS können OVA-spezifische humorale und zelluläre Immunantworten signifikant verstärken, und es gibt keinen statistisch signifikanten Unterschied zwischen den beiden, und sie haben eine gute Sicherheit.

Schlüsselwörter: Cistanche; Polysaccharide aus Cistanche; Ovalbumin; Hilfsstoff

Zistanche (C. deserticola. YC Ma),auch bekannt als Cunyun und Dayun, ist seit vielen Jahren eine parasitäre krautige Pflanze der Lydanaceae. Es ist ein seltenes und wertvolles chinesisches medizinisches Material. Zu den Hauptbestandteilen gehören Polysaccharide aus Cistanche, Cistanche-Phenylethanoid-Glykosidverbindungen, organische Säuren, Alkaloide usw.⑷, die mehrere Funktionen haben, z. B. Essenz und Blut nähren, Yang unterstützen und die Nieren tonisieren und Alterung lindern⑸. Aufgrund des extrem hohen medizinischen Wertes von Cistanche steht der Raubbau an Wildarten kurz vor dem Aussterben, und künstlich kultivierte Cistanche war erfolgreich. Forscher im In- und Ausland haben viel über die chemischen Komponenten und Wirkstoffe von wild wachsenden Cistanche und künstlich kultivierten Cistanche geforscht, aber es gibt nur wenige Berichte über den Vergleich von wilden und kultivierten Cistanche-Polysacchariden aus Cistanche (WCDPS/CCDPS) Adjuvansaktivität . Eine Vielzahl von Studien hat gezeigt, dass pflanzliche Polysaccharide aus Cistanche als Adjuvans die Immunantwort des Körpers regulieren können. Viele Forscher haben chinesische Kräutermedizin als Impfstoff-Adjuvans verwendet und gute Fortschritte gemacht“.

Diese Studie basiert auf der früheren Forschung (6), um die zu vergleichenimmunstärkendAktivitäten von Xinjiang WCDPS und CCDPS. Hauptsächlich durch Immunisierungsexperimente an Mäusen wurden unterschiedliche Dosen von WCDPS und CCDPS subkutan mit OVA in ICR-Mäusen immunisiert, und ihre Auswirkungen auf die humorale EbeneImmunitätund zelluläre Immunität, die durch OVA nach der Immunisierung induziert wurde, wurden getestet. Vergleichenwild wachsen cistancheundkünstlich angebaute CistanchePolysaccharide Die immunstärkende Aktivität von Polysacchariden in Zitrusfrüchten kann einen Hinweis für die bessere Entwicklung und Nutzung künstlich kultivierter Cistanche in Xinjiang liefern.

Materialien und Verfahren

Experimentelle Materialien:

Wild wachsende Cistanche und kultivierte Cistanche (im Handel erhältlich). RPMI 1640-Kulturmedium wurde von GIBCO gekauft; Fötales Rinderserum wurde von Israel Bioind bezogen; Durchflusszytometrie-Antikörper: PE-Ratte-Anti-Maus-CD3, APC-Ratte-Anti-Maus-CD4, FITC-Ratte-Anti-Maus-CD8a wurden von American BD Company, Eiweißprotein (Ovalbumin, OVA) Sigma-Produkt, Meerrettichperoxid-markiertes Ziegen-Anti-Maus gekauft IgG, IgG1 und IgG2a wurden von Southbiotech, USA, bezogen. Die anderen experimentellen chemischen Reagenzien sind alle inländischen analytischen Reagenzien.

Versuchstiere:

Reine weibliche ICR-Mäuse (6-8 Wochen, 18-22 g) wurden vom Experimental Animal Center der Xinjiang Medical University gekauft. Die Tiere wurden im Tierraum unseres Labors gehalten und der Versuch wurde 7 Tage nach Eingewöhnung der Tiere gestartet.

Vorbereitung von WCDPS und CCDPS:

Referenz [17] verwendet die Methode der Wasserextraktion und Alkoholfällung. Die kurzen Schritte sind wie folgt: Man nehme trockenes, in Xinjiang kultiviertes und wildes Cistanche-Pulver, füge das 10-fache Volumen Vaseline und absolutes Ethanol 1 Stunde lang Ultraschall zu; nach dem Absaugen den Medikamentenrückstand zurückbehalten und trocknen, zweimal das 10-fache Volumen destilliertes Wasser 37T Ultraschall zugeben, 10 min bei 4 000 U/min zentrifugieren, die Überstände vereinigen, einrotieren und aufkonzentrieren und über Nacht mit präzipitieren Alkohol; nach Vakuumfiltration und Trocknung erhält man das Rohextraktpulver; Savage-Methode ⑻ entfernt Protein aus WCDPS und CCDPS. Der Gehalt an Polysacchariden aus Cistanche in WCDPS und CCDPS, bestimmt nach der Zwiebel-Schwefelsäure-Methode, betrug 76,82 Prozent bzw. 59,58 Prozent.

Mausimmunisierung und Serumgewinnung:

Die {{0}} Wochen alten weiblichen ICR-Mäuse wurden als experimentelle Tiermodelle verwendet. Das Experiment wurde in 9 Gruppen unterteilt, 5 in jeder Gruppe: 0,9 % NaCl, OVA 10 Jig, OVA-Alaun 200 |jLg, OVA-WCDPS 10 |xg, OVA -WCDPS 50 |xg, OVA- WCDPS 100 netto, OVA-CCDPS 10 |jLg, OVA-CCDPS 50 |xg, OVA-CCDPS 100 netto. Vor der Immunisierung mit 0,9 % NaCl auflösen und die Mäuse zweimal im Abstand von 2 Wochen subkutan immunisieren. Vor der Immunisierung wird Blut gesammelt und Serum-80Y wird präpariert und für die spätere Verwendung aufbewahrt.

Die Auswirkungen von WCDPS und CCDPS auf das Wachstum von Mäusen:

Um die Wirkungen von WCDPS und CCDPS auf das Wachstum von Mäusen zu beobachten, wurde das Gewicht der Mäuse in jeder Gruppe bei 0 d vor der anfänglichen Immunisierung, 14 d und 21 d nach der Immunisierung gewogen.

Nachweis von Mausserum-Antikörper IgG und Typisierung nach WCDPS- und CCDPS-Immunisierung:

Zur Bestimmung von Serumantikörpern wurde das indirekte ELISA-Verfahren verwendet. Beschichten der ELISA-Platte mit 2,5 Jg/ml OVA, 4 Jahre über Nacht; dreimal mit PBST gewaschen und dann 5 % fettfreies Milchpulver 37 l zum Blockieren für 1 h zugegeben; dreimal mit PBST gewaschen und den Mäusen nach der Immunisierung in jeder Gruppe der primäre Antikörper zugesetzt Serum, das Verdünnungsverhältnis des primären Antikörpers ist 1:100, 100 Pille pro Vertiefung, 37 Tl h; nach 3-maligem Waschen mit PBST Sekundärantikörper zugeben: Ziegen-Anti-Maus-IgG, IgGl, IgG2a (l: 5 000) markiert mit HRP 37 Inkubiere den Drachen für 1 h; nach 4-maligem Waschen mit PBST Tetramethylbenzidin (TMB)-Substratlösung hinzufügen, um Licht für 15 min zu vermeiden. Fügen Sie 50 in jede Vertiefung hinzu, um die Reaktion mit 2 mol/L H2SO4 zu stoppen, und messen Sie den A45O/655-Wert. Vergleichen Sie die Antikörperspiegel in jeder Gruppe.

Nachweis der Maus-Milz-Lymphozyten-Proliferation nach WCDPS- und CCDPS-Immunisierung:

Das MTT-Verfahren wurde verwendet, um die Proliferation von Lymphozyten in der Milz von mit CCDPS und WCDPS immunisierten Mäusen nachzuweisen. Die Milz der Mäuse wurde 21 Tage nach der anfänglichen Immunisierung unter aseptischen Bedingungen isoliert und die Milzzellen wurden mit 1 0 Prozent FBS-haltigem RPMI 1640-Medium verdünnt, um eine Einzelzellsuspension herzustellen, zu zählen und die Zellen einzustellen (r Zellen/ml in eine 96-Well Zellkulturplatte ausstreichen, 20 OVA (Endkonzentration 10 |xg/ml) bzw. ConA (Endkonzentration 5 Pig/ml) zugeben, stimulieren, eine leere Zellkontrolle und ein leeres Serum ansetzen Kontrolle zur gleichen Zeit, 48 Stunden in einen 37Y-Zellinkubator geben, 20 MTT in jede Vertiefung geben, 37^ und weitere 4 Stunden inkubieren, 100 ± 1 DMSO in jede Vertiefung geben, um das Herz aufzulösen und zu testen 0 /63.Wert, berechnen Sie den Stimulationsindex (SI) jeder Gruppe von Mäusen.

Die Expression von CD4 und CD8 auf CD3 plus T-Zellen nach WCDPS- und CCDPS-Immunisierung:

Durchflusszytometrie wurde verwendet, um die Expression von CD4-plus-T- und CD8*-T-Zellen auf der Oberfläche von CD3-plus-T-Zellen nachzuweisen. Die Milz der Maus wurde 21 Tage nach der primären Immunisierung unter aseptischen Bedingungen isoliert, und die Milz wurde mit RPMI 1640-Medium behandelt, das 10 % FBS enthielt. Bereiten Sie eine Einzelzellsuspension vor, zählen Sie und stellen Sie die Anzahl der Zellen auf 1 x 106 Zellen/Probe ein, führen Sie eine CD4- und CD8-Färbung auf der Oberfläche von CD3 plus T-Zellen durch, schützen Sie sie 25 min lang bei Raumtemperatur vor Licht und verwenden Sie 10 ml a phosphatgepufferte Lösung mit 0,5 Prozent FBS (phosphatgepufferte Lösung). Kochsalzlösung, PBS) 1 200 U/min 7 min einmal waschen, 250 l PBS zugeben, durch ein 200-Mesh-Kupfersieb passieren, Durchflusszytometrie zum Nachweis der Expression von CD4 und CD8 auf der Oberfläche von CD3*T-Zellen.

Statistische Methoden:

Die Software Flowjo 7.6 verarbeitet die Testergebnisse der Durchflusszytometrie; GraphPad Prism 5.0 wird für die Datenanalyse verwendet, und die Daten basieren alle auf dem Mittelwert ± Standardabweichung. Verwenden Sie Student und Test, um die Daten zwischen den experimentellen Gruppen zu vergleichen. P<0.05 means="" that="" there="" is="" a="" difference.="" statistical="">

Ergebnis

1. The effect of WCDPS and CCDPS on the growth of mice: After co-immunization with WCDPS and CCDPS and OVA, weigh the weight of the mice (Table 1). There was no statistically significant difference in the bodyweight of mice in each group during the same growth period ( P>0.05).

2. Die Wirkung von WCDPS und CCDPS auf OVA-spezifisches Antikörper-IgG: WCDPS und CCDPS wurden subkutan mit OVA immunisiert, um die Expression von OVA-spezifischem Antikörper-IgG im Serum nach 14 Tagen und 21 Tagen der Immunisierung nachzuweisen. Die Ergebnisse sind in Fig. 1 gezeigt, WCDPS und CCDPS förderten die Expression von Antikörper-IgG im Serum in dosisabhängiger Weise; OVA plus WCDPS 50 p,g im Vergleich zu OVA plus CCDPS 50 |xg kann OVA-spezifische Antikörper im Vergleich zu OVA plus CCDPS 50 |xg signifikant fördern. Die Expression von IgG (F<0.05), but="" the="" difference="" was="" not="" statistically="" significant="" compared="" with="" the="" aluminum="" adjuvant="" group="" (p="">0.05); the difference between WCDPS and CCDPS at the same dose was not statistically significant (P>0.05).

3. Die Wirkung von WCDPS und CCDPS auf die OVA-spezifische Antikörpertypisierung: 21 Tage nach der Immunisierung wurde die Expression von OVA-spezifischen Antikörpertypisierungen IgG1 und IgG2a im Serum nachgewiesen. Die Ergebnisse sind in Abbildung 2 dargestellt. OVA-WCDPS 50 Jig und OVA-WCDPS 100 |xg Mumu förderten signifikant die Expression des Antikörpers IgG2a im Serum als die OVA-Gruppe allein (P<0.05); both="" ova-wcdps="" 50="" and="" ova-ccdps="" 50="" pigs="" could="" significantly="" promote="" the="" expression="" of="" ova-specific="" antibody="" iggl=""><0. 001);="" compared="" with="" ova-wcdps="" 50="" p,g,="" and="" ova-wcdps="" 100="" jig,="" the="" aluminum="" adjuvant="" group="" can="" significantly="" promote="" the="" expression="" of="" antibody="" igg2a=""><0.05); the="" expression="" of="" antibody="" typing="" is="" different="" between="" wcdps="" and="" ccdps="" at="" the="" same="" dose="" no="" statistical="" significance="" (p="">0.05).

4. Die Wirkung von WCDPS und CCDPS auf die Proliferation von Maus-OVA-spezifischen Lymphozyten: Um die Wirkung von WCDPS und CCDPS auf Milz-Lymphozyten nachzuweisen, wurden Polysaccharide aus Cistanche subkutan mit OVA immunisiert und Milzzellen wurden 21 Tage nach der Immunisierung abgetrennt , und das MTT-Verfahren wurde verwendet, um sie nachzuweisen. Fördern Sie die Proliferation von OVA-spezifischen Lymphozyten. Die Ergebnisse sind in Fig. 3 gezeigt. WCDPS und CCDPS verstärkten die OVA-spezifische Lymphozytenproliferation in dosisabhängiger Weise. Die Kombination von WCDPS und CCDPS mit der OVA-Gruppe kann die OVA-spezifische Lymphozytenproliferation verglichen mit der OVA-Gruppe allein signifikant fördern. Lymphozytenproliferation (P<0.05); ova-wcdps="" 50="" jig="" and="" ova-ccdps="" 50="" |xg="" compared="" with="" an="" aluminum="" adjuvant="" group="" can="" significantly="" promote="" ova-specific="" lymphocyte="" proliferation=""><0.05); the="" same="" dose="" of="" wcdps="" there="" was="" no="" statistically="" significant="" difference="" between="" ccdps="" and="" ccdps="" (p="">0.05).

5. Die Wirkung von WCDPS und CCDPS auf CD3 plus CD4 plus T- und CD3 plus CD8 plus T-Zellen: 21 Tage nachdem WCDPS und CCDPS subkutan mit OVA immunisiert wurden, wurde die Expression von CD4 und CD8 in CD3 plus T-Zellen durch Durchflusszytometrie nachgewiesen , wie in Abbildung 4A gezeigt<0.05); as="" shown="" in="" figure="" 4b,="" ova-wcdps="" 10="" a,="" ova-wcdps="" 50="" zhao="" significantly="" promotes="" the="" proliferation="" of="" cd3+cd8+="" t="" cells=""><0.05), ova-wcdps="" 100="" |xg,="" ova-ccdps="" 100="" significantly="" promotes="" the="" proliferation="" of="" cd3+cd8+="" t="" cells=""><0.01); but="" the="" same="" dose="" there="" was="" no="" significant="" difference="" between="" wcdps="" and="" ccdps="" (p="">0.05); there was no significant difference between WCDPS and CCDPS and OVA compared with an aluminum adjuvant group (P>0.05).

Diskussion

Zahlreiche Studien haben gezeigt, dass die chinesische Kräutermedizin eine immunmodulatorische Funktion "Da] hat, und es gibt auch eine große Anzahl von Berichten, die belegen, dass die Polysaccharide der chinesischen Kräutermedizin aus Cistanche als Adjuvans verwendet werden können, um die Immunwirkung von Impfstoffen zu verstärken"3], und Das in dieser Studie ausgewählte Xinjiang-Wüstenfleisch aus Congrong ist ein einzigartiges medizinisches Material in Xinjiang, und Wildarten stehen kurz vor dem Aussterben. In Kombination mit ihrem höheren medizinischen Wert ist der Anbau kultivierter Arten besonders wichtig für die Entwicklung und Nutzung von Heilpflanzenressourcen . Neue Impfstoffe auf dem derzeitigen Markt haben eine gute Antigenspezifität, aber eine schlechte Immunogenität. Pflanzliche Polysaccharide aus Cistanche können diesen Mangel ausgleichen. Mein Land hat einen großen Vorteil in der Erforschung der chinesischen Kräutermedizin. Wir screenen Impfstoff-Hilfsstoffe aus natürlichen chinesischen Kräuterarzneimitteln. Hohe Machbarkeit. Studien haben gezeigt, dass chinesische pflanzliche Polysaccharide aus Cistanche unterschiedliche Grade der Regulierung der spezifischen Immunität und unspezifischen Immunität aufweisen, wie z Kann die Immunwirkung des Impfstoffs verstärken.

Aufgrund der schnell steigenden Nachfrage nach Cistanche wurden ihre wilden Arten abgebaut und sind nun in meinem Land als gefährdete und geschützte Pflanzen gelistet. Basierend auf dem Erfolg der künstlichen Bepflanzung der Wüste Caulis Carlsbad wird erwartet, dass kultivierte Arten wilde Arten ersetzen werden. In diesem Experiment wurden wild gezüchtete Cistanche und kultivierte künstlich gezüchtete Cistanche-Polysaccharide als OVA-Adjuvantien verwendet, um in vivo Maus-Immunisierungsexperimente durchzuführen. Durch die Prüfung verschiedener Indikatoren wurde zunächst die Immunwirkung von wilden und kultivierten Zistanzen evaluiert, was eine Referenz für den effektiven Einsatz von kultivierten Zistanzen in Xinjiang lieferte.

Um die Sicherheit von wild wachsenden Cistanche zu verstehen und künstlich kultiviert zu kultivierenCistanche-Saccharidevon Cistanche, In-vivo-Tierimmunisierungsexperimente haben die Erscheinungsmerkmale von Mäusen beobachtet und festgestellt, dass die Mäuse nach der Immunisierung keinen Durchfall, aufgerichtetes Haar oder Tränen haben und ihre Aktivitäten und Atmung normal sind und es keine Muskelzuckungen gibt. Es gab keinen signifikanten Unterschied im Körpergewicht der Mäuse in jeder Gruppe aufgrund des Störungsphänomens, was darauf hinweist, dass die WCDPS- und CCDPS-Immunisierung das Wachstum der Mäuse nicht beeinträchtigte und ein gewisses Maß an Sicherheit hatte. Antikörper-IgG- und Typisierungstestergebnisse zeigen: WCDPS und CCDPS können die Expression von OVA-spezifischem Antikörper-IgG nach Koimmunisierung mit OVA signifikant erhöhen, und die Wirkung ist äquivalent zu Aluminium-Adjuvans; es kann die Expression des OVA-spezifischen Antikörpertyps IgG2a und IgGl signifikant verstärken. Es zeigt, dass Polysaccharide aus Cistanche gleichzeitig die Th1- und Th2-Immunantwort verstärken, und es gibt keinen signifikanten Unterschied zwischen WCDPS und CCDPS. Die Ergebnisse der Antikörpertypisierung von IgG2a ergaben, dass die WCDPS- und CCDPS- und OVA-Co-Immunisierungsgruppe die Expression von IgG2a im Vergleich zur Aluminium-Adjuvans-Gruppe signifikant steigern kann, ein Aluminium-Adjuvans fördert die T-Zell-Expression schwächer, was beweist, dass WCDPS und CCDPS verwendet werden als Adjuvantien Die Fähigkeit zur Förderung der zellulären Immunität ist signifikant höher als die von Aluminium-Adjuvantien.

Die Ergebnisse des Nachweises der Lymphozytenproliferation durch das MTT-Verfahren zeigten, dass die Milzzellen der Mäuse in jeder Gruppe durch OVA stimuliert wurden. Der Stimulationsindex (SI) der Lymphozytenproliferation in der mit OVA kombinierten WCDPS und CCDPS war signifikant höher als der in der OVA-allein-Immunisierungsgruppe. OVA – Der Stimulationsindex der WCDPS-50-Ah- und OVA-CCDPS-50-Jig-Gruppe war signifikant höher als der der Aluminium-Adjuvans-Gruppe; es weist darauf hin, dass WCDPS und CCDPS in Kombination mit der OVA-Gruppe die Proliferation von OVA-spezifischen Lymphozyten im Vergleich zu der OVA-Gruppe und der Aluminium-Adjuvans-Gruppe signifikant erhöhen können.

Es gibt verschiedene Untergruppen von T-Lymphozyten. CD3 ist das Oberflächenmolekül aller T-Lymphozyten. Nach verschiedenen Phänotypen können sie in CD8 plus T-Zellen und CD4 T-Zellen eingeteilt werden. CD4 plus Moleküle können unter Einwirkung von MHC fl Molekülen gebildet werden, die nach Aktivierung hauptsächlich als Helfer (Th) Zellen verwendet werden. Die CD8 plus Moleküle müssen unter der Wirkung von MHC I Molekülen gebildet werden. Nach der Aktivierung werden sie zu Killerzellen (TC oder CTL), die eine wichtige Rolle bei der Immunität gegen Virusinfektionen und der Tumorimmunität spielen. 3". Durchflusszytometrie erkennt CD3PD4 plus T- und CD3 plus CD8 plus T-Zellexpression, die Ergebnisse zeigen, dass WCDPS und CCDPS die Proliferation von CD4 plus T- und CD8 plus T-Zellen innerhalb eines bestimmten Dosisbereichs signifikant fördern können, und es gibt keine signifikanten Unterschied zwischen WCDPS und CCDPS bei gleicher Dosis Die Kombination von CCDPS und OVA kann die Expression von CD3 plus CD4 plus T- und CD3 plus CD8 plus T-Zellen stimulieren, und die beiden Wirkungen sind äquivalent.

Zusammenfassend sind WCDPS und CCDPS als Adjuvantien sicher. Nach der Immunisierung mit OVA können sie gleichzeitig die spezifische humorale Immunität und die zelluläre Immunität verstärken. Verglichen mit Aluminiumadjuvantien haben WCDPS und CCDPS bessere Wirkungen auf die Verstärkung der zellulären Immunität, und es gibt keinen Unterschied in den Verstärkungswirkungen der zwei Polysaccharide aus Cistanche. Diese Forschungsergebnisse liefern materielle Referenzen für in Xinjiang künstlich kultivierte Cistanche-Polysaccharide aus Cistanche als Adjuvantien und liefern auch die materielle Grundlage für das Screening sicherer und effizienter Immunadjuvantien aus der Xinjiang-WüsteZistanche.

Verweise

[1] X. Zhao, W. Sun, S. Zhang et al. Die adjuvante Immunreaktion von Polysacchariden aus Atractylodis macrocephalus Koidz bei Hühnern, die gegen die Newcastle-Krankheit (ND) geimpft wurden [J]. Carbohydr Polym, 2016, 190-196. DOI: 10. 1016/j. Kohlenhydrat-Pop. 2016. 01.033.

[2]Li J, Wang X, Wang W, et al. Pleurotus-Ferulat-Wasserextrakt verbessert die Reifung und Funktion von murinen Knochenmark-abgeleiteten dendritischen Zellen über den TLR4-Signalweg [J ]. Vaccine, 2015, 33(16): 1923-1933. DOI: 10.1016/j. Impfstoff.2015.02. 063.

[3]Zhao H., Luo Y., Lu C., et al. Die Immunantwort der Darmschleimhaut könnte die immunmodulierende Aktivität des Ganoderma-Polysaccharids bei Mäusen auslösen [J]. Planta Med, 2010, 76(3): 223-227. DOI: 10. 1055/S-0029-1186055.