Untersuchung der mikrobiellen Enzyme, die während der kombinierten bakteriellen Fermentation und ihrer biologischen Aktivitäten produziert werden ⅱ

ABSTRAKT

In dieser Arbeit wurden Aspergillus oryzae, Hefe, Streptococcus thermophilus und Lactobacillusbulgaricus als anfängliche Startstämme verwendet, um die Wirkung der gemischten Fermentation des Apfelenzyms auf die sensorische Bewertung zu untersuchen. Äpfel, Birnen und Zitrusfrüchte wurden als Rohstoffe unter optimalen Bedingungen verwendet, um das entsprechende Enzymeinthesupernatante Enzym für die Untersuchung der antioxidativen Aktivität von Apfelenzymen zu erhalten, Enzymaktivität zum Hinzufügen von Spezies (experimentelle Gruppe) und nicht hinzufügen Bakterien (Kontrollgruppe). Eingehende Untersuchung der antioxidativen Aktivität während der Fermentations- und Enzymaktivitätsänderungen des Enzyms, der experimentellen Gruppe und der Kontrollunterschiede zwischen den Gruppen. Die Hauptergebnisse sind wie folgt: 1． Die optimale Kombination von Stämmen des Bakterienverhältnisses und der sensorischen Bewertung unter Verwendung des sensorischen Bewertungsbewertungsniveaus als Indikator wählt das höchste Verhältnis der sensorischen Bewertungswerte. Erstens, in den Einzelspezies-Experimenten fand die nach der Inokulation reiner Stämme asspergillus oryzae, Hefe, Streptokokkustermophilus und Lactobacillus bulgaricus auf der sensorischen Bewertung des Enzyms eine gute Rolle. Gefolgt von einem Einzel-Faktor-Test, um die Menge einer Spezies zu ändern, in der die Inokulation die Beziehung der vier Arten verschiedener Inokulumstämme zwischen den Sensory-Evaluierungen verändert. Schließlich beträgt das optimale Verhältnis des Stammes aus dem orthogonalen Experiment -Test so, dass das Inokulum von Aspergillus oryzae 1,5%beträgt. Das Inokulum von Hefe beträgt 1. 1. 0%. Die höchste Punktzahl der sensorischen Bewertung des Enzyms beträgt bis zu 92,3.

 

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2． Enzyme der Apfel -Antioxidationsaktivität

Der Gesamtphenolgehalt von Enzymen in derVersuchsgruppe Reduzierung der Leistung, DPPH Radical Scavenging -Fähigkeit,Hydroxylradikalfänger, ABTS Radical Scavenging -KapazitätUndSuperoxid radikales SprengenMit Konzentration erhöht sich die experimentelle Gruppe von Superenzym -Apfel -Sauerstoffanionen radikal, dpph · radikal, ABTS radikaler Spulenkapazität als die Kontrollgruppe; eine Gruppe von Enzymen, besonders gute Hydroxylradikalfürst -Fähigkeit; Insgesamt ist die Fähigkeit der experimentellen Gruppe höher als die kontrollige Fähigkeit zur radikalen Sparklage für freie Radikale. 3． Apfelenzyme, Enzymvariation von Birnen- und Zitrusenzym -Fermentationsprozessantioxidationsaktivität mit der Ausdehnung der Fermentationszeit, die sich ändernden Trends der experimentellen und Kontrollgruppen sowohl die Zusammensetzung jeder Antioxidationsaktivität sind unterschiedlich als auch Änderungen des Komplexes, abhängig davon, ob der zugesetzte Stamm und die Fermentations -Vorbehalt selbst selbst. Apple fügt beispielsweise die Bakterien hinzu und addiert keinen Stamm im Vergleich zu den ersten 60 -Days -Fermentierungen, der Gesamtphenolgehalt stieg um 15. 00%und verbesserte die Leistungsintensität um 1,8%, um 1,8%igen, die Radikal -Scavenging -Kapazität von 36,55%, Hydroxyl -Radikal -Radikal -Radikal -Scaving -Kapazität von 4,27%, die DPPH · Radikal -Scaving -Kapazität von 4,27%ige. 59%stieg die radikale ABTS -Sparkapazität um 3,10%. 4． Das Transformationsgesetz der Variation von Apfel -Enzym -Variation der Enzymaktivität während der Fermentation durch die relevante Enzymaktivität in der experimentellen Gruppe und die Kontrollgruppe, die mit der Erweiterung der Fermentationszeit nachgewiesen wurde, zeigt die Enzymaktivität nicht, sondern nimmt zu, sondern nimmt zu und nimmt zu. Fügen Sie Bakterien hinzu und nicht zugesetzt Stamm im Vergleich zu den ersten 90 Tagen der Fermentation, die SOD -Aktivität nahm um 22,39%ab, die Amylaseaktivität stieg um 50%, die Lipaseaktivität nahm um 69,49%ab, 85,71%Proteasaktivität verbesserte sich um 54,19%. 5． Apfelenzym Fermentationsprozess Gesamtsäure, Gesamtzucker und Alkohol, verändert Enzyme innerhalb von 15 Tagen nach Beginn der Fermentation. Es ist Zeit für mikrobielles Wachstum und Reproduktion des schnellsten, aber auch der Gesamtsäure, des Gesamtzuckers und des Alkoholgehalts, pH, wenn die größte Veränderung. Mit der Ausdehnung der Fermentationszeit nahm der Gesamtsäurehalt von Enzymen innerhalb der Präsentation nach dem ersten zu und nahm dann ab. Fermentation 15, Gesamtsäurehalt schneller Akkumulation, der Gesamtzuckergehalt wurde signifikant reduziert, was viel Alkohol erzeugt und der pH -Wert stark zurückging. 15 Tage in die langsame Fermentationsphase. Im Vergleich zum zusätzlichen Bakterienstamm und ohne zugesetzte Fermentationstage war der Gesamtsäurehalt über 24,14%betrug, der Gesamtzuckergehalt um 12,5%, der Alkoholgehalt nahm um 16,67%zu und der pH -Wert um 5%.

 

Schlüsselwörter: Aspergillus oryzae; Hefe ; Streptococcus thermophilus; Lactobacillusbulgaricus; Enzyme; biologische Aktivität

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Kapitel 1 Einführung

Enzyme sind in den letzten Jahren zu einem beliebten Gesundheitsfutter geworden. Egal, ob es sich um TV -Werbespots oder Online -Marketing handelt, sie sind überall zu sehen. Sie sind die "Enzyme", mit denen die Menschen sehr vertraut sind. Auf diese Weise scheinen "Enzyme" nicht so mysteriös zu sein. Fast alle Organe, Gewebe und Zellen im menschlichen Körper stützen sich auf die katalytische Reaktion und die Energieversorgung von Enzymen, um ihre Macht und Gesundheit aufrechtzuerhalten. Enzyme können den Stoffwechsel des Körpers fördern und uns körperlich und geistig glücklich und energisch machen. Sie können die Durchblutung fördern, Toxine im Körper beseitigen und unser Blutsystem reinigen. Sie können unsere Magen -Darm -Verdauung und -absorption stärken und unsere körperliche Fitness stärken. Sie können das Säurebasis-Gleichgewicht in unserem Körper regulieren und der Leber helfen, entgiftet zu werden. Sie können auch die Reparatur beschädigter Zellen fördern und Zellen aktivieren [1].
Im frühen 20. Jahrhundert wurden Enzyme in Japan populär und wurden anschließend in Taiwan, Singapur, Malaysia, Südkorea, und die Vereinigten Staaten eingeführt. Wohin sie auch gingen, sie lösten Wellen des Enzymfiebers aus und erhielten äußerst enthusiastische Antworten. Im Laufe der Zeit achten Menschen mehr auf die Gesundheit, die enzymbezogenen Industrien haben sich schnell entwickelt, und Enzym-Lebensmittel haben auch immer mehr Aufmerksamkeit auf sich gezogen. Während des Fermentationsprozesses verbraucht Lebensmittel kontinuierlich Kohlenhydrate, wodurch der Fettgehalt reduziert wird. Daher investieren Menschen lange Zeit und hohe wirtschaftliche Kosten, um Lebensmittel vor dem Essen zu fermentieren, nicht nur den Geschmack, sondern auch für Ernährungsüberlegungen.

 

1.1 Überblick über mikrobielle Enzyme

Mikrobielle Enzyme beziehen sich auf funktionelle fermentierte Lebensmittel, die reich an Vitaminen und Mineralien sind, die durch Fermentieren eines oder mehrere Früchte, Gemüse usw. mit einer Vielzahl von Mikroorganismen hergestellt werden. Während des gesamten Fermentationsprozesses des Enzyms führen Mikroorganismen dazu, dass die Rohstoffe durch ihren Stoffwechsel verschiedene Veränderungen unterzogen werden und neue bioaktive Substanzen und Enzyme erzeugen, ohne die ursprünglichen Nährstoffe zu beeinflussen. Diese neuen aktiven Substanzen umfassen Phenolsubstanzen, organische Säuren, Zucker und andere funktionelle Nährstoffe, die bestimmte Beiträge zur menschlichen Gesundheit geleistet haben. Phenols Substanzen umfassen hauptsächlich Anthocyane, Flavonoide, Tannine, Lignin, Catechine, Styrol, Coumarine, Flavonole, Tannine, Phenolsäuren usw.; Organische Säuren umfassen hauptsächlich Malinsäure, Succinsäure, Pyruvsäure, Gallsäure usw. [2]. In gewissem Sinne ist das Hinzufügen von mikrobiellen Stämmen zu Enzymen wie das Platzieren einer Mikroverarbeitungsmaschine nach der anderen in den menschlichen Körper. Es kann jede Zelle in der Nahrung ordnungsgemäß verarbeiten, einige nicht nahrhafte Substanzen entfernen, den menschlichen Körper schaden und dann einige nahrhafte Substanzen hinzufügen, um die Wirkung der Gesundheitsversorgung zu erreichen. Mikrobielle Enzyme behalten nicht nur ihre ursprünglichen Funktionen in Bezug auf funktionelle Eigenschaften bei, sondern ihr einzigartiger fermentierter Geschmack kann auch den Bedürfnissen der Menschen in Bezug auf Geschmack und Textur entsprechen.

 

1.2 Fermentationsmechanismus von mikrobiellen Enzymen

Viele Lebensmittel können zur Fermentation verwendet werden. Zum Beispiel können fermentierende Fleisch- und Milchnahrungsmittel dazu beitragen, das ursprüngliche Protein zu zersetzen und es dem menschlichen Körper zu erleichtern, zu verdauen und zu absorbieren. Die Fermentation der Haut, der Früchte und der Samen von Pflanzen kann das Enzym mit der reichsten biologischen Aktivität erhalten, und seine Wurzeln und Stängel sind nach der Fermentation reich an Mineralien. Nach einer langen Fermentationsperiode erhöhen die Probiotika die Zersetzung und Verdauungsrate von Rohstoffnährstoffen, wodurch große molekulare Proteine ​​zu einer Vielzahl von wesentlichen Aminosäuren stärker zersetzt werden können, so dass Nährstoffe, die nicht leicht aufzunehmen, erhalten werden können. Die in mikrobiellen Enzymen enthaltenen Mikroorganismen umfassen hauptsächlich Milchsäurebakterien, Hefe, Aspergillus usw. [3-4]. Während des Fermentationsprozesses sezernieren diese Mikroorganismen Enzyme, die Zellwände zersetzen können, wodurch die Nährstoffrate von Nährstoffen verbessert wird. Darüber hinaus können sie auch einige Vitamine synthetisieren, die nur von Mikroorganismen "produziert" werden können und nicht von Tieren und Pflanzen selbst wie Vitamin B12 synthetisiert werden können. Während des Fermentationsprozesses produzieren Mikroorganismen viele Metaboliten durch ihren eigenen Stoffwechsel, die für die Regulierung der biologischen Funktionen des Körpers und der Hemmung der Ansammlung schädlicher Substanzen von Vorteil sind.
Sievers M, Reiss, et al. untersuchte den Hauptmechanismus des Fermentationsprozesses des Kombucha -Enzyms. Die Ergebnisse zeigten, dass im Fermentationsprozess mit Saccharose als Kohlenstoffquelle die ursprünglichen Daten des pH -Werts der Fermentationsflüssigkeit 3,75 betrug, was auf 2,42 fiel. Die produzierten Metaboliten umfassten Fructose, Essigsäure, Ethanol, Gluconsäure usw.; Gleichzeitig zeigten die Ergebnisse eine gute für beide Seiten vorteilhafte symbiotische Beziehung zwischen Hefe- und Essigsäure -Bakterien, die hauptsächlich in Hefekonvertiert in Glukose und Fructose durch Fermentation reflektiert werden und dann Fructose -Ethanol durch Fermententätigkeit durch Fermentation durch Fermentation umwandeln. Sheng-Chechu et al. untersuchte die antioxidative Aktivität des Kombuchas -Enzyms während der Fermentation. Die Ergebnisse zeigten, dass nach 15 Tagen Fermentation die Hemmrate der Linolensäureperoxidation auf 49%stieg, die Hydroxylradikalfängerrate auf 40%stieg und die Radikalfängerrate der DPPH -Radikale auf 70%stieg. Der Grund für diese Verbesserungen war die Zersetzung von Mikroorganismen während des Fermentationsprozesses [7]. Mi. Ae. Choi et al. untersuchten die Unterschiede im Fermentationsprozess des Kombucha -Enzyms unter unterschiedlichen Temperatur- und Kohlenstoffquellenbedingungen. Die Ergebnisse zeigten, dass die Arten von organischen Säuren, die durch die Verwendung von vier verschiedenen Kohlenstoffquellen hergestellt wurden, nämlich Glukose, Fructose, Saccharose und Maissirup, ähnlich waren, ihre Inhalte jedoch unterschiedlich waren. Die optimale Temperatur für die Fermentationssäureproduktion betrug 30 Grad, und die Stoffwechselraten lagen von hoch bis niedrig: Fructose, Glukose und Saccharose, darunter die Stoffwechselrate von Fructose viel schneller als die von Glucose [8].

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1.3 Einführung in experimentelle Stämme

Es gibt viele Arten von Mikroorganismen in natürlich fermentierten mikrobiellen Enzymen, und der Gehalt variiert. Die wichtigsten sind Milchsäurebakterien, Hefe, Aspergillus usw. Der Schlüssel zu dieser Studie besteht darin, 4 vorteilhafte Fermentationsstämme auszuwählen und einen bestimmten Anteil der Stämme auf der Grundlage der ursprünglichen Enzymproduktion künstlich zu inokulieren, um die Veränderungen des Fermentationsprozesses zu untersuchen. Diese 4 Stämme umfassen Aspergillus oryzae, Hefe, Streptococcus thermophilus und lactobacillus bulgaricus. Umfassende Literaturdaten zeigen, dass während des Fermentationsprozesses von Enzymen die Stämme komplex und vielfältig sind und in der Mitte viele neue Stämme erzeugt werden können. Trotz der Komplexität und Vielfalt der Stämme haben sie im Allgemeinen eine feste Zusammensetzung. Dies schließt die 4 in diesem Experiment ausgewählten Stämme ein. Im gesamten Fermentationsprozess spielen diese 4 Stämme unterschiedliche Rollen, sind jedoch keine unabhängigen Personen, sondern ergänzen sich gegenseitig. Daher ist die Kontrolle des Dehnungsverhältnisses von entscheidender Bedeutung und bestimmt die Qualität des Enzyms.

 

1.3.1 Aspergillus oryzae

Aspergillus oryzae ist ein Pilz, der zum Subphylum Ascomycota und zur Gattung Aspergillus mit guten Gaseigenschaften gehört. Seine Hyphen sind im Allgemeinen gelbgrün oder gelbbraun. Unter einem Mikroskop sind seine konidialen Köpfe radial, flaschenförmiger oder apikaler kugelförmig. Die Conidiophore wachsen auf dickwandigen Fußzellen, und die Stiele sind im Allgemeinen einschichtige. Die Konidien sind glatt und einige haben Dornen.
Aspergillus oryzae ist eine mikrobielle Spezies, die eine große Menge an Enzymen produziert. Es kann neben Proteasen andere Enzyme produzieren, wie Amylase, Cellulase und saccharifizierende Enzyme [9]. Unter der Wirkung von Proteasen zersetzt Aspergillus oryzae unverdauliche große molekulare Proteine ​​in Aminosäuren und Polypeptide; Unter der Wirkung von Amylasen verschlechtert es die geradkettige und verzweigte Stärke in niedrigen molekularen Zucker wie Maltose und Glukose. Aspergillus oryzae hat einen hohen Nährwert, kann die Verdauung und die Absorption fördern und einen bestimmten Gesundheitsversorgungseffekt auf den menschlichen Körper haben. Daher wird es in Lebensmitteln, Brauen und anderen Branchen häufig eingesetzt [10].

 

1.3.2 Hefe

In traditionellen fermentierten Milchprodukten in Asien, Osteuropa, Afrika usw. wie Kefir, Koumiss, Airag, Amasi und Käse spielt Hefe eine sehr wichtige Rolle. Es kann das gewünschte Aroma und das gewünschte Aroma in das Produkt bringen [11]. In den letzten Jahren haben die Menschen kontinuierlich entdeckt, dass wenn Hefe als Hilfsmittel eingesetzt wird, sie sich positiv auf den Geschmack von Milchprodukten auswirkt und das Wachstum schädlicher Bakterien wirksam hemmen kann und potenzielle vorteilhafte Funktionen für den menschlichen Körper hat [12-14]. Das von Hefe während des Fermentationsprozesses produzierte Kohlendioxid kann die Aktivität von Milchsäurebakterien fördern und auch den Wachstumszyklus schädlicher Mikroorganismen verlängern [15]. Hervorragende Hefe reproduziert zu Beginn der Fermentation in großen Mengen und verhindert die Invasion säurerzeuter Mikroorganismen, wodurch die langsame Periode des Fermentationsprozesses stark verkürzt. Seine Fähigkeit, durch Fermentation Alkohol zu produzieren, ist stark und kann die Alkoholkonzentration in kurzer Zeit ein hohes Niveau erreichen, was nicht nur die Reproduktion verschiedener Bakterien hemmt, sondern auch mehr und bessere Aromasubstanzen erzeugt [16]. In ähnlicher Weise kann das Hinzufügen einer angemessenen Menge Hefe zum Enzym nicht nur den Geschmack des Enzyms verbessern, sondern das Enzym auch stärker gegen hohe Temperatur, hoher Alkoholgehalt und hoher osmotischer Druck während des Fermentationsprozesses resistenter machen und dem Einfluss unerwünschter Umgebungen besser widerstehen.

 

1.3.3 Streptococcus thermophilus

Streptococcus thermophilus gehört zur Gattung Streptococcus. Die optimale Wachstumstemperatur beträgt 38 Grad -43 Grad und der optimale pH -Wert beträgt 6. 0-7. 0. Es ist ein fakultativer anaerobe Mikroorganismus. Es ist ein grampositives Bakterium. Es kann unter einem Mikroskop beobachtet werden, dass es keine Flagellen und keine Sporen hat. In der häuslichen und fremden Forschung zu Streptococcus thermophilus konzentrierte sich schon lange hauptsächlich auf seine Rolle bei der Förderung der menschlichen Gesundheit und ihrer biologischen Merkmale. Forschungsergebnisse zeigen, dass Streptococcus thermophilus einer der wichtigsten Mikroorganismen im Darm von Menschen und Tieren ist. Sein Vorhandensein kann das Gleichgewicht der Mikroorganismen im Darm anpassen und verbessern und die Gesundheit von Wirtszellen fördern. Es ist eines der häufigsten Bakterien in der Molkereifermentationsproduktion.
Akalin et al. glaubte, dass Streptococcus thermophilus den Gehalt an Lipoprotein- und Serum-Gesamtcholesterinspiegel signifikant verringern kann [17]. Darüber hinaus hat Streptococcus thermophilus einen guten Anti-Tumor-Effekt, kann die Laktose-Intoleranz lindern und wichtige physiologische Funktionen für Wirtszellen haben.

 

1.3.4 Lactobacillus bulgaricus

Lactobacillus bulgaricus ist ein Bakterium, das von bulgarischer Mikrobiologen Stamen Grigorov in 19 0 5 identifiziert und nach dem Land benannt wurde. Unter einem Mikroskop kann beobachtet werden, dass seine individuelle Morphologie dünn stabförmig ist, 0. 1-0. 8 μm breit und {{5} μm lang, was eine einzelne Stange oder Kette darstellt. Es ist eine Art fakultativer anaerobe Mikroorganismus. Die am besten geeignete Wachstumstemperatur ist 43-44 Grad, die Mindestwachstumstemperatur beträgt 22 Grad und die maximale Wachstumstemperatur beträgt 52,5 Grad [18]. Die auf Milch kultivierten Kolonien sind hellweiß oder farblos und scheinen im Allgemeinen raues Baumwollähnlicher zu sein [19]. Als Mitglied von Probiotika hat Lactobacillus bulgaricus einen sehr wichtigen Einfluss des Gesundheitswesens auf den menschlichen Körper. Es manifestiert sich hauptsächlich in: Förderung des Wachstums und der Besiedlung wirksamer Bakterien, der Entfernen des Darms, der Widerstand gegen Durchfall und der Aufrechterhaltung der gastrointestinalen Gesundheit [20-22]; Förderung von Verdauung und Absorption [23], Verbesserung der Immunität [24], Anti-Krebs, Anti-Tumor [25-26] und andere wichtige physiologische Funktionen. Die Aufnahme von Probiotika kann eine große biologische Barriere an der Darmschleimhaut bilden, die verwendet werden kann, um der Invasion pathogener Bakterien wie Escherichia coli zu widerstehen und antibakterielle Substanzen zu produzieren. Antibakterielle Substanzen können dem Wachstum von Selbstkorruptionsbakterien und exogenen pathogenen Bakterien im Darm widerstehen. Während die Verbesserung der spezifischen und unspezifischen Immunantwort des Körpers auch die Reproduktion schädlicher Bakterien im Darm verhindert, die Ansammlung schädlicher Substanzen erheblich reduziert und die Schädigung schädlicher Substanzen zu wichtigen Organen wie der Leber verringert, wodurch das Aling des Menschen verlangsamt und eine bestimmte Rolle gegen die Anti-Krebs-Rolle spielt. Darüber hinaus haben sie einen weiteren bekannten und weit verbreiteten Vorteil, der die Darmperistaltik fördern, die Fäkalienfeuchtigkeit erhöhen und einen gewissen osmotischen Druck aufrechterhalten und Verstopfung verhindern [27]. Daher werden Probiotika in der Lebensmittelindustrie und der medizinischen Versorgung häufig eingesetzt.

Veringa Ha et al. wies darauf hin, dass es eine symbiotische Beziehung zwischen thermophilem Streptokokken und Lactobacillus bulgaricus gibt. Im frühen Stadium der Fermentation zersetzt Lactobacillus bulgaricus Kasein zu neuen Aminosäuren und Peptiden, die das Wachstum von thermophilen Streptokokken besser fördern können. und thermophiler Streptokokken erzeugt während des gesamten Fermentationsprozesses eine große Menge CO2 und Ameisensäure. Diese beiden Substanzen können das Wachstum und den Stoffwechsel von Lactobacillus bulgaricus in gewissem Maße fördern [28].

 

Wenn die Menge an Honig 8% beträgt und die Fermentationszeit 2 h beträgt, kann der Glutathiongehalt im braunen Reisenzym 2,62 mg/g erreichen [31]. Xu Muxia und andere entwickelten ein Prozess zur Herstellung von Verbundsenzymen. Frisches Gemüse und Früchte werden in Scheiben geschnitten, 1% bis 1 {{15}% Apfelessig wird zugegeben, gleichmäßig gemischt und 1 bis 6 Monate bei Raumtemperatur versiegelt, damit sie auf natürliche Weise in Obst- und Gemüseenzymsaft fermentieren können. Kräuter werden ausgewählt, gehackt und gemischt, 1% bis 1 {{17}% Salz wird zugesetzt und 1 bis 6 Monate bei Raumtemperatur versiegelt, damit sie auf natürliche Weise in Pflanzenenzymsaft fermentieren können. Getreide werden ausgewählt, 1 bis 1 0% Honig wird als Substrat hinzugefügt, und 0. 01% bis 0,1% Trockenhefe wird zur Fermentation zur Bildung von Getreidezymen verwendet. Sojabohnen und schwarze Bohnen werden als Rohstoffe verwendet. Nachdem die Sojabohnen und schwarzen Bohnen gedämpft wurden, werden sie direkt mit 0,01% bis 0,1% Schimmelpilz inokuliert und fermentiert, um Bohnenenzyme zu bilden. Obst- und Gemüseenzyme, Pflanzenenzyme, Getreideenzyme und Bohnenenzyme werden entnommen, und Polyolen werden für eine zweite natürliche Fermentation bei Raumtemperatur in einer versiegelten Dose zum Gemisch zugesetzt. Nach 1 bis 3 Monaten nach der Aufgabe werden zusammengesetzte Enzymprodukte erhalten [32].

Der von Li Zhongshu et al. ist wie folgt: Drücken und mischen Sie die Früchte, um eine physische Squeeze -Enzymflüssigkeit zu erhalten; Nehmen Sie einen anderen Teil des Extrakts und fügen Sie {{0}}. 0 2% zu 0. 0. 05% bis 0,2% nach Gewicht der Brauerhefe, Fermentierung von 18 bis 25 Grad für 7 bis 15 Tage, dann 0,05% bis 0,1% der Essigsäure -Bakterien und 10 bis 30 Tage bei 30 bis 40 Grad fermentieren. Nach zwei Prozessen anaeroben und aeroben Erkrankungen, zwei Niederschlägen und Extraktionen, wird eine biologische Fermentationsenzym -Flüssigkeit erhalten. Die beiden Enzymflüssigkeiten werden gemischt und mit einer Membran mit einer Porengröße von 0,1 bis 0,2 μm filtriert, um eine Verbundenzymflüssigkeit herzustellen [33].

 

1.5 Funktionen und Eigenschaften von mikrobiellen Enzymen

 

1.5.1 Hauptenzyme

Enzyme sind reich an Enzymen wie Superoxiddismutase, Protease und Lipase [34]. Superoxiddismutase kann die Reaktion von Superoxidanionen -freien Radikalen (o 2-) beschleunigen und O 2- aus dem Körper entfernen. Dies kann nicht nur gegen das Altern widerstehen, sondern auch Herz -Kreislauf -Erkrankungen verhindern und behandeln und unseren Körper vor der Schädigung von O 2- schützen.
Protease ist eine Art von Enzym, die die Hydrolyse von Proteinen katalysiert. Es kann Proteine ​​in Lebensmitteln und sterbenden Zellen abbauen. Die Protease in Badprodukten kann eine sanfte Peeling -Rolle spielen. Während des Peeling kann es die Haut besser reinigen, insbesondere die Poren und Schmutz im Gesicht, die schwer zu reinigen sind.
Die Hydrolyseprodukte von Lipase sind im Allgemeinen natürliche Öle. Es hydrolysiert die Esterbindung zwischen Fettsäuren und Glycerin und wird häufig für Produkte von Gesundheitsprodukten, Kosmetika und Gewichtsverlust verwendet.
Yu Xiaoyan et al. untersuchte den Unterschied in der Aktivität verwandter Enzyme im Pasteenzym und im Pulverenzym. Die Ergebnisse zeigten, dass das Pastenenzym einen höheren Gehalt an Superoxiddismutase und Protease aufwies, während das Pulverenzym einen niedrigeren Enzymgehalt aufwies [34]. Die Forschungsergebnisse von Dong Yinmao et al. Es verfügt über eine starke DPPH -freie Radikale, Superoxidanionen -freier Radikal- und Hydroxylfreadikalfänger [35].

 

1.5.2 Antioxidative Aktivität

Die Ursachen vieler menschlicher Krankheiten hängen mit freien Radikalen und reaktiven Sauerstoffspezies zusammen, einschließlich entzündlicher Erkrankungen [{36-37], Krebs [38], Alterung [39-40], Diabetes [41], neurodegenerative Erkrankungen [42] und Arteriosclerosis [43]. Der menschliche Körper produziert kontinuierlich einige freie Radikale im normalen Stoffwechselprozess oder unter der Stimulation externer Faktoren. Diese freien Radikale können durch das antioxidative Verteidigungssystem des Körpers beseitigt werden, und Enzyme sind Bestandteile dieser antioxidativen Substanzen. Übermäßige Produktion von freien Radikalen kann das Gleichgewichtssystem des Körpers stören, was zu Zellschäden und zum Tod führt [44]. Jayabalan et al. In ihrer Untersuchung des Fermentationsprozesses des Kombucha -Enzyms, dass Kombucha -Enzym eine hohe antioxidative Aktivität aufweist, nimmt diese antioxidative Aktivität mit der Verlängerung der Fermentationszeit zu. Ihre Studie ergab, dass die Zunahme der antioxidativen Aktivität mit den von Bakterien und Hefe während der Fermentation des Fermentationssubstrats erzeugten Enzyme zusammenhängt [45].

 

1.5.3 Antibakterielle und entzündungshemmende Wirkungen

Enzyme sind natürliche Antibiotika. Dong Yinmao et al. untersuchten die antibakteriellen Wirkungen von mikrobiellen Enzymen. Die experimentellen Ergebnisse zeigten, dass sowohl Pastenenzyme als auch Pulverenzyme gute Wirkungen bei der Hemmung von Akne haben [46]. Darüber hinaus wurde festgestellt, dass das Hinzufügen von Enzymen zu Kosmetika oder Toilettenartikeln eine bestimmte antibakterielle und entzündungshemmende Rolle spielen kann.

 

1.5.4 Förderung des Stoffwechsels

Die Zellerneuerung ist der Stoffwechselprozess des menschlichen Körpers. Innerhalb eines bestimmten Lebenszyklus altern und sterben alte Zellen, und es werden neue Zellen erscheinen. Der Zersetzungsprozess nach Zellalterung und Nekrose ist jedoch ziemlich groß, und es ist notwendig, den Zellstoffwechsel und die Reparatur beschädigter Zellgewebe kontinuierlich zu fördern. Daher sind Enzyme zu einem unverzichtbaren Werkzeug geworden, und es ist kein einzelnes Enzym, sondern eine Vielzahl von Enzymen, die miteinander zusammenarbeiten, um ihre jeweiligen Vorteile zu spielen. Bei der Untersuchung der Wirkung biologischer Enzyme auf die Leberregenerationsfunktion von Ratten haben Liu Xiuhong et al. fanden heraus, dass biologische Enzyme wie Wachstumshormone, die die Regeneration von Leberzellen fördern, auf das frühe Stadium der Regeneration von Leberzellen wirken und die Regeneration von Leberzellen bei Ratten mit partieller Leberresektion fördern können [{47-48]. Enzyme spielen eine schützende Rolle bei der Stärkung von Zellen, verbessert den menschlichen Resistenz, die Aufrechterhaltung des Gleichgewichts von Darmbakterien, die Förderung von Verdauung und Absorption und das Entfernen von Abfällen aus dem Körper. Sie können das Blut im menschlichen Körper schwach alkalisch machen und das Gleichgewicht aller Aspekte des Körpers aufrechterhalten.

 

1.5.5 Immunität verbessern

In Bezug auf die Verbesserung der Immunität haben Li Boqing und andere relativ eingehende Forschungen durchgeführt. Mäuse wurden als Forschungsfächer verwendet, um die Wirkung des Kombuchas -Enzyms auf die Immunität experimenteller Mäuse zu beobachten. Im Experiment wurden die biologischen Aktivitäten von IL -1 und IL -2 mit der Thymozyten -Proliferationsmethode bzw. die Splenzyten -Proliferationsmethode gemessen; Die phagozytische Funktion von Makrophagen wurde anhand der Phagozytose von Candida albicans durch Peritonealmakrophagen gemessen; Die M1VR -Methode wurde verwendet, um die NK -Zell -Abtötungsaktivität zu messen. Experimentelle Ergebnisse zeigten, dass das Enzym die biologische Aktivität von IL -1 und IL -2 erhöhte; Die Phagozytosefunktion von Makrophagen wurde signifikant verbessert; und die Tötungsaktivität von NK -Zellen war signifikant erhöht (P.<0.01) [49].

 

1.5.6 Aufhellung und Anti-Aging

Enzyme werden von allen sehr gefragt, und ein weiterer wichtiger Grund sind ihre Aufhellungs- und Anti-Aging-Funktionen. Es ist aus Ren Qings in vitro- und in vivo-experimentellen Forschungsergebnissen zu sehen, dass Enzyme offensichtliche Aufhellung- und Anti-Aging-Wirkungen haben. Die Hemmraten von Tyrosinase durch Pastenenzyme mit Konzentrationen von 1%, 2% und 5% erreichten 88,41%, 96,35% bzw. 99,87%; Die Probanden wurden gebeten, Paste -Enzym bzw. Pulverenzym aufzutragen. Gel, die Melaninveränderungen im Anwendungsbereich der Probanden wurden regelmäßig getestet, und beide Enzyme hatten einen Whitening -Effekt; Der antioxidative Test des Enzyms und des Hauttexturstests der Probanden zeigten auch, dass das Enzym eine gute Fähigkeit zur Antioxidation und Anti-Aging-Effekte aufweist [50].

 

1.6 Forschungsinhalt, Zweck und Bedeutung dieses Themas

 

1.6.1 Forschungsinhalte

(1) Optimales Dehnungsverhältnis und sensorische Bewertung ausgewählter kombinierter Stämme (2) Forschung zur antioxidativen Aktivität von Apfelenzymen
(3) Das sich ändernde Muster der antioxidativen Aktivität während des Fermentationsprozesses des Apfelenzyms, des Birnenenzyms und des Zitruszyms (4) Das sich ändernde Muster der Enzymaktivität während des Fermentationsprozesses des Apfelenzyms
(5) Erforschung der Überwachung von Gesamtsäure, Gesamtzucker, Alkoholgehalt und pH während der Fermentation von Apfelenzym

 

1.6.2purpose und Bedeutung

In den letzten Jahren sind mikrobielle Enzyme weltweit populär geworden, und mikrobielle Enzymfunktionelle Produkte sind endlos aufgetreten. Seine Funktionen wie Antioxidans, Antibakterielles und entzündungshemmende, förderende Stoffwechsel, Verbesserung der Immunität, Aufhellung und Anti-Aging werden von Menschen sehr gefragt. Der Produktionsprozess von mikrobiellen Enzymen wird ständig aktualisiert, die meisten Forschungen erfolgen jedoch basierend auf traditionellen Fermentationsprozessen. Diese Art von mikrobiellem Enzym, das mithilfe der traditionellen Fermentationstechnologie natürlich fermentiert wird, wird leicht von Mikroorganismen in der Umwelt, dem Fermentationsprozess und saisonalen Bedingungen beeinflusst. Es ist schwierig, die Produktqualität künstlich zu kontrollieren, was sich auf die Entwicklung und Nutzung auswirkt. Daher bietet diese Studie einige Datenunterstützung und theoretische Grundlage für die Erforschung und Entwicklung neuer funktioneller mikrobieller Enzymprodukte und die Realisierung der industriellen Produktion. Die künstliche Inokulation von Bakterienstämmen wird verwendet, um eine eingehende Verfolgung und Überwachung ihrer antioxidativen Aktivität und Enzyme durchzuführen, um die Qualität der Produkte zu verbessern. Die Fermentation wird kontrolliert und geht in die Richtung, die wir erwarten. Derzeit basieren die meisten Forschungsergebnisse im In- und Ausland auf natürlichen Fermentation und untersuchen die Metaboliten, die während des Fermentationsprozesses, des Fermentationsmechanismus usw. produziert wurden. Es gibt keine relevanten Untersuchungen, die zeigen, welche Art von Auswirkungen durch Zugabe spezifischer vorteilhafter Bakterien im frühen Stadium der Fermentation verursacht werden. Auswirkungen und ob dieser Ansatz machbar ist.
In Anbetracht der oben genannten vorhandenen Probleme nimmt dieser Artikel Apple -Enzyme, Birnenenzyme und Zitruenzyme als Forschungsobjekte an. Im frühen Stadium der Fermentation werden eine bestimmte Menge an Aspergillus oryzae, Hefe, Lactobacillus acidophilus und lactobacillus bulgaricus inokuliert, um eine natürliche Fermentation (ohne Inokulation von Stämmen) zum Vergleich zu ermöglichen, die Antioxidationsaktivität und deren Änderungsmuster, Enzymaktivitäten und Änderungen des Musters und das Ändern von Mustern. Es wird erwartet, dass es eine bestimmte theoretische Grundlage und technische Grundlage für die weitere Lösung der Bakterienstammkontrolle, die Analyse der funktionellen Komponenten und die Produktqualitätskontrolle von mikrobiellen Enzymen sowie die umfassende Entwicklung und Nutzung von Enzymen bildet, damit Menschen Enzyme mit reicheren Ernährung und Funktionen trinken können. .