Wirkung von Acteosid als Zellschutz zur Herstellung eines geklonten Hundes

Ji Hye Lee1☯, Ju Lan Chun1☯, Keun Jung Kim1, Eun Young Kim1, Dong-hee Kim1, Bo Myeong Lee1, Kil Woo Han1, Kang-Sun Park1, Kyung-Bon Lee2, Min Kyu Kim1*

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ActeosidinZistanchehat vieleAuswirkungen

Tabelle 5. Mikrosatellitenanalyse des geklonten Hundes.

Tabelle 6. mtDNA-Sequenzen des geklonten Hundes.

werden durch die Verwendung von Spenderzellen im G{{0}}/G1-Stadium im Vergleich zur Verwendung von Spenderzellen im G2/M-Stadium verbessert [24–28], obwohl von Spenderzellen berichtet wurde im G2/M-Stadium des Zellzyklus arretiert, kann lebensfähige geklonte Ferkel produzieren [44]. Das Zellzyklusstadium der Kernspenderzellen spielt eine entscheidende Rolle bei den Umprogrammierungsereignissen, die auf SCNT folgen. Im G0/G1-Stadium angehaltene Kernspenderzellen initiieren effizient die erste DNA-Synthese nach SCNT [28, 29, 45]. Um eine Zellzyklussynchronisation zu induzieren, wurden verschiedene chemische Inhibitoren, einschließlich Acteosid, verwendet, um eine Zellzyklussynchronisation zu erreichen [46, 47]. Als CDK-Inhibitor wird Acteosid häufig verwendet, um eine Zellzyklus-Synchronisation im G0/G1-Stadium herbeizuführen. Leeet al. berichteten, dass Acteosid das Fortschreiten des Zellzyklus über die G1-Phase hinaus behinderte und somit die Proliferation von Leukämiezellen verhinderte. Darüber hinaus war der CDK-Spiegel reduziert, aber der CDK-Inhibitorspiegel war signifikant erhöht [38].

CistancheDeserticolaActeosidkann die Immunität verbessern und reduzierenApoptose

Die vorliegende Studie verglich die Wirkungen von Acteosid mit den beiden anderen gängigen Zellsynchronisationsmethoden, um die Wirkung der Zellsynchronisation auf die Effizienz von SCNT zu untersuchen. Fötale Fibroblasten von Hunden wurden mit verschiedenen Konzentrationen von Acteosid, Serummangel und Kontakthemmung behandelt; der Prozentsatz der Zellen im G{{0}}/G1-Stadium in den drei Behandlungsgruppen wurde verglichen. Serummangel erwies sich als die effektivste Methode zur Zellzyklussynchronisation im G0/G1-Stadium, und es gab keinen signifikanten Unterschied zwischen Acteosid und Kontakthemmung. Serummangel induzierte jedoch einen signifikant höheren ROS-Spiegel. Frühere Studien berichteten, dass die Zunahme von ROS Zellmembranen schädigt und Apoptose induziert, wodurch die Effizienz der Embryonalentwicklung verringert wird. Darüber hinaus erhöht ROS die DNA-Fragmentierung, die die Zellblockade induziert und die Embryonalentwicklung bei Menschen und Schweinen verzögert [48–51]. Die Behandlung mit Acteosid zeigte keinen Unterschied bei der Synchronisierung des Zellzyklus im G0/G1-Stadium im Vergleich zur Kontakthemmung. Allerdings induzierte Acteosid deutlich weniger ROS-Aktivität im Vergleich zu den beiden anderen Zellzyklus-Synchronisationsmethoden. Darüber hinaus induzierte die Acteosid-Behandlung signifikant weniger Apoptose und Nekrose als Kontakthemmung und Serummangel. Das Ergebnis ist auch deckungsgleich mit früheren Studien, die das Auftreten von mehr apoptotischen Ereignissen nach Zellzyklussynchronisation mit Serummangel als mit Kontakthemmung zeigten [32, 52]. Gleichzeitig mit der Verringerung der Apoptoserate zeigte die Acteosid-Behandlungsgruppe auch ein höheres Zellüberleben als die Kontakthemmungsgruppe. Serummangel führte zu massivem Zelltod im Vergleich sowohl zur Behandlung mit Acteoside als auch zur Kontakthemmung.

Die Synchronisierung des Kernspender-Zellzyklus im G{{0}}/G1-Stadium ist ein entscheidender Schritt für einen erfolgreichen SCNT-Embryo und letztendlich für die Produktion geklonter Tiere. ROS gilt als eine der Hauptursachen für Zelltod und Apoptose während der Embryonalentwicklung. In dieser Studie wurde Acteosid untersucht, um festzustellen, ob es ein nützliches alternatives Verfahren zur Induktion der Zellzyklussynchronisation im G0/G1-Stadium in fötalen Fibroblasten von Hunden als Kernspenderzellen wäre. Die Induktion der Zellzyklus-Synchronisation durch Acteosid-Behandlung von Kernspenderzellen reduzierte ROS und Apoptose, was zur Verbesserung der In-vitro-Entwicklung von SCNT-Embryonen beitrug. Embryonen, die mit Acteosid-behandelten Spenderzellen geklont wurden, wurden in Leihmutterhündinnen übertragen, und es wurde erfolgreich ein gesunder geklonter Hund produziert, was bei Embryonen aus der Kontakthemmungsgruppe nicht der Fall war.

Zusammenfassend zeigte diese Studie, dass Acteosid, ein CDK-Inhibitor, eine erfolgreiche Zellzyklussynchronisation der Hundefibroblasten im G0/G1-Stadium zur Verwendung als nukleare Spenderzellen induziert und sie auch durch Reduktion vor Apoptose schützt oxidativen Stress. Die zytoprotektive Wirkung von Acteosid, kombiniert mit der Fähigkeit zur Zellzyklussynchronisation, trug zur Verbesserung der In-vitro-Entwicklungskompetenz von SCNT-Embryonen bei. Daher wäre Acteosid ein wirksames Reagenz zur Steigerung der Klonierungseffizienz zur Herstellung geklonter Tiere.

Acteosid in Cistanchebehandeln kannNiereKrankheit verbessernNieren-Funktion

Danksagungen

Der Autor dankt Dr. John Hammond von USDA-ARS für seine wissenschaftlichen Vorschläge und seine schriftliche Unterstützung für das Manuskript.

Autorenbeiträge

Konzipierte und gestaltete die Experimente: JHL JLC MKK. Führte die Experimente durch: JHL KJK EYK DHK BML KWH KSP. Analysiert die Daten: JLC KBL. Beigesteuerte Reagenzien/Materialien/ Analysewerkzeuge: KJK EYK DHK BML KWH KSP. Schrieb das Papier: JHL JLC. Fördermitteleinwerbung und -betreuung: MKK.

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Verweise

1. Umeyama K., Honda K., Matsunami H., Nakano K., Hidaka T., Sekiguchi K., et al. Produktion von diabetischen Nachkommen unter Verwendung von kryokonservierten Nebenhodenspermien durch In-vitro-Fertilisation und intraeileiter Inseminationstechniken bei transgenen Schweinen. Das Journal der Fortpflanzung und Entwicklung. 2013; 59(6):599–603. PMID: 23979397; PubMed Central PMCID: PMC3934148.

2. Y. Shimatsu, K. Yamada, W. Horii, A. Hirakata, Y. Sakamoto, S. Waki ​​et al. Produktion geklonter NIBS (Nippon Institute for Biological Science) und alpha-1, 3--Galactosyltransferase-Knockout-MGH-Miniaturschweine durch somatischen Zellkerntransfer unter Verwendung der NIBS-Rasse als Surrogate. Xenotransplantation. 2013; 20(3):157–64. doi: 10.1111/Xen.12031 PMID: 23581451; PubMed Central PMCID: PMC3815503.

3. E. Kang, G. Wu, H. Ma, Y. Li, R. Tippner-Hedges, M. Tachibana et al. Nukleare Reprogrammierung durch Interphase-Zytoplasma von zweizelligen Mausembryos. Natur. 2014; 509(7498):101–4. doi: 10.1038/ nature13134 PMID: 24670652; PubMed Central PMCID: PMC4124901.

4. Kim EY, Song DH, Park MJ, Park HY, Lee SE, Choi HY, et al. Klonen nach dem Tod von gefährdeten Jeju-Schwarzrindern (koreanisches einheimisches Rind): Fruchtbarkeit und Serumchemie bei einem geklonten Bullen und einer geklonten Kuh und ihren Nachkommen. Das Journal der Fortpflanzung und Entwicklung. 2013; 59(6):536–43. PMID: 23955237; PubMed Central PMCID: PMC3934153.

5. Jang G, Kim MK, Lee BC. Aktueller Stand und Anwendungen des somatischen Zellkerntransfers bei Hunden. Theriogenologie. 2010; 74(8):1311–20. doi: 10.1016/j.theriogenology.2010.05.036 PMID: 20688377.

6. Mastromonaco GF, König WA. Klonen bei Haustieren, nicht einheimischen und gefährdeten Arten: Kann die Technologie zur praktischen Realität werden? Fortpflanzung, Fruchtbarkeit und Entwicklung. 2007; 19 (6): 748–61. PMID: 17714629.

7. Wilmut I, Schnieke AE, McWhir J, Kind AJ, Campbell KH. Lebensfähige Nachkommen aus fötalen und erwachsenen Säugetierzellen. Natur. 1997; 385(6619):810–3. doi: 10.1038/385810a0 PMID: 9039911.

8. T. Wakayama, AC Perry, M. Zuccotti, KR Johnson, R. Yanagimachi. Natur. 1998; 394(6691):369–74. doi: 10.1038/28615 PMID: 9690471.

9. Cibelli JB, Stice SL, Golueke PJ, Kane JJ, Jerry J, Blackwell C, et al. Geklonte transgene Kälber, die aus nicht ruhenden fötalen Fibroblasten hergestellt wurden. Wissenschaft. 1998; 280(5367):1256–8. PMID: 9596577.

10. Polejaeva IA, Chen SH, Vaught TD, Page RL, Mullins J, Ball S, et al. Geklonte Schweine, hergestellt durch Zellkerntransfer aus erwachsenen somatischen Zellen. Natur. 2000; 407(6800):86–90. doi: 10.1038/35024082 PMID: 10993078.

11. Agarwal A, Gupta S, Sharma R. Oxidativer Stress und seine Auswirkungen auf die weibliche Unfruchtbarkeit – die Perspektive eines Klinikers. Reproduktionsbiomedizin online. 2005; 11(5):641–50. PMID: 16409717.

12. Agarwal A, Gupta S, Sharma RK. Rolle von oxidativem Stress bei der weiblichen Fortpflanzung. Reproduktionsbiologie und Endokrinologie: RB&E. 2005; 3:28. doi: 10.1186/1477-7827-3-28 PMID: 16018814; PubMed Central PMCID: PMC1215514.

13. Goud AP, Goud PT, Diamond MP, Gonik B, Abu-Soud HM. Reaktive Sauerstoffspezies und Oozytenalterung: Rolle von Superoxid, Wasserstoffperoxid und hypochloriger Säure. Freie Radikale Biologie & Medizin. 2008; 44(7):1295–304. doi: 10.1016/j.freeradbiomed.2007.11.014 PMID: 18177745; PubMed Central PMCID: PMC3416041.

14. Park SH, Cho HS, Yu IJ. Wirkung von Rinderfollikelflüssigkeit auf reaktive Sauerstoffspezies und Glutathion in Eizellen, Apoptose und Apoptose-assoziierte Genexpression von in vitro produzierten Blastozysten. Fortpflanzung bei Haustieren=Zuchthygiene. 2014; 49(3):370–7. doi: 10.1111/RDA.12281 PMID: 24592966.

15. You J, Lee J, Hyun SH, Lee E. Die Behandlung mit L-Carnitin während der Oozytenreifung verbessert die In-vitro-Entwicklung von geklonten Schweinembryonen durch Beeinflussung der intrazellulären Glutathionsynthese und der embryonalen Genexpression. Theriogenologie. 2012; 78(2):235–43. doi: 10.1016/j.theriogenology.2012.02.027 PMID: 22578613.

16. You J, Kim J, Lim J, Lee E. Anthocyanin stimuliert die In-vitro-Entwicklung von geklonten Schweinembryonen, indem es den intrazellulären Glutathionspiegel erhöht und reaktive Sauerstoffspezies hemmt. Theriogenologie. 2010; 74(5):777–85. doi: 10.1016/j.theriogenology.2010.04.002 PMID: 20537699.

17. Das ZC, Gupta MK, Uhm SJ, Lee HT. Die Ergänzung des Embryokulturmediums mit Insulin-Transferrin-Selen verbessert die In-vitro-Entwicklung von Schweinembryonen. Zygote. 2014; 22(3):411–8. doi: 10. 1017/S0967199412000731 PMID: 23506698.

18. Park ES, Hwang WS, Jang G, Cho JK, Kang SK, Lee BC, et al. Auftreten von Apoptose in geklonten Embryonen und verbesserte Entwicklung durch die Behandlung somatischer Spenderzellen mit mutmaßlichen Apoptose-Inhibitoren. Molekulare Reproduktion und Entwicklung. 2004; 68(1):65–71. doi: 10.1002/Mrd.20046 PMID: 15039949.

19. G. Jang, ES Park, JK Cho, MM Bhuiyan, BC Lee, SK Kang et al. Embryonalentwicklung vor der Implantation und Inzidenz von Blastomerapoptose in somatischen Rinderkerntransferembryonen, die mit langzeitkultivierten Spenderzellen rekonstruiert wurden. Theriogenologie. 2004; 62(3–4):512–21. doi: 10.1016/j. Theriogenology.2003.11.022 PMID: 15226007.

20. Uhm SJ, Gupta MK, Yang JH, Lee SH, Lee HT. Selen verbessert die Entwicklungsfähigkeit und reduziert die Apoptose in porcinen Parthenoten. Molekulare Reproduktion und Entwicklung. 2007; 74 (11): 1386–94. doi: 10.1002/mrd.20701 PMID: 17342738.

21. Jeong YW, Hossein MS, Bhandari DP, Kim YW, Kim JH, Park SW, et al. Wirkungen von Insulin-Transferrin-Selen in definierten und mit porciner Follikelflüssigkeit ergänzten IVM-Medien auf die IVF- und SCNT-Embryoproduktion von Schweinen. Wissenschaft der Tierreproduktion. 2008; 106 (1–2): 13–24. doi: 10.1016/j.anireprosci. 2007.03.021 PMID: 17482776.

22. Kang JT, Koo OJ, Kwon DK, Park HJ, Jang G, Kang SK, et al. Wirkungen von Melatonin auf die In-vitro-Reifung von Schweineizellen und die Expression von Melatoninrezeptor-RNA in Kumulus- und Granulosazellen. Zeitschrift für Zirbeldrüsenforschung. 2009; 46(1):22–8. doi: 10.1111/j.1600-079X.2008.00602.x PMID: 18494781.

23. M. Ozawa, T. Nagai, M. Fahrudin, N. W. Karja, H. Kaneko, J. Noguchi et al. Die Zugabe von Glutathion oder Thioredoxin zum Kulturmedium verringert den intrazellulären Redoxstatus von Schweine-IVM/IVF-Embryonen, was zu einer verbesserten Entwicklung bis zum Blastozystenstadium führt. Molekulare Reproduktion und Entwicklung. 2006; 73 (8): 998–1007. doi: 10.1002/mrd.20533 PMID: 16700069.

24. CampbellKH. Nukleare Äquivalenz, Kerntransfer und der Zellzyklus. Klonen. 1999; 1(1):3–15. doi:10.1089/15204559950020058 PMID: 16218826.

25. Boquest AC, Tag BN, Prather RS. Durchflusszytometrische Zellzyklusanalyse von kultivierten fötalen Fibroblastenzellen vom Schwein. Biologie der Fortpflanzung. 1999; 60(4):1013–9. PMID: 10084979.

26. Kasinathan P, Knott JG, Wang Z, Jerry DJ, Robl JM. Produktion von Kälbern aus G1-Fibroblasten. Naturbiotechnologie. 2001; 19(12):1176–8. doi: 10.1038/nbt1201-1176 PMID: 11731789.

27. Urakawa M, Ideta A, Sawada T, Aoyagi Y. Untersuchung einer modifizierten Zellzyklus-Synchronisationsmethode und Rinderkerntransfer unter Verwendung von synchronisierten frühen G1-Phasen-Fibroblastenzellen. Theriogenologie. 2004; 62(3–4):714–28. doi: 10.1016/j.theriogenology.2003.11.024 PMID: 15226025.

28. K. Miyamoto, Y. Hoshino, N. Minami, M. Yamada, H. Imai. Auswirkungen der Synchronisation des Spenderzellzyklus auf die Embryonalentwicklung und die DNA-Synthese bei Kerntransfer-Embryos vom Schwein. Das Journal der Fortpflanzung und Entwicklung. 2007; 53(2):237–46. PMID: 17132911.

29. Koo OJ, Hossein MS, Hong SG, Martinez-Conejero JA, Lee BC. Zellzyklus-Synchronisation von Hundeohr-Fibroblasten für den somatischen Zellkerntransfer. Zygote. 2009; 17(1):37–43. doi: 10.1017/S096719940800498X PMID: 19032801.

30. Cho JK, Lee BC, Park JI, Lim JM, Shin SJ, Kim KY, et al. Entwicklung von Rinderoozyten, die mit verschiedenen somatischen Spenderzellen mit oder ohne Serummangel rekonstruiert wurden. Theriogenologie. 2002; 57(7):1819–28. PMID: 12041686.

31. Kues WA, Carnwath JW, Paul D, Niemann H. Zellzyklus-Synchronisation von fötalen Schweinefibroblasten durch Serumentzug initiiert eine unkonventionelle Form der Apoptose. Klonen und Stammzellen. 2002; 4 (3): 231–43. doi: 10.1089/15362300260339511 PMID: 12398804.

32. Cho SR, Ock SA, Yoo JG, Mohana Kumar B, Choe SY, Rho GJ. Auswirkungen von konfluenter Roscovitin-Behandlung und Serummangel auf die Zellzyklus-Synchronisation von fötalen Rinderfibroblasten. Fortpflanzung bei Haustieren=Zuchthygiene. 2005; 40(2):171–6. doi: 10.1111/j.1439-0531.2005.00577.x PMID: 15819970.

33. Hashem MA, Bhandari DP, Kang SK, Lee BC, Suk HW. Zellzyklusanalyse von in vitro kultivierten Hautfibroblasten von erwachsenen Goralen (Naemorhedus caudatus). Zellbiologie international. 2006; 30(9):698–703. doi: 10.1016/j.cellbi.2006.04.008 PMID: 16793292.

34. Goissis MD, Caetano HV, Marques MG, de Barros FR, Feitosa WB, Milazzotto MP, et al. Auswirkungen von Serumentzug und Cycloheximid auf den Zellzyklus von fötalen Schweinefibroblasten mit niedriger und hoher Passage. Fortpflanzung bei Haustieren=Zuchthygiene. 2007; 42(6):660–3. doi: 10.1111/j.1439-0531.2006. 00839.x PMID: 17976076.

35. Arruda AL, Vieira CJ, Sousa DG, Oliveira RF, Castilho RO. Jacaranda cuspidifolia Mart. (Bignoniaceae) als antibakterielles Mittel. Zeitschrift für medizinische Lebensmittel. 2011; 14(12):1604–8. doi: 10.1089/jmf. 2010.0251 PMID: 21663482.

36. Avila JG, de Liverant JG, Martinez A, Martinez G, Munoz JL, Arciniegas A, et al. Wirkungsweise von Buddleja cordata verbascosid gegen Staphylococcus aureus. Zeitschrift für Ethnopharmakologie. 1999; 66 (1): 75–8. PMID: 10432210.

37. Pendota SC, Aderogba MA, Ndhlala AR, Van Staden J. Antimikrobielle und Acetylcholinesterase-hemmende Aktivitäten von Buddleja salviifolia (L.) Lam. Blattextrakte und isolierte Verbindungen. Zeitschrift für Ethnopharmakologie. 2013; 148(2):515–20. doi: 10.1016/j.jep.2013.04.047 PMID: 23665162.

38. Wu SC, Chen RJ, Lee KW, Tung CC, Lin WP, Yi P. Angioembolisation als wirksame Alternative zur Hämostase bei hartnäckigen lebensbedrohlichen maxillofazialen Traumablutungen: eine Fallstudie. Das amerikanische Journal für Notfallmedizin. 2007; 25(8):988e1–5. doi: 10.1016/j.ajem.2007.02.039 PMID: 17920998.

39. Lee BC, Kim MK, Jang G, Oh HJ, Yuda F, Kim HJ, et al. Aus erwachsenen somatischen Zellen geklonte Hunde. Natur.2005; 436(7051):641. doi: 10.1038/436641a PMID: 16079832.

40. Hase M, Hori T, Kawakami E, Tsutsui T. Plasma-LH- und Progesteronspiegel vor und nach dem Eisprung und Beobachtung von Ovarialfollikeln durch ein Ultraschall-Diagnosesystem bei Hunden. Das Journal of Veterinary Medical Science / die Japanische Gesellschaft für Veterinärmedizin. 2000; 62(3):243–8. PMID: 10770594.

41. Choi YH, Lee BC, Lim JM, Kang SK, Hwang WS. Optimierung des Kulturmediums für geklonte Rinderembryonen und dessen Einfluss auf Trächtigkeit und Geburtsergebnis. Theriogenologie. 2002; 58(6):1187–97. PMID: 12240921.

42. Kim KS, Jeong HW, Park CK, Ha JH. Eignung von AFLP-Markern für die Untersuchung genetischer Beziehungen zwischen koreanischen einheimischen Hunden. Gene & genetische Systeme. 2001; 76(4):243–50. PMID: 11732633.

43. Oback B, Wells D. Spenderzellen für das Kernklonen: Viele werden berufen, aber wenige werden ausgewählt. Klonen und Stammzellen. 2002; 4(2):147–68. doi: 10.1089/153623002320253328 PMID: 12171706.

44. Lai L, Park KW, Cheong HT, Kuhholzer B, Samuel M, Bonk A, et al. Transgenes Schwein, das das verstärkte grün fluoreszierende Protein exprimiert, das durch Kerntransfer unter Verwendung von Colchicin-behandelten Fibroblasten als Spenderzellen produziert wird. Molekulare Reproduktion und Entwicklung. 2002; 62(3):300–6. doi: 10.1002/mrd.10146 PMID: 12112592.

45. Shufaro Y, Reubinoff BE. Zellzyklus-Synchronisation zum Zweck des somatischen Zellkerntransfers (SCNT). Methoden der Molekularbiologie. 2011; 761:239–47. doi: 10.1007/978-1-61779-182-6_16 PMID: 21755453.

46. ​​Zhang F, Jia Z, Deng Z, Wei Y, Zheng R, Yu L. In-vitro-Modulation der Telomeraseaktivität, Telomerlänge und des Zellzyklus in MKN45-Zellen durch Verbascosid. Planta Medica. 2002; 68(2):115–8. doi: 10.1055/ s-2002-20255 PMID: 11859459.

47. Lee KW, Kim HJ, Lee YS, Park HJ, Choi JW, Ha J, et al. Acteosid hemmt die Proliferation menschlicher Promyelozyten-HL-60-Leukämiezellen, indem es den Zellzyklusarrest in der G0/G1-Phase und die Differenzierung zu Monozyten induziert. Karzinogenese. 2007; 28(9):1928–36. doi: 10.1093/Marcin/bgm126 PMID: 17634406.

48. Kitagawa Y, Suzuki K, Yoneda A, Watanabe T. Auswirkungen der Sauerstoffkonzentration und Antioxidantien auf die In-vitro-Entwicklungsfähigkeit, die Produktion reaktiver Sauerstoffspezies (ROS) und die DNA-Fragmentierung in Schweineembryos. Theriogenologie. 2004; 62(7):1186–97. doi: 10.1016/j.theriogenology.2004.01.011 PMID: 15325546.

49. A. Yoneda, K. Suzuki, T. Mori, J. Ueda, T. Watanabe. Auswirkungen von Delipidation und Sauerstoffkonzentration auf die In-vitro-Entwicklung von Schweinembryos. Das Journal der Fortpflanzung und Entwicklung. 2004; 50 (3): 287–95. PMID: 15226593.

50. Guerin P, El Mouatassim S, Menezo Y. Oxidativer Stress und Schutz vor reaktiven Sauerstoffspezies im Präimplantationsembryo und seiner Umgebung. Update zur menschlichen Reproduktion. 2001; 7(2):175–89. PMID: 11284661.

51. Yang HW, Hwang KJ, Kwon HC, Kim HS, Choi KW, Oh KS. Nachweis von reaktiven Sauerstoffspezies (ROS) und Apoptose in menschlichen fragmentierten Embryonen. Menschliche Fortpflanzung. 1998; 13(4):998–1002. PMID: 9619561.

52. Khammanit R, Chantakru S, Kitiyanant Y, Saikhun J. Wirkung von Serummangel und chemischen Inhibitoren auf die Zellzyklussynchronisation von dermalen Fibroblasten des Hundes. Theriogenologie. 2008; 70(1):27–34. doi: 10. 1016/j.theriogenology.2008.02.015 PMID: 18423836.