Acylierte Phenylethanoidglykoside, Echinacosid und Acteosid aus Cistanche tubulosa verbessern die Glukosetoleranz bei Mäusen
Mar 16, 2022
für weitere Informationen:ali.ma@wecistanche.com
Abstrakt
Phenylethanoidglykoside,Echinacosid(1) undActeosid(2), Hauptbestandteile in StemsofCistanche tubulosa(Orobanchaceae), hemmten den Anstieg der postprandialen Blutglukosespiegel bei mit Stärke beladenen Mäusen bei Dosen von 250–500 mg/kg po 125 und/oder 250 mg/kg/Tag po, ohne dass es zu signifikanten Veränderungen des Körpergewichts oder der Nahrungsaufnahme kommt. Darüber hinaus sind mehrere Bestandteile ausCistanche tubulosa, darunter 1 (IC50=3.1 µM), 2 (1.2 µM), Isoacteosid (3, 4.6 µM), 20-Acetylacteosid (4, 0.071 lM), Tubuloside A (5, 8,8 lM) und B (9, 4,0 lM), Syringalid A3-OaL-Rhamnopyranosid (10, 1,1 lM), Campneosid I (13, 0,53 μM) und Kankanosid J1 (14, 9,3 μM) zeigten eine starke Hemmwirkung auf Rattenlinsen-Aldosereduktase. Insbesondere war die Wirksamkeit von Verbindung 4 ähnlich der von Epalrestat (0,072 μM), einem klinischen Aldosereduktase-Inhibitor.
Schlüsselwörter Echinacosid, Acteosid, Verbesserung der Glukosetoleranz, Aldose-Reduktase-Hemmer,Cistanche tubulosa
Einführung
Phenylethanoidglykoside(PhGs) sind eine Art von phenolischen Verbindungen, die durch eine b-Glucopyranosid-Struktur gekennzeichnet sind, die eine Hydroxyphenylethyl-Einheit als Aglykon trägt. Diese Verbindungen umfassen oft eine Reihe von Substituenten wie aromatische Säuren (z. B. Zimtsäure, Cumarsäure, Kaffeesäure, Ferulasäure, Isoferulasäure). usw.) und/oder verschiedene Zucker (z. B. Rhamnose, Xylose, Apiose, Arabinose usw.), die über Ester- bzw. glykosidische Bindungen an den Glucoserest gebunden sind. Obwohl PhGs im Pflanzenreich weit verbreitet sind, wurden die meisten in den Familien Scrophulariaceae, Oleaceae, Plantaginaceae, Lamiaceae und Orobanchaceae gefunden [1–3].Echinacosid(1) [4, 5]undActeosid(2, auch als Verbascosid, Kusaginin, Andorobanchin bezeichnet) [6–9] sind Vertreter der gut untersuchten PhGs und besitzen Berichten zufolge eine Reihe wichtiger bioaktiver Eigenschaften wie antioxidative, neuroprotektive, Stickoxid-Radikalfänger, antihepatotoxische und antiosteoporotische Aktivitäten [1–3, 10–14].
Zuvor berichteten wir über die Identifizierung und biologischen Eigenschaften von Bestandteilen aus den Stängeln vonCistanche tubulosa(Schrenk) R. Wight (Orobanchaceae) [15–19], wobei die Hauptbestandteile 1 und 2 sind. Wir haben gezeigt, dass diese PhGs eine vasorelaxierende Aktivität in isolierter ratthorakaler Aorta zeigen, die durch Noradrenalin kontrahiert ist [15]. Der Stammteil vonCistanche tubulosa(Kanka-nikujuyou auf Japanisch) wird traditionell in tibetischen Gebieten verwendet, um die Durchblutung zu fördern [20, 21], und dieser Befund liefert wissenschaftliche Beweise für die traditionelle Verwendung vonCistanche tubulosa.
Weiterführende Studien zu den bioaktiven Eigenschaften dieses Pflanzenmaterials zeigten, dass diese Haupt-PhGs eine hypoglykämische Aktivität besitzen und die Glukosetoleranz bei mit Stärke beladenen Mäusen verbessern. Weiterhin werden einige der PhGs isoliert ausCistanche tubulosa(1–18) wurde eine potentaldosereduktasehemmende Wirkung nachgewiesen.
EchinacosidinCistanche tubulosa
Resultate und Diskussion
Zuvor [15] berichteten wir über die Isolierung und die bioaktiven Eigenschaften von Bestandteilen der Methanolextrakte von getrockneten StengelnCistanche tubulosa, einschließlich 1, 2, Isoacteosid (3), 20-Acetylacteosid (4), Tubuloside A (5) und B (9) und Salidrosid (18). Wiedemanninosid C (6), Kankanoside H1(7) und H2 (8) Syringalid A 30-OaL-Rhamnopyranosid(10), Kankanosid I (11), Cistantubulosid A (12), Campneosid I (13) und Kankanoside J1 (14), J2 (15), K1 (16) und K2 (17) wurden zusätzlich aus den frischen Stängeln des gleichen Materials isoliert [16, 17] (Abb. 1).
Zunächst wurden die Wirkungen der wichtigsten PhGs (1 und 2) auf den postprandialen Anstieg der Blutglukosespiegel bei mit Stärke beladenen Mäusen untersucht. Die Aktivität von sowohl 1 als auch 2 Dosen von 250–500 mg/kg po war signifikant (Tabelle 1). In diesem Experiment zeigte ein intestinaler a-Glucosidase-Inhibitor, Acarbose, der als positive Kontrolle verwendet wurde, eine angemessene Hemmung (Tabelle 1).
Um die Wirkungen von 1 und 2 auf die Glucosetoleranz zu untersuchen, wurde die Erhöhung des Blutglucosespiegels in mit Stärke beladenen Mäusen nach 2 Wochen kontinuierlicher Verabreichung untersucht. Dosen von 125 und/oder 250 mg/kg/Tag po sowohl 1 als auch 2 verbesserten signifikant die Glukosetoleranz (Tabelle 2) ohne signifikante Veränderung entweder des Körpergewichts oder der Nahrungsaufnahme (Daten nicht gezeigt). Diese Ergebnisse legten nahe, dass 1 und 2 sowohl bei der Hemmung des postprandialen Glukoseanstiegs als auch bei der Verbesserung der Glukosetoleranz wirksam waren.
Um die Wirkungsweise dieser antihyperglykämischen Aktivitäten zu untersuchen, wurden die Wirkungen von 1 und 2 auf Ratten-Dünndarm-a-Glucosidasen, Maltase und Sucrase, untersuchtCistanche tubulosagegen diese Enzyme wurden ebenfalls untersucht. Wir haben zuvor ein dünnes Zuckersulfoniumsalz identifiziert, Salacinol (einer der wirksamsten natürlich vorkommenden a-Glucosidase-Inhibitoren; IC50=6.0 und 1,3 μM gegen Maltase bzw. Saccharose) [22–24], der wurde in dieser Studie auch als Positivkontrolle eingesetzt. 1 (IC50=149 und 174 µM) und 2 (188 und 152 µM) zeigten ähnliche enzymhemmende Aktivitäten (Tabelle 3). Ihre Aktivitäten waren jedoch weit geringer als die der positiven Kontrollen, Salacinol und Acarbose (IC50=6.0 und 1,3 bzw. 1,7 und 1,5 μM). Es ist erwähnenswert, dass unter den isolierten PhGs 3 (IC50=70.4 und 152 μM) und 9 (88,2 und 175 μM) eine trans-Caffeoyl-Einheit an der 60--Position des inneren Glucopyranosyls besitzen teilweise hemmten Maltase und Sucrase mäßig, während ihre Regioisomere 2 und 4 ([300 μM), die die Caffeoyleinheit an der 40--Position besitzen, weniger Aktivität gegen diese Enzyme zeigten.
ActerosidinCistanche tubulosa
Die inhibitorischen Aktivitäten der PhGs gegen humane intestinale Maltase wurden auch in der Mikrosomalfraktion untersucht. Als Ergebnis wurde gefunden, dass 1 (IC50=125 1M), 2 (154 1M), 3 (117 1M), 5 (63 1M), 9 (139 1M) und 15 (168 1M) diese Aktivität zeigen . Diese Verbindungen waren jedoch weit weniger aktiv als Acarbose (15,2 μM).
Zuvor haben wir mehrere Flavonoide [25–31], Stilbenoide [25, 32], Chinasäurederivate [30] und Terpenoide [33] als potente Inhibitoren der Aldosereduktase identifiziert. In dieser Arbeit wurden auch die inhibitorischen Wirkungen der isolierten PhGs (1–18) auf die Aldosereduktase der Rattenlinse untersucht. Aldosereduktase ist bekanntermaßen ein Schlüsselenzym, das die Reduktion von Glucose zu Sorbitol im Polyol-Verarbeitungsweg katalysiert. Sorbitol diffundiert nicht leicht durch Zellmembranen, und die intrazelluläre Akkumulation von Sorbitol wurde mit den chronischen Komplikationen von Diabetes wie Katarakten in Verbindung gebracht [25].
Zunächst ein Methanolextrakt aus frischen StängelnCistanche tubulosazeigte eine starke inhibitorische Aktivität (IC{{0}},8 lg/ml). Unter den isolierten PhGs wurde bei 1 (IC50=3.1 µM), 2 (1.2 µM), 3 (4.6 µM), 4 (0.{{24 }}71 µM), 5 (8,8 µM), 9 (4,0 µM), 10 (1,1 µM), 13 (0,53 µM) und 14 (9,3 µM) (Tabelle 3). Insbesondere Verbindung 4 zeigte die stärkste Aktivität, die der von Epalrestat (0,0072 μM), einem klinisch verwendeten Aldose-Reduktase-Inhibitor, äquivalent war.
Abschließend,Echinacosid(1) undActeosid(2), themajor PhGs aus Stämmen vonCistanche tubulosa, wurde festgestellt, dass sie den Anstieg des postprandialen Blutzuckerspiegels in mit Stärke beladenen Mäusen bei Dosen von 250–500 mg/kg po hemmen 250 mg/kg/Tag po, ohne dass es zu signifikanten Veränderungen des Körpergewichts oder der Nahrungsaufnahme kommt. Diese Ergebnisse legten nahe, dass 1 und 2 nicht nur bei der Hemmung der postprandialen Glukoseerhöhung, sondern auch bei der Verbesserung der Glukosetoleranz wirksam waren. Ihre a-Glucosidase hemmenden Aktivitäten waren jedoch der Aufmerksamkeit nicht würdig. Somit trug die Hemmung von a-Glucosidase kaum zu ihrer antihyperglykämischen Aktivität bei. Das detaillierte Aktionsmodell sollte weiter untersucht werden. Unter den isolierten PhGs hemmten 1–3, 5, 9 und 15 moderat die intestinalen a-Glucosidasen von Ratten und Menschen. Im Gegensatz zu dieser moderaten Hemmung hemmten die PhGs 1–5, 9, 10, 13 und 14 die Rattenlinsen-Aldosereduktase wirksam. Insbesondere war die Aktivität von Verbindung 4 von ähnlicher Größenordnung wie die von Epalrestat, einem klinisch verwendeten Inhibitor.
Experimentelle Methode
Pflanzenmaterial
Stiele vonCistanche tubulosakultiviert in Urumqi, Provinz Xinjiang, China, wurden im September 2007 gesammelt. Das Pflanzenmaterial wurde von einem der Autoren (X. Jia, Präsident des Xinjiang Institute of Chinese Materia Medica and Ethnodrug) identifiziert Labor.
Tiere
Männliche ddY-Mäuse (6 oder 10 Wochen) wurden von KiwaLaboratory Animal Co., Ltd., Wakayama, Japan, bezogen. Die Tiere wurden bei einer konstanten Temperatur von 23 ± 2 Grad gehalten und wurden dann mit einem Standard-Laborfutter (MF; Oriental Yeast Co., Ltd., Tokio, Japan) gefüttert. Die Tiere wurden vor Versuchsbeginn 20–24 h fasten gelassen, hatten aber freien Zugang zu Leitungswasser. Alle Experimente wurden mit wachen Mäusen durchgeführt, sofern nicht anders angegeben. Das experimentelle Protokoll wurde vom Experimental Animal Research Committee der KinkiUniversity genehmigt.
Hemmwirkungen von 1 und 2 auf den Blutglukosespiegel bei mit Stärke beladenen Mäusen
Eine Mischung aus jeder Testprobe und a-Stärke (1 g/kg), suspendiert in 5 Prozent (w/v) Akazienlösung (20 ml/kg), wurde nüchternen Mäusen (6 Wochen) oral verabreicht. Blutproben (ca. 0,1 ml) wurden aus dem infraorbitalen Venenplexus unter Etheranästhesie 0,5, 1 und 2 h nach oraler Verabreichung entnommen. Das gesammelte Blut wurde sofort mit Heparin-Natrium (5 Einheiten/Röhrchen) gemischt. Nach Zentrifugation der Blutproben wurde der Plasmaglucosespiegel enzymatisch mit dem Glucose CII Test Wako (Wako Pure Chemical Industries Ltd., Osaka, Japan) bestimmt. Als Referenzverbindung wurde der intestinale a-Glucosidase-Inhibitor Acarbose verwendet.
Verbesserungseffekte der Glukosetoleranz nach 2-wöchiger Verabreichung von 1 und 2 bei mit Stärke beladenen Mäusen
Jede Testprobe wurde einmal täglich (10:00-12:00) für 2 Wochen 10- Wochen alten Mäusen verabreicht, die mit Standard-Laborfutter (MF; Oriental Yeast Co., Ltd.). Das Körpergewicht wurde jeden Tag vor der Verabreichung der Testprobe gemessen. Nach 20-stündigem Fasten wurde den Mäusen eine Stärkelösung (1 g/kg) mit 20 ml/kg oral verabreicht. Durch das gleiche Verfahren wurden Blutproben (ca. 0,1 ml) gesammelt und die Plasmaglukosespiegel wurden wie beschrieben bestimmt Oben.
Hemmende Wirkungen auf intestinale a-Glucosidasen von Ratten
Die Experimente wurden nach der in unseren früheren Berichten beschriebenen Methode mit einer leichten Modifikation[23, 24] durchgeführt. Daher wurden Dünndarm-Bürstensaum-Membranvesikel von Ratten hergestellt und ihre Suspensionen in 0.1 Mmaleat-Puffer (pH 6,0) wurden als Dünndarm-Glucosidasen von Maltase und Sucrase verwendet. Eine Testprobe wurde in Dimethylsulfoxid (DMSO) gelöst, und die resultierende Lösung wurde mit 0,1 M Maleatpuffer verdünnt, um die Testprobenlösung (Konzentration von DMSO 10 Prozent) herzustellen. Eine Substratlösung im Maleatpuffer (Maltose 74 mM, Saccharose 74 mM, 50 ul), die Testprobenlösung (25 ul) und die Enzymlösung (25 ul) wurden bei 37ºC für 30 min gemischt und dann sofort durch Sieden erhitzt Wasser für 2 min, um die Reaktion zu stoppen. Die Glucosekonzentrationen wurden durch ein Glucose-Oxidase-Verfahren bestimmt. Die Endkonzentration von DMSO in der Testlösung betrug 2,5 Prozent und es wurde kein Einfluss von DMSO auf die inhibitorische Aktivität festgestellt. Als Referenzverbindungen wurden die intestinalen a-Glucosidase-Inhibitoren Acarbose und Salacinol verwendet.
Hemmende Wirkungen auf die intestinale Maltase beim Menschen
Ein menschliches Dünndarmmikrosom (Charge MIC318017, gekauft von BIOPREDIC International, Rennes, Frankreich) in 0,1 M Maleatpuffer (pH 6,0) wurde verwendet, um die Dünndarm-a-Glucosidase-Aktivität von Maltase zu bestimmen . Durch ein ähnliches Verfahren wurde die Wirkung der Maltase-inhibitorischen Aktivität wie oben beschrieben gemessen.
Hemmende Wirkungen auf die Aldosereduktase der Rattenlinse
Die Experimente wurden nach der in unseren früheren Berichten [25–33] beschriebenen Methode mit geringfügigen Modifikationen durchgeführt. So wurde die überstehende Flüssigkeit eines Rattenlinsen-Homogenats als Rohenzym verwendet. Die Enzymsuspension wurde verdünnt, um in der folgenden Reaktion ungefähr 2 nmol/Vertiefung Nicotinamidadenindinukleotidphosphat (NADP) herzustellen. Die Inkubationsmischung enthielt Phosphatpuffer 135 mM (pH 7,0), Li2SO4100 mM, reduziertes Nicotinamidadenindinucleotidphosphat (NADPH) 0,03 mM, DL-Glyceraldehyd 1 mMas als Substrat und 20 lL Enzymfraktion mit einer Testprobe in einem Gesamtvolumen von 100 lL. Die Reaktion wurde durch die Zugabe von NADPH bei 30°C gestartet. Nach 30 min wurde die Reaktion durch die Zugabe von 30 ul 0,5 M HCl gestoppt. Dann wurden 100 ul 6 M NaOH, enthaltend 10 mM Imidazol, zugegeben und die Lösung wurde 20 min auf 60 °C erhitzt, um NADP in ein fluoreszierendes Produkt umzuwandeln. Die Fluoreszenz wurde mit einem Fluoreszenz-Mikroplattenlesegerät (SH-9000, CORONA) bei einer Anregungswellenlänge von 360 nm und einer Emissionswellenlänge von 460 nm gemessen. Jede Testprobe wurde in DMSO gelöst. Es wurden Doppelmessungen durchgeführt und IC50-Werte graphisch ermittelt. Als Referenzverbindung wurde ein Aldose-Reduktase-Inhibitor Epalrestat verwendet.
Statistiken
Die Werte wurden als Mittelwert ± SEM ausgedrückt. Für die statistische Analyse wurde eine Einweg-Varianzanalyse, gefolgt von einem Dunnett-Test, verwendet. Danksagungen Diese Arbeit wurde teilweise durch einen Grant-in-Aid for Scientific Research der Japan Society for the Promotion of Science (JSPS) KAKENHI a Grant Number 24590153 und unterstützt TheJapan-China Medical Association für die finanzielle Unterstützung
Aus: „Acylierte Phenylethanoidglykoside,Echinacosid, undActeosidausCistanche tubulosaVerbesserung der Glukosetoleranz bei Mäusen' von Toshio Morikawa, et al
---J Nat Med (2014) 68:561–566 DOI 10.1007/s11418-014-0837-9
Verweise
1. Jime´nez C, Riguera R (1994) Phenylethanoidglykoside in Pflanzen: Struktur und biologische Aktivität. Nat Prod Rep. 11:591–606
2. Fu G, Pang H, Wong YH (2008) Natürlich vorkommende Phenylethanoidglykoside: potenzielle Hinweise für neue Therapeutika. Curr Med. Chem. 15:2592–2613
3. He J, Hu XP, Zeng Y, Li Y, Wu HQ, Qiu RZ, Ma WJ, Li T, Li CY, He ZD (2011) Advanced research onActeosidfür Chemie und Bioaktivitäten. J Asian Nat Prod Res 13:449–464
4. Stoll A, Renz J, Brack A (1950) Isolierung und Konstitution des Echinacosids, eines Glykosids aus den Wurzeln von Echinacea angustifolia DC 6. Mitteilung über antibakterielle Stoffe. Helv Chim Acta 33: 1877–1893
5. H. Becker, WC Hsieh, R. Wylde, C. Laffite, C. Andary (1982) Structure ofEchinacosid. Z Naturforsch C: Biosci 37C:351–353
6. Scarpati ML, Dell MF (1963) Isolierung von zwei neuen Glucosiden, Verbascosid und Isoverbascosid, aus Verbascum sinuatum. Anna Chim 53:356–367
7. Birkofer L., Kaiser C., Thomas U. (1968) Sugar esters. IV.Acteosidund Neoacteosid, Zuckerester von Syringa vulgaris. Z Naturforsch, B: Chem Sci 23:1051–1058
8. Andary C., Wylde R., Laffite C., Privat G., Winternitz F. (1982) Strukturen von Varbascosid und Orobanchosid, Kaffeesäure-Zuckerester von Orobanche rapum-genistae. Phytochemie 21: 1123–1127
9. Sakurai A, Kato T (1983) Ein neues Glykosid, Kusaginin, isoliert aus Clerodendron trichotomum. Bull. Chem. Soc. Jpn. 56: 1573–1574
10. Lee KJ, Woo ER, Choi CY, Shin DW, Lee DG, You HJ, Jeong HG (2004) Schutzwirkung vonActeosidauf Tetrachlorkohlenstoff-induzierte Hepatotoxizität. Life Sci 74:1051–1064
11. Jia C., Shi H., Jin W., Zhang K., Jiang Y., Zhao M., Tu P. (2009) Stoffwechsel vonEchinacosid, ein gutes Antioxidans, bei Ratten: Isolierung und Identifizierung seiner Gallenmetaboliten. Drug Metab Dispos 37:431–438
12. Jia Y, Guan Q, Guo Y, Du C (2012)Echinacosidstimuliert die Zellproliferation und verhindert Zellapoptose in intestinalen epithelialen MODE-K-Zellen durch Hochregulierung der Expression des transformierenden Wachstumsfaktors b1. J Pharmacol Sci 118:99–108
13. Li F, Yang Y, Zhu P, Chen W, Qi D, Shi X, Zhang C, Yang Z, Li P 2012)Echinacosidfördert die Knochenregeneration durch Erhöhung des OPG/RANKL-Verhältnisses in MC3T3-E1-Zellen. Fitoterapia 83: 1443–1450
14. Li F, Yang X, Yang Y, Guo C, Zhang C, Yang Z, Li P (2013) Antiosteoporotic activity ofEchinacosidbei ovariektomierten Ratten. Phytomedizin 20:549–557
15. Yoshikawa M, Matsuda H, Morikawa T, Xie H, Nakamura S, Muraoka O (2006) Phenylethanoid aminoglycosides and acylated oligosugars with vasorelaxant activity fromCistanche tubulosa. Bioorg Med. Chem. 14:7468–7475
16. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Matsuda H, Yoshikawa M, Yuan D, Muraoka O (2010) Acylierte Phenylethanoid-Aminoglykoside mit hepatoprotektiver Aktivität aus der WüstenpflanzeCistanche tubulosa. Bioorg Med. Chem. 18:1882–1890
17. Pan Y, Morikawa T, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Muraoka O (2010) Bioaktive Bestandteile aus chinesischen Naturheilmitteln. XXXVI. Vier neue acylierte Phenylethanoid-Oligoglykoside, Kankanoside J1, J2, K1 und K2, aus Stämmen vonCistanche tubulosa. Chem. Pharm. Bull. 58:575–578
18. H. Xie, T. Morikawa, H. Matsuda, S. Nakamura, O. Muraoka, M. Yoshikawa (2006) Monoterpene-Bestandteile ausCistanche tubulosa: chemische Strukturen der Kankanoside AE und Kankanol. Chem. Pharm. Bull. 54:669–675
19. Morikawa T, Pan Y, Ninomiya K, Imura K, Yuan D, Yoshikawa M, Hayakawa T, Muraoka O (2010) Iridoid and acyclic monoterpene glycosides, kankanosides L, M, N, O, and P fromCistanche tubulosa. Chem. Pharm. Bull. 58:1403–1407
20. H. Kobayashi, H. Oguchi, N. Takizawa, T. Miyase, A. Ueno, K. Usmanghani, M. Ahmad (1987) New phenylethanoid glycosides fromCistanche tubulosa(Schrenk) Haken. f. I. Chem. Pharm. Bull. 35:3309–3314
21. Shimoda H, Tanaka J, Takahara Y, Takemoto K, Shan SJ, Su MH (2009) The hypocholesterolemic effects ofCistanche tubulosaExtrakt, eine traditionelle chinesische Rohmedizin, bei Mäusen. Am J Chin Med 37: 1125–1138
22. Yoshikawa M, Morikwa T, Matsuda H, Tanabe G, Muraoka O (2002) Absolute stereostructure of potent a-Glucosidase inhibitor, salacinol, with unique this sugar sulfoniumsulfat inner salt structure from Salacia reticulata. Bioorg Med. Chem. 10:1547–1554
23. Muraoka O, Morikawa T, Miyake S, Akaki J, Ninomiya K, Yoshikawa M (2010) Quantitative Bestimmung von potenten a-Glucosidase-Inhibitoren, Salacinol und Kotalanol, in Salasia-Arten mittels Flüssigkeitschromatographie-Massenspektrometrie. J Pharm Biomed Anal 52: 770–773
24. Muraoka O, Morikawa T, Miyake S, Akaki J, Ninomiya K, Pongpiriyadacha Y, Yoshikawa M (2011) Quantitative Analyse von Neosalacinol und Neokotalanol, zwei weitere potente a-Glucosidase-Inhibitoren von Salacia-Arten, durch LC-MS mit Ionen- Paarchromatographie. J Nat Med 65: 142–148
25. Matsuda H., Morikawa T., Toguchida I., Yoshikawa M. (2002) Strukturelle Anforderungen an Flavonoide und verwandte Verbindungen für die hemmende Aktivität der Aldosereduktase. Chem. Pharm. Bull. 50: 788–795
26. Yoshikawa M., Morikawa T., Murakami T., Toguchida I., Harima S., Matsuda H. (1999) Medicinal flowers. I. Aldosereduktase-Inhibitoren und drei neue Sesquiterpene vom Eudesmane-Typ, Kikkanole A, B und C, aus den Blüten von Chrysanthemum Indicum L. Chem Pharm Bull 47:340–345
27. H. Matsuda, T. Morikawa, I. Toguchida, S. Harima, M. Yoshikawa (2002) Medizinische Blumen. VI. Absolute Stereostrukturen von zwei neuen Flavanon-Glykosiden und einem Phenylethanoid-Glykosid aus den Blüten von Chrysanthemum Indicum L.: ihre inhibitorischen Aktivitäten für Rattenlinsen-Aldosereduktase. Chem. Pharm. Bull. 50:972–975
28. Yoshikawa M., Murakami T., Ishiwada T., Morikawa T., Kagawa M., Higashi Y., Matsuda H. (2002) New flavonol oligoglycosides and polyacrylate sucroses with inhibitoring effects on aldose reductase and platelet aggregation from the flowers of Prunus mume. J Nat Prod 65: 1151–1155
29. Matsuda H, Morikawa T, Yoshikawa M (2002) Antidiabetogene Inhaltsstoffe aus mehreren Naturheilmitteln. Pure Appl. Chem. 74:1301–1308
30. Xie H, Wang T, Matsuda H, Morikawa T, Yoshikawa M, Tani T (2005) Bioaktive Bestandteile aus chinesischen Naturheilmitteln. XV. Hemmwirkung auf Aldosereduktase und Strukturen der Saussureoside A und B aus Saussurea medusa. Chem. Pharm. Bull. 53:1416–1422
31. Morikawa T, Xie H, Wang T, Matsuda H, Yoshikawa M (2008) Bioaktive Bestandteile aus chinesischen Naturheilmitteln. XXXII. Aminopeptidase N und Aldosereduktase-Inhibitoren aus Sinocrassula indica: Strukturen der Sinocrassoside B4, B5, C1 und D1–D3. Chem. Pharm. Bull. 56:1438–1444
32. T. Morikawa, S. Chaipech, H. Matsuda, M. Hamao, Y. Umeda, H. Sato, H. Tamura, H. Kon'i, K. Ninomiya, M. Yoshikawa, Y. Pongpiriyadacha, T. Hayakawa, O. Muraoka (2012) Antidiabetogenic oligostilbenoids and {{ 2}}Ethyl-4-phenyl-3,4-dihydroisocumarine aus der Rinde von Shorea roxburghii. Bioorg Med. Chem. 20:832–840
33. Morikawa T, Kishi A, Pongiriyadacha Y, Matusda H, Yoshikawa M (2003) Strukturen neuer Triterpene vom Friedelane-Typ und Sesquiterpene vom Eudesmane-Typ und Aldose-Reduktase-Inhibitoren von Salacia Chinensis. J Nat Prod 66: 1191–1196