Entzündungshemmende Prinzipien aus den Nadeln von Pinus Taiwanensis Hayata und In-Silico-Studien zu ihrer potenziellen Anti-Aging-Wirkung Ⅱ

Die Kiefernnadeln wurden mit Methanol extrahiert und mit Hexan und Ethyl verteiltAcetat und Wasser, um jeweils drei lösliche Schichten zu erhalten. DerAntiphlogistikumFraktion, DieEthylacetatschicht, wurde einer kontinuierlichen konventionellen Chromatographie unterzogengrafische Technikkombination und fünf unbeschriebene Verbindungen wurden charakterisiertdarunter zwei neue Lignane, 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -Dihydroxy-70 -(4-hydroxyphenyl)propan-80 -yloxy]benzoesäure (1), 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -Dihydroxy-70 -(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)-propan-80 -yloxy]-2-hydroxybenzoesäure (2), ein neues Diterpenoid, (13E,12R)-12 -hydroxyagathischSäure (3), ein Monoterpenoid, 5-Isopropyl-3-oxocyclohex-1-en-1-carbonsäure (4), und einPhenylpropan, Styraxinolsäure (5). Die chemischen Strukturen dieser neuen Verbindungenwurden mit Hilfe der NMR-Spektralaufklärung und der MS-Spektrometrie konstruiertmetrische Analyse. Darüber hinaus sind 72 bekannte Verbindungen bekannt, darunter ein Steroid, -Sitosterin (6); ein Sesquiterpenoid, (-)-Oplopan-4-eins-10- -O- -D-Glucosid (7); einsCumarin, Umbelliferon (8); einsAlkaloid, Indol-3-aldehyd (9); vier Diterpenoide,

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3-Methoxyphenyl)-1-Propanon (64), 3-hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)-1-propanon (65),2-(4-hydroxyphenyl)essigsäure (66), Phenylessigsäure (67), ist Vanillinsäure (68), BenzoesäureSäure (69), Vanillin (70), p-Hydroxyacetophenon (71), Natriumsalicylat (72), Vanillinsäure4-O- -L-Rhamnosid (73), trans-Ferulasäure (74), Natriump-Cumarat (75), p-CumarsäureSäure (76), trans-Methylp-Cumarat (77) wurden jeweils durch die Untersuchung von identifiziertihre physikalischen und spektroskopischen Daten mit den zuvor veröffentlichten (Referenzen bekannter).Verbindungen wurden im Anhang B mit ergänzenden Materialien bereitgestellt.

3.1. Strukturaufklärung der Verbindungen 1–5

Verbindung1 wurde als optisch aktiver farbloser Sirup isoliert und das molekulareFormel wurde als C zugewiesen16H16O6 durch HR-ESI-MS-Analyse ([M− H]−, m/z 303,0855, ber.für C16H15O6, 303.0869, Abbildung S1). Das IR-Spektrum weist auf die Anwesenheit einer Hydroxylgruppe hin(3412 cm−1 ) und eine konjugierte Carbonylgruppe (1598 cm).−1 ). Der1H-NMR-Daten (Abbildung S2)zeigte die Signale für zweiAbs-substituierte aromatische Einheiten [δH 6.72 (2H, d, J = 8.4 Hz,H-30 , -50 ), 6.86 (2H, d, J = 8,8 Hz, H-2, -6), 7,24 (2H, d,J = 8.4 Hz, H-20 , -60 ) und 7,83(2H, d, J = 8.8 Hz, H-3, -5)], zwei sauerstoffhaltige Methine [δH 4.48 (1H, m, H-80 ) und 4,85(1H, d, J = 5.6 Hz, H-70 )] und zwei Methine [δH 3,81 (1H, dd,J {{0}}.0, 4,0 Hz, H-90 a), und 3.86 (1H, dd,J {{0}}.0, 5,6 Hz, H-90 B)]. Der13C- und DEPT-NMR-Spektren (Abbildung S3)von1 zeigte sechzehn Kohlenstoffe, entsprechend einer Methylengruppe, zwei sauerstoffhaltigeKohlenstoffe, zwölf aromatische Kohlenstoffe und ein konjugiertes Carbonyl (Tabelle1). Der2 J- Und3 J- HMBC-Korrelationen von H-2, -6 zu C-1 und 4; von H-3, 5 bis C-1 und 7; von H-20, 60 ZuC-40 und 70 ; von H-70 zu C-80 und 90 ; und von H-80 bis C-1 wurden jeweils beobachtetdas HMBC-Spektrum von1 (Abbildung S4). Darüber hinaus ist eine große Kopplungskonstante zwischen H-70 und H-80 (J = 5.6 Hz) unterstützte die relative Konfiguration von1 bei C-70 /C-80 alsdrei[44]. Die absoluten Konfigurationen bei C-70 und C-80 von1 wurden durch elektronisches Rundschreiben ermitteltDichroismus-Analyse (ECD). Der positive Cotton-Effekt bei 230 nm (∆ε plus 0.17) ergab eine 8S Konfiguration für1, gemäß der veröffentlichten Literatur [37,38] und daher 70 R war auchbestimmt. Andere 2D-Spektren (Abbildung S5–S7) lieferten die vollständige Zuordnung von Protonen undKohlenstoffsignale. Dementsprechend ist die Struktur von1 wurde als 1-[(7 zugewiesen0 R,80 S)-70 ,90 -Dihydroxy-7 0 -(4-hydroxyphenyl)propan-80 -yloxy]benzoesäure, wie in Abbildung gezeigt1. 

Die Summenformel von2 wurde als C zugeordnet17H18O8 auf Basis von HR-ESI-MSanalytische Daten (m/z 349.0936 [M − H]−, Abbildung S8). Die Absorption im IR-Spektrum(3425 und 1541 cm−1 ) zeigte die Hydroxyl- und konjugierte Carbonylfunktionalitäten an,bzw. Im Vergleich der NMR-Spektren von1 Und2, es konnte beobachten, dass siebesaß verschiedene aromatische Einheiten. Zwei Sätze ABX-gekoppelter aromatischer Ringe und einerEs konnte eine Methoxygruppe nachgewiesen werden1H- (Abbildung S9) und13C-NMR-Daten (Abbildung S10).von2 (Tisch1), und es deutete auf diese Verbindung hin2 besaß zwei trisubstituierte stattAbs-disubstituierte aromatische Einheiten. Die signifikanten HMBC-Korrelationen (Abbildung S11) ausH-3 zu C-1, C-5 und C-7; von H-6 nach C-4; von OCH3-30 zu C-30 ; von H-60 zu C-40 UndC-70; von H-70 zu C-10 , C-20 , C-80 und 90 ; von H-80 zu C-1 jeweils festgestelltdie Struktur von2 war auch ein Neolignan-Skelett. Durch eine Kombination einer großen Kupplungkonstant (J7,8 = 5.2 Hz) und positiver Cotton-Effekt bei 230 nm (∆ε plus 1,14), das AbsoluteKonfiguration von2 wurde als zugewiesendrei- und (70 R,80 S)-Form, das Gleiche wie1 [44,45]. Andere2D-Spektren (Abbildung S12–S14) lieferten die vollständige Zuordnung der Protonen- und Kohlenstoffsignale.Diese Feststellungen schlossen die Struktur von ab2 als 1-[(70 R,80 S)-70 ,90 -Dihydroxy-70 -(4-hydroxy-3-Methoxyphenyl)propan-80 -yloxy]-2-hydroxybenzoesäure (Abbildung1). 

Verbindung3 wurde als farbloses Pulver erhalten und seine Summenformel lauteteals C zugeordnet20H30O5 auf Basis von HR-ESI-MS-Analysedaten (m/z 349.2024 [M − H]−, Abbildung S15). Verbindung3 zeigte Absorptionspeaks bei 3450 (OH) und 1648 (Carbonsäure).Säure) cm−1 in seinem IR-Spektrum. Dies wurde durch die bewiesen13C-NMR-Spektrum (Abbildung S16) inbei dem zwei Carboxylfunktionalitäten beobachtet wurdenδC 167,2 (C-15) und 181,5 (C-19). Ines ist1H-NMR (Abbildung S17), die Resonanzen beiδH 4,03 (1H, dd,J = 9.2, 2,8 Hz, H-12) undδC 75,5 (C-12) deutete auf das Vorhandensein einer sekundären Alkoholgruppe hin. Das terminale MethylenGruppe konnte aufgrund der Protonenresonanzen bei etabliert werdenδH 4.53 (1H, s, H-17a) und4.91 (1H, s, H-17b) und die Kohlenstoffsignale beiδC 106,9 (C-17) bzw. 150,2 (C-8).Zwei Methylgruppen anδH 0.63 (3H, s, CH3-20) und 1,21 (3H, s, CH3-18) waren mit verbundendie quartären Kohlenstoffe (C-10 und C-4), nachgewiesen durch die HMBC-Korrelationen (Abbildung S18).Der Abschirmeffekt der Carboxylgruppe an C-4 führte zu einer Hochfeldverschiebung von CH3-20 (δH 0.63), was darauf hindeutet-Aufbau [46]. Darüber hinaus ist die chemische Verschiebung von H-17a (δH 4,53) erschien im Upfield-Bereich, was auf die 12 schließen lässtR Aufbau [47]. In seinem HMBCSpektrum, die Korrelationen von H-12 zu C-9, C-14 und C-16; von H-17 zu C-7 und C-9;aus CH3-16 zu C-12 und C-14; aus CH3-18 zu C-3, C-4 und C-19; aus CH3-20 zu C-1, C-5,C-9 bzw. C-10 konstruierten die planare Struktur von3 wie bereits berichtetfür 12-Hydroxyagathinsäure [46]. Die C-13-Konfiguration von3 wurde festgelegtalsE durch die NOESY-Analysedaten (Abbildung S19), die die NOE-Effekte untereinander zeigtenH-5/H-9, H-5/H-18 und H-12/H-14. Darüber hinaus ist der NOE zwischen H-14 und CH3-16, die in 12-Hydroxyagathinsäure [46], wurde in nicht erkannt3. Andere2D-Spektren (Abbildung S20–S21) lieferte die vollständige Zuordnung der Protonen- und Kohlenstoffsignale.Abschließend ist die Struktur von3 wurde gegründet als (13E,12R)-12-Hydroxyagathinsäure alsdargestellt (Abbildung1).

Das HR-ESI-MS-Spektrum von4 zeigte eine [M− H]− Ionenpeak beim/z 181.0855 (Abbildung S22), im Einklang mit der pseudomolekularen Formel von C10H13O3. Die AbsorptionSpitzen bei 3456 und 1635 cm-1 in seinem IR-Spektrum zeigten Hydroxyl und konjugiertes CarbonylGruppen bzw. Zwei Methinprotonen anδH 2,09 (1H, m, H-5) und 6,32 (1H, dd,J = 2.4, 1,2 Hz, H-2), zwei Methylengruppen anδH 1.84 (1H, m, H-4a), 2.02 (1H, m, H-4b), 2.50 (1H, dddd,J = 19.2, 9.2, 4.8, 2.4 Hz, H-6a) und 2.70 (1H, dddd,J = 19.2, 5,2, 5,2, 1,2 Hz,H-6b) und ein Satz Isopropylprotonen beiδH 0.88 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-9), 0.98 (3H, d, J = 6,8 Hz, CH3-10) und 2.31 (1H, hept,J = 6.8 Hz, H-8) erschien in der1H-NMR-Spektrumvon4 (Abbildung S23). Darüber hinaus liegt ein konjugierter Carbonylkohlenstoff beiδC 174,8 (C-7) und einsCarboxylkohlenstoff beiδC 205,7 (C-3) konnte darin beobachtet werden13C- und DEPT-NMR-Spektren(Abbildung S24). Die beobachteten HMBC-Korrelationen (Abbildung S25) von H-2 zu C-7; von H-4 bisC-3; von H-6 zu C-1, C-2 und C-5; aus CH3-9 bis C-5 und CH3-10; aus CH3-10 bis C-8,bzw. konstruierte die Struktur von4 als 5-Isopropyl-3-oxocyclohex-1-en-1-carbonsäureSäure (Abbildung1). Andere 2D-Spektren (Abbildung S26–S28) lieferten die vollständige Zuordnung des Protonsund Kohlenstoffsignale. Die Stereochemie an C-5 blieb jedoch unbestimmt.

Verbindung5 besaß die Summenformel C11H14O5 aus einer deprotonierten bestimmtMolekülionenpeak im Negativmodus HR-ESI-MS-Analyse (m/z 225.0767 [M − H]−, FigurS29). In seinem IR-Spektrum ist Hydroxyl (3421 cm).−1 ) und Carboxyl (1572 cm−1 ) Funktionalitäten konnten erkannt werden. Der1Das H-NMR-Spektrum (Abbildung S30) zeigte zwei weitreichendeKopplung aromatischer Protonen anδH 6.86 (1H, d, J = 2.4 Hz, H-4) und 7.31 (1H, d,J = 2.4 Hz, H-6), eine Methoxygruppe anδH 3.56 (2H, t, J = 6.8 Hz, H-9) und ein Satz vonPropanol-Protonen anδH 1,82 (2H, tt,J {{0}}.0, 6,8 Hz, H-8), 2,61 (2H, t,J {{0}},0 Hz, H-7) und 3,56(2H, t, J = 6,8 Hz, H-9). Darüber hinaus befand sich eine Carboxylgruppe anδC 176,2 (C-10) ines ist13C-NMR-Spektrum (Abbildung S31). Die planare Struktur von5 wurde von der bedeutenden Person gegründetHMBC-Korrelationen (Abbildung S32) von OCH3-3 zu C-3; H-6 bis C-2, C-4, C-7 und C-10; H-7zu C-4, C-5 und C-8; H-9 bis C-7 bzw. C-8. Andere 2D-Spektren (Abbildung S33–S35)lieferte die vollständige Zuordnung der Protonen- und Kohlenstoffsignale. Die oben genannten Beweise deuten darauf hindie Struktur von5 als 2-hydroxy-5-(3-hydroxypropyl)-3-methoxybenzoesäure (Abbildung1), die bereits in der früheren Syntheseliteratur als Styraxinolsäure beschrieben wurde [48]. Dennoch handelt es sich bei der vorliegenden Untersuchung um den ersten Bericht darüber5 aus natürlichen Quellen.

3.2. Entzündungshemmende Wirkung

Entzündungen sind einer der wichtigsten Selbstverteidigungsmechanismen, die durch Bakterien stimuliert werden.Viren, Wunden oder verschiedene andere Umweltfaktoren. Es handelt sich um eine erste Reaktion des ImmunsystemsSystem gegen Infektionen und Reizungen. Neutrophile gehören zu einer häufig vorkommenden Artvon Makrophagen und spielen eine wichtige Rolle bei Entzündungen und sind normalerweise die ersten LymphozytenZellen gelangen in die infizierte Region [49]. Neutrophile sezernieren eine Reihe von Zytotoxinen wie zSuperoxidanion und Elastase als Reaktion auf die Aktivierung des Immunsystems [50]. InIn den letzten Jahren wurde gezeigt, dass verschiedene menschliche Krankheiten mit Neutrophilen zusammenhängenÜberexpression [51–55]. Der Zusammenhang zwischen Entzündung und Krebs ist erwiesen, und die Autoren wiesen darauf hin, dass die Bildung von Krebszellen in direktem Zusammenhang stehezu einer Entzündung [49]. Daher lohnen sich neue entzündungshemmende Wirkstoffeweitere Studie zur Krebsbehandlung. Es wurden 43 isolierte Verbindungen untersuchtdie Hemmung der Erzeugung von Superoxidanionen und der Elastasefreisetzung durch menschliche Neutrophileals Reaktion auf fMLF/CB [56] (siehe ergänzende Materialien, Tabelle S2). Das Signifikante ininhibitorische Ergebnisse (Tabelle2) hat das nur gezeigt45, 47, 48, 49, Und50 (Figur2) angezeigteine signifikante Hemmung der Erzeugung von Superoxidanionen mit IC50 Werte reichen von3.3 ± 0.9 Zu7.7 ± 0.9 µM im Vergleich zur Positivkontrolle LY294002 (IC50 1.1 ± 0.3 µM). Darüber hinaus,48, 50, Und51 (Figur2) ergab eine signifikante Hemmung der Elastasefreisetzungmit IC50 Werte im Bereich von 5,3± 0.2 bis 8.3± 0.8 µM im Vergleich zum PositivenKontrolle LY294002 (IC50 3.2 ± 1.0 µM) (Tabelle2). Verbindungen48 Und50 beides angezeigtHemmungen der Erzeugung von Superoxidanionen und der Elastasefreisetzung, was auf ihr Vielfaches hinweistentzündungshemmende Bioaktivitäten. Die Nadeln vonP. morrisonicolaEs wurde berichtet, dass dies der Fall wareine entzündungshemmende Wirkung in RAW 264.7-Makrophagen [13]. Das haben die Autoren vorgeschlagenEpicatechin undp-Cumarsäure identifiziert inP. morrisonicolakönnen die Wirkstoffe sein.In der vorliegenden Untersuchung enthielten alle Wirkstoffe ein ähnliches Flavon-Rückgratzu dem von Epicatechin und demp-Cumaroyl-Einheit konnte auch in beobachtet werden49, 50, Und51. Dies weist darauf hin, dass das Flavonoid undp-Cumaroyl-funktionelle Gruppen können einen Beitrag leistendie entzündungshemmende Bioaktivität in der vorliegenden Studie. Diese Bioassay-Ergebnisse legen dies naheFlavonoide spielen dabei eine SchlüsselrollePinusSpezies für entzündungshemmende Bioaktivität.

Tabelle 2.Hemmende Wirkung gereinigter Verbindungen auf die Erzeugung von Superoxidanionen und die Elastasefreisetzungdurch menschliche Neutrophile als Reaktion auf fMLF/CB.

Figur 2.Strukturen entzündungshemmender Prinzipien45, 47, 48, 49, 50, Und51. 

3.3. Molekulare Docking-Studie

Der altersbedingte Rückgang des GH-Spiegels gilt als Symptom einer neuroendokrinen ErkrankungAltern [57]. Dieses Phänomen kommt bei mehreren Säugetierarten vor, beispielsweise beim Menschen und bei HaustierenHunde und Labornager [57]. Beim Menschen beginnen die GH-Spiegel im Plasma zu sinkenmit zunehmendem Alter nach der vollständigen körperlichen Reifung und setzt sich über die Jahrzehnte des Lebens fort [57]. Ghrelin wird als endogener Ligand für das GHSR identifiziert und ist ein Hauptregulator vonGH-Sekretion [18,19]. Ghrelin ist an verschiedenen physiologischen und pathophysiologischen Prozessen beteiligtMechanismen beim Menschen wie Alterung [24,25]. Darüber hinaus kann an Ghrelin gedacht werdenmit der entzündungshemmenden Wirkung zusammenhängen. Die Aktivierung von Immunzellen wurde durch Ghrelin begrenztBehandlung durch die Hemmung von NF-κB-Aktivierung und anschließende MCP-1-Sekretion [26]. Es wurde über ein synthetisches Ghrelin-Analog-Wachstumshormon-Releasing-Peptid-2 (GHRP-2) berichtetEs reduziert die Entzündungsfaktoren bei arthritischen Ratten und unterstützt die Immunzellenwurden durch die Aktivierung von Ghrelinrezeptoren vermittelt [27]. Neves et al. auch vorgeschlagendie Regulierung von Entzündungen als Anti-Aging-Intervention [58]. So laut derexperimentelle Daten zu entzündungshemmenden Bioassays,45, 47, 48, 49, 50, Und51 (Figur2) zeigtesignifikante Hemmwirkungen und wurden ausgewählt, um ihre Bindungsfähigkeiten an das zu bestimmenGhrelin-Rezeptor. Vor der Docking-Simulation war der native Ligand (8QX) im 6KO5 enthaltenDie PDB-Datei wurde zur Validierung erneut angedockt. Die Wechselwirkungen zwischen 8QX und 6KO5 und demDie besten Ergebnisse der berechneten Ergebnisse zeigten eine hohe Ähnlichkeit und Wiederholbarkeit mit nativen Daten(Daten nicht angezeigt). Die Ergebnisse zeigen die hohe Genauigkeit des bestehenden Simulationssystemsund unterstützte weitere Berechnungen.

Die niedrigste Bindungsenergie jedes Liganden wurde als beste Konformation angesehen. DerBindungsaffinitäten sind in der Tabelle aufgeführt3. Wachstumshormon freisetzendes Peptid 6 (GHRP-6) warWird wie in unserem Fall als Positivkontrolle für das Andocken an die Bindungstasche des Ghrelinrezeptors verwendetvorheriger Bericht. Obwohl AutoDock Vina nicht für das Andocken zwischen Peptiden konzipiert istund Proteine ​​wurden in früheren Berichten mehrere erfolgreiche Ergebnisse veröffentlicht [59–61]. Daher wurde in dieser Studie zunächst GHRP-6 berechnet, um die Genauigkeit des zu bestimmenaktuellen Docking-Modell und die Ergebnisse stimmten gut überein (Abbildung3A). Im Vergleich zu GHRP-6,die Bindungsenergien von49, 50, Und51 waren niedriger als−10,3 kcal/mol (Tabelle3). Dasschlägt vor, dass49, 50, Und51 könnte in die Tasche des Ghrelin-Rezeptors andocken oder ähnlichsogar besser als das von GHRP-6. Für49, konnten die Wasserstoffbrückenbindungen dazwischen beobachtet werdenzwei Carbonylgruppen (C-4 undp-coumaroyl) und Arg283, C-5 hydroxyl und Gln120,C-7 Hydroxyl und Tyr313 und C-40 Hydroxyl bzw. Cys304. Arg199 bildete aherkömmliche Wasserstoffbindung mit einer Carbonylgruppe vonp-Cumaroyl. Zusätzlich,49 Warverknüpft mit den Resten Arg283, Arg102, Asp99, Phe279, Phe312, Leu181 und Pro200 vonDer Ghrelin-Rezeptor über verschiedene Effekte wie dieπ-Kation,π-Anion,π–π T-förmig undπ-Alkyl-Wechselwirkungen. Diese ermöglichten eine Verbindung49 und Protein zu einem stabilen Komplex(Figur3B). 50 wurde mit Asp99, Arg102, Gln120, Arg283, Leu103, Asn305 und gebundenArg199 durch verschiedene Wasserstoffbrückenbindungen, während andere Wechselwirkungen (π-Kation,π–Anion,π–π T-förmig undπ–Alkyl) wurden auch bei Asp99, Arg102, Arg283, Phe279, Phe312,Leu181 und Leu210 (Abbildung3C). 51 Außerdem wurden Wasserstoff- oder Kohlenstoff-Wasserstoff-Bindungen aufgebautmit Tyr313, Ser123, Arg283, Arg102 und Asn305, zusammen mit anderen Wechselwirkungen (π-Kation,π-Anion,π-Sigma,π–π T-förmig undπ-Alkyl) zur Verknüpfung mit Asp99, Arg283, Arg102, Leu181,Es konnten Phe312- und Pro200-Reste des Ghrelinrezeptors nachgewiesen werden (Abbildung3D). Im Vergleich zuVerbindungen45, 47, Und48 mit49, 50, Und51, die erstere Gruppe besaß ein Flavonoidnur das Gerüst, während die letztere Gruppe Zucker- und Cumaroyleinheiten aufwies. Das wurde berichtetDie am Zucker angebrachte Cumaroylgruppe war entscheidend für die Bindungsaffinität zum GhrelinRezeptor [34]. Die Lückenstruktur von GHSR interagiert mit der Acylsäureeinheit von Ghrelinführte zur Umwandlung des Ghrelinrezeptors in eine aktive Konfiguration [43]. Darüber hinaus wird die Bindungstasche von GHSR durch die Salzbrücke zwischen Glu124 gegabeltund Arg283, und diese Region ist reich an hydrophoben Aminosäuren [43]. Nach unseremDaten, die Docking-Scores von49, 50, Und51 waren höher als die von45, 47, Und48, welcheschlug eine bessere Bindungsfähigkeit vor. Die wichtigsten strukturellen Merkmale waren dieCumaroylgruppen anstelle der Zuckereinheiten, und dies könnte durch die weiter belegt werdenUntersuchung weiterer Verbindungen mit Cumaroyl-Funktionalitäten. In dieser Studie wurde dieWirkstoffe49, 50, Und51 besaß nicht nur entzündungshemmende Bioaktivität, sondern auchdas Bindungspotential des Ghrelin-Rezeptors. Dies deutete darauf hin, dass die behauptete Anti-Aging-Wirkung vonKiefernnadeltee kann auch auf diesen Tee-Ghrelin-ähnlichen Verbindungen basieren.

4. Schlussfolgerung

Insgesamt wurden siebenundsiebzig Isolate mit fünfzehn unbeschriebenen Verbindungen gereinigt.bestätigt anhand der Methanolextrakte vonP. taiwanensisNadeln. Ihre Strukturen wurden charakterisiertdurch spektroskopische und spektrometrische Analysen. Es wurden 43 gereinigte Verbindungen hergestelltauf ihre untersuchtentzündungshemmend Aktivitätbis zumHemmung der Bildung von SuperoxidanionenUndElastase-Freisetzung am Neutrophilenmodell. Das legen die Ergebnisse nahe45, 47, 48, 49, 50, Und51 bedeutend besitzenentzündungshemmende Potenziale. Weiteres molekulares AndockenRechenergebnisse unterstützt49, 50, Und51 eine Bindungsaffinität zum Wirkstoff aufweisenTasche des Ghrelinrezeptors. Daher sind die Rohextrakte und gereinigten Bestandteile vonP. taiwanensishaben das Potenzial, als neue entzündungshemmende Leitmedikamente entwickelt zu werden oderInhaltsstoffe.

Zusatzmaterialien:Folgendes ist online verfügbar unter, Anhang A: Vollständige Extraktions- und Isolierungsverfahren,Anhang B: Referenzenbekannter Verbindungen, Tabelle S1: Vorläufiges Bioaktivitätsscreening von Nadeln vonP. taiwanensisauf SuperoxidAnionenerzeugung und Elastasefreisetzung durch menschliche Neutrophile als Reaktion auf fMLF/CB,Tabelle S2: Hemmwirkung gereinigter Verbindungen auf die Erzeugung von Superoxidanionen und ElastaseFreisetzung durch menschliche Neutrophile als Reaktion auf fMLF/CB, Abbildung S1–S35: HRMS- und NMR-Spektren vonneue Verbindungen

1–5. Autorenbeiträge:Konzeptualisierung, P.-CK und JTCT; Methodik, P.-CK und T.-LH;Untersuchung, Y.-CL, AMK und M.-LY; Ressourcen, S.-YW; Datenkuration, Y.-CL und G.-HY;Schreiben – Originalentwurfsvorbereitung, P.-CK und Y.-CL; Schreiben – Rezension und Bearbeitung, P.-CK AllDie Autoren haben die veröffentlichte Version des Manuskripts gelesen und ihr zugestimmt.

Finanzierung:Diese Studie wurde vom Ministerium für Wissenschaft und Technologie, Taiwan (MOST) gefördert. DerDie Forschung wurde teilweise vom Higher Education Sprout Project des Bildungsministeriums unterstütztHauptsitz der Universitätsförderung an der National Cheng Kung University (NCKU).

Erklärung des Institutional Review Board:Die Studie wurde mit Genehmigung der Institution durchgeführtPrüfungsausschuss des Chang Gung Memorial Hospital (IRB-Nr. 201800369A3).Einverständniserklärung:Die Abrechnung kann auf Anfrage zur Verfügung gestellt werden.

Erklärung zur Datenverfügbarkeit:Originaldaten können auf Anfrage beim entsprechenden Autor angefordert werden.

Danksagungen:Die Autoren danken auch dem Chang Gung Memorial Hospital (CMRPD1B0281~3,CMRPF1D0442~3, CMRPF 1F0011~3, CMRPF1F0061~3 und BMRP450 verliehen an T.-LH) für dieteilweise finanzielle Unterstützung der vorliegenden Forschung. Die Autoren danken für den Einsatz der NMRAusrüstung des Instrumentenzentrums der Nationalen Cheng-Kung-Universität.

Interessenskonflikte:Die Autoren geben an, dass kein Interessenkonflikt besteht.

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