Die antidepressiven und kognitiven Verbesserungsaktivitäten des traditionellen chinesischen Krauts Cistanche Ⅰ
Jun 23, 2022
Abstrakt
Mehr als zehn Prozent der Menschen leiden in ihrem Leben an mindestens einer Episode von Depressionen und verwandten psychischen Störungen, und Depressionen und verwandte psychische Störungen sind weltweit eines der größten Probleme der öffentlichen Gesundheit. Eine Multiple-System-Theorie besagt, dass die Dysregulation der multiplen Systeme der Pathogenese von Depressionen und verwandten psychischen Störungen zugrunde liegt, und dass neue Therapien auf der Grundlage der Multiple-System-Dysregulationstheorie dringend benötigt werden. In dieser Studie wurde die antidepressive Wirkung des Suds aus Kräutern untersuchtCistanche DeserticolaYCMa undCistanche tubulosawurde untersucht. KrautCistancheAbkochung reduzierte die Immobilitätszeit im Mausschwanz-Suspensionstest signifikant. Mäuse, die mit Kräutersud behandelt wurden, zeigten im Morris-Wasserlabyrinth-Test eine verbesserte Fähigkeit des räumlichen Lernens und des Gedächtnisses. Gruppen, die mit Kräutersud behandelt wurden, zeigten eine herunterregulierte Monoaminoxidase (MAO)-Aktivität; die Dopamin (DA)-Konzentration im Gehirn war hochreguliert, was auf Kraut hinweistCistancheAbkochung verbesserte die Nervenerregbarkeit; die Serumkonzentration von Corticosteron (CORT) wurde herunterreguliert, was zeigt, dass Mäuse von einem reduzierten Stressniveau profitierten. Daher die antidepressive Wirksamkeit und der Mechanismus vontraditionelles chinesisches KrautCistanchewurden in dieser Studie untersucht. KrautCistanchezeigte ein Potenzial, als komplementäre und alternative Therapie für Depressionen entwickelt zu werden.
1. Einleitung
Depressionen und verwandte Stimmungsstörungen, bei denen schätzungsweise 12 bis 17 Prozent der Bevölkerung mindestens eine Episode in ihrem Leben erleben, gehören zu den Hauptursachen für geistige Behinderungen und gelten als eines der weltweit größten Probleme der öffentlichen Gesundheit. Von besonderer Bedeutung ist, dass ein erheblicher Anteil der Patienten mit Depressionen an Gedächtnisverlust, Konzentrationsproblemen, verminderter Energie oder Müdigkeit, Verlust des Interesses oder der Freude an Hobbys und Aktivitäten und Schlafstörungen, frühmorgendlichem Erwachen oder Verschlafen leidet. Obwohl die neuronalen Substrate für Anomalien bei Depressionen und verwandten Syndromen unklar sind, wird allgemein anerkannt, dass die Beeinträchtigung der Neuroplastizität und der zellulären Belastbarkeit die Pathophysiologie der Depression hervorruft und eine erfolgreiche Behandlung von der Intervention auf der Ebene der Neurotransmitter abhängen kann. Der Ansatz zur Behandlung von Depressionen basiert im Wesentlichen auf der klassischen Hypothese des Monoaminsystems, die besagt, dass eine Fehlregulation von Monoaminen, insbesondere von Serotonin (5-HT) und Norepinephrin (NE), zur Pathogenese von Depressionen beiträgt, und eine Intervention des Neurotransmittersystems mit Dopamin Agonisten und dopaminnoradrenerge Modulatoren würden die Symptome einer schweren Depressionsstörung lindern. Obwohl weitverbreitet verschrieben, ist die heilende Wirksamkeit von Antidepressiva fraglich und die Nebenwirkung kann nicht ignoriert werden, da ein signifikanter Anteil der Patienten nicht auf die Manipulation des Monoaminsystems anspricht. Kürzlich haben neue Theorien zur Pathogenese von Depressionen darauf hingewiesen, dass mehrere Systeme, darunter Entzündungswege, der oxidative Stressweg, die Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren (HPA)-Achse, das metabolische und bioenergetische System, neurotrophe Wege, das Glutamatsystem, das Opioidsystem und das cholinerge System, sind eng mit dem Auftreten von Depressionen verbunden. Es gibt Hinweise darauf, dass eine Intervention mit mehreren Zielen eine bessere Wirksamkeit erzielte als eine Intervention mit einem einzigen Ziel. Neue Therapien, die auf der Theorie der multiplen Systemdysregulation basieren, werden dringend benötigt.

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Kräuterprodukte werden Berichten zufolge von mehr als der Hälfte der US-Bevölkerung konsumiert; Das Interesse und die Nachfrage nach Kräutern oder Kräuterprodukten als ergänzende Methode zur Behandlung von Depressionen nehmen weltweit zu. Es wurde festgestellt, dass mehrere Heilpflanzen eine wohltuende Wirkung zur Linderung von Depressionen zeigen. Zu den Kräutern, von denen berichtet wird, dass sie Depressionen unterdrücken und die kognitive Funktion verbessern, gehören Sanddorn,Ginkgo biloba,Piper nigrum,Hypericum perforatum,Griffonia simplicifolia. Eine kombinierte Gabe von Ferulasäure und Piperin zeigte bei Mäusen durch Manipulation des monoaminergen Systems eine synergistische antidepressive Wirkung. Albiflorin zeichnete sich durch eine hohe selektive Affinität zu den Neurotransmitterrezeptoren und -transportern und signifikant erhöhte extrazelluläre Konzentrationen von 5-HT und NE im Hypothalamus frei beweglicher Ratten aus. Ein HeilkrautMelisse officinalisL. linderte das depressive Verhalten von Mäusen, indem es den Einfluss auf den serotonergen Neurotransmitterspiegel ausübte. Diese Kräuter oder Abkochungen, die als alternative Heilmittel für Depressionen entwickelt wurden, helfen, die Symptome der Depression zu lindern und bieten eine neue Quelle für die Entwicklung von Antidepressiva. KrautCistancheArten, die in Trockengebieten und Wüsten im nördlichen Teil Chinas verbreitet sind, sind Kräuter der traditionellen chinesischen Medizin und werden seit mehr als 1,000 Jahren in China häufig zur Behandlung verschiedener Krankheiten eingesetzt. Die mehrfache Wirksamkeit des KrautsCistancheAbkochung reicht zwischen dem Aphrodisiakum [14], immunfördernde [15], antioxidativ [16] und hepatoprotektive [17] Eigenschaften.C. DeserticolaAbkochungen induzieren die testikulären steroidogenen Enzyme [18], fördern die erektile Reaktion des Penis und verkürzen die Latenzzeit der erektilen Reaktion bei kastrierten Ratten [19]. KrautCistancheEs wurde berichtet, dass es die Aktivitäten von dopaminergen Neuronen hemmt, indem es die inhibitorischen Apoptosegene und neurotrophen Faktoren reguliert [20].C. tubulosaAbkochungen verbesserten die kognitive Dysfunktion, die durch A 1-42 über die Blockierung der Amyloidablagerung und belebte die cholinerge und hippocampale dopaminerge neuronale Funktion [21]. Die neuroprotektive Eigenschaft von KräuternCistancheimpliziert das therapeutische Potenzial bei den kognitiven Erkrankungen. Depression ist eine übliche Mischform emotionaler Reaktionen mit Vergesslichkeit und kognitivem Verfall als häufigen Symptomen [22]. KrautCistanchewurde allgemein als traditionelle chinesische Medizin zur Behandlung von Vergesslichkeit verwendet; Darüber hinaus zeigt ein kürzlich veröffentlichter Bericht, dass eine frühzeitige Verabreichung des Maismehls an Erwachsene mit ergänzt wirdC. tubulosaist vorteilhaft für die Langlebigkeitsförderung und das olfaktorische Lernen und die Verbesserung des Gedächtnisses bei NichtwirbeltierenDrosophilaModell [23]. Diese Tatsachen weisen auf die kognitiv verbessernde Eigenschaft des Krauts hinCistanche; hier in dieser Forschung haben wir zum ersten Mal die antidepressive Eigenschaft und ihre Beziehung zu kognitiven Verbesserungsaktivitäten im Säugetiermodell charakterisiert, indem wir das Monoaminsystem und die HPA-Achse reguliert haben. Erhellt die antidepressive Eigenschaft und den vorläufigen Mechanismus des KrautsCistanchekönnte das Anwendungsspektrum von Kraut erweiternCistanche, das als alternatives Mittel gegen Depressionen entwickelt werden könnte.

2. Materialien und Methoden der Antidepressionsfunktion von Cistanche
2.1. Pflanzenmaterial und Abkochung von Cistanche
C. DeserticolaYCMa wurde von der Autonomen Region Nei Mongol, China, erhalten;C. tubulosawurde aus der Autonomen Region Xinjiang Uygur, China, bezogen. Vor dem Abkochen wird das Kraut (C. DeserticolaYCMa oderC. tubulosa) wurde mittels HPLC (Hochleistungs-Flüssigkeitschromatographie) (Milford, MA, Waters, USA) auf den Gehalt an Echinacosid und Verbascosid untersucht und für die Tierversuche das zugelassene Produkt (gemäß Arzneibuch der Volksrepublik China) verwendet . Der Sud wurde basierend auf der Methode der Wasserverdampfung erworben, die vom Forschungszentrum für Lebensmittel- und Gesundheitstechnik des staatlichen Bildungsministeriums der Sun Yat-sen-Universität entwickelt wurde. GetrocknetCistanche Deserticola125 g YCMa wurden zerkleinert und durch ein 120--Maschensieb gesiebt, und dann wurde das Pulver in 3 l ultrareinem Wasser gelöst, 2 h auf 100 Grad erhitzt, dann auf Raumtemperatur abgekühlt und gesiebt ; der Überstand wurde recycelt. Das Sediment wurde dann in 2 l ultrareinem Wasser gelöst und dann für 1,5 h erhitzt und wie oben erwähnt abgekühlt, um den Überstand zu recyceln; das Sediment wurde dann zum Recycling des Überstands verwendet. Der Inhalt des gesamten Überstands wurde durch Rotationsvakuumverdampfer bei 60 Grad angereichert; schließlich wurde die Rohdrogenkonzentration auf 0,5 g/ml eingestellt und das Produkt bei –20 Grad gelagert.

2.2. Echinacosid- und Verbascosid-Assay durch HPLC-Analyse
HPLC (Hochleistungsflüssigkeitschromatographie) wurde verwendet, um den qualitativen und quantitativen Assay von Echinacosid und Verbascosid zu messen; Verbascosid (Reinheit > 93 Prozent) und Echinacosid (Reinheit > 93 Prozent) wurden von den National Institutes for Food and Drug Control (Peking, China) gekauft und als Standardkontrolle verwendet.
2.3. Die Tierpflege und das experimentelle Verhalten auf Cistanche
Die Probanden waren männliche Kunming-Mäuse mit SPF (spezifisch pathogenfrei), die 21 bis 25 Gramm wogen und vom Medical Experimental Animal Center der Provinz Guangdong geliefert wurden. Die Tiere wurden in Plastikkäfigen gehalten (zehn pro Käfig); Die Umgebungsbedingungen wurden wie folgt eingestellt: Feuchtigkeit 40–70 Prozent, Raumtemperatur 21 ± 1 Grad und eine Hell-Dunkel-Periode von 12 h:12 h. Alle Tierversuche wurden von der Tierethikkommission der Sun Yat-sen Universität genehmigt.
2.4. Heckaufhängungstest auf Cistanche
Der Heckaufhängungstest wurde gemäß dem von Cryan et al. [24] mit geringfügigen Änderungen. Kurz gesagt, am Tag 21 wurden die Mäuse am Schwanz unter Verwendung von metallischen Galgen aufgehängt, die durch einen Nylonkatheter angebunden waren, wobei der Kopf in einer Höhe von 50 mm über dem Boden war. Die Mäuse wurden 10 bis 20 mm vom Ende ihres Schwanzes entfernt an den Haken an Klebebändern aufgehängt und durch Schindeln akustisch und visuell isoliert. Die Körperbewegungen der Maus wurden aufgezeichnet und die Atembewegungen wurden ignoriert. Vor dem Tag des Experiments wurden die Mäuse für 8 min zur Anpassung suspendiert.
2.5. Der Morris Water Maze Test auf Cistanche
Der Wasserlabyrinthtest wurde gemäß der Beschreibung von Vorhees et al. durchgeführt. [25–27] mit dem von der Chinesischen Akademie der Medizinischen Wissenschaften entwickelten Gerät. Es wurde ein kreisförmiges Becken (150 cm Durchmesser) mit Wasser gefüllt (26 ± 1 Grad; Randhöhe (Abstand Wasseroberfläche zu Wandrand): 10 cm) verwendet, kreisförmige Rettungsplattform (Durchmesser: 11 cm; Abstand zwischen Plattformmittelpunkt und Becken). Wand: 27 cm) wurde 1–1,5 cm unter die Wasseroberfläche getaucht und der Testbereich wurde mit indirekter Beleuchtung (50 ± 10 Lux) beleuchtet, um Reflexionen zu vermeiden. Es wurden vier Startorte verwendet, N, S, E und W. Für den räumlichen Lerntest wurden die Tiere täglich an den Tagen 9–11 am festen Startort trainiert. Die Fluchtlatenzzeit wird gemessen, um das räumliche Gedächtnis und die Lernfähigkeit der Mäuse darzustellen. Wenn die Mäuse die Plattform nicht finden oder darauf klettern konnten, wurden die Mäuse zur Plattform geführt und blieben für 10 s. Nach einer Pause von 60 s wird mit der nächsten Trainingseinheit begonnen. Als Basiswert für die Abformung wurden Daten aus dem letzten räumlichen Lerntest verwendet. An den Tagen 23–28 wurden ein Ortsnavigationstest und eine räumliche Sonde durchgeführt. Der Platznavigationstest dauerte 6 Tage und wurde um 13:00 Uhr durchgeführt, die Tiere wurden mit dem Kopf zur Beckenwand gerichtet im Uhrzeigersinn ins Wasser gesetzt und die Latenzzeit (innerhalb von 2 min) aufgezeichnet. Nachdem der Ortnavigationstest durchgeführt wurde, wurde die Plattform entfernt. Die Mäuse wurden an einer zufälligen Stelle mit dem Kopf zur Beckenwand gerichtet ins Wasser gesetzt, und die Bewegungsspur und die Häufigkeit, mit der die Mäuse innerhalb von 2 min über die Plattform schwammen, wurden aufgezeichnet. Die Bewegungsspur wurde mit einem autonomen Multifunktionsrecorder für Mausbewegungen (YLS-1A, Yiyan Technology, Jinan, China) aufgezeichnet.
2.6. Nachweis der MAO-Aktivität
Die MAO-Aktivität wurde unter Verwendung eines MAO-Nachweiskits (A034, Nanjing Jiancheng Bioengineering Institute, Nanjing, China) gemessen und der Nachweis erfolgte gemäß dem Protokoll des Herstellers. Homogenat aus Gehirngewebe wurde erhalten; 500μl wurde mit 300 gemischtμl von Agent 1 und 300μl Agent 2, 3 h bei 37 Grad inkubiert und dann nacheinander mit 300μ1, von Agent 3, 3 ml von Agent 4, und Vortex für 2 min. Das Reaktionsgemisch wurde 10 min bei 3,000 U/min zentrifugiert, und die optische Dichte des Überstands wurde mit einem Spektrophotometer für ultraviolettes und sichtbares Spektrum (Lambda 25, PerkinElmer, USA) unter Verwendung von 242 nm Anregungslicht bestimmt.
2.7. Enzyme Linked Immunosorbent Assay of Neurotransmitters and ACTH and CORT
Enzyme Linked Immunosorbent Assay (ELISA) Nachweiskit für Dopamin (DA), Norepinephrin (NE) und 5-Hydroxytryptamin (5-HT) wurde von BLUE GENE, Shanghai gekauft. ELISA-Nachweiskits wurden von Qiyun Biotech, Guangzhou, gekauft.
Die Verfahren sind wie folgt: Das Experiment wurde bei Raumtemperatur durchgeführt. Beschichten Sie die Vertiefungen einer PVC-Mikrotiterplatte mit dem Capture-Antikörper bei 1–10μg/mL-Konzentration in Carbonat/Bicarbonat-Puffer (pH 9,6). Platte versiegeln und über Nacht bei 4 Grad inkubieren; Waschen Sie die Platte dreimal mit PBS/Tween und die unspezifischen Bindungsstellen werden durch Blocklösung blockiert; Waschen Sie dann die Platte dreimal mit PBS/Tween. Standards und Proben werden in Blocking Solution und 100 verdünntμ1 wird in die Vertiefung der Platte gegeben, und die Platte wird verschlossen und 1 h bei 37 Grad inkubiert. Addiere 100μl Detektionsantikörper verdünnen und die Platte 1 h bei 37 Grad inkubieren; Waschen Sie die Platte dreimal mit PBS/Tween. Füge 50 hinzuμl Entwicklungslösung färben und die Platte vom Licht fernhalten und 15 min bei Raumtemperatur inkubieren; 50μl Stopppuffer wird hinzugefügt, um die Reaktion zu stoppen. Messen Sie die optische Dichte (OD) für jeden Brunnen mit einem Mikroplattenleser, der in 30 min auf 405 nm eingestellt ist.

2.8. Statistische Analyse
Alle Daten wurden als Mittelwert ± SEM (Standardfehler des Mittelwerts) dargestellt, der signifikante Unterschied wurde durch analysiert t-Test oder einfache ANOVA, gefolgt von Duncans Multiple-Range-Test unter Verwendung von SPSS 16.0, und Unterschiede zwischen den Gruppen mitP< 0,05 wurden als statistisch signifikant angesehen.






