Antioxidans-Graphenoxid-Nanoband als neuartiges Aufhellungsmittel hemmt den mit Mikrophthalmie assoziierten Transkriptionsfaktor-bezogenen Melanogenesemechanismus

Kontakt:joanna.jia@wecistanche.com/ WhatsApp: 008618081934791

ABSTRAKT:In demMelaninSyntheseprozesse spielen oxidative Reaktionen eine wesentliche Rolle, und es ist eine gute Strategie, die Melaninproduktion durch Reduzierung von oxidativem Stress zu hemmen. Fulleren und seine Derivate oder die Komplexe galten als starke Fänger freier Radikale, und wir wandten außerdem mehrschichtiges sp2nanocarbon an, um es zu entdeckenMelaninSynthese hemmende Mechanismen. In der vorliegenden Studie verwendeten wir neuartige Nanomaterialien, wie mehrwandige Kohlenstoffnanoröhren (MWCNTs), MWCNTs vom kurzen Typ, Graphenoxid-Nanobänder (GONRs) und GONRs vom kurzen Typ als Antioxidantien zur RegulierungMelaninProduktion. Die Ergebnisse zeigten, dass GONRs auf intrazellulären und extrazellulären Analyseplattformen für oxidativen Stress bessere antioxidative Fähigkeiten aufwiesen als andere. Wir schlugen vor, dass GONRs sauerstoffhaltige funktionelle Gruppen aufweisen. Im 2′,7′-Dichlordihydrofluoresceindiacetat-Assay fanden wir heraus, dass GONR Metallionen chelatisieren kann, um reaktive Sauerstoffspezies zu binden. In der molekularen Einblicksansicht beobachteten wir, dass diese Nanomaterialien die Melaninsynthese herunterregulierten, indem sie die Mikrophthalmie-assoziierte Transkriptionsfaktor-bezogene Genexpression verringerten, und es gab ähnliche Konsequenzen bei der Proteinexpression. Zusammenfassend lässt sich sagen, dass GONRs als Roman ein potenzieller Agent istAntioxidansund hautbleichendes kosmetisches Material.

ZistancheMelaninbildung hemmen

1. EINLEITUNG

Die Haut ist das Organ, das die äußere Oberfläche des menschlichen Körpers bedeckt. Da die Grenzfläche mit der Umgebung in Kontakt steht, spielt die Hautschicht eine wichtige Rolle beim Schutz des Körpers vor Krankheitserregern, bei der Vermeidung von übermäßigem Wasserverlust, bei der Regulierung der Körpertemperatur usw. Melanozyten wachsen in der Basalmembran der Hautepidermis und machen 5 bis 10 Prozent des Zellinhalts aus. Sie wurden als einzellige "Drüsen" mit dünnen, langen, schlangenartigen Dendriten und Verzweigungen charakterisiert. Melanozyten bewegen sich in ihrer unmittelbaren Umgebung durch die Epidermiszellen und bilden eine Konstellation von Epidermiszellen um jeden Melanozyten herum. Es gibt viele interne und externe Ursachen für die Hautalterung, und einer dieser Faktoren ist die ultraviolette (UV) Strahlung des Sonnenlichts.1 Während der UV-Exposition steigt der Gehalt an reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) in der Haut dramatisch an, was als oxidativer Stress bekannt ist. Mehrere Umwelttoxizitätsfaktoren erhöhen auch den oxidativen Stress für die Haut, wie Pestizide, Tetrachlorkohlenstoff, Schwermetalle, aromatische Amine und Feinstaub 2,5 (PM2,5).2 Im biochemischen Mechanismus werden die intrazellulären Oxidantien aus dem nicht-enzymatischen System erzeugt und in umgewandelt ROS, um den Melanogeneseweg auszulösen.

Zusätzlich zu ROS gibt es viele Faktoren, die die Melaninproduktion beeinflussen, einschließlich Genexpression, Entzündungen, endokrine Veränderungen und Pigmentaufnahme.1 In den ersten Schritten der Melaninproduktion spielt Tyrosinase eine Rolle bei der Katalyse von Tyrosin zu Phäomelanin und Eumelanin. Die Herstellungsmechanismen beider Pigmente sind ähnlich, einschließlich der Hydroxylierung von L-Tyrosin zu 3,4--Dihydroxy-L-phenylalanin (L-DOPA) und der Oxidation von L-DOPA zu Dopachinon. Im nächsten Schritt wird Dopamin durch das Tyrosinase-verwandte Protein 1 (TRP-1) und das Tyrosinase-verwandte Protein 2 (TRP-2) im Melanosom oxidiert, was durch den Mikrophthalmie-assoziierten Transkriptionsfaktor (MITF) reguliert wird. FormenMelanin.Schließlich reift Melanin und wird im Stratumcorneum ausgefällt.4,5 Diese dringen in die benachbarten Keratinozyten der Basalschicht ein und schützen ihre DNA vor UV-induzierten Mutationen oder Modifikationen. Das GereifteMelanininnerhalb der Melanosomen auf Keratinozyten übertragen6−9 und führt schließlich zu einer langanhaltenden Pigmentierung. Lentigines, Sommersprossen und braune/schwarze Flecken verursachen manchmal soziale Probleme bei Männern und Frauen. Das Blockieren des oxidativen Stresses oder das Unterdrücken der Tyrosinase-Aktivität ist eine Strategie, um das Syndrom der Hyperpigmentierung und dermatologische Störungen herunterzuregulieren.Antioxidantienheilen ROS-verursachte Hyperpigmentierungen und Zellschäden.10,11 Daher haben synthetisierte antioxidative Verbindungen viele biofunktionelle Anwendungen in Hautpflegeanwendungen.

Fulleren (C60), Kohlenstoffnanoröhrchen (CNT), Graphen und Graphen-Nanoband (GNR) sind vier Arten von sp2-Nanokohlenstoff, die weltweit umfassend erforscht werden.12 Fulleren und seine Derivate oder Komplexe gelten seit langem als starke Fänger freier Radikale. Yodohet al. verwendeten wasserlösliches C60 als Schutzmittel gegen katabolen Stress-induzierte Degeneration. Injacet al. kamen zu dem Schluss, dass C60(OH)24 stark istAntioxidansVerbindung, wenn der oxidative Stress zu hoch ist. Okudaet al. schlugen vor, dass C60-Komplexe eine NO-vermittelte Zellschädigung verhindern können.13,14 Tong et al. zeigten, dass C60-Komplexe vielversprechende Kandidaten für die Behandlung gehirnbedingter Krankheiten sein könnten, die durch erhöhte Superoxidspiegel verursacht werden. Tatsächlich identifizierte ein japanisches Unternehmen 2006 Fullerene mit einer starken antioxidativen Aktivität für kosmetische Zwecke. Lucente Schultz et al. zeigten, dass funktionalisierte einwandige CNTs (SWCNTs) fast 40-mal besser Sauerstoffradikale abfangen als dendritisches C60.15−19Fenoglio et al. beobachteten, dass mehrwandige CNTs (MWCNTs) in Kontakt mit einer externen Quelle von Hydroxyl- oder Superoxidradikalen eine bemerkenswerte Radikalfängerkapazität besitzen.20Dichtefunktionaltheorie-Rechnungen ergaben auch ein Modell von SWCNTs als Radikalfänger. Im Jahr 2004 demonstrierten Novoselov et al. erstmals, dass Graphen einen starken ambipolarelektrischen Effekt aufweist und für elektronische Anwendungen vielversprechend sein könnte.21 Anschließend zeigten sie weiter, dass Graphen elektronische Eigenschaften besitzt, die für ein 2D-Partikelgas charakteristisch sind, das durch die Dirac-Gleichung beschrieben wird. 22,23 Seit diesen beiden bahnbrechenden Veröffentlichungen wurde der Graphen-basierten Forschung mehr und mehr Aufmerksamkeit geschenkt.24−30 Zum Beispiel haben Qiu et al. im Jahr 2014 zeigte, dass Graphenoxid und Graphen mit wenigen Schichten signifikant sindAntioxidansAktivität und können verschiedene biomolekulare Moleküle vor Oxidation schützen.31Han et al. 2007 experimentell gezeigt, dass die Energielücke von GNRs während des Lithographieprozesses durch Ändern der Bandbreite gesteuert werden kann.32 Unter den vier Nanokohlenstoffen haben GNRs die geringste Aufmerksamkeit erhalten. Unseres Wissens gibt es wenig Forschung zu den antioxidativen Eigenschaften von Graphenoxid-Nanobändern (GONRs).31,33 Daher haben wir in dieser Studie MWCNTs, kurze MWCNTs, GONRs und kurze GONRs sorgfältig hergestellt und versuchten, ihre antioxidativen Eigenschaften und damit verbundenen Ergebnisse systematisch zu vergleichen .

2. ERGEBNISSE UND DISKUSSION

2.1. Morphologie von MWCNTs und GONRs.

Figure 1a shows the low- and high-magnification transmission electron microscopy (TEM) images of MWCNTs and short MWCNTs. Following acidic cutting under ultrasonication, the length of MWCNTs could be shortened from >10 μm bis 2−3 μm. Gleichzeitig wurde beobachtet, dass die Salpetersäurebehandlung die glatten Rohroberflächen aufrauht. Einige Kerben und unregelmäßige Formen werden im stark vergrößerten Bild angezeigt. Ferner erhält man durch Verwendung von MWCNTs und kurzen MWCNTs durch Mikrowellenreaktionen GONR bzw. shortGONR. Wir illustrierten auch die TEM-Bilder mit niedriger und hoher Vergrößerung von GONR und kurzen GONR. Aufgrund des großen Längsaufreißens und des geringfügigen horizontalen Schnitts scheint es, dass GONRs kürzer waren als MWCNTs. Andererseits zeigten stark vergrößerte Bilder größere Durchmesser, d. h. 0.11–0,18 μm, von GONRs als die von MWCNTs, was darauf hinweist, dass der Entpackvorgang erfolgreich war. In ähnlicher Weise zeigten kurze GONRs eine kürzere Länge und einen größeren Durchmesser als kurze MWCNTs. Im Luftkompressor unseres neuen Entpackverfahrens waren die dünnen Schichtstrukturen der GONRs geringer als die, die wir in dem frühen Bericht für die gleiche Mikrowellenleistung von 250 W erhalten hatten, während die dickeren zentralen MWCNTs beibehalten wurden.12 Dies bedeutete, dass eine Kern-Schale-MWCNT/GONR-Heterostruktur wahrscheinlicher wäre erscheinen anstelle der vollständig geöffneten Nanobandstruktur durch alle Mikrowellenleistungen im neuen Prozess. Um mit dem kurzen GONR in unseren früheren Studien zu vergleichen,34 erzeugte die höhere Mikrowellenleistung mehr Kerben an der Seite der Bänder und bildete keine schönen glatten Bandkanten. Beachten Sie, dass wir in Abbildung 1a zwei verschiedene Arten von Cu-Gittern verwendet haben. Für MWCNTs und GONRs mit ausreichender Länge wurde das Gu-Gitter mit einem mit Kohlenstoff stabilisierten Lacey-Formvar (Produktnr. 01881-F, Ted Pella, Inc., USA) verwendet. Die offenen Löcher in einem spitzenartigen Kohlenstofffilm verhinderten ein überlappendes Übertragungsbild zwischen Nanokohlenstoffen und dem Kohlenstofffilm. Die dunkelgrauen Netzwerke gehören zum spitzenartigen Kohlenstofffilm. Das Gu-Gitter mit kohlenstoffstabilisiertem Formvar (Produktnr. 01800-F, Ted Pella, Inc., USA) wurde jedoch für kurz MWCNT und kurz GONR benötigt. Dies lag daran, dass die großen Löcher in dem spitzenförmigen Kohlenstoffilm Probleme beim effizienten Halten des kurzen MWCNT und des kurzen GONR verursachten. Wie in Abbildung 1 dargestellt, ist der hellgraue Kontrast unter den kurzen MWCNTs und kurzen GONRs eine helle Kohlenstoffschicht. Diese Kohlenstoffschicht stabilisierte den dem Elektronenstrahl ausgesetzten Formvar-Film durch seine wärme- und elektrisch leitenden Eigenschaften.

2.2. Bindungskonfigurationen von MWCNTs und GONRs.

Die Raman-Spektren der vier Nanokohlenstoffe sind in Abbildung 1b dargestellt; die D-Bande von GONRs war nach dem Entpacken höher als die von MWCNTs. Dies wurde dem höheren Oxidationsniveau und einer größeren Anzahl von Kantenstrukturen von GONR im Vergleich zu MWCNTs zugeschrieben. Dieses Phänomen ähnelt auch dem, was wir in 2011.12 beobachtet haben. Aufgrund des hohen Graphitisierungsniveaus hatte das G-Band von MWCNTs die niedrigste Zahl für die volle Breite bei halbem Maximum. Die ID/IG-Verhältnisse der vier Nanokohlenstoffe waren 0.076, 0.502, 0,483 bzw. 0,700. Kurz gesagt, die verringerte Länge und die Oberflächenoxidation erhöhten das Defektniveau und machten somit die ID/IG-Verhältnisse höher. Der D′-Peak ist in allen defekten Graphenen vorhanden und wird als Qualitätsmaß angesehen.35 Wie in Abbildung 1b dargestellt, werden die D′-Peaks in den vier Spektren entweder nach dem Schneide- oder dem Aufreißprozess deutlicher, was darauf hindeutet, dass es sich um zerstörerische Prozesse handelt, die einführen viele Mängel. Abbildung 1c,dzeigt die Röntgenphotoelektronenspektroskopie-Spektren der vier Nanokohlenstoffe. Anscheinend ist der D′-Peak für kurze GONRs am deutlichsten. Wie in Abbildung 1c gezeigt, stieg der O-Gehalt aufgrund der starken Oxidationsfähigkeit von KMnO4 in einer sauren Umgebung deutlich von 7,6 Prozent (MWCNTs) auf 19,9 Prozent (GONRs). Andererseits stieg der O-Pegel leicht um 0,8 Prozent von MWCNT zu den kurzen MWCNTs. Wichtig ist, dass der höchste O-Gehalt für das kurze GONR 38,3 Prozent beträgt, was impliziert, dass die Enden der Nanobänder leichter sauerstofffunktionelle Gruppen anbringen würden als die planaren sp2-Oberflächen. Die größere Zahl bei voller Breite bei halbem Maximum und die Verschiebung zur hohen Bindungsenergie von C 1s-Peaks nach dem Entpacken sowohl von MWCNTs als auch von kurzen MWCNTs sind in Abbildung 1d dargestellt. Für Graphenoxide die entfalteten Peaks in der hohen Bindungsenergie Seite konnte C-C(CC)-, C-O-, CO- und COOH-Bindungen zugeordnet werden.36 Wir charakterisierten GONR (200 W) im Jahr 2013,37 und die Ergebnisse waren ähnlich wie diese Studienergebnisse. Diese Studie schloss das Phänomen der Raman-Spektren, was bedeutet, dass mehr sauerstoffhaltige funktionelle Gruppen während der Röhrchen-zu-Band-Umwandlung erzeugt wurden (Abbildung 2).

2.3. Antioxidative Eigenschaften von MWCNTs und GONRs.

2.3.1. Bestimmung von 1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl Free Radical Scavenging Activity Assays.

1,1-Diphenyl-2-picrylhydrazyl (DPPH) Radikalfängeraktivität ist eineAntioxidansPlattform zum Nachweis der antioxidativen Kapazität; die Ergebnisse für die vier Nanokohlenstoffe sind in Tabelle 2 beschrieben. Im DPPH-Assay wurde Vitamin C in einer Konzentration von 100 μM als Positivkontrolle verwendet. Um die antioxidativen Aktivitäten von MWCNTs, kurzen MWCNTs, GONRs und kurzen GONRs zu testen, wurden Dosierungen von 1, 5 und 1 0 mg/l in die Reaktionslösung inkubiert, um die Eigenschaften zu messen. MWCNTs, kurze MWCNTs, GONRs und kurze GONRs hatten moderate inhibitorische Fähigkeiten bei 1{{2{0}} mg/l (19,2 ±{0,3, 12,1 ± 0,3, 26,8 ± 0,3 und 30,0). ± 0,4 Prozent), während Vitamin Chad einen ähnlichen Zustand bei 100 μM (93,4 ± 0,1 Prozent) für die Unterdrückung aufweist.

2.3.2. Ionen-Chelat-Aktivitätsassay.

Innerhalb der oxidativen Stresssituation kann das Ferrozin einen quantitativ zu messenden Komplex mit Fe2 bilden. In Anwesenheit von chelatbildenden Mediatoren wird der Komplex aufgebrochen, was bewirkt, dass die Eisen(II)-Ionen von einer dunkelroten Farbe des Fe2+-Komplexes reduziert werden. Wir verwendeten EDTA als positive Kontrolle. Tabelle 2 zeigt, dass MWCNTs, kurze MWCNTs, GONRs und kurze GONRs eine chelatbildende Aktivität bei 10 mg/l (29,2 ± {{10}},8, 28,7 ± 0) aufwiesen. 7, 69,7 ± 0,6 und 68,9 ± 0,3 Prozent), während die positive Kontrolle einen ähnlichen Zustand bei 100 μM aufwies (93,4 ± 0,1 Prozent).

2.3.3. Leistungsmessung von eisenreduzierenden Antioxidantien.

Der Eisen(III)-Reduktionspotential-Assay ist ein einfacher und zuverlässiger Test zur Quantifizierung der Fe(III)-Ferricyanid-Komplexsynthese. In diesem Assay wurde die Reduktionskraft der vier Nanokohlenstoffe, die den Eisen(III)-TPTZ-Komplex erzeugen, durch Farbänderungen der Lösung von gelb nach grün und blau nachgewiesen. Tabelle 2 zeigt, dass die Reduktionskräfte von MWCNT, kurz MWCNT, GONR und kurz GONR optische Dichte (OD) 1,11, 1,13, 1,15 und 1,11 bei 10 mg/l waren.

2.3.4. MWCNTs und GONRs hemmen die intrazelluläre ROS-Akkumulation.

Viele Berichte haben gezeigt, dass ROS die strukturelle Integrität von Zellmembranen, einschließlich Zellmembranen und Kernmembranen, zerstört, was zu Zellschäden und zum Verlust der normalen Funktion führt Die Hemmung der ROS-Produktion ist eine gute Strategie zur HerunterregulierungMelanin synthesis. In this study, we used the 2′,7′-dichlorodihydrofluorescein diacetate (DCFDA) staining assay to analyze the intracellular oxidative stress level in MWCNT and GONR treatment cells. Phorbol 12-myristate 13-acetate (PMA) induced oxidative stimulations in MWCNT and GONR groups and was used as a negative control.41 When the concentration of PMA was 20 ng/mL, it induced oxidative stress, increasing the value to 38%; after treating GONRs and MWCNTs, the levels of ROS were downregulated to the normal level. The data showed that both materials inhibited oxidative stress levels, and the anti-oxidative effect of GONRs was higher than that of MWCNTs (Figure 3). Table 1 shows a similar consequence list. We contended that there are three reasons for our new findings: first, the order of solubility of these materials was as follows: short GONRs > GONRs >kurze MWCNTs > MWCNTs, was bedeutet, dass die Kontaktfläche von kurzen GONRs am größten war, also war sie für die ROS-Spülung überlegen. Zweitens waren GONRs und MWCNTs sp2--Kohlenstoffstrukturen, die ROS-Elektrizität durch Adduktbildung oder Elektronentransfer zerstören konnten.42 Wir fanden heraus, dass dieantioxidative Wirkungender Nanobandstrukturen waren besser als die der Nanoröhrenstrukturen, sodass Nanobänder die Übertragung von Elektronen einfacher machen als Nanoröhren. Schließlich beobachten wir in Abbildung 1b, dass die sp2--Kohlenstoffstelle von GONR mehr sauerstofffunktionelle Gruppen enthielt als MWCNTs, die Carbonsäuregruppen Metallionen chelatieren konnten und die Hydroxylgruppen ein H-Donor sein könnten, um ROS abzufangen und die Melaninproduktion zu hemmen.

2.4. Zytotoxizität von MWCNTs und GONRs, die in menschlichen dermalen Fibroblastenzellen behandelt wurden.

Zur Bewertung der Zytotoxizität wurde die Methode {{0}}(4,5-Dimethylth-triazol-2-yl)-2,5-diphenyltetrazoliumbromid (MTT) angewendet Eigenschaften von GONRs auf Hs68-Zellen (Abbildung 3), und die Zellen wurden mit unterschiedlichen Dosen von 1, 5 und 10 ug/ml kultiviert. Wir untersuchten, dass die Zelllebensfähigkeiten von MWCNT 100,7 ± 3,7, 99,8 ± 4,9 und 94,1 ± 4,7 Prozent bei Konzentrationen von 1, 5 bzw. 10 mg/l betrugen; Lebensfähigkeiten für die kurze MWCNT wurden in der gleichen Reihenfolge berechnet und mit 93,9 ± 2,2, 86,4 ± 3,0 und 98,9 ± 2,1 Prozent ermittelt. Wir beobachteten, dass die B16-F10-Zellen in hohen Konzentrationen inkubiert wurden und das Zellüberleben von Hs68-Zellen mehr als 80 Prozent betrug, was darauf hindeutet, dass MWCNT und kurze MWCNT keine toxische Wirkung auf menschliche dermale Fibroblastenzellen hatten. Die Zelllebensfähigkeiten von GONR und kurz GONR waren 86,24 ± 2,1, 90,87 ± 3,5, 88,58 ± 2,5, 89,03 ± 3,6, 90,71 ± 2,8 und 90,64 ± 2,5 Prozent. In 4a wird auch darauf hingewiesen, dass GONR und shortGONR keine erkennbare zytotoxische Wirkung auf HS68-Zellen hatten. In früheren Berichten konnte die Verwendung ungetesteter Nanomaterialien für kosmetische Zwecke als fragwürdig angesehen werden43,44 und war in der Regel auf den Angriff von DNA zurückzuführen, nachdem die Nanopartikel in die Zellen eingedrungen waren. Nach dem Zytotoxizitätstest stellten wir fest, dass unsere Materialien keine Toxizität für normale Hautzellen verursachten. Wir kamen zu dem Schluss, dass die Nanomaterialien, nachdem sie in die Zellen eingedrungen sind, die Melaninproduktion nur hemmen, indem sie den oxidativen Stress verringern und Metallionen chelatieren, und die Mitochondrien oder die DNA nicht schädigen, was bedeutet, dass die Verwendung von MWCNTs und GONRs sicher war.

2.5. Zwei Arten von MWCNTs und GONRs in B16-F10-Tyrosinaseaktivität und Melaningehalt.

In demMelaninSyntheseweg spielt Tyrosinase eine entscheidende Rolle. Tyrosinase oxidiert und bildet Eumelanin und Phäomelanin durch eine Reihe von biochemischen Reaktionen. Um zu bestimmen, ob GONRs und MWCNTs die Aktivitäten von Tyrosinase hemmen und eine Abnahme der Melaninproduktion verursachen, analysierten wir die Tyrosinaseaktivität in B16-F10-Zellen. Wir fanden heraus, dass MWCNTs und kurze MWCNTs die Tyrosinase-Aktivität um etwa 17,1 Prozent und 23 Prozent bei 10 mg/l hemmten. GONRs und kurze GONRs hatten eine bessere Wirkung bei der Unterdrückung der Tyrosinaseaktivität bei denselben Konzentrationen im Vergleich zu einem anderen GONR. Sie waren auch dosisabhängig und hemmten 49,8 Prozent und 44,7 Prozent der Tyrosinase-Aktivität, wie in 4b gezeigt.

Melaninist ein unentbehrliches Pigment im menschlichen Körper, aber die Überexpression von Melanin löst oft eine Reihe von Krankheiten aus. In früheren Studien haben Xiao et al. verwendeten ein ähnliches Material, Radical Sponge, ein Fulleren-Nanopartikel, als Anti-Melanin-Mittel.45 Es gab einige gute Ergebnisse; etwa 20 Prozent vonMelaninDie Produktion könnte gehemmt werden. Um seine Effizienz zu verbessern, haben wir das Testmaterial weiter verbessert, um die Inhibitionsrate von Melanin und seinen molekularen Mechanismus zu messen, wie in den Abbildungen 4c und 5 gezeigt. MWCNTs und kurze MWCNTs verringerten den Melaningehalt um 17,6 ± 5,5 und 13,2 ± 0. 2 Prozent bei 1 0 mg/L und dosisabhängig. GONRs und kurze GONRs senkten die Werte stark auf 32,0 ± 2,3 und 35,3 ± 3,4 Prozent bei 10 mg/L. Die experimentellen Ergebnisse legten nahe, dass alle vier Typen die Synthese von Melanin hemmen könnten und GONRs eine stärkere Wirkung hatten. Andererseits haben wir auch beobachtet, dass das kurze GONR eine bessere Wirkung bei der Hemmung der Melaninproduktion hat. Wir schließen daraus, dass die kurzen GONRs mehr funktionelle Gruppen aufweisen und Metallionen-katalysierte Tyrosinase wirksam verhindern können, wodurch die Melaninproduktion weiter gehemmt wird (Abbildung 2). In Tabelle 1 stellen wir fest, dass der Aufwand des Metallionen-chelatbildenden kurzen Typs höher ist als der des normalen Typs; das bedeutet, dass diese kurzen GONRs möglicherweise im kosmetischen Bereich als Hautpflegemittel eingesetzt werden könnten.

2.6. Mechanismus von MWCNTs und GONRs hemmte den B16-F10-Gehalt an zellulärem Melanin.

Zellen reagieren auf externen oxidativen Stress, indem sie die Proteinexpression regulieren. B16-F10-Zellen verstärken die c-myc-Genexpression und regulieren AMPK hoch, um die oxidativen Spiegel zu senken,46 und in dieser Arbeit ist MITF ein spezifischer Transkriptionsfaktor von Tyrosinase, um den Signalweg der molekularen Melaninsynthese zu regulieren.47–49 In Abbildung 5a MWCNTs und GONRs den Mikrophthalmie-assoziierten Transkriptionsfaktor herunterregulieren, indem sie den oxidativen Stress reduzieren, und dann wurden auch die nachgeschalteten Gene TRP-1 und TRP-2 herunterreguliert. Auf Proteinebene wurde ein ähnliches Phänomen gefunden, wobei MWCNTs und GONRs den MITF-bezogenen Melanogeneseweg herunterregulierten und schließlich reduziertenMelaninInhalt (Abbildung 5b).

Cistanche-Bodybuilding

3. EXPERIMENTELLE MATERIALIEN UND METHODEN

3.1. Herstellung von MWCNTs und GONRs.

Der relevante Prozess zur Herstellung von GONRs wurde in einer früheren Veröffentlichung beschrieben. 12MWCNT (0.05 g) wurde in 9:1 H2SO4/H3PO4 suspendiert und mit einem Mikrowellenreaktor (CEM-Discover) mit dem Power-Set behandelt bei 250 W für 2 min. Nach der Zugabe von KMnO4 (0,25 g) zu den Lösungen wurden die Lösungen mit der gleichen Mikrowellenleistung bei 65 Grad für 4 min12 behandelt. Wir modifizierten dieses Verfahren dann unter Verwendung einer kürzeren Mikrowellenzeit der zweiten Stufe von 8 min durch Verwendung eines Luftkompressors. Hier wird der Luftkompressor verwendet, um die Temperatur des Mikrowellenreaktors während des Prozesses zu steuern. Die Mikrowellenleistung wurde bei den Vorversuchen auf 250 W eingestellt.

3.2. Herstellung von Short MWCNTs und Short GONRs.

Das relevante Verfahren zur Herstellung kurzer GONRs wurde in unserer vorherigen Veröffentlichung beschrieben.34 Die Säurebehandlungszeit wurde mit 8 h gewählt. Die Mikrowellenleistung wurde auf 250 W eingestellt, was die gleiche wie die zum Erhalten von GONRs ist.

3.3. Radikalfängeraktivität von DPPH.

DPPH wurde häufig verwendet, um die Abfangkapazität von Proben und die Antioxidationseigenschaften zu bestimmen.50 DPPH ist ein violettes Reagenz, das seine Farbe von violett nach gelb ändert, wenn die freien Radikale auf den Analyten übertragen werden. Positive antioxidative Proben mit geeigneten Konzentrationen wurden zu der Lösung gegeben und die Proben wurden bei 517 nm für 30 min analysiert. Wir haben die Prozentsätze des verbleibenden DPPH neben den Testproben verwendet, um die Anzahl zu messenAntioxidantienerforderlich, um die vorherigen DPPH-Radikale zu reduzieren. Als positive Kontrolle wurde Vitamin C mit 100 &mgr;M verwendet. Die Abfangaktivität (Prozent) wurde gemessen als

3.4. Metall-chelatbildende Aktivität.

Das Metallion ist der Faktor, der eine übermäßige Lipidoxidation verursacht, und Fe2 plus ist eines der am stärksten beeinflussenden Ionen.50 Unterschiedliche Konzentrationen von Nano-Biomaterialien (1 μl) wurden in eine 96--Well-Platte geladen, die 2 mM FeCl2·4H2O enthielt ( 10 μl) und dann in Ferrozin (5 mM, 20 μl) geladen. Die Mischung wurde vollständig mit 69 &mgr;l Menthol vermischt und 10 min bei Raumtemperatur gehalten. Dann wurde die Probenreaktionslösung bei 562 nm beobachtet. EDTA wurde als positive Kontrolle bei 100 μM verwendet, und die Berechnungsformel für die Metallchelatbildungsaktivität basierte auf Gleichung 1.

3.5. Energie reduzieren.

Die Berechnung des Reduktionsvermögens basiert auf einer früheren Studie.50 Zuerst wurden 2,5 μl Graphenmaterialien mit PBS-Puffer (67 mM, pH 6,8) und K3Fe(CN)6 (2,5 μl, 20 Prozent) gemischt und dann 20 Jahre lang bei 50 Grad inkubiert Mindest. Dann wurde 10 Prozent Trichloressigsäure (160 &mgr;l) mit den Reagenzien bei 300 g gemischt und 20 Minuten lang zentrifugiert. Die Absorptionslänge wurde bei 700 nm bestimmt, nachdem sie mit 25 &mgr;l FeCl 3 (2 Prozent) gemischt wurde. Butyliertes Hydroxyanisol (BHA) wurde mit 100 &mgr;M verwendet.

3.6. Zellproliferationsuntersuchungen.

Die menschliche Dermalfibroblasten-Zellinie HS68 wurde verwendet, um das Verhältnis der Zellproliferation zu analysieren. HS68 wurde in Dulbeccos modifiziertem Eagle-Medium (DMEM) inkubiert, das 10 Prozent fötales Rinderserum und 1 Prozent Penicillin und Streptomycin gemischt enthielt.50,51 Nach der Behandlung mit unterschiedlichen Probenkonzentrationen wendeten wir MTT an, um das Zellproliferationsverhältnis zu ermitteln. 8000 Zellen wurden in 96-Well-Platten ausgesät und 24 h lang mit Proben behandelt. Die überstehende Lösung wurde entfernt, und wir verwendeten die MTT-Lösung zur Kultivierung für 2 h bei 37 Grad. Nach der Inkubation wurde das MTT enthaltende Medium entfernt und mit Dimethylsulfoxid (DMSO) gelöst. Die Lösung wurde bei OD 590 nm abgelesen und die Rate wurde durch Gl. 1 berechnet.

3.7. Bewertung des zellulären Melaningehalts.

Wir verwendeten eine Methode mit geringfügigen Modifikationen basierend auf dem vorherigen Assay.52,53 Zellpellets von B16−F10 vom Bioresource Collection and Research Center (BCRC, CRL 6323, Hsinchu, Taiwan) wurden in einer Mischung aus 2,0 N NaOH gelöst und 10 Prozent DMSO. Anschließend wurde die Probe 1 h auf 90 Grad erhitzt und weitere 10 min bei 10 000g zentrifugiert, um den geklärten Überstand zu erhalten. DasMelaninDie Zählung wurde durch Überwachen der OD des Überstands bei 475 nm bestimmt.

3.8. Aktivität der zellulären B16-F10-Tyrosinase.

Für die Aktivität der zellulären B16-F10-Tyrosinase verwiesen wir auf die frühere Arbeit mit einigen Modifikationen.50 Zellen wurden in 12--Well-Platten mit 105 Zellen pro Well kultiviert. Nach der Behandlung mit Proben wurden die Zellen in 1 Prozent Triton X-100/PBS und 2 mML-Tyrosin (50 ul) für 3 h lysiert. Nach der Inkubation entfernten wir das Medium und lasen die Extinktion bei OD 590 nm ab. Die Tyrosinase-Aktivitätsformel wurde durch Gleichung 1 berechnet.

3.9. Nachweis von ROS durch DCFDA-Färbung.

Unter Bezugnahme auf die vorherige Studie wurden 54 1.2 1.105 B16-F10-Zellen in 6-Well-Platten ausgesät und mit verschiedenen Probenkonzentrationen behandelt. Die Zellen wurden in PBS suspendiert und dann mit DCFDA (5 &mgr;M) in Nicht-Phenolrot-DMEM für 30 Minuten bei 37 Grad beladen. Das Durchflusszytometer (Guava, Merck, Deutschland) wurde verwendet, um das Fluoreszenzsignal von DCFDA nachzuweisen. Anregungs- und Emissionswellenlängen von DCFDA waren 488 bzw. 535 nm.

3.10. Quantitative Echtzeit-Polymerase-Kettenreaktion.

Wir folgten den Methoden von Lin et al. (2018).1 Die quantitative Reverse-Transkription-Polymerase-Kettenreaktion (qRT-PCR) in Echtzeit bestand aus einer exklusiven Primer-Sonde zur Erzeugung von Fluoreszenz. Es wurde eine Fluoreszenzdetektionstechnik verwendet, die jeden Zyklus unter Verwendung eines 7500 qRT-PCR-Systems (Applied Biosystems, USA) erfasst. Es detektierte den Zyklus basierend auf der Menge an freigesetzter Fluoreszenz, und dann wurde das Produkt jedes Zyklus für den erzeugten Inhalt berechnet, was dazu führte, dass quantitative Zwecke in Echtzeit erreicht wurden. Trizol (Invitrogen, USA) wurde verwendet, um eine vollständige RNA des Lungengewebes gemäß den Anweisungen des Herstellers zu extrahieren. Anschließend wurde ein Reverse-Transkriptions-Kit (Takara, Japan) verwendet, um DNA zu erzeugen. Bei der qRT-PCR unter Verwendung der in Tabelle 1 aufgeführten Primer wurde die Probe zuerst erhitzt, um einen DNA-Einzelstrang zu bilden; dann erfolgte eine Primerbindung zu einer doppelsträngigen DNA (dsDNA), wonach SYBR Green dsDNA kombiniert wurde, wofür das SYBR green plus Reagenzienkit (Roche, Basel, Schweiz) verwendet wurde, was zur Freisetzung von Fluoreszenz führte. Das Ergebnis wurde durch ein Fluoreszenzdetektionssystem geleitet. Die Detektion von Fluoreszenzsignalen erfolgte während der Elongations- oder Annealingphase jedes Zyklus; nach der Detektion wurden die Probeninhalte durch die detektierten Fluoreszenzintensitäten zurückgedrängt.55 Die Expressionsniveaus der Zielgene wurden unter Verwendung der 2−ΔΔCt-Methode auf -Tubulinniveaus normalisiert .

Cistanche aufhellende Wirkung auf die Haut gegen Oxidation

3.11. Western Blot-Test.

B16-F10-Zellen wurden bei 4 Grad über Nacht mit einem Radioimmunpräzipitations-Assay-Puffer (Thermo Scientific Co., USA), der Proteaseinhibitoren enthält, lysiert. Das Bicinchoninsäure-Protein-Assay-Kit (BCA, Sigma-Aldrich Corp., USA) wurde verwendet, um die Proteinmenge zu quantifizieren. Probenproteine ​​wurden auf 10 % Natriumdodecylsulfat-Polyacrylamidgel aufgetrennt und auf eine Polyvinylidendifluorid (PVDF)-Membran (Pall LifeScience, Ann Arbor, MI, USA) übertragen. Die PVDF-Membran wurde mit einem Blockierungspuffer (Thermo Scientific) für 1 h blockiert und mit dem spezifischen primären Antikörper über Nacht bei 4 Grad inkubiert. Als nächstes wurde die Membran zweimal mit Tris-gepuffertem Saline-Tween-20-Puffer gewaschen und mit sekundären Antikörpern für 1,5 h inkubiert. Danach wurde die Membran in Chemilumineszenz-Nachweisreagenzien (Thermo Scientific) getaucht und mit einem MiniChemi Chemiluminescenceimager (Beijing Sage Creation Science, China) analysiert. Zu den Antikörperquellen gehörten Kaninchen-Anti-MITF, Kaninchen-Anti-TRP-1, Kaninchen-Anti-TRP-2 und -Aktin (Thermo Scientific).

3.12. Materialanalyse.

TEM (JEOL JEM-1230, 100 kV) wurde verwendet, um die Morphologie des Nanokohlenstoffs zu beobachten. Ein Mikro-Raman-Spektrometer (PTT, RAMaker) wurde angewendet, um die Resonanzmoden des Nanokohlenstoffs zu überprüfen. Zur Bestimmung der Zusammensetzungsanalyse wurden auch röntgenphotoelektronenspektroskopische (XPS, Kratos Axis Ultra DLD) Messungen durchgeführt.

3.13. Statistische Analyse.

Alle Proben und Standardversuche wurden mindestens dreimal wiederholt. Wir haben den Student's t-Test angewendet, um den Durchschnitt der Mittelwerte ± Standardabweichung statistisch zu vergleichen und auszudrücken.

4. SCHLUSSFOLGERUNG

Zusammenfassend haben wir festgestellt, dass das kurze GONR aufgrund seiner multiplen biofunktionellen Eigenschaften ein potenzielles Material für die Herstellung von Hautpflegeprodukten ist (Abbildung 6). Die Ergebnisse zeigten, dass der Nanokohlenstoff als extrazelluläres und intrazelluläres Antioxidans eine Rolle spielte. Unterdessen hemmte der Nanokohlenstoff die Tyrosinase-Aktivität und dieMelaninInhalt und verursachte keine ernsthafte Schädigung der Pigmentzellen. Diese Arbeit etablierte die Anti-Melanogenese-Funktionen von vier Arten von Nanokohlenstoff; zukünftige Studien werden den Mechanismus dieser Verbindungen auf spezifische Gen- und Proteinexpressionen im Zusammenhang mit Melaninreifung, -transport und -akkumulation untersuchen.

cistanche bienfaits

VERWEISE

(1) Lin, L.-C.; Chen, C.-Y.; Kuo, C.-H.; Lin, Y.-S.; Hwang, BH;Wang, TK; Kuo, Y.-H.; Wang, H.-MD 36H: A Novel PotentInhibitor for Antimelanogenesis. Oxid. Med. Zelle. Langlebigkeit 2018,2018, 6354972.

(2) Li, R.; Qiu, X.; Xu, F.; Lin, Y.; Fang, Y.; Zhu, T. Makrophagen-vermittelte Wirkungen von luftgetragenen Feinstaubpartikeln (PM2.5) auf die Hepatozyten-Insulinresistenz in vitro. ACS Omega 2016, 1, 736−743.

(3) Sie, Y.-J.; Wu, P.-Y.; Liu, Y.-J.; Hou, C.-W.; Wu, C.-S.; Wen, K.-C.; Lin, C.-Y.; Chiang, H.-M. Sesamol hemmte durch UV-Strahlung induzierte Hyperpigmentierung und Schäden in C57BL / 6-Maushaut. Antioxidantien 2019, 8, 207.

(4) Hseu, Y.-C.; Cheng, K.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, C.-Y.; Chou, H.-Y.;Ma, D.-L.; Leung, C.-H.; Wen, Z.-H.; Wang, H.-M. Synergistische Wirkungen von Linderanolid B in Kombination mit Arbutin, PTU oder Kojisäure auf die Tyrosinase-Hemmung. akt. Pharm. Biotechnologie. 2015, 16, 1120−1126.

(5) Bae-Harboe, Y.-SC; Park, H.-Y. Tyrosinase: ein zentrales regulatorisches Protein für die Hautpigmentierung. J. Invest. Dermatol. 2012, 132,2678–2680.

(6) Rezapour-Lactose, A.; Yeganeh, H.; Ostad, SN; Gharibi, R.; Mazaheri, Z.; Ai, J. Thermoresponsive Polyurethan/Siloxanmembran für Wundverband und Zellblatttransplantation: In-vitro- und In-vivo-Studien. Mater. Wissenschaft. Eng., C 2016, 69, 804−814.

(7) Boo, YC p-Cumaric Acid as An Active Ingredient inCosmetics: A Review Focusing on its Antimelanogenic Effects.Antioxidants 2019, 8, 275.

(8) Awan, F.; Islam, MS; Kann.; Yang, C.; Shi, Z.; Berry, RM; Tam, KC Cellulose-Nanokristall-ZnO-Nanohybride zur Steuerung der photokatalytischen Aktivität und des UV-Schutzes in kosmetischen Formulierungen. ACS Omega 2018, 3, 12403-12411.

(9) Cristina Negritto, M.; Valdez, C.; Sharma, J.; Rosenberg, C.; Selassie, CR Wachstumshemmung und DNA-Schäden, die durch X-Phenole in Hefe induziert werden: Eine quantitative Struktur-Aktivitäts-Beziehungsstudie. ACS Omega 2017, 2, 8568−8579.

(10) Hameln, M.; Hemmati, S.; Varma, K.; Veisi, H. Greensynthesis, die antibakterielle, die antioxidative und zytotoxische Wirkung von Goldnanopartikeln unter Verwendung von Pistacia Atlantica-Extrakt. J. Taiwan Inst. Chem.Eng. 2018, 93, 21–30.

(11) Meneses-Gutierrez, CL; Herna ́ndez-Damia ́n, J.; Pedraza- ́Chaverri, J.; Guerrero-Legarreta, I.; Tellez, DI; Jaramillo-Flores, M. ́E. Antioxidative Kapazität und zytotoxische Wirkungen von Catechinen und Resveratrol-Oligomeren, die durch enzymatische Oxidation gegen T24-Human-Harnblasenkrebszellen hergestellt werden. Antioxidantien 2019, 8, 214.

(12) Sonne, C.-L.; Chang, C.-T.; Lee, H.-H.; Zhou, J.; Wang, J.; Sham, T.-K.; Pong, W.-F. Mikrowellenunterstützte Synthese einer Core-Shell-MWCNT/GONR-Heterostruktur für den elektrochemischen Nachweis von Ascorbinsäure, Dopamin und Harnsäure. ACS Nano 2011, 5, 7788-7795.

(13) Lin, T.-E.; Lu, Y.-J.; Sonne, C.-L.; Pick, H.; Chen, J.-P.; Lesch, A.;Girault, HH Weiche elektrochemische Sonden zur Kartierung der Verteilung von Biomarkern und injizierten Nanomaterialien in tierischem und menschlichem Gewebe. Angew. Chem., Int. Ed. Engl. 2017, 56, 16498–16502.

(14) Okuda, K.; Hirota, T.; Hirobe, M.; Nagano, T.; Mochizuki, M.; Nishino, T. Synthese verschiedener wasserlöslicher G60-Derivate und ihrer Superoxid-Quenching-Aktivität. Fullerene Sci. Technol. 2000, 8,127–142.

(15) Lucente-Schultz, RM; Moore, VC; Leonard, AD; Preis, BK; Kosynkin, DV; Lu, M.; Partha, R.; Conyers, JL; Tour, JM Einwandige Antioxidans-Kohlenstoffnanoröhren. Marmelade. Chem. Soc. 2009, 131, 3934–3941.

(16) Injac, R.; Perse, M.; Obermajer, N.; Djordjevic-Milic, V.;Prijatelj, M.; Djordjevic, A.; Cerar, A.; Strukelj, B. Mögliche hepatoprotektive Wirkungen von Fulleren C60(OH)24 bei Doxorubicin-induzierter Hepatotoxizität bei Ratten mit Mammakarzinomen. Biomaterialien 2008, 29, 3451–3460.

(17) Tong, J.; Zimmermann, MC; Li, S.; Yi, X.; Luxenhofer, R.; Jordan, R.; Kabanov, AV Neuronale Aufnahme und intrazelluläres Abfangen von Superoxid von Fulleren (C60)-Poly(2-oxazolin)snanoformulation. Biomaterialien 2011, 32, 3654–3665.

(18) Yugioh, K.; Shishido, K.; Murayama, H.; Yano, M.; Matsubayashi, K.; Takada, H.; Nakamura, H.; Masuko, K.; Kato, T.; Nishioka, K. Wasserlösliches C60-Fulleren verhindert die Degeneration von Gelenkknorpel bei Osteoarthritis durch Herunterregulierung der katabolischen Aktivität von Chondrozyten und Hemmung der Knorpeldegeneration während der Krankheitsentwicklung. Arthritis-Rheuma. 2007, 56, 3307–3318.

(19) Takada, H.; Mimura, H.; Xiao, L.; Islam, RM; Matsubayashi, K.; Ito, S.; Miwa, N. Innovatives Antioxidans: Fullerene (INCI #:7587) ist als „Radical Sponge“ auf der Haut. Sein hohes Maß an Sicherheit, Stabilität und Potenzial als erstklassiger Anti-Aging- und Aufhellungs-Kosmetik-Inhaltsstoff. Fullerenes, Nanotubes, Carbon Nanostruct.2006, 14, 335−341.

(20) Fenoglio, I.; Greco, G.; Tomaten, M.; Müller, J.; Raymundo Pinero, E.; Begin, F.; Fonseca, A.; Nagy, JB; Lison, D.; Fubini, B. ́Strukturelle Defekte spielen eine große Rolle bei der akuten Lungentoxizität von mehrwandigen Kohlenstoffnanoröhren: physikalisch-chemische Aspekte. Chem. Res. Toxicol. 2008, 21, 1690–1697.

(21) Novoselov, KS; Geim, AK; Morozov, SV; Jiang, D.;Zhang, Y.; Dubonos, SV; Grigorjewa, IV; Firsov, AA Elektrischer Feldeffekt in atomar dünnen Kohlenstoffschichten. Wissenschaft 2004, 306, 666–669.

(22) Novoselov, KS; Geim, AK; Morozov, SV; Jiang, D.; Katsnelson, MI; Grigorjewa, IV; Dubonos, SV; Firsov, AA Zweidimensionales Gas aus masselosen Dirac-Fermionen in Graphen. Natur 2005, 438, 197–200.

(23) Zhou, X.; Wei, Y.; Er, Q.; Boey, F.; Zhang, Q.; Zhang, H. Reduzierte Graphenoxidfilme, die als Matrix von MALDI-TOF-MS zum Nachweis von Octachlordibenzo-p-dioxin verwendet werden. Chem. Kommun. 2010, 46,6974–6976.

(24) Zhao, W.; Fan, S.; Xiao, N.; Liu, D.; Tay, YY; Yu, C.; Sim, D.;Huang, HH; Zhang, Q.; Boey, F.; Ma, X.; Zhang, H.; Yan, Q. Flexible Carbon Nanotube Papers mit verbesserten thermoelektrischen Eigenschaften.Energy Environ. Wissenschaft. 2012, 5, 5364–5369.

(25) Wang, Z.; Wu, S.; Zhang, J.; Chen, P.; Yang, G.; Zhou, X.;Zhang, Q.; Yan, Q.; Zhang, H. Vergleichende Studien zu einschichtigen reduzierten Graphenoxidfilmen, die durch elektrochemische Reduktion und Hydrazindampfreduktion erhalten wurden. Nanoskalige Res. Lette. 2012, 7, 161.

(26) Liang, X.; Fu, Z.; Chou, SY Graphen-Transistoren, hergestellt durch Transferdruck in den aktiven Bereichen des Geräts auf dem großen Wafer. Nano Lett. 2007, 7, 3840–3844.

(27) Sonne, X.; Liu, Z.; Waliser, K.; Robinson, JT; Goodwin, A.;Zaric, S.; Dai, H. Nanographenoxid für die zelluläre Bildgebung und Arzneimittelabgabe. Nanores. 2008, 1, 203–212.

(28) Chen, W.; Xiao, P.; Chen, H.; Zhang, H.; Zhang, Q.; Chen, Y. Polymere Graphen-Massenmaterialien mit einem 3D-vernetzten monolithischen Graphen-Netzwerk. Erw. Mater. 2019, 31, 1802403.

(29) Chen, D.; Feng, H.; Li, J. Graphenoxid: Herstellung, Funktionalisierung und elektrochemische Anwendungen. Chem. Rev. 2012, 112, 6027–6053.

(30) Ranjan, P.; Agrawal, S.; Sinha, A.; Rao, TR; Balakrishnan, J.; Thakur, AD Eine kostengünstige, nicht explosive Synthese von Graphenoxid für skalierbare Anwendungen. Wissenschaft. Rep. 2018, 8, 12007.

(31) Qiu, Y.; Wang, Z.; Owens, ACE; Kulaots, I.; Chen, Y.; Kane,AB; Hurt, RH Antioxidanschemie von Materialien auf Graphenbasis und ihre Rolle in der Oxidationsschutztechnologie. Nanoscale 2014, 6,11744−11755.

(32) Han, MY; Ozyilmaz, B.; Zhang, Y.; Kim, P. Energiebandlücken-Engineering von Graphen-Nanobändern. Phys. Rev. Lett. 2007, 98,206805.

(33) Souza, JP; Mansano, AS; Venturini, FP; Santos, F.; Zucolotto, V. Antioxidansstoffwechsel von Zebrafischen nach subletaler Exposition gegenüber Graphenoxid und Erholung. Fischphysiol. Biochem. 2019,45, 1289−1297.

(34) Sonne, C.-L.; Eine solche.; Wu, J.-J. Synthese von kurzen Graphenoxid-Nanobändern zum verbesserten Biomarker-Nachweis der Parkinson-Krankheit. Biosens. Bioelektron. 2015, 67, 327–333.

(35) König, AAK; Davies, BR; Noorbehesht, N.; Newman, P.; Kirche, TL; Harris, AT; Razal, JM; Minett, AI A New RamanMetric for the Characterization of Graphene oxide and its Derivatives.Sci. Rep. 2016, 6, 19491.

(36) Hsu, H.-C.; Gezeigt, I.; Wei, H.-Y.; Chang, Y.-C.; Du, H.-Y.; Lin,Y.-G.; Tseng, C.-A.; Wang, C.-H.; Chen, L.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, K.-H. Graphenoxid als vielversprechender Photokatalysator für die Umwandlung von CO2 in Methanol. Nanoscale 2013, 5, 262−268.

(37) Lin, L.-Y.; Yeh, M.-H.; Tsai, J.-T.; Huang, Y.-H.; Sun, C.-L.;Ho, K.-C. Eine neuartige Core-Shell-Mehrwand-Kohlenstoffnanoröhre@Graphenoxid-Nanoband-Heterostruktur als potenzielles Superkondensatormaterial. J. Mater. Chem. 2013, 1, 11237–11245.

(38) Yin, H.; Xu, L.; Porter, NA Lipidperoxidation durch freie Radikale: Mechanismen und Analyse. Chem. Rev. 2011, 111, 5944−5972.

(39) Tung, C.-H.; Chang, J.-H.; Hsieh, Y.-H.; Hsu, J.-C.; Ellis, AV; Liu, W.-C.; Yan, R.-H. Vergleich der Ausbeuten an Hydroxylradikalen zwischen photo- und elektrokatalysierten Wasserbehandlungen. J. Taiwan Inst. Chem.Eng. 2014, 45, 1649–1654.

(40) Ohshima, H.; Yoshie, Y.; Auriol, S.; Gilbert, I. Antioxidative und prooxidative Wirkungen von Flavonoiden: Auswirkungen auf DNA-Schäden, die durch Stickoxid, Peroxynitrit und Nitroxylanion induziert werden. Freie Radikale Biol. Med. 1998, 25, 1057–1065.

(41) Chou, H.-Y.; Lee, C.; Pan, J.-L.; Wen, Z.-H.; Huang, S.-H.; Lan,C.-W.; Liu, W.-T.; Stunde, T.-C.; Hseu, Y.-C.; Hwang, B.; Cheng, K.-C.; Wang, H.-M. Angereicherter Astaxanthin-Extrakt aus Haematococcus Pluvialis erhöht die Sekretion von Wachstumsfaktoren, um die Zellproliferation zu erhöhen, und induziert den MMP1-Abbau, um die Kollagenproduktion in menschlichen dermalen Fibroblasten zu steigern. Int. J.Mol. Wissenschaft. 2016, 17.955.

(42) Bitter, BR; Marcano, DC; Berlin, JM; Fabian, RH; Cherian, L.; Culver, JC; Dickinson, ME; Robertson, CS; Pauller, RG; Kent, TA; Tour, JM Antioxidative Kohlenstoffpartikel verbessern die zerebrovaskuläre Dysfunktion nach einer traumatischen Hirnverletzung. ACSNano 2012, 6, 8007–8014.

(43) Liao, C.; Li, Y.; Tjong, S. Graphen-Nanomaterialien: Synthese, Biokompatibilität und Zytotoxizität. Int. J.Mol. Wissenschaft. 2018, 19, 3564.

(44) Kong, H.; Wang, L.; Zhu, Y.; Huang, Q.; Fan, C. Kulturmedium-assoziierte physikalisch-chemische Einblicke in die Zytotoxizität von Kohlenstoff-Nanomaterialien. Chem. Auflösung Giftig. 2015, 28, 290–295.

(45) Xiao, L.; Matsubayashi, K.; Miwa, N. Inhibitorische Wirkung des wasserlöslichen, polymerumhüllten Derivats von Fulleren auf die UVA-induzierte Melanogenese durch Herunterregulierung der Tyrosinase-Expression in menschlichen Melanozyten und Hautgeweben. Bogen. Dermatol. Auflösung 2007, 299,245–257.

(46) Kfoury, A.; Amaro, M.; Collet, C.; Sordet-Dessimoz, J.; Giner, MP; Christen, S.; Moco, S.; Leleu, M.; Leval, L.; Koch, U.; Trumpp, K.; Sakamoto, K.; Biermann, F.; Radtke, F. AMPK fördert das Überleben von c-Myc-positiven Melanomzellen durch Unterdrückung von oxidativem Stress. EMBO J. 2018, 37, Nr. e97673.

(47) Hseu, Y.-C.; Cheng, K.-C.; Lin, Y.-C.; Chen, C.-Y.; Chou, H.-Y.; Ma, D.-L.; Leung, C.-H.; Wen, Z.-H.; Wang, H.-M. Synergistische Wirkungen von Linderanolid B in Kombination mit Arbutin, PTU oder KojicAcid auf die Tyrosinase-Hemmung. akt. Pharm. Biotechnologie. 2015, 16,1120–1126.

(48) Lee, S.; Kim, J.; Lied, H.; Seok, J.; Hong, S.; Boo, Y. Luteolin7-Sulfat dämpft die Melaninsynthese durch Hemmung der CREB- und MITF-vermittelten Tyrosinase-Expression. Antioxidantien 2019, 8, 87.

(49) Duval, C.; Cohen, C.; Chagnoleau, C.; Flouret, V.; Bourreau, E.; Bernard, F. Wichtige regulatorische Rolle dermaler Fibroblasten bei der Pigmentierung, wie anhand eines rekonstruierten Hautmodells gezeigt: Auswirkungen der Lichtalterung. PLoS One 2014, 9, Nr. e114182.

(50) Li, P.-H.; Chiu, Y.-P.; Shih, C.-C.; Wen, Z.-H.; Ibeto, LK;Huang, S.-H.; Chiu, CC; Ma, D.-L.; Leung, C.-H.; Chang, Y.-N.;Wang, H.-MD Biofunctional Activities of Equisetum ramosissimumExtract: Protective Effects against Oxidation, Melanoma, andMelanogenesis. Oxid. Med. Zelle. Langlebigkeit 2016, 2016, 2853543.

(51) Liang, C.-H.; Chan, L.-P.; Ding, H.-Y.; Also EC; Lin, R.-J.;Wang, H.-M.; Chen, Y.-G.; Chou, T.-H. Freie Radikalfänger-Aktivität von 4-(3,4-Dihydroxybenzoyloxymethyl)phenyl-O- -d-glucopyranosid aus Origanum vulgare und sein Schutz vor oxidativen Schäden. J. Agric. Lebensmittelchem. 2012, 60, 7690–7696.

(52) Wang, H.-M.; Chen, C.-Y.; Wen, Z.-H. Identifizierung von Melanogenese-Inhibitoren aus Cinnamomum SubGenius mit In-vitro- und In-vivo-Screening-Systemen durch Targeting der menschlichen Tyrosinase. Exp.Dermatol. 2011, 20, 242–248.

(53) Wang, Y.-C.; Huang, X.-Y.; Chiu, C.-C.; Lin, M.-Y.; Lin, W.-H.; Chang, W.-T.; Tseng, C.-C.; Wang, H.-MD Hemmungen der Melanogenese durch Phyllanthus Emblica-Fruchtextraktpulver in B16F10-Zellen. Lebensmittel Biosci. 2019, 28, 177–182.

(54) Pantschuk, RR; Skorokhyd, NR; Kozak, YS; Lehka, LV;Moiseenok, AG; Stoica, RS Die gewebeschützende Aktivität von Selenomethionin und D-Pantherin bei B16-Melanom-tragenden Mäusen unter Doxorubicin-Behandlung ist nicht mit ihrem ROS-Scavenging-Potenzial verbunden. Kroate. Med. J. 2017, 58, 171.

(55) Wang, H.-MD; Chen, C.-C.; Huynh, P.; Chang, J.-S. Erkundung des Potenzials der Verwendung von Algen in Kosmetika. Bioresour. Technol.2015, 184, 355−362