Die Studie für Cistanche von chemischen Profilen und Metaboliten

Kontakt: Audrey Hu WhatsApp/hp: 0086 13880143964 E-Mail:audrey.hu@wecistanche.com

Zhe Li, Lkhaasuren Ryenchindorj, Bonan Liu, Ji Shi, Chao Zhang, Yue Hua, Pengpeng Liu, Guoshun Shan & Tianzhu Jia

Abstrakt

Hintergrund: Die Verarbeitung der chinesischen Materia medica ist eine herausragende und einzigartige pharmazeutische Technik in der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM), die zur Verringerung von Nebenwirkungen und zur Erhöhung oder sogar Veränderung der therapeutischen Wirksamkeit der rohen Kräuter verwendet wird. Für die gesteigerte Wirksamkeit von Heilpflanzen sind in erster Linie Veränderungen der wesentlichen Inhaltsstoffe verantwortlich, die durch ein optimiertes Verarbeitungsverfahren hervorgerufen werden. Die Nieren-Yang-belebende Wirkung von mit Reiswein gedämpftem Cistancha deserticola (C. deserticola) war stärker als die von rohem C. deserticola (CD). Methoden: Zur Bestimmung des Verarbeitungseinflusses wurde eine Vergleichsanalyse mit dem UPLC-Q-TOF-MSE mit der UNIFI-Informatikplattform durchgeführt. In-vitro-Studien wurden sowohl zur Charakterisierung von Inhaltsstoffen als auch durchgeführtMetabolitenin vivo. DaschemischBestandteile wurden in CD und seinen verarbeiteten Produkten bestimmt. Die multivariaten statistischen Analysen wurden durchgeführt, um Variationen zwischen ihnen zu bewerten, während OPLS-DA für den paarweisen Vergleich verwendet wurde. Ergebnisse: Die Ergebnisse dieser Studie zeigten erhebliche Schwankungen bei Phenylethanoidglykosiden (PhGs) und Iridoiden nach der Verarbeitung. In den Extrakten von CD und seinem Verarbeitungsprodukt wurden insgesamt 97 Verbindungen nachgewiesen. PhGs mit 4'-O-Caffeoyl-Gruppe im 8-O- -D-Glucopyranosyl-Teil, wie Acteosid, Cistanosid C, Campneosid II, Osmanthusid nahmen nach der Verarbeitung ab, während PhGs mit 6'-O- Caffeoyl-Gruppe im 8-O- -D-Glucopyranosyl-Teil, wie Isoacetosid, Isocistanosid C, Isocampneosid I, Isomartynosid erhöht, insbesondere in der CD-NP-Gruppe. Die Intensität von Echinacosid und Cistanosid B, deren Struktur eine 6'-O- -D-Glucopyranosyl-Einheit besitzt, nahm ebenfalls zu. In einer In-vivo-Studie 10 Prototypkomponenten und 44Metabolitenwurden in Plasma, Kot und Urin von Ratten nachgewiesen. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass die Verarbeitung zu einer erheblichen Variation in der führtchemischBestandteile von CD und beeinflusst die Disposition der Verbindungen in vivo, und Phase-II-Stoffwechselprozesse sind die Schlüsselkaskaden jeder Verbindung, und die meisten derMetabolitenmit Echinacosid oder Acteosid assoziiert sind. Schlussfolgerungen: Dies ist die erste globale Vergleichsstudie von roher und verarbeiteter CD. Diese Ergebnisse erweitern unser Verständnis der Auswirkungen der CD-Verarbeitung und liefern wichtige Daten für zukünftige Wirksamkeitsuntersuchungen.

Die Studie für Cistanche von chemischen Profilen und Metaboliten

Einführung

Die Verarbeitung der chinesischen Materia Medica (CMM) hat eine bedeutende Anwendbarkeit in der klinischen Praxis der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) gezeigt und gilt seit mehreren Jahrhunderten als praktikable Behandlung. Dies ist eine einzigartige pharmazeutische Technologie, die aus der Theorie der TCM abgeleitet wurde. Nach der Verarbeitung deutliche Unterschiede im Aussehen,chemischBestandteile, Eigenschaften und medizinische Bedeutung aller Arten von TCM wurden identifiziert, was zu der Annahme führt, dass die Verarbeitung die Wirksamkeit verbessern oder die toxischen Wirkungen der TCM verringern könnte.

Für Hunderte von Jahren,Cistanche Deserticola(Roucongrong auf Chinesisch, CD) wird in der klinischen Praxis der TCM häufig zur Unterstützung der Nierenfunktion verwendet. Es hilft auch bei der Befeuchtung des Darms, was zu einer Entspannung des Darms führt [1].Cistanchewurde erstmals in ShenNongBencaoJing aufgenommen. Es kommt häufig in trockenen und halbtrockenen Lebensräumen in Eurasien und Nordafrika vor, einschließlich Iran, China, Indien und der Mongolei [2]. Die Verarbeitung von CD wurde durch Dämpfen mit Reiswein unter Normaldruck durchgeführt, was ein Herstellungsverfahren ist, das in der chinesischen Pharmakopöe (Jiucongrong auf Chinesisch, im Folgenden als "CD-NP" bezeichnet) dokumentiert ist. Und CD-Dämpfen mit Reiswein unter hohem Druck ist eine effektivere Zubereitungsmethode (im Folgenden "CD-HP" genannt) [3, 4]. Mehrere Studien haben gezeigt, dass sich die pharmakologischen Wirkungen von CD von denen seiner verarbeiteten Produkte unterscheiden [5]. CD kann das Nieren-Yang tonisieren und den Darm entspannen, während nach dem Dämpfen mit Reiswein die Wirkung der Auffüllung des Nieren-Yang verstärkt wird. In unserer früheren Studie wurde festgestellt, dass CD-NP die Tonisierung der Niere verbessern und das Yang unterstützen und die Wirkung der Darmbefeuchtung und des Stuhlgangs lindern kann [6,7,8]. In der klinischen Praxis sind verarbeitete Produkte die am häufigsten verwendete Form.

Bis heute haben mehrere Studien die analysiertchemischKomponenten von CD, gefolgt von der Isolierung und Identifizierung von mehr als 100 Verbindungen [9,10,11], wie Phenylethanoid-Glykoside (PhGs), Iridoide, Lignane und Oligosaccharide als seine chemischen Hauptbestandteile. Es wurde auch berichtet, dass es viele pharmakologische Aktivitäten von PhGs gibt, darunter immunmodulatorische, neuroprotektive, hepatoprotektive, entzündungshemmende, antioxidative usw. [12,13,14]. Iridoide besitzen entzündungshemmende Aktivitäten [15, 16]. Frühere Studien haben auch gezeigt, dass einige chemische Komponenten während der Verarbeitung Schwankungen zeigten [17,18,19,20]. Aufgrund dieser Berichte kann davon ausgegangen werden, dass die Nachbearbeitung die Schwankungen inchemischZusammensetzung führen zu verschiedenen pharmakologischen Wirkungen, die weiter erforscht werden müssen.

In der aktuellen Studie wurde eine empfindliche und effektive Methode, dh Ultrahochleistungs-Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit TOF-MSE (UPLC-Q-TOF-MSE), zur vergleichenden Analyse durchgeführt, und In-vitro-Studien wurden durchgeführt, um die Extrakte qualitativ zu analysieren von CD, CD-NP und CD-HP zur Aufklärung ihrer chemischen Profile. Allgemein das ExogeneChemikalienmit hoher Exposition in Zielorganen wurden als wirksame Komponenten angesehen. Daher wurden CD und seine verarbeiteten Produkte an Ratten oral verabreicht, gefolgt von ihrer Charakterisierung. Die vorliegende Studie zeigt erstmals eine Vergleichsstudie (sowohl in vitro als auch in vivo) von roher und verarbeiteter CD. Die erhaltenen Ergebnisse würden unser Verständnis bezüglich der Wirkung der CD-Verarbeitung erweitern, was für weitere Studien hilfreich sein könnte.

cistanche von chemischen Profilen und Metaboliten

Materialen und Methoden

Materialien

Standardverbindungen von Ajugol (180120) und 2'-Actylacetosid (M0601AS) wurden von Chendu Pure Chem-Standard Co., Ltd (Chengdu, China) bereitgestellt. Cistanosid F (MUST-17022620), Echinacosid (D1105AS), Cistanosid A (M0906AS) und Isoacteosid (M0106AS) wurden von der Firma Must (Sichuan, China) bereitgestellt; Acteosid (O0618AS), Salidrosid (J0526AS), Catalpol (S0728AS), Geniposid (A0407AS) und Geniposidinsäure (MB6001-S) wurden von Dalian Meilun Bio.Co., Ltd (Dalian, China) erworben. 8-Epidesoxylogansäure (B31123) wurde von Shanghai Yuanye Biological Technology Co., Ltd., China, bezogen. Methanol und Acetonitril waren von MS-Qualität und wurden von Merck KGaA, Darmstadt, Deutschland bezogen. Methansäure (CH 2 O 2 ) in HPLC-Qualität wurde von Merck KGaA (Darmstadt, Deutschland) bereitgestellt. Das in der vorliegenden Studie verwendete Wasser wurde über das Milli-Q-System (18,2 MΩ, Millipore, Ma, USA) verarbeitet. Reiswein wurde von Brand Tower Shaoxing Wine Co., Ltd. (Zhejiang, China) bereitgestellt.

Cistanch deserticola wurde von Neimenggu wangyedi gesammeltZistancheCo. Ltd. Die Proben wurden von Prof. Yanjun Zhai (Fakultät für Pharmazie, Liaoning University of TCM) identifiziert. Die Proben wurden der Liaoning University of Traditional Chinese Medicine vorgelegt.

Tiere

Männliche Sprague-Dawley-Ratten (SPF-Klasse) mit einem Gesamtkörpergewicht von 180–220 g wurden von Liaoning Changsheng Biotechnology Co. Ltd. (Laboratory Animal Resource Center of Liaoning Province, Lizenznummer: SCXK-2015–0001) bereitgestellt. Diese Ratten wurden eine Woche lang in einem Zuchtraum mit gut gehaltener Temperatur und Luftfeuchtigkeit, dh 20–26 Grad, 50–70 Prozent, untergebracht. Die Ratten wurden vor dem Experimentieren mit gewöhnlichem Laborfutter und Wasser gefüttert. Die Tiere fasteten über Nacht, jedoch wurde das Wasser ad libitum vor dem Experiment bereitgestellt. Die Ratten wurden mit einem 10-prozentigen Chloralhydrat-Anästhetikum hingerichtet. Das Institutional Animal Ethics Committee des Liaoning Provincial Hospital of Chinese Medicine genehmigte alle Versuchsprotokolle (2019.3.25, 2019015).

Herstellung von CD-, CD-NP- und CD-HP-Extrakt

CD-NP, CD-HP wurden aus derselben Cistanch-Deserticola-Charge verarbeitet. Zur Herstellung von CD-NP wurden trockene CD-Stücke (5 mm dick, 100 g) mit Reiswein (30 ml) befeuchtet und 16 h bei 100 Grad gedämpft, gefolgt von Trocknen bei 55 Grad in einem Trockenofen. Während CD-HP durch Infiltration von trockenen CD-Stücken (5 mm dick, 100 g) mit Reiswein (30 ml) hergestellt wurde, gefolgt von Dampf bei 1,25 Atmosphärendruck für 4 h. und anschließend im Trockenschrank bei 55 Grad getrocknet.

In einem 100-ml-Messkolben wurde ein Gramm des Pulvers durch Sieb Nr. 4 gesiebt, gefolgt von der Zugabe von 50 Prozent Methanol (50 ml) und dann fest abgedeckt und gemischt. Diese Mischung wurde gewogen, gefolgt von einer halbstündigen. Mazeration. Nach der Mazeration wurde die Mischung 40 min mit Ultraschall behandelt (Leistung 250 W, Frequenz 35 kHz), gefolgt von Abkühlen und erneutem Wiegen. Der Gewichtsverlust wurde mit 50 Prozent Methanol ergänzt, richtig gemischt und stehen gelassen, gefolgt von Filtrieren des Überstands und dann Verwendung des erhaltenen Filtrats als Testlösung.

MSE-Analyse aktiver Komponenten

Zubereitung von Standardsubstanzen: Tubulosid-A (3,02 mg), Echinacosid (3,00 mg), 2'-Acetylacteosid (2,34 mg), Acteosid (2,45 mg), Isoacteosid (0,61 mg), Cistanosid-F (2,14 mg), Salidrosid (3,39 mg), Geniposid (2,84 mg), Ajugol (1,58 mg), Catalpol (2,39 mg), Geniposidinsäure (2,56 mg) und 8- Epideoxylogansäure (2,34 mg) wurden in einen 10-ml-Messkolben gegeben, Methanol mit konstantem Volumen zur Skalierung hinzugefügt, in eine entsprechende Konzentrations-Referenzlösung konfiguriert. Jede der 100 μL wurde in eine gemischte Referenzlösung konfiguriert.

MS-Analysebedingung: Der Massenwert wurde vor dem Experiment korrigiert und der negative Ionenmodus wurde verwendet. Der Massenbereich war 50–1200 Da, und die Probe wurde durch eine Strömungsinjektionspumpe injiziert. Die Konusgeschwindigkeit betrug 100 l/h, die Lösungsmittelströmungsrate wurde auf 800 l/h eingestellt. Die Kapillar- und Konusspannungen wurden entsprechend auf 2500 und 40 V festgelegt. Die Temperatur der Ionenquelle und des Lösungsmittelgases betrug 100 Grad bzw. 400 Grad, und die Signalerfassungsfrequenz betrug 0,5 S – 1.

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UPLC-Q-TOF-MSE-Analyse von CD-Extrakt

Chromatographische Auswertungen wurden in einem Waters ACQUITY I-CLASS UPLC-System (Waters Corporation, Milford, MA, USA) durchgeführt. Einschließlich ACQUITY UPLC® BEH C18-Säule (50 × 2,1 mm, 1,7 μm, Waters). Die mobile Phase bestand aus Wasser mit 0,1 Prozent Ameisensäure (A) und Acetonitril enthält 0,1 Prozent Ameisensäure (B), die Elutionsbedingung war wie folgt: 97 Prozent bis 85 Prozent A (0–5 min), 85 % bis 75 % A (5–15 min), 75 % bis 65 % A (15–16 min), 65 % bis 55 % A (16–18 min) . Die Flussrate betrug 0,3 ml min−1, während die Temperatur des Autosamplerraums und der Säule getrennt 30 Grad und 8 Grad betrug. Das Injektionsvolumen betrug 1,0 μl.

Die massenspektrometrische Auswertung erfolgte über Waters XEVO G{{0}}XS QTOF MS (Waters Corporation, Milford, MA, USA), bestehend aus einer ESI-Quelle. Die Durchflussrate des Stickstoffgases wurde auf 800 L·h –1 bei einer Temperatur von 400 Grad festgelegt, die Quellentemperatur wurde auf 100 Grad festgelegt und das Konusgas wurde auf 50 L h –1 eingestellt. Die Spannung von Konus und Kapillare wurde entsprechend auf 40 und 2000 V eingestellt. Die Kollisionsenergie der Rampe wurde im Bereich von 20–30 V verwendet. Die Schwerpunktdaten aller Proben wurden von 50 bis 1200 Da erhalten, mit einer 5--Scanzeit von 0,5 s über eine Analysezeit von 10 min . Zur Validierung der Massenpräzision wurde LockSpray TM eingesetzt. Als Sperrmasse wurde das [M–H]–-Ion von Leucin-Enkephalin (200 pg·μL–1 Infusionsflussrate 10 μL min–1) bei m/z 554,2615 verwendet. Für die genaue Masse, die Zusammensetzung der Vorläuferionen und die Berechnung der Fragmentionen wurde die Software MassLynx V4.1 (Waters Co., Milford, USA) verwendet.

Datenanalyse in der Masslynx-Plattform

Darüber hinaus wurde anhand von Literaturangaben eine hauseigene Bibliothek angelegt, die den Namen der Verbindung, ihre Struktur und die Summenformel (in Mol) umfasst. Alle Verbindungen wurden in einer speziellen Excel-Vorlage notiert. Zusätzlich wurden auch die mol-Dateien (Chemdraw Ultra 8.0, Cambridge soft, USA) und die Excel-Dateien aller einzelnen Verbindungsstrukturen auf dem lokalen PC gespeichert. Das etablierte Excel-Sheet mit wichtigen Daten wurde direkt in die wissenschaftliche Bibliothek in UNIFI importiert.

UNIFI 1.8.2, Waters, Manchester, UK wurde für die Bewertung von Strukturmerkmalen verwendet, insbesondere für die charakteristischen Fragmente und die MS-Fragmentierung. Für die 2D-Peakerkennung wurde eine minimale Peakfläche von 500 eingestellt. Beim Aufdecken von 3D-Peaks wurden eine niedrige Energiepeakintensität von mehr als 300 Zählungen und eine erhöhte Energiepeakintensität von mehr als 80 Zählungen gewählt. Es wurde festgestellt, dass der Massenfehler für bekannte Verbindungen bis zu ± 10 ppm beträgt, und die Retentionszeittoleranz wurde im Bereich von ± 0,1 min festgelegt. Wir haben die negativen Addukte ausgewählt, die –H plus HCOOH enthalten. Die Verarbeitung der von MS erhaltenen Rohdaten erfolgte über eine optimierte UNIFI-Software, um die schnell zu lokalisierenchemischKomponenten, die den Standards entsprechen, mit der selbst erstellten Datenbank und der hauseigenen Bibliothek für traditionelle Medizin.

Als nächstes, um die zu überprüfenchemischStruktur jeder Zielverbindung wurden die Isomere durch ihre charakteristischen MS-Fragmentierungsmuster, die in den berichteten Studien aufgedeckt wurden, und durch Vergleich der Retentionszeiten von Referenzstandards unterschieden.

Metabolomanalyse basierend auf multivariater statistischer Analyse

Vor der Verarbeitung der Rohdaten wurden die Parameter festgelegt, wie z. B. Masse im Bereich von 150 bis 1200 Da, Bereich der Retentionszeit (0 bis 20 min), Schwellenintensität ( 2000 Zählungen), Massentoleranz, dh 5 mDa, während das Masse- und Retentionszeitfenster 0,20 min bzw. 0,05 Da betrug. In der nachfolgenden Liste der Datenbank waren die Ionenidentifikatoren die RT-m/z-Paare in Bezug auf ihre Elutionszeiten. Gleiche Werte für RT und m/z in verschiedenen Probenchargen wurden als gleiche Verbindung betrachtet.

Es wurde eine multivariate statistische Analyse durchgeführt, um wirksame Biomarker zu evaluieren, die erheblich zu den Variationen zwischen verschiedenen Gruppen beigetragen haben. Bei der Analyse kam die Hauptkomponentenanalyse (PCA) zum Aufzeigen der maximalen Unterschiede und Mustererkennung zur Übersicht und Einordnung zum Einsatz. Das OPLS-DA ist ein Modellierungswerkzeug, das eine Visualisierung der OPLS-DA-Vorhersagekomponentenbelastung bereitstellt, um die Modellauswertung zu unterstützen. Variable Wichtigkeit für die Projektion (VIP) wurde zur Bewertung der Bewertung verschiedener Komponenten verwendet, und dieMetabolitenwith VIP values >1.0 und P-Wert< 0.05 were="" regarded="" as="" effective="" markers.="" furthermore,="" a="" permutation="" test="" was="" conducted="" for="" providing="" reference="" distributions="" for="" the="" r2/q2="" values="" that="" could="" show="" the="" statistical="">

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Tierversuche

Die Ratten wurden zufällig in vier Gruppen eingeteilt (n = 6 für jede Gruppe), gefolgt von der oralen Verabreichung verschiedener Extrakte: (1) Blindkontrollgruppe: Den Ratten wurde normale Kochsalzlösung (2 ml/100 g) verabreicht; (2) CD-Gruppe: Den Ratten wurde CD-Extrakt (2 ml/100 g) gegeben; (3) CD-NP-Gruppe: Den Ratten wurde CD-NP-Extrakt (2 ml/100 g) gegeben; (4) CD-HP-Gruppe: Den Ratten wurde CD-HP-Extrakt (2 ml/100 g) gegeben. Die weitere Kategorisierung aller Gruppen erfolgte entsprechend in drei Untergruppen für Plasma, Urin und Kot. Zwei Stunden später wurde jeder Ratte die gleiche und gleiche Menge an Extrakten oral verabreicht.

Nach der Verabreichung wurde die Entnahme von Blutproben um 1,0 h, 2,0 h und 4,0 h in heparinisierten 1,5-ml-Polyäthylenröhrchen (aus Augenhöhlenvenen) durchgeführt. , gefolgt von Zentrifugation (bei 4500 U/min) aller Proben für 15 min.

Für Urin- und Kotproben wurden die Ratten in Stoffwechselkäfigen gehalten, und dann wurde die Sammlung von Urin- und Kotproben für 24 h nach der Verabreichung durchgeführt. Die Zentrifugation der Urinproben wurde bei 4500 U/min für 15 min durchgeführt, während die Kotproben im Schatten getrocknet, zu Pulver gemahlen, dann 0,2 g entnommen und in 0,5 ml Kochsalzlösung gegeben wurden Lösung, Ultraschall für 5 min und zentrifugiert bei 12, 000 rpm für 15 min. Alle Bioproben wurden bis zur Analyse bei –80 Grad gehalten.

Vorbereitung biologischer Proben

Die Zugabe von Plasma-, Urin- und Kotproben erfolgte mit 3 Volumina Methanol, gefolgt von 3-minütigem Vortexen. Als nächstes wurde die Zentrifugation (bei 12, 000 Upm) der Mischungen für 10 Minuten durchgeführt, gefolgt vom Überführen des Überstands in das EP-Röhrchen und dann durch Stickstoff bei 37 Grad getrocknet. Weiterhin erfolgte die Zugabe von 200 μL HCN-H2O (50-prozentiger) Lösung. Dann wurde der Vortex zum Mischen verwendet (1 min), gefolgt von Zentrifugation (bei 12,000 rpm) für 5 min. Der Überstand (5 μl) der behandelten Proben wurde in das UPLC-Q-TOF-MSE-System injiziert.

Flüssigkeitschromatographischer und massenspektrometrischer Zustand

Die Analyse fürMetabolitenwurde auch vom Waters UPLC-Instrument über eine ESI-Schnittstelle durchgeführt. Die Trennungen wurden unter Verwendung einer Acquity UPLC HSS T3-Säule (100 mm × 2,1 mm, 1,8 µm) durchgeführt, die mobile Phase war 0,1 Prozent Ameisensäure (A): Acetonitril (B), die Gradientenelutionsbedingungen waren 0–3 min (99,8 Prozent → 98 Prozent A), 3–5 min (98 Prozent → 95 Prozent A), 5–8 min (95 Prozent → 90 Prozent A), 8 –12 min (90 Prozent → 85 Prozent A), 12–17 min (85 Prozent → 70 Prozent A), 17–22 min (70 Prozent → 60 Prozent A), 22–23 min (60 Prozent → 58 Prozent A) , 23–25 min (58 Prozent A), 25–32 min (58 Prozent → 45 Prozent A) und 32–37 min (45 Prozent → 35 Prozent A), 0,4 ml min−1 war die Flussrate. Die Temperatur für die Säule und den Probenraum wurde auf 40 Grad bzw. 8 Grad eingestellt. Es wurden die oben erwähnten Massenspektrometriebedingungen verwendet.

Strategie zur systematischen Analyse von Metaboliten in Bioproben

Für die Datenverarbeitung wurde die Software UNIFI (1.8.2) verwendet. Zur Identifizierung effektiver Metaboliten wurde die Binary Compare-Funktion verwendet. Ausgewertete Metaboliten waren in der äquivalenten Kontrollprobe nicht vorhanden oder bei niedrigen Ionenintensitäten vorhanden. Die relative Intensitätsschwelle wurde auf 3 oder 5 eingestellt undMetabolitendie die unterstrichenen Kriterien erfüllten, bewertet werden konnten. Üblich und vorhersehbarMetabolitenwurden dann von EIC ermittelt. Für die Suche nach zweiphasigen Metaboliten wurde die NLF-Funktion angewendet. Beispielsweise könnten in der UNIFI-Software die Parameter auf 176,0321 gesetzt werden, um nach möglichen Glucuronsäure-Konjugaten zu suchen. Nachbearbeitung kann ein neutraler Verlust im Verfahren eingestellt oder identifiziert werden. MassFragment wurde zur Bestimmung oder Charakterisierung von detektierten verwendetMetaboliten'-Strukturen ist die spektrale Interpretationsfunktion eines UNIFI die Hauptfunktion, die verwendet wird, um die sekundäre Fragmentierung von Elternkomponenten zu analysieren. Diese Funktion kann zur schnellen Überprüfung des Fragmentierungspfades verwendet werden, falls sinnvoll.

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Ergebnisse

Massenfragmentierungsregel von Phenylethanoidglykosiden und Iridoiden

Phenylethanoidglykoside sind die wichtigstenchemischBestandteile von CD. Die Standardlösungen von Isoacteosid, Cistanosid F, Tubulosid A, Echinacosid, Acteosid und 2'-Actylactosid wurden genommen, gefolgt von der Bereitstellung unterschiedlicher Kollisionsenergien (Tabelle 1), und dann wurden entsprechende MS2-Karten erhalten (Abb. 1). .

Abb. 1 Massenspektrogramm und Spaltungsweg von Phenylethanoidglykosiden. Ein Isoacteosid; B CistanosidF; C-Tubulosid A; D-Echinacteosid; E-Acteosid; F 2'-Actylactosid

Tabelle 1 Stoßenergie für Standardsubstanzen

Die massenspektrometrische Analyse ergab, dass Phenylethanoidglykoside ähnliche Massenspektrum-Fragmentierungsmuster aufweisen, die Spaltungswege im Negativ-Ionen-Modus umfassen hauptsächlich: (1) Spaltung der Esterbindung: Verlust der neutralen Caffeoylgruppe (C9H3O6, 162.03) und der neutralen Acetylgruppe (C2H2O , 42.00); (2) Glykosidische Spaltung: Verlust neutraler Rhamnosereste (C6H10O4, 146,05) und neutraler Glucosereste (C6H10O5, 162,05). Durch hochauflösende Massenspektrometrie konnten Caffeoyl (162.03) und Glucoserest (162.05) unterschieden werden.

Es wurden Standardlösungen der Iridoide Ajugol, Catalpol, Geniposidsäure, Geniposid und 8--Epidesoxylogansäure genommen, gefolgt von der Bereitstellung unterschiedlicher Kollisionsenergien, und entsprechende MS2-Karten wurden erhalten (Abb. 2).

Abb. 2 Massenspektrogramm und Spaltungsweg von Iridoidglykosiden. A Ajugol, B Catalpol, C Geniposidinsäure, D Geniposid, E 8- Epideoxylogansäure

Iridoid-Glycoside haben ähnliche Massenspektrum-Fragmentierungsmuster, die Spaltungswege im Negativ-Ionen-Modus umfassen hauptsächlich (1) glykosidische Spaltung: Verlust des neutralen Glucoserests (C6H10O5, 162,05); (2) Verlust von neutralem CO2 (43,99) und H2O (18,01).

Identifizierung der Verbindungen in CD-, CD-NP- und CD-HP-Extrakten

UPLC-QTOF-MS E-Analyse

Die Optimierung der chromatographischen Bedingungen wurde durchgeführt. Als nächstes werden die Verbindungen vonCistancheHerba wurden sowohl im negativen als auch im positiven Ionenmodus mit hohen sowie niedrigen CEs bewertet. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass die Kompatibilität des negativen Modus relativ zum positiven Modus für diese Verbindungen höher war. Abbildung 3 zeigt ein MS-Basispeak-Ionen(BPI)-Chromatogramm, das mit nummerierten Peaks aufgezeichnet wurde. Die Intensität jedes detektierten Ions in der UPLC-Q-TOF-MSE-Analyse wurde in Bezug auf die Gesamtionenzählung für die Erzeugung einer Datenmatrix normalisiert, die den m/z-Wert, die normalisierte Peakfläche und die Retentionszeit umfasste.

Abb. 3 Die Basisspitzenintensität (BPI) der Proben. 1. CD, 2. CD-NP, 3. CD-HP

Die Bewertung von Komponenten von CD und seinen verarbeiteten Produkten auf der UNIFI-Plattform

Insgesamt 97 Verbindungen wurden mit dem -SEM (n = 6)-Modus von CD und seinem verarbeiteten Produkt identifiziert (Tabelle 2), einschließlich Phenylethanoidglykoside (PhGs), Iridoide, Lignane und Oligosaccharide. Die 95-, 91- und 94-Komponenten wurden entsprechend in CD, CD-NP und CD-HP nachgewiesen. Darunter waren 64 Phenylethanoide, 13 Iridoide und 20 andere Arten von Verbindungen wurden bestimmt. Es gab eine Ähnlichkeit in derchemischZusammensetzung von CD und seinem verarbeiteten Produkt, jedoch wurde festgestellt, dass die Menge der Komponenten zwischen CD und seinem verarbeiteten Produkt unterschiedlich war.

Tabelle 2 Bewertung von Verbindungen, die aus CD und seinen verarbeiteten Produkten durch UPLC-Q-TOF-MSE erhalten wurden

Variationen beichemischBestandteile verarbeiteter Produkte

Zur Analyse der multivariaten Datenmatrix wurde die Software Simca-P 13.0 verwendet. Vor der PCA waren alle Variablen mittelwertzentriert und pareto-skaliert, gefolgt von der Identifizierung potenzieller Diskriminanzvariablen. In einem PCA-Score-Plot zeigte jeder Punkt eine individuelle Probe. Proben, die Ähnlichkeit in ihren zeigtenchemischKomponenten wurden nebeneinander verstreut, während diejenigen, die Variationen in ihren Komponenten zeigten, geteilt wurden. Wie in PCA (Fig. 4) zu sehen ist, wurde die Gruppe von CD-HP von den Gruppen von CD und CD-NP getrennt.

Abb. 4 Der PCA von CD und seinen verschiedenen verarbeiteten Produkten

To distinguish CD from CD-HP and CD-NP, OPLS-DA, permutation test, S-plot, and VIP value were developed. (Figs. 5, 6, 7) The obtained results revealed that many components were key characteristic components of each product. The screening condition was the VIP >1 und S< 0.05. from="" the="" date="" of="" the="" s-plot,="" the="" characteristic="" components="" were="" evaluated,="" which="" were="" commonly="" existing="" in="" the="" three="">

Abb. 5 Der OPLS-DA/Permutationstest/S-Plot/Heatmap zeigt die Intensitäten potenzieller Biomarker zwischen CD-NP und CD-HP Verbindungen 9, 10, 14, 32, 59, 60, 68, 70, 74, 75, 80, 81, 82 und 84 sind die differentiellen Komponenten von CD-NP, während die Verbindungen 11, 15, 16, 45, 48, 66 und 72 die differentiellen Komponenten von CD-HP sind.

Abb. 6 Der OPLS-DA/Permutationstest/S-Plot/Heatmaps, die die Intensitäten effektiver Biomarker zwischen CD und CD-NP anzeigen. Verbindungen 13, 15, 16, 37, 49, 63, 66, 72, 74, 75 und 85 sind die differentiellen Komponenten von CD, während die Verbindungen 10, 11, 32, 59, 60, 68, 70, 71, 80, 81 und 82 die differentiellen Komponenten von CD-NP sind.

Abb. 7 OPLS-DA/Permutationstest/S-Plot/Heatmaps, die die Intensitäten wirksamer Biomarker zwischen CD und CD-HP-Verbindungen 9, 14, 16, 59, 63, 66, 72, 74, 75, 80, 82 zeigen , 84, 85 und 94 sind die differentiellen Komponenten von CD, und 11, 15, 45, 49, 50, 60 und 71 sind die differentiellen Komponenten von CD-HP.

Aus Abb. 8 haben wir die Intensität von Acteosid (54), Cistanosid C (74), Campneosid II (43), Osmanthusid (75) und 2'-Actylacteosid (80) mit der 4'-O-Caffeoylgruppe gefunden der 8-O- -D-Glucopyranosyl-Teil (siehe Abb. 9) nahm nach Verarbeitung mit Reiswein ab, während die Intensität von Isoacetosid (60), Isocistanosid (71), Isocampneosid I (69) , Isomartynosid (86) mit der 6'-O-Caffeoyl-Gruppe (siehe Fig. 9) erhöht, insbesondere für die CD-NP-Gruppe. Obwohl Tubulosid B (72) die gleiche 6'-O-Caffeoylgruppe wie Isoacteosid hat, nahm die Intensität aufgrund seiner 2'-Actylgruppe ab. Die Intensität von Echinacosid (38) und Cistanosid B mit 6'-O- -D-Glucopyranosyl-Einheitsgruppen nahm zu, aber die Intensität von Tubulosid A (55) nahm auch wegen seiner 2'-Actylgruppe ab.

Abb. 8 Die Intensität hauptsächlich von PhGs in CD und seinen verarbeiteten Produkten

Abb. 9ChemischStrukturen von hauptsächlich PhGs in CD und seinen verarbeiteten Produkten.

Unser Forschungsteam untersuchte auch die thermische Stabilität von Acteosid und Isoacteosid und stellte fest, dass Acteosid in Wasser, Methanol und gelber Reisweinlösung instabil war und teilweise unter Erhitzungsbedingungen in Isoacteosid umgewandelt werden konnte. Aber die Thermostabilität von Isoacteosid war besser, insbesondere in gelber Reisweinlösung. Abbildung 10 zeigte die möglichen Änderungen von PhGs in CD während der Verarbeitung:

Abb. 10 Die mögliche Reaktion für PhGs während der Verarbeitung

Identifizierung der Metaboliten bei Ratten

Aus hochauflösenden Massenspektrometriedaten werden das genaue Molekulargewicht und die elementare Zusammensetzung zMetabolitenund Protomolekülverbindungen wurden analysiert und verglichen. Da die gleichen Arten von Verbindungen in der TCM Ähnlichkeit in metabolischen Modifikationen zeigten, können sich die Korrelationen von phytochemischen Bestandteilen in vitro auf ihre Metaboliten in vivo erstrecken. Unterdessen wurde basierend auf herkömmlichen Biotransformationswegen eine vernünftige Änderung des Molekulargewichts gefolgert. Endlich, dasMetabolitenwurden durch Analyse der MSE-Massenspektren der Metaboliten und des Fragmentierungswegs der Protoverbindungen im Massenspektrum identifiziert [21, 22]. Verglichen mit der Blindprobe wurden ihre Bestandteile in vivo basierend auf den Informationen des Chromatogramm-Massenspektrums, der Möglichkeit einer metabolischen Reaktion, den Eigenschaften der Verbindungsstruktur und der Fragmentierungsregel ihres Massenspektrums identifiziert. Siehe Tabelle 3.

Tabelle 3 IdentifiziertMetabolitenin Plasma, Urin und Fäkalien von wässrigem Extrakt in CD und seinen verarbeiteten Produkten

Identifizierung von mit Phenylethanolglykosiden verwandten Metaboliten

Für die Verarbeitung wurde die UNIFI-Plattform verwendet. Abbildung 11 zeigt das TIC-Chromatogramm von Urin, Kot und Plasma für CD und seine verarbeiteten Produkte. Im Vergleich zu Blindproben wurden bei Ratten insgesamt 54 Metaboliten identifiziert, darunter 10 Prototypkomponenten und 44Metaboliten, in denen sich 24, 49 und 6 entsprechend in Kot, Urin und Plasma befanden.

Abb. 11 Chromatograph von TIC. A Urinprobe in der BC-Gruppe; B Urinprobe in CD-Gruppe; C Urinprobe in der CD-NP-Gruppe; D Urinprobe in der CD-HP-Gruppe; E Kotprobe in BC-Gruppe; F Kotprobe in CD-Gruppe; G Stuhlprobe in der CD-NP-Gruppe; H Stuhlprobe in der CD-HP-Gruppe; I Plasmaprobe in BC-Gruppe; J Plasmaprobe in CD-Gruppe; K Plasmaprobe in der CD-NP-Gruppe; M Plasmaprobe in der CD-HP-Gruppe

Basierend auf genauer Masse, Fragmentierungskaskade und vorhersagbaren neutralen Verlusten durch Biotransformation sind insgesamt 35 Phenylethanoidglykoside assoziiertMetabolitenwurden vorläufig ausgewertet. Die verwandten Metaboliten von Phenylethanoidglykosiden haben ähnliche Massenspektrum-Fragmentierungsmuster, wie das typische Decaffeoyl-Fragment m/z 461.1605, dann in vivo weiter durch glykosidische und Esterbindungen hydrolysiert und zu Hydroxytyrosol (HT) (m/ z 153,0504, C8H10O3, 4,73 min) und Kaffeesäure (CA) (m/z 179,0389, C9H7O4, 0,77 min), siehe Fig. 12A.

M11 zeigte [M–H]− bei m/z 153,0504 mit der Formel dh C8H10O3 an und wurde als HT identifiziert. M16 präsentierte [M–H]− bei m/z 329,0851, was um 176 Da höher war als das von HT, was zeigt, dass es ein glucuronidierter Metabolit von HT sein könnte. Die [M–H]– von M26 lag bei m/z 343,1037, 14 Da höher als die von HT-Glucuronid. Daher wurde M26 als HT-methyliertes Glucuronid identifiziert. M17 wurde basierend auf seinem [M-H]- bei m/z 233,0112, 80 Da über dem HT, als HT-Sulfat identifiziert, das weiter methyliert werden konnte, und produzierte dann M22, das den m/z 247,0278 zeigte, was darauf hinweist, dass es war HT-methyliert sulfatiertMetabolit. M7 (m/z 167,0335) und M5 (m/z 167,0762) wurden als Oxidationsprodukte bzw. methyliertes HT angesehen (Fig. 12B).

M1 zeigte [M–H]− bei m/z 179,0389 an, die aufgeklärte Summenformel war C9H7O4 und wurde als Kaffeesäure (CA) identifiziert. M25 zeigte [M–H]− bei m/z 355,0704, die um 176 Da höher waren als die von CA, was zeigt, dass es ein glucuronidiertes sein könnteMetabolitvon CA. M27 hatte m/z 258,994, was 80 Da höher war als das von CA, also haben wir es als CA-Sulfat aufgeklärt, und es konnte M35 (m/z 273,0064) produzieren. Da M4 das [M–H]− bei m/z 193,0524 liefert, 14 Da höher als CA, wurde es als CA-methylierter Metabolit identifiziert. M39 war CA-DehydroxylierungMetabolit, mit m/z 163,04, und es könnte in M32 (m/z 242,9951) sulfatiert werden.

M33 (m/z 181,0491, C9H10O4, 9,06 min) war das Reduktionsprodukt von CA, d. h. 3,4-Dihydroxybenzolpropionsäure, das zu M19 (m/z 195,0623, C10H12O4, 0,93 min). M33 könnte zu M43 dehydroxyliert werden, d. h. 3-HPP (m/z 165,0558, C9H10O3, 11,29 min) und M31 (m/z 341,0942, C15H17O9, 8,90 min) und M29 (m/z 245,0125, C9H10O6S, 8,52 min) waren die glucuronidierten und sulfatierten Produkte (Fig. 12C).

Für die mit Phenylethanoid-Glykosiden assoziiertenMetaboliten, waren die wichtigsten metabolischen Kaskaden metabolische Reaktionen der Phase II, dh Glucuronidierung, Methylierung und Sulfatierung. Die vorgeschlagenen Stoffwechselkaskaden von Phenylethanoiden sind in Abb. 13 dargestellt.

Abb. 12 Massenspektrum einigerMetabolitenbei CDs

Abb. 13 Möglicher Stoffwechselweg von Phenylethanoiden

Identifizierung von mit Iridoiden verwandten Metaboliten

Durch die Analyse der elementaren Zusammensetzung derMetaboliten, MSE-Fragmentierung und zugehöriger Literatur wurden insgesamt 19 Iridoid-assoziierte Metaboliten vorläufig bewertet. Iridoidglykoside wurden durch glykosidische Bindungen hydrolysiert, um ihre entsprechenden Aglykone zu bilden. Das m/z 185,117 war für M8, 162 Da kleiner als Ajugol, das durch den Verlust von Glucoseresten erhalten wurde.

M40 (m/z 199,0641, Rt 10,91 min) war das deglycosylierte Produkt von Catalpol. M45 m/z 169,0487, Rt 12,15 min) war weniger als 30 Da von deglykosyliertem CatalpolMetabolit, und wurde als Entfernung eines Moleküls des CH2O-Metaboliten identifiziert. M34 (m/z 151,0352, Rt 9,08 min) war ein weiterer H2O-VerlustMetabolit.

M44 (m/z 211,0665, Rt 11,31 min) war ein deglykosylierter Metabolit von Geniposid, und M37 (m/z 197,0833, Rt 15,03 min) war eine Deglykosylierung von 8--Epidesoxylogansäure. Metabolische Reaktionen für Iridoide konnten als Phase-I-Stoffwechsel der Deglykosylierung aufgedeckt werden (Fig. 12D).

Vergleich der Stoffwechselprofile in Plasma, Urin und Fäkalien zwischen CD und seinen verarbeiteten Produkten

2 Prototypen im Plasma, 7 im Urin und 3 im Kot wurden verglichen. Es wurden 7 Prototypen in CD absorbiert, 7 Prototypen in CD-NP absorbiert und 8 Prototypen in CD-HP. M21 wurde nur in der Kotgruppe von CD-NP nachgewiesen, und M38 und M51 wurden nur in Uringruppen von CD-HP nachgewiesen. Verglichen mit Metaboliten, identischMetabolitenin Plasma, Urin und Kot waren 4, 42 bzw. 21. In der CD-Gruppe wurden 34 Metaboliten, in der CD-NP-Gruppe 39 und in der CD-HP-Gruppe 40 absorbiert. M5, M7, M40 und M52 wurden nur in CD-NP-Gruppen nachgewiesen, während M24, M41 und M48 nur in CD-HP-Gruppen nachgewiesen wurden.

In diversen Verarbeitungsprodukten von CD wurden Unterschiede in der Resorption sowie im Metabolismus von Wirkstoffen beobachtet. Aus Abb. 14 haben wir herausgefunden, dass die Intensität der HT-Sulfat-Konjugation (M17) im Urin am höchsten war, gefolgt von 3--HPP-Sulfat-Konjugation (M29), methylierter HT-Sulfat-Konjugation (M22), dehydroxyliertem CA-Sulfat Konjugation (M32) und 3,4-Dihydroxybenzolpropionsäuresulfat-Konjugation (M19). Der Gehalt an Stoffwechselprodukten war in der verarbeiteten Gruppe höher als in der CD-Gruppe, insbesondere bei M22, M29, M27, M16, M19, M1, M2. Ihre Vorläuferverbindungen wie Hydroxytyrosol haben tumorhemmende, entzündungshemmende, antibakterielle, antivirale und antimykotische Eigenschaften [23]. Kaffeesäure besitzt entzündungshemmende, krebshemmende und antivirale Aktivitäten [24]. Es stand im Einklang mit der klinischen Verwendung von CD und seinen verarbeiteten Produkten.

Diskussion

CD ist eine TCM, und ihre wichtigsten bioaktiven Komponenten, einschließlich PhGs, Iridoide und Polysaccharide, wurden durch verschiedene Forschungsstudien dokumentiert. In der klinischen Praxis der TCM wurden die verarbeiteten CD-Produkte im Vergleich zu den Rohprodukten weit verbreitet verwendet. DaschemischZusammensetzung wird während der Verarbeitung verändert, was zu Veränderungen in der medizinischen Wirkung führen kann (Abb. 14).

Abb. 14 Intensität der HauptleitungMetabolitenim Urin

PhGs sind eine Art von phenolischer Verbindung, die durch eine -Glucopyranosid-Struktur gekennzeichnet ist, die eine Hydroxyphenylethyl-Einheit als Aglykon trägt. Diese Verbindungen umfassen häufig Kaffeesäure und Rhamnose, die über Ester- bzw. glykosidische Bindungen an den Glucoserest gebunden sind. In der aktuellen Studie wurden die qualitativen Analysen von CD, CD-NP und CD-HP durchgeführt und insgesamt 97 Verbindungen, darunter Phenylethanoidglykoside (PhGs), Iridoide usw., identifiziert. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten die Variationen inchemischZusammensetzung vor und nach der Verarbeitung. Die Intensität von PhGs mit der 4'-O-Caffeoyl-Gruppe im 8-O- -D-Glucopyranosyl-Teil, wie Acteosid, Cistanosid C, Campneosid II, Osmanthusid, nahm nach der Verarbeitung ab, während PhGs mit 6 '-O-Caffeoyl-Gruppe im 8-O- -D-Glucopyranosyl-Teil, wie Isoacetosid, Isocistanosid, Isocampneosid I, Isomartynosid erhöht, insbesondere in der CD-NP-Gruppe. Die Intensität von Echinacosid und Cistanosid B, deren Struktur eine 6'-O- -D-Glucopyranosyl-Einheit besitzt, nahm ebenfalls zu. PhGs mit einer 2'-Actylgruppe nahmen häufig aufgrund einer Hydrosisreaktion während des Prozesses ab, wie Tubulosid B, 2-Acetylacteosid.

Untersuchung vonMetabolitenresorbiert in vivo wurde nach oraler Verabreichung von CD und seinen Verarbeitungsprodukten durchgeführt. Die metabolischen Prozesse der Phase II waren die Schlüsselkaskaden und die meisten Metaboliten waren Sulfat, Glucuronid und methylierte Konjugate. Phenylethanolglykoside weisen eine geringe orale Absorption und Verwertung auf. Sie werden nur schwer in das Blut aufgenommen und wirken als Vorläufer, um ihre Rolle nach metabolischer Aktivierung in vivo zu spielen. Phenylethanoide, die in Phenylethanolaglycon produziert werden, wie Hydroxytyrosin (HT) und Kaffeesäure (CA) und ihr Derivat 3-Hydroxyphenylpropionsäure (3-HPP), diese Metaboliten können leichter in das Plasma aufgenommen werden und haben eine bessere medizinische Wirkung Wirkung.

Die meisten von denMetabolitenwurden in niedrigeren Konzentrationen gefunden oder im Rattenplasma nicht nachgewiesen, jedoch wurden höhere Konzentrationen im Urin beobachtet, was darauf hindeutet, dass Metaboliten leicht über den Urin ausgeschieden werden. Wie in Tabelle 3 dargestellt, wurden in verschiedenen Gruppen die gleichen Verbindungen bestimmt, während erhebliche Variationen in den Konzentrationen der gefunden wurdenMetabolitenwas mit der ungleichen Wirksamkeit von CD und seinen verarbeiteten Produkten zusammenhängen könnte. HT-Sulfat-Konjugation (M17) hat die höchste Intensität im Urin, gefolgt von 3-HPP-Sulfat-Konjugation (M29), methylierter HT-Sulfat-Konjugation (M22), dehydroxylierter CA-Sulfat-Konjugation (M32) und 3,{{ 7}}Dihydroxybenzolpropionsäuresulfat-Konjugation (M19). Der Gehalt an Stoffwechselprodukten war in der verarbeiteten Gruppe höher als in der CD-Gruppe, insbesondere bei M22, M29, M27, M16, M19, M1, M2.

Im Allgemeinen könnten die Komponenten mit hoher Exposition in den Zielorganen wirksam sein. Eine ausreichende Menge an Phenylethanoiden und ihren Derivaten wurde bewertet und in vitro bestimmt. Acteoside sind die charakteristischen Verbindungen, deren Gehalt nach der Verarbeitung durch Reiswein abnahm und der Gehalt an Isoacteosid, Isocistanosid C, Isocampneosid I entsprechend zunahm. Die Abbauprodukte von PhGs, wie CA- und HT-Derivate, konnten in den Bioproben bewertet werden, und die Reisweinverarbeitung kann die Absorption von verbessernMetabolitenin vivo.

Fazit

In dieser Studie wurden 97 Verbindungen in den Extrakten von CD und seinem verarbeiteten Produkt nachgewiesen. Der Abbau einiger Glykoside erfolgte bei erhöhter Temperatur, und als Ergebnis wurden einige neue Isomere und Komplexe synthetisiert. In einer in vivo-Studie wurden Prototypkomponenten (10) undMetaboliten(44) wurden in Plasma, Kot und Urin von Ratten bestimmt oder vorläufig bewertet. Metabolische Prozesse der Phase II waren die wichtigsten Kaskaden, die meisten davonMetabolitenwurden mit Echinacosid oder Acteosid assoziiert, wie HT, CA und ihre Derivate 3-Hydroxyphenylpropionsäure 3-HPP. Diese Metaboliten können leichter in das Plasma aufgenommen werden und haben eine bessere medizinische Wirkung. Die erhaltenen Ergebnisse zeigten, dass diechemischDie Zusammensetzung von CD war unterschiedlich und beeinflusste die Disposition der Verbindung in vitro und in vivo.

Verfügbarkeit von Daten und Materialien

Die während der aktuellen Studie verwendeten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage beim korrespondierenden Autor erhältlich.

Abkürzungen

PhGs: Phenylethanoidglykoside

CD:Cistanche Deserticola

CMM: Chinesische Materia Medica

TCM: Traditionelle Chinesische Medizin

CD-NP:Cistanche DeserticolaVerarbeitet durch Dämpfen mit Reiswein unter Normaldruck

CD-HP:Cistanche DeserticolaVerarbeitet durch Dämpfen mit Reiswein unter hohem Druck

UPLC-Q-TOF-MSE: Ultrahochleistungs-Flüssigkeitschromatographie gekoppelt mit TOF-MSE

PCA: Hauptkomponentenanalyse

VIP: Variable Wichtigkeit für die Projektion

CA: Kaffeesäure

HA: Hydroxytyrosol

Die Studie für Cistanche von chemischen Profilen und Metaboliten

Verweise

1. Chinesische Arzneibuchkommission. Arzneibuch der Volksrepublik China, Bd. I. Peking: China Medical Science Press; 2020. p. 140.

2. Z. Li, H. Lin, L. Gu, J. Gao, CM Tzeng. KräuterCistanche(Rou Cong-Rong): Eines der besten pharmazeutischen Geschenke der traditionellen chinesischen Medizin. Vorderseite Pharmacol. 2016;7:41.

3. Liu BN, Shi J, Zhang C, Li Z, Hua Y, Liu PP, Jia TZ. Auswirkungen verschiedener Trocknungsverfahren für FreshCistanche Deserticolaauf seinen Komponenteninhalt. J Chin Med Mater. 2020;10:2414–8.

4. Liu BN, Shi J, Jia TZ, Lv TT, Li Z. Optimierung des Hochdruckdampfprozesses für Cistanches Herba. Chin Trad Patent Med. 2019;11:2576–80.

5. Fan YN, Huang YQ, Jia TZ, Wang J, La-Sika, Shi J. Auswirkungen vonCistanchenherba vor und nach der Verarbeitung zur Anti-Aging-Funktion und Immunfunktion von D-Galactose-induzierter alternder Ratte. Chin Arch Trad Chin Med, 2017; 11:2882–2885.

6. Gao YJ, Jiang Y, Dai F, Han ZL, Liu HY, Bao Z, Zhang TM, Tu PF. Studie zu abführenden Bestandteilen in Cistanche deserticola YC Ma. Modernes Chin Med. 2015;17(4):307–10.

7. Liu BN, Shi J, Li Z, Zhang C, Liu P, Yao W, Jia T. Study on the neuroendocrine-immune function ofCistanche Deserticolaund seine Reiswein-Dampfprodukte im Glucocorticoid-induzierten Rattenmodell. Evidenzbasiertes Komplement Alternat. Med. 2020;22:5321976.

8. Guo Y, Wang L, Li Q, Zhao C, He P, Ma X. Verstärkung der nierenbelebenden Funktion im Mausmodell durch Cistanches herba schnell getrocknet bei mittlerer bis hoher Temperatur. J Med Food. 2019;22(12):1246–53.

9. Wang T., Zhang X., Xie W.Cistanche DeserticolaYC Ma, "Wüstenginseng": eine Rezension. Bin J Chin Med. 2012;40(6):1123–41.

10. Fu Z, Fan X, Wang X, Gao X. Cistanches Herba: Ein Überblick über seine chemischen, pharmakologischen und pharmakokinetischen Eigenschaften. J Ethnopharmacol. 2018;219:233–47.

11. H. Lei, X. Wang, Y. Zhang, T. Cheng, R. Mi, Xu X, X Zu, W. Zhang HerbaCistanche(Rou Cong Rong): eine Überprüfung seiner Phytochemie und Pharmakologie. Chem. Pharm. Bull. 2020;68(8):694–712.

12. Geng X, Tian X, Tu P, Pu X. Neuroprotektive Wirkungen von Echinacosid im Maus-MPTP-Modell der Parkinson-Krankheit. Eur J Pharmacol. 2007;564:66–74.

13. Deng M, Zhao JY, Ju XD, Tu PF, Jiang Y, Li ZB. Schützende Wirkung von Tubulosid B auf TNF-alpha-induzierte Apoptose in neuronalen Zellen. Acta Pharmacol Sin. 2004;25(10):1276–84.

14. Nan ZD, Zhao MB, Zeng KW, Tian SH, Wang WN, Jiang Y, Tu PF. Entzündungshemmende Iridoide aus den Stielen vonCistanche Deserticolain der Tarim-Wüste kultiviert. Chin J. Nat. Med. 2016;14(1):61–5.

15. Nan ZD, Zeng KW, Shi SP, Zhao MB, Jiang Y, Tu PF. Phenylethanoidglykoside mit entzündungshemmender Wirkung aus den Stängeln von Cistanche deserticola, die in der Tarim-Wüste kultiviert werden. Fitoterapie. 2013;89:167–74.

16. T. Morikawa, Y. Pan, K. Ninomiya, K. Imura, D. Yuan, M. Yoshikawa, T. Hayakawa, O. MuraokaCistancheTubulus. Chem. Pharm. Bull. 2010;58(10):1403–7.

17. Li SL, Song JZ, Qiao CF, et al. Eine neuartige Strategie zur schnellen Erkundung von PotenzialenchemischMarker für die Unterscheidung zwischen rohem und verarbeitetem Radix Rehmanniae durch UHPLC-TOF-MS mit multivariater statistischer Analyse. J Pharm Biomed Anal. 2010;51(4):812–23.

18. Peng F, Chen J, Wang X, Xu CQ, Liu TN, Xu R. Änderungen des Gehalts an Phenylethanoidglykosiden, antioxidative Aktivität und andere Qualitätsmerkmale inCistanche DeserticolaScheiben durch Dampfbehandlung. Chem. Pharm. Bull. 2016;64:1024–30.

19. Ma ZG, Tan YX. Inhaltsveränderungen von sechs Phenylethanoid-Glykosiden unter dampfenden Zeitspannen mit Wein in Desertliving Cistanche. Chin Trad Patent Med. 2011;33(11):1951–4.

20. Peng F, Xu R, Wang X, Xu C, Liu T, Chen J. Wirkung des Dampfprozesses auf die Qualität der NachernteCistanche Deserticolafür medizinische Zwecke während der Sonnentrocknung. Biol PharmBull. 2016;39(12):2066–70.

21. Q. Cui, Y. Pan, W. Zhang, Y. Zhang, S. Ren, D. Wang, Z. Wang, X. Liu, W. Xiao.Metabolitenvon diätetischem Acteosid: Profile, Isolierung, Identifizierung und hepatoprotektive Kapazitäten. J Agric FoodChem. 2018;66(11):2660–8.

22. Cui Q, Pan Y, Bai X, Zhang W, Chen L, Liu X. Systematische Charakterisierung derMetabolitenvon Echinacosid und Acteosid ausCistanchetubulosa in Plasma, Galle, Urin und Kot von Ratten, basierend auf UPLC-ESI-Q-TOF-MS. Biomed Chromatogr. 2016;30(9):1406–15.

23. Bertelli M., Kiani AK, Paolacci S., Manara E., Kurti D., Dhuli K., Bushati V., Miertus J., Pangallo D., Baglivo M., Beccari T., Michelini S. Hydroxytyrosol: eine natürliche Verbindung mit vielversprechenden pharmakologischen Aktivitäten. J Biotechnol. 2020;309:29–33.

24. Touaibia M, Jean-François J, Doiron J. Kaffeesäure, ein vielseitiger Pharmakophor: ein Überblick. Mini-Rev. Med. Chem. 2011;11(8):695–713.