Weder die afrikanisch-zentrierte S47- noch die P72-Variante von TP53 ist in einer malischen Kohortenstudie mit einem verringerten Risiko für febrile Malaria verbunden

Hintergrund. Es wurde gezeigt, dass TP53 bei entzündlichen Prozessen, einschließlich Malaria, eine Rolle spielt. Wir haben zuvor herausgefunden, dass p53 durch Parasiten verursachte Entzündungen abschwächt und einen klinischen Schutz vor einer Plasmodium falciparum-Infektion bei malischen Kindern vorhersagt. Hier untersuchten wir in einer prospektiven Kohortenstudie zur Malariaimmunität, ob die Polymorphismen der p53-Codons 47 und 72 mit einem unterschiedlichen Risiko einer P. falciparum-Infektion und einer unkomplizierten Malaria verbunden sind.

Methoden. Die Polymorphismen der p53-Codons 47 und 72 wurden durch Sequenzierung des TP53-Exons 4 bei 631 malischen Kindern und Erwachsenen bestimmt, die an der Kalifabougou-Kohortenstudie teilnahmen. Die Auswirkungen dieser Polymorphismen auf das prospektive Risiko für fieberhafte Malaria, Parasitämie-Vorfälle und die Zeit bis zum Auftreten von Fieber nach Parasitämie-Vorfällen über einen Zeitraum von 6 Monaten intensiver Malariaübertragung wurden mithilfe von Cox-Proportional-Hazards-Modellen bewertet.

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Ergebnisse. Störfaktoren für das Malariarisiko, einschließlich Alter und Hämoglobin S oder C, waren bei Personen mit oder ohne p53-, S47- und R72-Polymorphismen ähnlich. Im Vergleich zu ihren jeweiligen häufigen Varianten waren weder S47 noch R72 mit Unterschieden im prospektiven Risiko für fieberhafte Malaria, inzidente Parasitämie oder fieberhafte Malaria nach Parasitämie verbunden.

Schlussfolgerungen. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass die Polymorphismen der p53-Codons 47 und 72 nicht mit dem Schutz vor auftretender P. falciparum-Parasitämie oder unkomplizierter fieberhafter Malaria verbunden sind.

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Schlüsselwörter. Malaria; P47S; p53-Polymorphismen; P72R; prospektive Kohortenstudie.

Der klinisch bedeutsamste Malariaerreger in Afrika, Plasmodium falciparum, infiziert Menschen seit fast 10 Jahren [1]. Im Laufe dieser Zeit hat die hohe Sterblichkeitsrate der schweren Falciparum-Malaria einen starken Selektionsdruck auf das menschliche Genom ausgeübt [2]. Daher wurden spezifische Erythrozyten-Polymorphismen, die andernfalls schädlich für den Wirt sein könnten (z. B. die Sichelhämoglobin-Mutation [HbS], die für die Sichelzellenanämie verantwortlich ist), in Malaria-endemischen Populationen beibehalten, da diese Mutationen Malariaresistenz verleihen, indem sie die Erythrozyten weniger gastfreundlich machen der eindringende Parasit [3–5]. In genomweiten Assoziationsstudien wurde festgestellt, dass zusätzliche Polymorphismen, die nicht mit der Erythrozytenfunktion in Zusammenhang stehen, vor schwerer Malaria schützen, aber bis zu 89 % der Anfälligkeit für schwere Malaria müssen bisher bestimmten genomischen Loci zugeschrieben werden [6–9]. Darüber hinaus fehlten Belege für Gelderythrozyten-Wirtspolymorphismen, die vor unkomplizierter (nicht schwerer) Malaria schützen könnten. Frühere Studien haben gezeigt, dass der Tumorsuppressor p53 bei der Bekämpfung von Malariainfektionen eine Rolle spielt. Es wurde gezeigt, dass ein erhöhter Wirts-p53 die Belastung im Leberstadium durch Plasmodium bei Mäusen verringert [10]. Unsere Gruppe zeigte zuvor eine erhöhte Expression der TP53- und p53-Zielgene im Blut nicht infizierter malischer Kinder, die später eine asymptomatische P. falciparum-Parasitämie aufwiesen, im Vergleich zu denen, die später eine fieberhafte Malaria aufwiesen [11]. Diese Beobachtungen haben zu der Frage geführt, ob TP53-Polymorphismen für diese Unterschiede im klinischen Phänotyp verantwortlich sein könnten. TP53 ist das am häufigsten mutierte Gen bei Krebserkrankungen beim Menschen, wobei die meisten Missense-Mutationen an Hot Spots innerhalb der prolinreichen Domäne (Aminosäuren 55–100) oder der DNA-Bindungsdomäne (Aminosäuren 102–192) auftreten [12, 13]. Die häufigste natürlich vorkommende Mutation tritt am Codon 72 (rs1042522) auf und entsteht durch einen Einzelnukleotid-Polymorphismus (SNP) in Exon 4 [14, 15]. Ein Prolinrest an dieser Position (P72), der als Vorfahrenform gilt, kommt bevorzugt bei Personen afrikanischer Abstammung vor, wohingegen ein Argininrest (R72) häufiger bei nicht-hispanischen weißen Amerikanern und Europäern vorkommt, wobei die Häufigkeit linear mit dem Breitengrad zunimmt [ 16, 17]. Obwohl ein Ersatz von Prolin durch Arginin zu erheblichen strukturellen und funktionellen Veränderungen führt [18], wird angenommen, dass beide Reste ausreichend funktionieren, um vor den verschiedenen Krebsarten zu schützen, denen Menschen in ihren jeweiligen Breitengraden ausgesetzt sein können (Übersicht in [13]). Bemerkenswert ist, dass die R72-Variante mit kalten Temperaturen und geringer UV-Intensität in Verbindung gebracht wird [19], aber Studien, die den Zusammenhang von Codon-72-Polymorphismen mit Hautkrebs untersuchen, haben zu inkonsistenten Ergebnissen geführt [20–23]. Trotz der erhöhten Häufigkeit von P72 bei Afrikanern im Vergleich zu Europäern [17] wurde von anderen vorgeschlagen, dass die R72-Variante möglicherweise vor einer Malariainfektion beim Menschen schützt [24], basierend auf Beweisen, dass R72 im Vergleich zu P72 ein erhöhtes apoptotisches Potenzial aufweist [ 25] und dass Apoptose ein Mechanismus ist, durch den der Wirt parasitierte Hepatozyten in der Leber eliminiert [10]. Das zweithäufigste p53-kodierende SNP kommt auch in Exon 4 vor und ist innerhalb der Region lokalisiert, die die N-terminale Transaktivierungsdomäne bei Codon 47 (rs1800371) kodiert [26], wo das häufiger vorkommende Prolin (P47) durch Serin (S47) ersetzt werden kann ) [27]. Im Gegensatz zum sehr häufigen Polymorphismus am Codon 72 ist die S47-Variante beim Menschen relativ selten, mit einer Allelhäufigkeit von 2–4 % in afrikanischen Populationen [26, 27]. Da S47 bei Amerikanern nichtafrikanischer Herkunft bisher nicht nachgewiesen wurde [28], wird dieser Polymorphismus in der Literatur als afrikanisch-zentrierte Variante bezeichnet. Die S47-Variante kann Resistenz gegen den eisenabhängigen programmierten Zelltod (Ferroptose) verleihen, was zu einem erhöhten Risiko für spontane Krebserkrankungen führt [27, 29]. Bei S47-Mäusen kann diese fehlerhafte Ferroptose zu einer Eisenansammlung und einer entzündungshemmenden Reaktion auf das Malariapigment Hämozoin führen, was zu Spekulationen führt, dass die S47-Variante malariainduzierte Entzündungen begrenzen und so das Überleben von Personen verbessern könnte, die in Gebieten mit intensiver Malariaübertragung leben [ 30]. Studien zu p53-Polymorphismen und der Malariaanfälligkeit beim Menschen waren bisher begrenzt. Zwei Studien untersuchten den Zusammenhang zwischen Codon-72-Varianten und dem Malariarisiko beim Menschen mit widersprüchlichen Ergebnissen [24, 31]. Nach unserem Kenntnisstand muss der Zusammenhang zwischen p53-Codon-47-Polymorphismen und dem Malariarisiko beim Menschen jedoch noch untersucht werden. In der aktuellen Studie untersuchten wir, ob die Polymorphismen der p53-Codons 47 und 72 das Risiko einer P. falciparum-Infektion und klinischer Malaria in einer prospektiven Kohorte malischer Kinder und Erwachsener beeinflussen.

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METHODEN

Studiendesign und Teilnehmer

Der Studienort und die Studienpopulation wurden an anderer Stelle beschrieben [32]. Kurz gesagt, die Studie wurde im Dorf Kalifabougou in Mali durchgeführt, wo die Übertragung von P. falciparum-Malaria intensiv und saisonal ist und von Juni bis Dezember erfolgt [32]. Im Mai 2011 haben wir 695 gesunde Kinder und Erwachsene im Alter von 3 Monaten bis 25 Jahren in eine longitudinale Beobachtungskohortenstudie zur Untersuchung der Malaria-Immunität aufgenommen. Dabei wurde eine zweiwöchentliche aktive Malariaüberwachung mit regelmäßigen wöchentlichen Hausuntersuchungen und passiver Selbstüberwachung durchgeführt -Verweisung. Zu den Ausschlusskriterien bei der Aufnahme gehörte der Hämoglobinspiegel<7 g/dL, axillary temperature >37.5°C, acute systemic illness, underlying chronic disease, use of antimalarial or immunosuppressive medications in the past 30 days, and pregnancy. Malaria episodes were defined as parasitemia of >2500 Parasiten pro Mikroliter, eine Achseltemperatur von mindestens 37,5 Grad innerhalb von 24 Stunden und keine andere durch körperliche Untersuchung erkennbare Ursache für Fieber. Episoden wurden prospektiv durch Selbstüberweisung an die Studienklinik und wöchentliche aktive klinische Überwachungsbesuche erkannt. Alle Personen mit mikroskopisch festgestellten Anzeichen und Symptomen von Malaria und einem Grad an Parasitämie wurden gemäß den Richtlinien des malischen National Malaria Control Program behandelt. Während der geplanten Klinikbesuche wurde alle zwei Wochen Blut durch Fingerstiche für Blutausstriche und getrocknete Blutflecken (DBSs) auf Filterpapier gesammelt. Asymptomatische P. falciparum-Infektionen wurden durch mikroskopische Untersuchung von Blutausstrichen und Polymerase-Kettenreaktionsanalyse (PCR) von Blutflecken am Ende des Überwachungszeitraums festgestellt. Erste P. falciparum-Infektionen wurden retrospektiv mit PCR von längs gesammelten DBS nachgewiesen, wie an anderer Stelle beschrieben [32]. Erste Malaria-Episoden wurden anhand der Daten der klinischen Besuche ermittelt. Die mit einem HemoCue-Analysegerät gemessenen Hämoglobinwerte wurden zur Bestimmung des Anämiestatus auf der Grundlage der Kriterien der Weltgesundheitsorganisation verwendet. Die Hämoglobintypisierung für HbS wurde mit einem D-10-Hämoglobin-Testsystem (Bio-Rad) durchgeführt. An anderer Stelle wurden drei klinische Klassen mit unterschiedlichem Grad der klinischen Immunität beschrieben [11].

DNA-Isolierung und -Sequenzierung

Genomische DNA wurde aus Vollblutproben mit drei Methoden extrahiert: (1) aus Vollblutpellets (100 μl) unter Verwendung eines QIAamp 96 DNA Blood Kit (Qiagen) gemäß dem Protokoll des Herstellers; (2) von DBSs unter Verwendung des QIAamp DNA Mini Kit (Qiagen) gemäß dem Protokoll des Herstellers; oder (3) aus DBSs unter Verwendung einer benutzerdefinierten Hochdurchsatz-Extraktionsmethode, wie an anderer Stelle beschrieben [33]. Gereinigte genomische DNA wurde verwendet, um Exon 4 von TP53 durch PCR unter Verwendung der folgenden zuvor veröffentlichten Primer zu amplifizieren [34]: 5′-TGAGGACCTGGTCCTCTGAC- 3′ (vorwärts) und rückwärts 5′-AGAGGAATCCCAAAGTTC CA-3′ ( umkehren). Die PCR-Amplifikation wurde mit dem HotStarTaq Plus Master Mix Kit (Qiagen) bei einer Annealing-Temperatur von 60 Grad gemäß dem vom Hersteller empfohlenen Protokoll durchgeführt. Amplifizierte PCR-Produkte wurden bei Quintara Biosciences mit der Kettenabbruchmethode gereinigt und sequenziert. Die empfangenen Sequenzdateien wurden mit der Benchling-Software (Version 2022.2.3; https://benchling.com) analysiert und mit der TP53-Referenzsequenz (Genidentifikator 7157; National Center for Biotechnology Information) abgeglichen. Von der Software gemeldete Base Calls wurden manuell mit den Chromatogrammen verglichen. Die generierten Sequenzen werden auf GenBank verfügbar sein (Zugangsnummern OP593553–OP594185).

Statistische Analyse

Kaplan-Meier-Kurven wurden verwendet, um die jeweiligen Wahrscheinlichkeiten abzuschätzen, frei von (1) klinischer Malaria, (2) P. falciparum-Parasitämie oder (3) fieberhafter Malaria zu bleiben, sobald sie parasitär geworden ist. Für die Zeitspanne bis zum Auftreten einer fieberhaften Malaria nach Parasitämie wurde als Startzeit der Zeitpunkt des Auftretens einer Parasitämie verwendet, geschätzt als die Mitte zwischen dem letzten negativen P. falciparum-PCR-Ergebnis und dem ersten positiven P. falciparum-PCR-Ergebnis. Cox-Proportional-Hazards-Modelle wurden zur Schätzung der Wald-Statistik verwendet, um die Signifikanz von Unterschieden in der Zeit bis zum ersten Ereignis zwischen TP53-Varianten am Codon 47 oder 72 entweder in univariaten Analysen oder in Analysen, die Kovariaten umfassten, wie in den Tabellen angegeben, zu testen. Der Kruskal-Wallis-Rangsummentest wurde verwendet, um die Unterschiede zwischen Gruppen für kontinuierliche Ergebnisse zu vergleichen. Für kategoriale Variablen wurden Gruppenvergleiche mithilfe von χ 2 -Tests durchgeführt. Die statistische Signifikanz wurde als 2-tailed P-Wert definiert<.05. All analyses were performed using R software (version 4.2.0).

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Ethische Anerkennung

Die Kalifabougou-Kohortenstudie wurde von der Ethikkommission der Fakultät für Medizin, Pharmazie und Zahnmedizin der Universität für Wissenschaft, Technik und Technologie von Bamako und dem Institutional Review Board des National Institute of Allergy and Infectious Diseases, National Institutes of Health, genehmigt . Die schriftliche Einverständniserklärung der erwachsenen Teilnehmer und der Eltern oder Erziehungsberechtigten der teilnehmenden Kinder wurde eingeholt. Diese Studie wurde vom Indiana University Institutional Review Board (Protokoll 2005922267) als ausgenommene Forschung an menschlichen Probanden genehmigt.

ERGEBNISSE

Häufigkeit von TP53-Polymorphismen bei Studienteilnehmern

Von den 695 Personen, die ursprünglich in die Kalifabougou-Kohorte aufgenommen wurden, verfügten 631 über ausreichend genomische DNA für die TP53-Exon-4-Sequenzierung. Sequenzvergleiche ergaben 4 0 Individuen (6,3 %) mit S47-Polymorphismen, von denen 33 heterozygot und 7 homozygot waren (Tabelle 1). R72-Polymorphismen wurden bei 327 Personen (51,8 %) beobachtet, von denen 206 (32,6 %) heterozygot und 121 (19,2 %) homozygot waren (Tabelle 1). Weder die Polymorphismen von Codon 47 noch Codon 72 befanden sich im Hardy-Weinberg-Gleichgewicht (exakter Haldane-Test, P=6,5 × 10−6 bzw. P=1,0 × 10−12). Die Verteilung potenzieller Modifikatoren des Malariarisikos (Alter, Geschlecht, HbS oder Hämoglobin, bestehende P. falciparum-Parasitämie und Anämie) unterschied sich zwischen den TP53-Variantengruppen weder für S47 noch für R72 signifikant (Tabelle 1). Alle 6 Personen, die sowohl für die S47- als auch für die R72-Allele heterozygot waren, waren männlich und bei der Einschreibung PCR-positiv für P. falciparum (Tabelle 1).

Keine Assoziation der TP53-Codon-47- und Codon-72-Polymorphismen mit einem verringerten Risiko klinischer Malaria-Episoden oder eines P. falciparum-VorfallsParasitämie

Es wurden Zeit-zu-Ereignis-Analysen durchgeführt, um den Zusammenhang zwischen S47- und P72-Varianten und dem Risiko einer fieberhaften Malaria zu untersuchen. Die erste Analyse zwischen P47/P47, P47/S47 und S47/S47 zeigte keinen signifikanten Unterschied im Malariarisiko (Daten nicht gezeigt), vermutlich aufgrund der geringen Stichprobengrößen für die heterozygoten P47/S47- und homozygoten S47/S47-Genotypen. Somit wurden diese Genotypen in einer einzigen Schicht zusammengefasst. Für Codon 72 wurden die heterozygoten und homozygoten Genotypen als drei separate Schichten beibehalten. Es gab keine signifikanten Unterschiede in der Zeit bis zur ersten klinischen Malaria-Episode zwischen den Genotypen P47/P47 (Median [95 %-Konfidenzintervall], 184 [165–210] Tage) und der S47-Variante (151 [133–210] Tage) oder dazwischen P72/P72 (183 [59–210] Tage) und entweder P72/R72 (210 [160–210] Tage) oder R72/R72 (159 [142–210] Tage) Genotypen in den univariaten Analysen (Abbildung 1A und 1B). ) oder die angepassten Analysen, die Alter, Geschlecht, Ausgangsparasitämie, Anämie und das Vorhandensein von HbS als Kovariaten umfassten (Ergänzungstabelle 1). Personen, die P47/S47 und P72/R72 waren, zeigten ein ähnliches Risiko für klinische Malaria wie homozygote P47/P47- und P72/P72-Personen (ergänzende Abbildung 1). Es wurde gezeigt, dass erhöhtes p53 die Belastung im Leberstadium durch Plasmodium in Mausmodellen verringert [10]. Wir haben daher festgestellt, ob TP53-Polymorphismen mit einem unterschiedlichen Risiko für das Auftreten von P. falciparum-Infektionen verbunden sind, wie durch eine intensive, aktive PCR-Überwachung bei Personen ermittelt wurde, deren Studienbeginn durch PCR negativ auf P. falciparum war (n=330). Wir konnten keinen signifikanten Unterschied in der Zeit bis zur ersten PCR-nachweisbaren P. falciparum-Infektion zwischen P47/P47 (Median [95 % Konfidenzintervall], 85 [81–91] Tage) und der S47-Variante (85 [58–124]) feststellen. Tage) Genotypen oder zwischen P72/P72 (88 [80–95] Tage) und entweder P72/R72 (81 [72–91] Tage) oder R72/R72 (91 [80–116] Tage) Genotypen in beiden univariaten Analysen ( Abbildung 1C und 1D) oder angepasste Analysen, die relevante Kovariaten umfassten (Ergänzungstabelle 2).

Kein Zusammenhang von TP53-Polymorphismen mit dem Schutz vor febriler Malaria nach einem Vorfall mit P. falciparum-Parasitämie oder Unterschieden in der Genexpression

Unsere Gruppe identifizierte zuvor eine Untergruppe von Kindern in der Kalifabougou-Kohorte, die zum Zeitpunkt des Vorfalls fieberfrei waren, PCR-bestätigte P. falciparum-Parasitämie [11]. Diese Kinder wurden als „verzögertes Fieber“ oder „immun“ eingestuft, je nachdem, ob sie nach 2–14 Tagen Fieber entwickelt hatten oder für den Rest der Malariasaison asymptomatisch blieben. Diese beiden Untergruppen zeigten eine erhöhte Expression von TP53 und TP53-Zielgenen zu Beginn der Infektion im Vergleich zu Kindern, die zum Zeitpunkt des Auftretens einer P. falciparum-Parasitämie („Frühfieber“) fieberhaft waren [11]. Um festzustellen, ob TP53-Polymorphismen entweder mit dem verzögerten Fieber- oder dem Immunphänotyp assoziiert sind, untersuchten wir die Verteilung der S47- und R72-Polymorphismen in diesen Untergruppen, beobachteten jedoch keine signifikanten Unterschiede zwischen den drei klinischen Phänotypen (Tabelle 2). Eine erneute Untersuchung der TP53-Expression in den RNA-seq-Transkriptomen, die an der gesunden Grundlinie jedes Kindes (n=80) [11] durch Polymorphismen der Codons 47 und 72 erhalten wurden, ergab keine Unterschiede zwischen den häufigen Polymorphismen und ihren jeweiligen Varianten (Abbildung 2). Um zu bestimmen, ob S47- oder P72-Varianten mit dem Schutz vor Malariafieber verbunden sind, sobald Parasiten in der Elternkohorte auftreten, haben wir das Risiko einer fieberhaften Malaria bestimmt, wobei wir den Zeitpunkt der ersten Parasitämie als Startzeitpunkt verwendeten. Hier haben wir alle Personen eingeschlossen, die zu Beginn der Studie PCR-negativ P. falciparum hatten und anschließend eine PCR-bestätigte P. falciparum-Parasitämie aufwiesen (n=292). In Untergruppen mit S47- oder P72-Polymorphismen im Vergleich zu ihren jeweiligen gemeinsamen Genotypen wurden durch univariate Analysen keine signifikanten Unterschiede in der Zeit bis zum ersten Fieber nach Parasitenbefall beobachtet (Abbildungen 3A und 3B). Obwohl für S47 im Vergleich zu P47/P47 ein Trend zu einem erhöhten Risiko für fieberhafte Malaria zu verzeichnen war, wenn es einmal parasitär war (Abbildung 3A), wurde dieser Unterschied statistisch unbedeutender, wenn relevante Kovariaten wie Alter und HbS angepasst wurden (Ergänzungstabelle 3).

DISKUSSION

Im Gegensatz zur schweren Malaria betrafen genetische Polymorphismen des Wirts, die mit einer Resistenz gegen unkomplizierte Malaria einhergehen, hauptsächlich Erythrozyten-Genvarianten [2, 5]. Während mehrere Nicht-Erythrozyten-Gene mit dem Schutz vor schwerer Malaria in Verbindung gebracht werden [6, 7, 9], wurden nur eine Handvoll Gene, die an der Entzündungsreaktion beteiligt sind, nämlich NOS2 und TNF, speziell mit einem unterschiedlichen Risiko für unkomplizierte oder leichte Malaria in Verbindung gebracht [2, 35–38]. Der Transkriptionsfaktor p53 hält die zelluläre Homöostase als Reaktion auf Stresssignale aufrecht, indem er ein breites Spektrum nachgeschalteter Ziele, einschließlich Entzündungswegen, reguliert, die zusammen onkogene Prozesse unterdrücken [39]. Das onkogene Potenzial chronischer Entzündungen ist gut belegt [40] und es gibt zunehmend Hinweise darauf, dass p53 die Wirtsentzündung im Zusammenhang mit Krankheitserregern modulieren kann [41, 42]. Um dies zu untermauern, beobachtete unsere Gruppe zuvor, dass eine erhöhte Expression von TP53 und seinen nachgeschalteten Zielen mit dem Schutz vor Fieber während einer Parasitämie durch P. falciparum verbunden war, was darauf hindeutet, dass p53 die fieberhafte Reaktion während einer Malariainfektion zunächst dämpfen könnte [11]. In einer früheren Studie zeigten Mäuse mit der p53-S47-Variante eine entzündungshemmende Reaktion auf das Malariapigment Hämozoin, was darauf hindeutet, dass spezifische p53-Polymorphismen Entzündungen bei Malariainfektionen beim Menschen begrenzen könnten [30]. Im Zusammenhang mit einer entzündlichen Herausforderung mit Lipopolysacchariden zeigten Mäuse mit dem p53-R72-Polymorphismus im Vergleich zu P72-Mäusen eine höhere Überlebensrate, was darauf hindeutet, dass die R72-Variante vor pathologischen Reaktionen auf gramnegative Bakterien schützen könnte [43]. Hier untersuchten wir, ob Codon 47- oder 72-Polymorphismen das Risiko einer P. falciparum-Malaria in einer prospektiven Längsschnittkohorte beeinflussen, und zeigten, dass keiner dieser Polymorphismen mit einem unterschiedlichen Risiko einer Parasitämie oder einer fieberhaften Malaria verbunden ist. Darüber hinaus war keiner dieser TP53-Polymorphismen in der Untergruppe der Kinder überrepräsentiert, die vor Malaria geschützt waren und in der vorherigen Studie unserer Gruppe eine erhöhte Expression von TP53 und seinen Zielen zum Zeitpunkt der Präinfektion zeigten [11]. Unsere Ergebnisse stimmen mit Querschnittsstudien an ghanaischen Erstgebärenden (n=314) und ruandischen Kindern (n=545) überein, die keinen Zusammenhang zwischen dem R72-Polymorphismus und der Prävalenz oder Parasitenintensität von P. falciparum-Infektionen zeigten [31]. Die einzige andere veröffentlichte Untersuchung von p53-Polymorphismen bei Malaria war eine Studie an Neugeborenen auf Sardinien, bei der eine größere Häufigkeit des mutmaßlich Malaria-schützenden homozygoten Genotyps R72 in einem Gebiet mit zuvor höherer Malaria-Endemizität (n=46) im Vergleich zu festgestellt wurde ein Gebiet mit zuvor geringerer Malaria-Endemizität (n=47) [24]. Basierend auf der Annahme, dass die R72-Variante von p53 über ein erhöhtes apoptotisches Potenzial verfügt [25] und somit eine Infektion im Leberstadium durch Apoptose parasitierter Hepatozyten verhindern kann [10], schlugen die Autoren vor, dass die Endemizität von Malaria möglicherweise positiv für den R72-Polymorphismus selektiert hat [24]. ]. Diese Hypothese wird jedoch nicht durch unsere Daten gestützt, die keinen Unterschied in der Zeit bis zum Auftreten einer PCR-bestätigten Parasitämie zwischen den Codon-72-Genotypen zeigen. Darüber hinaus könnte ein Malaria-protektiver R72-Polymorphismus nicht erklären, warum das P72-Allel bei Afrikanern häufiger vorkommt als bei Europäern [17], eine Beobachtung, die darauf hindeuten würde, dass P72 das Allel ist, das ausgewählt wurde, um in Malaria-endemischen Populationen erhalten zu bleiben, so die Studie. Malaria-Hypothese“ [8]. Möglicherweise ist die durch R72 vermittelte funktionelle Aktivität für das Risiko einer fieberhaften Malaria nicht relevant. Wie oben erwähnt, kann die R72-Variante Mäuse zwar vor einer Lipopolysaccharid-Exposition schützen [43], es wurde jedoch in Mausstudien auch gezeigt, dass sie Entzündungen im Zusammenhang mit einer fettreichen Ernährung [44] oder Brustkrebs [45] auslöst. Wie sich der R72-Polymorphismus auf die Entzündungsreaktion auswirkt, kann daher sowohl von der Art als auch von der Schwere der Störung abhängen.

Tabelle 1. Mögliche Störfaktoren des Malariarisikos und der TP53-Genotypen

Figure 1. p53 Codon 47 and 72 polymorphisms and malaria risk in the Kalifabougou cohort during the 2011 malaria season. Kaplan-Meier curves of time to first febrile malaria episode (defined as >2500 parasites per microliter by blood smear and axillary temperature >37,5 Grad) (A, B) und Zeit bis zur ersten Polymerasekettenreaktion (PCR) – bestätigte Plasmodium falciparum-Parasitämie (C, D), stratifiziert nach den angegebenen p53-Varianten-Genotypen. Für C und D umfasste die Analyse nur Personen, die zu Beginn der Malariasaison laut PCR negativ auf P. falciparum waren. Die Signifikanz wurde durch Cox-Proportional-Hazards unter Verwendung der Wald-Teststatistik bestimmt. Die Tabellen zeigen die Anzahl der gefährdeten Personen an den angegebenen Tagen seit der Registrierung. Abkürzung: HR, Hazard Ratio.

Tabelle 2. Verteilung der TP53-Genotypen bei Kindern mit unterschiedlicher Anfälligkeit für febrile Malaria nach anfänglicher Plasmodium falciparum-Parasitämie

Abbildung 2. TP53-Expression durch Codon 47- und 72-Polymorphismen. Expression von TP53 durch die angegebenen Polymorphismen der p53-Codons 47 (A) und 72 (B) in Vollblutproben von 80 malischen Kindern zu ihrem gesunden, nicht infizierten Ausgangswert im Mai 2011, vor der Malariasaison [11]. Die Signifikanz wurde mithilfe des Wilcoxon-Tests (A) oder der Varianzanalyse (B) bestimmt. Die Genexpression wird als log2-Anzahl pro Million (CPM) angegeben.

Der fehlende Zusammenhang zwischen Codon-47- oder Codon-72-Varianten und dem Schutz vor Malaria könnte auch durch deren mangelnde Auswirkung auf die p53-Expression erklärt werden, wie aus unseren Daten (Abbildung 2) und früheren Studien hervorgeht (27, 46). Ein Hauptergebnis der vorherigen Studie unserer Gruppe war, dass die Expression von p53 und seinen nachgeschalteten Zielen bei Kindern erhöht war, die während einer Parasitämie vor Frühfieber geschützt waren [11], was darauf hindeutet, dass die Induktion der p53-Expression möglicherweise erforderlich ist, um Entzündungen zu kontrollieren. Obwohl die S47-Variante im Vergleich zu P47 die Fähigkeit zur Apoptoseinduktion verringert, bleibt die p53-Proteinexpression in der Zelle immer noch auf einem ähnlichen Niveau [27]. Zusammen mit der Beobachtung, dass keines der Kinder in der am stärksten geschützten „Immungruppe“ die S47-Variante in sich trug, legt dies nahe, dass die Reduzierung der Apoptose durch diesen Polymorphismus wahrscheinlich nicht der Mechanismus ist, durch den p53 das Malariafieber beeinflusst. Ebenso ist der R72-Polymorphismus funktionell bedeutsam, führt jedoch nicht unbedingt zu einer erhöhten p53-Expression [25, 46]. Selektive Kräfte können die Häufigkeit bevorzugter Allele im Laufe der Zeit erhöhen. Das S47-Allel war bei 6,3 % der untersuchten Teilnehmer vorhanden, wobei 1,1 % homozygot waren, was einer Allelhäufigkeit von 3,7 % entspricht, was mit den zuvor für Afrikaner aus Afrika südlich der Sahara gemeldeten 2–4 % übereinstimmt [28]. Im Gegensatz dazu war das R72-Allel bei 51,8 % der Teilnehmer vorhanden (19,2 % homozygot), was einer Allelhäufigkeit von 35,5 % in dieser Population entspricht. Das Vorherrschen des P72-Allels in der malischen Kohorte steht im Einklang mit der erhöhten Häufigkeit dieses Allels in Breitengraden näher am Äquator, ein Befund, der auf natürliche Selektion zurückgeführt wurde [17].

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Es ist verlockend zu spekulieren, warum das S47-Allel bei Afrikanern so selten vorkommt. Angesichts der Tatsache, dass S47 im Vergleich zu P47 ein verringertes apoptotisches Potenzial aufweist [27], könnte die geringe Häufigkeit des S47-Allels durch die Fitnesskosten erklärt werden, die durch seine Aufrechterhaltung aufgrund selektiver Nachteile entstehen, die nicht mit pathologischen Entzündungen während Malaria zusammenhängen, wie beispielsweise ein erhöhtes Brustkrebsrisiko vor der Menopause [47]. Allerdings könnte die S47-Variante durch die Begrenzung der Hämozoin-induzierten Entzündungsreaktion [30] immer noch vor schwererer Malaria schützen. Da in der aktuellen Studie nur unkomplizierte P. falciparum-Malaria untersucht wurde, wurde nicht untersucht, ob einer dieser Polymorphismen mit einer Verringerung des Risikos schwerer Malaria verbunden war. Bemerkenswert ist der mäßig signifikante Zusammenhang zwischen doppelter Heterozygotie (P47/S47 und P72/R72) und asymptomatischer P. falciparum-Parasitämie bei der Einschreibung im Mai (Tabelle 1). In Gebieten mit intensiver saisonaler Malaria spiegelt eine chronische asymptomatische P. falciparum-Infektion am Ende der Trockenzeit eine höhere kumulative Malariaimmunität wider [48]. Da diese 6 doppelt heterozygoten Individuen im Vergleich zu den anderen Gruppen ein höheres Durchschnittsalter haben, ist die Überrepräsentation asymptomatischer Parasitämie in diesem Genotyp möglicherweise einfach eine zufällige Folge früherer Malariaexposition und nicht eine Folge der p53-Polymorphismen. Zusätzliche Kohortenstudien zu den p53-Polymorphismen der Codons 47 und 72 und zum Malariarisiko wären erforderlich, um die Bedeutung des doppelt heterozygoten Genotyps zu bestätigen. Weitere Einschränkungen dieser Studie müssen beachtet werden. Obwohl es sich bei unserer Studie um eine der bisher größeren Studien zu p53-Polymorphismen und dem Malariarisiko handelt, waren nur 7 der 631 Teilnehmer homozygot für S47, was unsere Fähigkeit, einen Zusammenhang festzustellen, einschränkte. Darüber hinaus haben wir nur p53-Polymorphismen innerhalb von Exon 4 ausgewertet und haben daher möglicherweise die Auswirkungen anderer potenziell relevanter Mutationen übersehen, einschließlich der 3KR-Mutationen (K117R + K161R + K162R), an denen p53-Acetylierungsstellen beteiligt sind (49). Bemerkenswert ist, dass wir Codon 117 untersucht haben, das sich auf Exon 4 befindet, und festgestellt haben, dass nur Lysin vorhanden ist. Wir haben auch keine Polymorphismen in nichtkodierenden TP53-Regionen oder in p53-Regulatoren bewertet, die p53 auf Proteinebene beeinflussen könnten, wie z. B. MDM2 (28, 50). Sequenzierungsansätze der nächsten Generation, die Polymorphismen in nicht translatierten 5′- und 3′-Regionen sowie in allen kodierenden Regionen für TP53- und p53-Regulatoren umfassend bewerten, könnten diese Einschränkungen beheben. Schließlich haben wir nicht festgestellt, ob sich die p53-Genotypen in ihrer Expression von p53 auf zellulärer Ebene unterscheiden, was möglicherweise wichtige Erkenntnisse darüber geliefert hat, ob der Polymorphismus der Codons 47 und 72 p53-regulierte Signalwege beeinflussen könnte. Zusammenfassend liefert die aktuelle Studie Hinweise darauf, dass weder die Codon-47- noch die Codon-72-Variante von p53 vor Malaria schützen, gemessen an der Zeit bis zum Auftreten einer P. falciparum-Parasitämie und einer unkomplizierten fieberhaften Malaria. Angesichts der geringeren Häufigkeit des S47-Allels in dieser Population wären größere Studien erforderlich, um den fehlenden Zusammenhang der S47-Variante mit dem Malariarisiko zu bestätigen.

Abbildung 3. Polymorphismen der p53-Codons 47 und 72 und Risiko einer fieberhaften Malaria nach einem Vorfall mit Parasitämie. Kaplan-Meier-Diagramme der Zeit bis zur ersten fieberhaften Malaria unter Verwendung einer durch die erste Polymerasekettenreaktion bestätigten Infektion im Blutstadium mit Plasmodium falciparum als Startzeit, stratifiziert nach Polymorphismen der p53-Codon-47- (A) oder Codon-72-Variante (B). Die Signifikanz wurde durch Cox-Proportional-Hazards unter Verwendung der Wald-Teststatistik bestimmt. Die Tabellen zeigen die Anzahl der gefährdeten Personen zum angegebenen Zeitpunkt seit der Registrierung. Abkürzung: HR, Hazard Ratio.

Zusatzdaten

Ergänzende Materialien sind online im Journal of Infectious Diseases verfügbar. Die veröffentlichten Materialien bestehen aus Daten, die von den Autoren zum Nutzen des Lesers bereitgestellt werden. Sie werden nicht kopiert und liegen in der alleinigen Verantwortung der Autoren. Fragen oder Kommentare sollten daher an den entsprechenden Autor gerichtet werden.

Anmerkungen

Danksagungen. Wir möchten den Studienteilnehmern und den Forschungsunterstützungsmitarbeitern in Kalifabougou und Bamako, Mali, danken. Wir danken auch Shanping Li, Emily LaVerriere und Daniel E. Neafsey für die Bereitstellung von Genommaterial und technischer Beratung.

Autorenbeiträge. PDC und TMT haben das Projekt konzipiert. SD, KK, AO, BT, PDC und TMT haben die ursprüngliche Kohortenstudie entworfen und SD, KK, AO und BT haben sie umgesetzt. ELG führte die Experimente durch. JB, AU, ELG und TMT führten die Datenanalyse durch. PDC steuerte zusätzliche Ressourcen bei. JB, PDC und TMT haben das Manuskript geschrieben. Alle Autoren haben das Manuskript gelesen und genehmigt.

Haftungsausschluss. Für den Inhalt sind ausschließlich die Autoren verantwortlich und geben nicht unbedingt die offiziellen Ansichten der National Institutes of Health wieder.

Finanzielle Unterstützung. Diese Arbeit wurde vom National Institute of Allergy and Infectious Diseases (NIAID) und den National Institutes of Health (Zuschüsse R01AI158719 und K08AI125682 an TMT) unterstützt. Die Kalifabougou-Kohortenstudie wird von der NIAID-Abteilung für intramurale Forschung unterstützt.

Mögliche Interessenkonflikte. Alle Autoren: Keine gemeldeten Konflikte. Alle Autoren haben das ICMJE-Formular zur Offenlegung potenzieller Interessenkonflikte eingereicht. Konflikte, die die Herausgeber als relevant für den Inhalt des Manuskripts erachten, wurden offengelegt.

Verweise

1. Sundararaman SA, Plenderleith LJ, Liu W, et al. Genome der kryptischen Schimpansenart Plasmodium enthüllen wichtige evolutionäre Ereignisse, die zur Malaria beim Menschen führten. Nat Commun 2016; 7:11078.

2. Kwiatkowski DP. Wie sich Malaria auf das menschliche Genom ausgewirkt hat und was uns die menschliche Genetik über Malaria lehren kann. Am J Hum Genet 2005; 77:171–92.

3. Allison AC. Schutz durch Sichelzellanämie gegen subtertale Malariainfektion. Br Med J 1954; 1:290–4.

4. Lell B, May J, Schmidt-Ott RJ, et al. Die Rolle von Polymorphismen roter Blutkörperchen bei der Resistenz und Anfälligkeit gegenüber Malaria. Clin Infect Dis 1999; 28:794–9.

5. Lopera-Mesa TM, Doumbia S, Konate D, et al. Einfluss von Erythrozytenvarianten auf Malaria bei Kindern in Mali: eine prospektive Kohortenstudie. Lancet Haematol 2015; 2: e140–9.

6. Ravenhall M, Campino S, Sepulveda N, et al. Neuartige genetische Polymorphismen im Zusammenhang mit schwerer Malaria und unter Selektionsdruck im Nordosten Tansanias. PLoS Genet 2018; 14:e1007172.

7. Ndila CM, Uyoga S, Macharia AW, et al. Menschliche Kandidatengenpolymorphismen und Risiko schwerer Malaria bei Kindern in Kilifi, Kenia: eine Fall-Kontroll-Assoziationsstudie. Lancet Haematol 2018; 5:e333–45.

8. Ebel ER, Uricchio LH, Petrov DA, Egan ES. Überprüfung der Malaria-Hypothese: Berücksichtigung von Polygenität und Pleiotropie. Trends Parasitol 2022; 38:290–301.

9. Malaria Genomic Epidemiology Network. Einblicke in die Anfälligkeit für Malaria anhand genomweiter Daten von 17000 Personen aus Afrika, Asien und Ozeanien. Nat Commun 2019; 10:5732.

10. Kaushansky A, Ye AS, Austin LS, et al. Die Unterdrückung von p53 des Wirts ist entscheidend für eine Infektion mit Plasmodium im Leberstadium. Zellvertreter 2013; 3:630–7.

11. Tran TM, Guha R, Portugal S, et al. Eine molekulare Signatur im Blut zeigt, dass p53 eine Rolle bei der Regulierung malariabedingter Entzündungen spielt. Immunität 2019; 51:750–65.e10.

12. Baugh EH, Ke H, Levine AJ, Bonneau RA, Chan CS. Warum gibt es bei Krebserkrankungen beim Menschen Hotspot-Mutationen im TP53-Gen? Zelltodunterschied 2018; 25:154–60.

13. Hoyos D, Greenbaum B, Levine AJ. Die Genotypen und Phänotypen von Missense-Mutationen in der Prolindomäne des p53-Proteins. Zelltodunterschied 2022; 29:938–45.

14. Harris N, Brill E, Shohat O, et al. Molekulare Grundlage für die Heterogenität des menschlichen p53-Proteins. Mol Cell Biol 1986; 6:4650–6.

15. Matlashewski GJ, Tuck S, Pim D, Lamb P, Schneider J, Crawford LV. Primärstrukturpolymorphismus am Aminosäurerest 72 von menschlichem p53. Mol Cell Biol 1987; 7: 961–3.

16. Katkoori VR, Jia X, Shanmugam C, et al. Die prognostische Bedeutung des p53-Codon-72-Polymorphismus unterscheidet sich je nach Rasse beim kolorektalen Adenokarzinom. Clin Cancer Res 2009; 15: 2406–16.

17. Beckman G, Birgander R, Sjalander A, et al. Wird der p53-Polymorphismus durch natürliche Selektion aufrechterhalten? Hum Hered 1994; 44:266–70.

18. Thomas M, Kalita A, Labrecque S, Pim D, Banks L, Matlashewski G. Zwei polymorphe Varianten von Wildtyp-p53 unterscheiden sich biochemisch und biologisch. Mol Cell Biol 1999; 19:1092–100. 19. Shi H, Tan SJ, Zhong H, et al. Wintertemperatur und UV-Strahlung stehen in engem Zusammenhang mit genetischen Veränderungen im p53-Tumorsuppressorweg in Ostasien. Am J Hum Genet 2009; 84:534–41.

20. McGregor JM, Harwood CA, Brooks L, et al. Zusammenhang zwischen dem p53-Codon-72-Polymorphismus und der Anfälligkeit für Sonnenbrand und Hautkrebs. J Invest Dermatol 2002; 119: 84–90.

21. Nan H, Qureshi AA, Hunter DJ, Han J. Wechselwirkung zwischen p53-Codon-72-Polymorphismus und Melanocortin-1-Rezeptorvarianten bei der Sonnenbräunungsreaktion und dem Hautmelanomrisiko. Br J Dermatol 2008; 159:314–21.

22. Cotignola J, Chou JF, Roy P, et al. Untersuchung der Auswirkung der Polymorphismen MDM2 SNP309 und TP53 Arg72Pro auf das Erkrankungsalter des kutanen Melanoms. J Invest Dermatol 2012; 132:1471–8.

23. Liu T, Lei Z, Pan Z, et al. Genetischer Zusammenhang zwischen p53-Codon-72-Polymorphismus und dem Risiko eines kutanen Plattenepithelkarzinoms. Tumor Biol 2014; 35:3899–903.

24. Gloria-Bottini FMG, Saccucci P, Bottini E. P53-Codon 72 und frühere Malariamorbidität auf Sardinien. Malar Chemoth Cont Elimination 2013; 2(1):107.

25. Dumont P, Leu JI, Della Pietra AC 3rd, George DL, Murphy M. Die polymorphen Codon-72-Varianten von p53 haben deutlich unterschiedliche apoptotische Potenziale. Nat Genet 2003; 33:357–65. 26. Felley-Bosco E, Weston A, Cawley HM, Bennett WP, Harris CC. Funktionelle Studien eines Keimbahnpolymorphismus am Codon 47 im p53-Gen. Am J Hum Genet 1993; 53:752–9.

27. Li X, Dumont P, Della Pietra A, Shetler C, Murphy ME. Der Codon-47-Polymorphismus in p53 ist funktionell bedeutsam. J Biol Chem 2005; 280:24245–51.

28. Barnoud T, Parris JLD, Murphy ME. Häufige genetische Varianten im TP53-Signalweg und ihre Auswirkungen auf Krebs. J Mol Cell Biol 2019; 11:578–85.

29. Jennis M, Kung CP, Basu S, et al. Ein afrikaspezifischer Polymorphismus im TP53-Gen beeinträchtigt die p53-Tumorsuppressorfunktion in einem Mausmodell. Genes Dev 2016; 30: 918–30.

30. Singh KS, Leu JI, Barnoud T, et al. Die auf Afrika konzentrierte TP53-Variante erhöht die Eisenansammlung und die bakterielle Pathogenese, verbessert jedoch die Reaktion auf Malariatoxin. Nat Commun 2020; 11:473.

31. Gai PP, Meese S, Bedu-Addo G, Gahutu JB, Mockenhaupt FP. Kein Zusammenhang des p53-Codon-72-Polymorphismus mit Malaria bei ghanaischen Erstgebärenden und ruandischen Kindern. Am J Trop Med Hyg 2014; 90:1133–4.

32. Tran TM, Li S, Doumbo S, et al. Eine intensive Kohortenlängsstudie an malischen Kindern und Erwachsenen ergab keine Hinweise auf eine erworbene Immunität gegen eine Infektion mit Plasmodium falciparum. Clin Infect Dis 2013; 57:40–7.

33. LaVerriere E, Schwabl P, Carrasquilla M, et al. Design und Implementierung von Multiplex-Amplikon-Sequenzierungspanels zur Unterstützung der genomischen Epidemiologie von Infektionskrankheiten: eine Malaria-Fallstudie. Mol Ecol Resour 2022; 22: 2285–303.

34. Kawaguchi H., Ohno S., Araki K. et al. p53 Polymorphismus bei humanem Papillomavirus-assoziiertem Speiseröhrenkrebs. Cancer Res 2000; 60:2753–5.

35. Kun JF, Mordmüller B, Perkins DJ, et al. Stickoxidsynthase 2Lambaréné (G-954C), erhöhte Stickoxidproduktion und Schutz vor Malaria. J Infect Dis 2001; 184:330–6.

36. Flori L, Delahaye NF, Iraqi FA, Hernandez-Valladares M, Fumoux F, Rihet P. TNF als Malaria-Kandidatengen: Polymorphismus-Screening und familienbasierte Assoziationsanalyse von leichtem Malariaanfall und Parasitämie in Burkina Faso. Genes Immun 2005; 6:472–80.

37. Fugtagbi G, Otu PS, Abdul-Rahman M, et al. Zusammenhang zwischen TNF-alpha, MBL2, NOS2 und G6PD mit Malaria-Ergebnissen bei Menschen im Süden Ghanas. Genet Res (Camb) 2022; 2022:6686406.

38. Meyer CG, May J, Luty AJ, Lell B, Kremsner PG. TNFalpha-308A ist mit kürzeren Intervallen von Plasmodium falciparum-Reinfektionen verbunden. Tissue Antigens 2002; 59:287–92.

39. Cooks T, Harris CC, Oren M. Ins Kreuzfeuer geraten: p53 bei Entzündung. Karzinogenese 2014; 35:1680–90.

40. Coussens LM, Werb Z. Entzündung und Krebs. Natur 2002; 420:860–7.

41. Madenspacher JH, Azzam KM, Gowdy KM, et al. p53 integriert die Wirtsabwehr und das Zellschicksal während einer bakteriellen Lungenentzündung. J Exp Med 2013; 210:891–904.

42. Menendez D, Shatz M, Azzam K, Garantziotis S, Fessler MB, Resnick MA. Die Toll-like-Rezeptor-Genfamilie ist in menschliche DNA-Schäden und p53-Netzwerke integriert. PLoS Genet 2011; 7:e1001360.

43. Frank AK, Leu JI, Zhou Y, et al. Der Codon-72-Polymorphismus von p53 reguliert die Interaktion mit NF-κB und die Transaktivierung von Genen, die an Immunität und Entzündung beteiligt sind. Mol Cell Biol 2011; 31:1201–13.

44. Kung CP, Leu JI, Basu S, et al. Der P72R-Polymorphismus von p53 prädisponiert für Fettleibigkeit und Stoffwechselstörungen. Zellvertreter 2016; 14:2413–25.

45. Gunaratna RT, Santos A, Luo L, et al. Die dynamische Rolle des Codon 72 p53-Einzelnukleotid-Polymorphismus bei der Brusttumorentstehung in einem humanisierten Mausmodell. Oncogene 2019; 38:3535–50.

46. ​​Kim BY, Lee SY, Chung SK. Differenzielle Transkriptionsregulation des polymorphen p53-Codons 72 in Stoffwechselwegen. Int J Mol Sci 2021; 22:10793.

47. Murphy ME, Liu S, Yao S, et al. Ein funktionell signifikanter SNP bei TP53 und Brustkrebsrisiko bei afroamerikanischen Frauen. NPJ Brustkrebs 2017; 3:5.

48. Portugal S, Tran TM, Ongoiba A, et al. Die Behandlung einer chronischen asymptomatischen Plasmodium falciparum-Infektion erhöht nicht das Risiko einer klinischen Malaria bei einer erneuten Infektion. Clin Infect Dis 2017; 64:645–53.

49. Li T, Kon N, Jiang L, et al. Tumorsuppression ohne p53-vermittelten Zellzyklusstillstand, Apoptose und Seneszenz. Zelle 2012; 149:1269–83.

50. Grochola LF, Zeron-Medina J, Meriaux S, Bond GL. Einzelnukleotidpolymorphismen im p53-Signalweg. Cold Spring Harb Perspect Biol 2010; 2:a001032.