Einzigartige und gemeinsame miRNAs der drei Exosomentypen

Als nächstes untersuchten wir die Rolle der einzigartigen miRNAs der drei Exosomentypen bei der Signalregulation. Das Venn-Diagramm zeigte 16, 27 und 61 einzigartige miRNAs in hESC-Exos, hiPSC-Exos und hUC-MSC-Exos sowie 70 gemeinsame miRNAs (Abb. 6A). Das regulatorische Netzwerk der miRNA-Protein-Wechselwirkungen wurde durch gezielte Ausrichtung auf die einzigartigen miRNAs evaluiert. In hESC-Exos wurde festgestellt, dass die 16 einzigartigen miRNAs Autophagie, PI3K-AKT, Foxo, HIF-1, ErbB, mTOR, Langlebigkeit, AMPK-Signalweg usw. regulieren (Abb. 6B). Für die 27 einzigartigen miRNAs in hiPSC-Exos ergab die KEGG-Analyse mehrere signifikante Ontologien, darunter den Metabolismus von Xenobiotika, AGE-RAGE-Signalisierung, mTOR-Signalisierung, Retinol-Metabolismus, zelluläre Seneszenz, MAPK-Signalisierung usw. (Abb. 6C). In hUC-MSC-Exos wurde festgestellt, dass die 61 einzigartigen miRNAs an der Regulierung des PI3K-AKT-Signals, der Infektion mit dem humanen Papillomavirus, des cGMP-PKG-Signals, der zellulären Seneszenz, des Ras-Signals, des mTOR-Signals, des JAK-STAT-Signals und von NF-κB beteiligt sind Signalisierung usw. (Abb. 6D).

Glykosid von Cistanche kann auch die SOD-Aktivität im Herz- und Lebergewebe erhöhen und den Gehalt an Lipofuscin und MDA in jedem Gewebe erheblich reduzieren, wodurch verschiedene reaktive Sauerstoffradikale (OH-, H₂O₂ usw.) effektiv abgefangen und vor verursachten DNA-Schäden geschützt werden durch OH-Radikale. Cistanche-Phenylethanoidglykoside haben eine starke Fähigkeit, freie Radikale abzufangen, eine höhere Reduktionsfähigkeit als Vitamin C, verbessern die Aktivität von SOD in der Spermiensuspension, reduzieren den MDA-Gehalt und haben eine gewisse schützende Wirkung auf die Funktion der Spermienmembran. Cistanche-Polysaccharide können die durch D-Galaktose verursachte Aktivität von SOD und GSH-Px in Erythrozyten und Lungengewebe experimentell seneszierender Mäuse steigern, außerdem den Gehalt an MDA und Kollagen in Lunge und Plasma verringern und den Gehalt an Elastin erhöhen eine gute Abfangwirkung auf DPPH, verlängert die Zeit der Hypoxie bei seneszenten Mäusen, verbessert die Aktivität von SOD im Serum und verzögert die physiologische Degeneration der Lunge bei experimentell seneszenten Mäusen. Bei der zellulären morphologischen Degeneration haben Experimente gezeigt, dass Cistanche über eine gute antioxidative Fähigkeit verfügt und hat das Potenzial, ein Medikament zur Vorbeugung und Behandlung von Hautalterungskrankheiten zu sein. Gleichzeitig hat Echinacosid in Cistanche eine erhebliche Fähigkeit, freie DPPH-Radikale abzufangen, reaktive Sauerstoffspezies abzufangen und den durch freie Radikale verursachten Kollagenabbau zu verhindern, und hat auch eine gute Reparaturwirkung auf Schäden durch freie Thymin-Radikalanionen.

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Die miRNA-Komponenten tragen indirekt stark zu mehreren Signalwegen bei. Um die Interaktion zwischen den einzigartigen miRNA-Clustern und kanonischen Signalwegen zu untersuchen, führten wir eine regulatorische Netzwerkanalyse unter Verwendung der IPA-Datenbank durch. Die IPA-Ergebnisse zeigten, dass die miRNAs mit der höchsten Lesezahl (P<0.05, abundance>1000) im regulatorischen Netzwerk wurden mehreren kanonischen Signalwegen zugeordnet. miRNAs und ihre entsprechenden Wege sind in der Zusatzdatei 5 aufgeführt. Am Beispiel von hESC-Exos-miRNAs sind mehrere miRNAs mit hoher Häufigkeit, einschließlich has-miR-95-3p, has-miR-30a{{8} }p, has-miR- 181-5p, has-miR-183-3p und has-miR-301a-3p waren an AMPK, Autophagie, ErbB und Langlebigkeit beteiligt Regulierung und der FOXO-Signalweg, unter anderem. Cytoscape wurde verwendet, um das Netzwerk einzigartiger miRNAs aus den drei Exosomentypen und ihren regulierten Signalwegen zu zeichnen (Zusatzdatei 1: Abb. S11).

miRNA-Profile im Zusammenhang mit der Pluripotenzregulierung

To investigate the regulatory effect of exosome-derived miRNAs on the pluripotency of stem cells, we predicted the target genes and screened the miRNAs involved in regulating the above process. Pluripotency-related miRNAs (abundance>1000) in den drei Exosomentypen sind aufgelistet (Abb. 7A–C). Die drei wichtigsten miRNAs in den drei Exosomentypen waren has-miR-302b-3p, has-miR-302a-5p und has-miR{{9} }d-3p (hESC-Exos), has-miR-372-3p, has-miR-371a-5p und has-miR-221-3p (hiPSC-Exos) und has-miR-21-5p, has-miR-146a-5p und has-miR- 320a-3p ( hUC-MSC-Exos). Darüber hinaus haben wir das regulatorische Netzwerk der zehn wichtigsten miRNAs aus Exosomen und ihrer an der Pluripotenzregulation beteiligten Zielgene beschrieben (Abb. 7D – F). Die Analyse des Venn-Diagramms ergab 12 überlappende miRNAs, was darauf hindeutet, dass es sich möglicherweise um entscheidende miRNA-Sets bei der Regulierung der Pluripotenz von Stammzellen handelt (Abb. 7G–H).

Spezifische Proteine ​​und miRNAs in den drei Exosomentypen

Um die tatsächliche Expression spezifischer Proteine ​​in den drei Exosomen weiter zu überprüfen, führten wir Western Blot durch, um Kandidatenproteine ​​auf verschiedenen Wegen zu erkennen (Abb. 8A und B). Für den Zellzyklus wurden drei entscheidende regulatorische Faktoren, MCM5, PCNA1 und CDK1, in hESC-Exos und hiPSCExos stärker exprimiert als in hUC-MSC-Exos. PRKAA1, das zur Familie der Ser/Thr-Proteinkinasen gehört, ist ein zellulärer Energiefaktor, der in allen eukaryotischen Zellen konserviert ist und eine ähnliche Belastung in den drei Exosomen zeigte. SYK wird in großem Umfang in hämatopoetischen Zellen exprimiert und ist an der Kopplung aktivierter Immunrezeptoren an nachgeschaltete Signalereignisse beteiligt. BTK spielt eine entscheidende Rolle bei der Entwicklung und Immunregulation von B-Zellen. Die Proteinbelastungen von SYK und BTK waren in hUC-MSCExos im Vergleich zu denen in hESC-Exos oder hiPSC-Exos erhöht. Wnt5 ist ein Mitglied der Wnt-Genfamilie, das an Entwicklungsprozessen beteiligt ist, einschließlich der Regulierung des Zellschicksals und der Musterbildung während der Embryogenese. hESC-Exos waren am stärksten mit Wnt5 angereichert, gefolgt von hiPSC-Exos und hUC-Exos. RHEB ist aufgrund seiner Rolle im mTOR/S6K-Signalweg von entscheidender Bedeutung für die Regulierung des Wachstums und des Zellzyklusverlaufs. Western Blot zeigte, dass die drei Exosomentypen eine ähnliche RHEB-Belastung trugen. EGFR ist ein Zelloberflächenprotein, das den epidermalen Wachstumsfaktor bindet und so die Rezeptordimerisierung und Tyrosin-Autophosphorylierung induziert, was zur Zellproliferation führt. Sowohl hESC-Exos als auch hUC-MSC-Exos hatten höhere EGFR-Werte als hiPSC-Exos. ICAM2 gehört zur Familie der interzellulären Adhäsionsmoleküle (ICAM) und vermittelt adhäsive Wechselwirkungen, die für die antigenspezifische Immunantwort, die NK-Zell-vermittelte Clearance, die Lymphozytenrezirkulation und andere für die Immunantwort und -überwachung wichtige zelluläre Wechselwirkungen wichtig sind. Unter den drei Exosomen hatten hUC-MSC-Exos den höchsten ICAM2-Spiegel. Darüber hinaus wurden die fünf besten miRNAs in den drei Exosomentypen durch RT-qPCR bewertet und ihre Expression stimmte mit den Ergebnissen der RNA-Sequenzierung überein (Abb. 8C).

Diskussion

Elektrofahrzeuge sind reich an verschiedenen biologisch aktiven Substanzen und bestehen hauptsächlich aus Proteinen, Nukleotiden und Lipiden [3, 17]. In den letzten Jahrzehnten hat die Forschungsgemeinschaft das goldene Zeitalter der Analysetechniken für Protein-, Nukleotid- und Lipid-Omics eingeläutet. Unter diesen Techniken ermöglichen Massenspektrometrie [14, 20] und Hochdurchsatzsequenzierung [6, 54] das Screening und die Identifizierung von EV-Komponenten in großem Maßstab. Zwei Datenbanken, Vesiclepedia (https://microvesicles.org) [28] und Expedia (https://evpedia.info) [29], werden kontinuierlich aktualisiert und bieten eine Zusammenfassung der Komponenten von Elektrofahrzeugen von Säugetieren bzw. Nicht-Säugetieren . Als EVs unterscheiden sich Exosomen von MVs hinsichtlich ihres biologischen Ursprungs und ihrer physikalischen Abmessungen [46]. Aufgrund der kontinuierlichen Fortschritte auf dem Gebiet der Elektrofahrzeuge werden ständig neue Methoden optimiert, um die Isolierung und Reinigung von Exosomen zu erleichtern und den für vergleichende Analysen erforderlichen Genauigkeiten gerecht zu werden. Um die Exosomendatenbanken zu ergänzen und den Umfang ihrer klinischen Anwendungen zu erweitern, beschreiben wir in dieser Studie das Komponentengerüst von Exosomen aus hESCs und hiPSCs, über das noch nicht berichtet wurde. Wir verglichen auch ihre Zusammensetzung und biologischen Funktionen mit denen von hUC-MSC-abgeleiteten Exosomen. Zu diesem Zweck haben wir Exosomen von EVs in anerkannten Größen mithilfe von Ultrazentrifugation in Kombination mit Filtration festgehalten, wobei MVs und apoptotische Körper ausgeschlossen wurden, was die Verfeinerung der Exosomenkomponenten erleichterte. Während der logarithmischen Wachstumsphase der Zellen waren die gesammelten CMs für die Exosomenvorbereitung bereit. Es wurde festgestellt, dass die Partikelkonzentration von hESC-Exos deutlich höher ist als die von hUC-MSC-Exos, aber ähnlich der von hiPSC-Exos. Ähnliche Ergebnisse wurden beim Vergleich der Proteinkonzentrationen erhalten. Im Gegensatz dazu zeigten Gesamt-RNAs einen signifikanten Rückgang der Gradienten von hESC-Exos und hiPSC-Exos zu hUC-MSC-Exos. Diese Ergebnisse deuten darauf hin, dass hESCs (H9) möglicherweise eine zentrale Rolle bei der Replikationsaktivität spielen und eine stärkere Fähigkeit zur Sekretion von Exosomen zwischen den drei Stammzellen haben.

In früheren Studien haben sich Forscher auf die Zugänglichkeit von Exosomen konzentriert [1, 11, 58] und sich dabei auf ihr Forschungsgebiet beschränkt. Infolgedessen wurde der Differenzanalyse zwischen Exosomen aus verschiedenen Quellen weniger Aufmerksamkeit geschenkt. Obwohl einige EV-Proteomstudien der drei Stammzellen durchgeführt wurden, haben Forscher die Dimension der Exosomen noch nicht verfeinert [19, 32, 59], und die Testmethode basiert im Allgemeinen auf einer einzigen Massenspektrometrietechnik. In der vorliegenden Studie wurden sowohl TMT- als auch LFQ-Methoden verwendet, um die Proteinkomponenten der isolierten Exosomen zu messen und zu quantifizieren. Bioinformatische Analysen ergaben, dass hochbeladene Proteine ​​die Prozesse der Entwicklung, Schadensreparatur und des Stoffwechsels über dazwischenliegende Wnt-, AMPK-, VEGF- und Zellzyklus-Signalwege koordinieren können, was mit einem früheren Bericht übereinstimmt [19]. Ebenso könnten hiPSC-Exos auch an den oben genannten biologischen Prozessen beteiligt sein, indem sie die Kollateralsignale beeinflussen. Die EV-Proteomik von aus HFFs induzierten hiPSCs zeigte jedoch einen anderen Überblick über die Genontologie und konzentrierte sich mehr auf die Prozesse der DNA-Replikation und des RNA-Katabolismus (45). Daher folgerten wir, dass Exosomen, die von hiPSCs aus verschiedenen Geweben abgesondert werden, unterschiedliche Proteinprofile aufweisen können. In Bezug auf hUC-MSCs-Exos sind seine Komponenten in viele immunmodulatorische Aktivitäten eingebunden, indem sie das Komplementsystem, mikrobielle Infektionen, NF-κB-Signale usw. reguliert und mehrere Stoffwechselsignale beeinflusst haben, wie z. B. den Cholesterinstoffwechsel, den Phospholipase-D-Stoffwechsel und Purin Stoffwechsel und lieferte ähnliche Ergebnisse wie frühere Berichte [1, 59].

In der vorliegenden Studie haben wir die Proteome von drei Arten von Exosomen paarweise verglichen und ihre exklusiven Proteine ​​im Hinblick auf Funktionswege und regulatorische Netzwerke weiter analysiert. Die hiPSCs sind eine Art pluripotenter Stammzellen, die durch Umprogrammierung somatischer Zellen erzeugt werden können, um die Pluripotenz von hESCs nachzuahmen [48], was zeigt, dass diese Zellen bis zu einem gewissen Grad ähnlich sind. Obwohl sich ihre Exosomenproteine ​​stark überlappten, waren die von hESC-Exos hinsichtlich der Entwicklungsregulation und Zellzyklusfunktionen angereichert, was darauf hindeutet, dass hESC-Exos in unserer Studie möglicherweise eine stärkere Fähigkeit zur Regulierung der Pluripotenz haben als hiPSC-Exos. Die Pluripotenz von hUC-MSCs ist der von hiPSCs und hESCs unterlegen, was sich in ihren deutlich unterschiedlichen Proteinprofilen widerspiegelt. Das Proteom von hUC-MSC-Exos unterschied sich in der Immunregulation von dem von hESC-Exos und hiPSC-Exos und war an Proteinen angereichert, die die Aktivitäten natürlicher Killerzellen und des Komplementsystems regulieren. Darüber hinaus ergab die Bioinformatik der von den drei Exosomentypen gemeinsam genutzten Proteine, dass sich die Hochregulierung von hESC-Exos- oder hiPSC-Exos-Proteinen mehr auf Stoffwechsel-, Entwicklungs- und Zellproliferationsfunktionen konzentrierte, indem sie klassische Signalwege wie AMPK, Wnt und mTOR störte und der Zellzyklus. Im Vergleich dazu waren die hochregulierten Proteine ​​von hUC-MSC-Exos nicht nur an immunbezogenen Signalen, einschließlich des Komplementsystems, mikrobiellen Infektionen, NF-κB-Signalen und B-Zell-Rezeptor-Signalen, sondern auch an Stoffwechselprozessen wie PPAR-Signalen angereichert , Cholesterinstoffwechsel und MAPK-Signalisierung.

Exosomenladungen sind einzigartigen Gewebe- und Zellursprungs und enthalten miRNAs [16]. Die vorliegende Studie zeigte auch, dass Exosomen, die aus CMs isoliert wurden, die in vitro von hESCs, hiPSCs und hUC-MSCs produziert wurden, charakteristische und spezifische miRNA-Signaturen enthielten. Wir fanden heraus, dass jede exosomale miRNA eine einzigartige Landschaft hatte. Die miRNA-Expression und die Interaktion mit der 3'- oder 5'-UTR ihrer Zielgene sind an komplexen physiologischen und pathophysiologischen Aktivitäten beteiligt[18]. Die oben geladenen miRNAs der drei Exosomentypen regulieren eine Reihe biologischer Prozesse, einschließlich des Zellzyklus und der Hippo-, Wnt-, AMPK- und TGF-Signalisierung. Die miRNA-Profile von hUC-MSC-Exos hatten jedoch eine stärkere immunmodulatorische Fähigkeit als die von hESC-Exos oder hiPSC-Exos in Bezug auf das Verhalten von B- und T-Zellen sowie die TNF-, JAK-STAT- und NF-κB-Signalisierung. Insbesondere waren die meisten einzigartigen miRNA-Profile mit der Regulierung von Autophagie, Langlebigkeit, PI3K-Akt-, mTOR-, AMPK- und p53-Signalisierung verbunden, was darauf hindeutet, dass diese miRNA-Cluster das Altern, altersbedingte Krankheiten, die Gewebereparatur nach Verletzungen und den Stoffwechsel modulieren können . Die einzigartigen miRNAs von hiPSC-Exos regulieren die mTOR-Signalübertragung, die zelluläre Seneszenz, den Retinol-Metabolismus und die TNF-Signalisierung, was auch zur Seneszenz- und Stoffwechselregulierung beiträgt. Zusätzlich zur mTOR-Signalisierung und Zellalterung regulieren die einzigartigen miRNAs von hUC-MSC-Exos die Foxo-, Jak-STAT- und NF-κB-Signalisierung, was zur Umgestaltung der Stoffwechsel- und Immunmikroumgebung beitragen kann. Die Analyse gemeinsamer miRNAs zwischen den drei Exosomentypen bestätigte diese Unterschiede in der Signalregulation weiter. Insgesamt koordinierten die miRNA-Cluster in hESC-Exos oder hiPSC-Exos das Auftreten mehrerer Ereignisse, wie z. B. Entwicklung, Zellzyklus und Zelldifferenzierung. Der miRNA-Satz von hiPSC-Exos scheint bei diesen Funktionen eine weniger wichtige Rolle zu spielen als der von hESC-Exos, aber eine wichtigere Rolle als der von hUCMSC-Exos. Was hUC-MSC-Exos betrifft, so deuten die gefundenen miRNA-Profile auf deren überlegene Fähigkeit bei der Regulierung der Immunumgebung, insbesondere bei der Wund- und Infektionsheilung, hin.

In der Entwicklungsbiologie fördern aus pluripotenten Stammzellen gewonnene Exosomen die Aufrechterhaltung des pluripotenten Zustands. Daher tragen miRNAs, die in die Zellmikroumgebung gelangen, erheblich zur Aufrechterhaltung der Stammzellenfunktion bei [4, 32]. Die drei Exosomentypen in der vorliegenden Studie enthielten unterschiedliche miRNA-Cluster, die die pluripotente Signalübertragung regulieren. Dennoch könnten die 12 miRNAs, die von den drei Exosomentypen gemeinsam genutzt werden, für die Regulierung der Pluripotenz von entscheidender Bedeutung sein, darunter miR- 21-5p, miR-92a-3p und miR-221-3p. Diese Hypothese muss noch überprüft werden, und es müssen weitere Stammzelltypen untersucht werden. Darüber hinaus könnten die überlappenden miRNAs zwischen hESC-Exos und hiPSC-Exos an der Zelldifferenzierung und -reprogrammierung beteiligt sein, wie die Ergebnisse detaillierterer Analysen zeigen. Beispielsweise war die miR-302-Familie stark angereichert und exklusiv für hESC-Exos und hiPSC-Exos und trug durch Modulation der Neuprogrammierung erheblich zur Beeinflussung des Stammzellverhaltens bei [33, 50]. Dieser Punkt stimmt indirekt mit früheren Untersuchungen zur Einzigartigkeit von miR-302 in ESCs von Mensch und Maus überein [33, 50]. Die Expressionsanalyse von miRNA-Clustern, die in der Anfangsphase der Neuprogrammierung stark in ESCs exprimiert wurden, ergab die Induktion von miR-17 [41] und miR-106a/106b [37]. Die Überexpression von miR-93 förderte einen Anstieg der Koloniezahl von iPSCs [35].

Das durch Exosomenladungen aufgebaute Signalnetzwerk treibt intrazelluläre Ereignisse voran und greift weiter in eine Reihe pathologischer und physiologischer Prozesse ein [3]. Die Exosomen von hESCs enthalten zahlreiche geladene Proteine ​​und miRNAs, von denen vorhergesagt wird, dass sie die Landschaft der Entwicklung, des Stoffwechsels und des Anti-Aging regulieren, indem sie sich in die AMPK-, mTOR- und Wnt-Signalwege einfügen und Autophagie, Langlebigkeit und den Zellzyklus regulieren. Mehrere Studien haben die Funktionen von hESCEVs bei der Verjüngung des alternden Hippocampus [25, 26], des Knochenmarks [19] und der Endothelzellen [10] sowie der Linderung wiederkehrender Arthrose durch die Bereitstellung spezifischer Proteine ​​oder miRNAs [58] hervorgehoben. Unsere Ergebnisse stützen auch frühere Untersuchungen, in denen festgestellt wurde, dass ESC-abgeleitete Elektrofahrzeuge positive Auswirkungen auf die Wiederherstellung einer beeinträchtigten Herz-Kreislauf-Funktion haben [5]. ESC-abgeleitete EVs ermöglichten die Beibehaltung des Stammes von ESCs und waren somit in der Lage, sich neu zu programmieren [4], was mit unseren Ergebnissen für hESC-Exos-Ladungen übereinstimmt. In unserer Studie hatten aus Nabelschnurzellen umprogrammierte hiPSCs ähnliche biologische Funktionen wie hESC-Exos; Es gibt jedoch keine Berichte, die diese Theorie ausdrücklich unterstützen. Im Vergleich dazu haben hUC-MSC-Exos mehr Aufmerksamkeit erhalten und verschiedene präklinische und klinische Studien haben ihre therapeutische Wirkung bei mehreren Krankheiten geklärt [51]. Obwohl hUC-MSC-Exos zur Geweberegeneration und Gewebeumgestaltung beitragen, sind diese Fähigkeiten denen von hESC-Exos und hiPSC-Exos unterlegen. Unsere Analyse ergab, dass hUC-MSC-Exos eine hervorragende Fähigkeit zur Immunregulation aufwies. Diese Erkenntnisse bilden eine Grundlage für die weitere Forschung zu entzündungsbedingten Erkrankungen wie COVID-19 [2].

Schlussfolgerungen

Insgesamt ist hESC-Exos hervorragend bei der Regulierung von Entwicklung, Stoffwechsel und Anti-Aging. hiPSC-Exos hat ähnliche biologische Funktionen, ist aber hESC-Exos unterlegen. Im Vergleich dazu tragen hUC-MSC-Exos stärker zur Immunregulation bei. Unsere Analyse erweitert den Anwendungsbereich von hESC-Exos, hiPSCs und hUC-MSC-Exos und hebt ihre jeweiligen Vorteile bei der Intervention krankheitsbedingter Signale hervor. Nach unserem besten Wissen ist diese Studie die erste, die über eine systematische und umfassende Analyse der Exosomenproteomik und miRNA-Profile von hESCs, hiPSCs und hUC-MSCs berichtet. Unsere Studie bereichert die aktuellen EV-Datenbanken weiter und erleichtert die Gewinnung wertvollerer Daten für die Identifizierung geeigneter azellulärer Therapien im klinischen Umfeld. Diese Exosomen dienen auch der Arzneimittelentwicklung als alternatives Abgabesystem, um Virusabgabesysteme wie das Adenovirus zu ersetzen [7]. Auch wenn die aktuellen Vorhersagen nicht ausreichend validiert sind, könnten diese Ergebnisse weitere individuelle oder gemeinsame Anwendungen der drei Exosomen in der präklinischen oder klinischen Forschung aufzeigen. Darüber hinaus könnte zukünftige Forschung auch über die integrierte Differenzialanalyse von Exosomenladungen mit Elektrofahrzeugen sowie der Komponenten der Zellen selbst durchgeführt werden.

Abkürzungen

MSC: Mesenchymale Stammzelle; hESCs: Menschliche embryonale Stammzellen; hiPSCs: Vom Menschen induzierte pluripotente Stammzellen; hUC-MSCs: mesenchymale Stammzellen der menschlichen Nabelschnur; TMT: Tandem-Massen-Tag; LFQ: Markierungsfreie relative Peptidquantifizierung; hESC-Exos: Aus menschlichen embryonalen Stammzellen gewonnene Exosomen; hiPSC-Exos: Aus menschlichen embryonalen Stammzellen gewonnene Exosomen; hUC-MSC-Exos: Aus menschlichen mesenchymalen Stammzellen gewonnene Exosomen der Nabelschnur; EVs: Extrazelluläre Vesikel; MVs: Mikrovesikel; Alix: Apoptose-verknüpftes Gen 2-, das mit Protein X interagiert; TSG101: Tumoranfälligkeitsgen 101; HFFs: Menschliche Vorhautfibroblasten; CAMs: Zelladhäsionsmoleküle; TEM: Transmissionselektronenmikroskopie; PDI: Polydispersität; TEAB: Tetraethylammoniumbromid; DEPs: Differentiell exprimierte Proteine; FDR: Falscherkennungsraten.

Danksagungen

Wir danken Xueke Tan, Zhongshuang Lv und Xixia Li für ihre Unterstützung bei der Probenvorbereitung für die Elektronenmikroskopie und der Aufnahme von TEM-Bildern am Center for Biological Imaging (CBI), Institut für Biophysik, Chinesische Akademie der Wissenschaften. Die Autoren danken außerdem Dr. Baohua Zou vom Institut für Biophysik der Chinesischen Akademie der Wissenschaften für ihre freundliche Hilfe bei wichtigen Lektüren und Vorschlägen.

Autorenbeiträge

YB, YZ und JG konzipierten und gestalteten die Experimente. YB und XQ führten die Isolierung und Identifizierung der Exosomen durch. YB, XQ, QL, SS, KZ, XQ, XZ, CJ, HW und ZY trugen zur bioinformatischen Analyse bei. YB, YZ und JG haben den Artikel geschrieben. Alle Autoren haben das Manuskript gelesen und genehmigt.

Finanzierung

Diese Arbeit wurde durch Zuschüsse des National Key Research and Development Project (2019YFA0110400 an GJ), der National Foundation of Sciences and Technology (31971051, 31771562 an GJ) und der Dengfeng Clinical Medicine Grant Support der Stadt Dalian (2021024 an YZ) unterstützt.

Verfügbarkeit von Daten und Materialien

Alle während der aktuellen Studie verwendeten und/oder analysierten Datensätze sind auf begründete Anfrage beim jeweiligen Autor erhältlich. Alle Autoren haben bestätigt, dass die verfügbaren Daten im Abschnitt „Referenzen“ zitiert wurden.

Erklärungen

Ethische Genehmigung und Zustimmung zur Teilnahme

Die Autoren geben an, dass kein potenzieller Interessenkonflikt besteht.

Einwilligung zur Veröffentlichung

Unzutreffend.

Angaben zum Autor

1 Schlüssellabor für interdisziplinäre Forschung, Institut für Biophysik, Chinesische Akademie der Wissenschaften, Peking 100101, China. 2 Universität der Chinesischen Akademie der Wissenschaften, Peking 100049, China. 3 Abteilung für Medizinische Onkologie, Zweites angegliedertes Krankenhaus der Dalian Medical University, Dalian 116023, China. 4 Sechste Abteilung für Lebererkrankungen, Dalian Public Health Clinical Center, Dalian Medical University, Dalian 116023, China.

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Anmerkung des Herausgebers

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