Wirkungen des wässrigen Extrakts von Cistanche Tubulosa auf die Darmmikrobiota von Mäusen mit Darmerkrankungen

Kontakt: Audrey Hu WhatsApp/hp: 0086 13880143964 E-Mail:audrey.hu@wecistanche.com

Störungen der Darmmikrobiota sind mit vielen Krankheiten verbunden. wäßrigExtraktausCistanche tubulosa(CT), eine traditionelle chinesische Kräuterformel, soll eine Rolle beim Schutz des menschlichen Darms spielen. Über seine Auswirkungen auf die Darmmikrobiota ist jedoch wenig bekannt. *Die vorliegende Studie wurde durchgeführt, um festzustellen, ob das CT wässrig istExtraktkann das Darmmikrobiom bei Mäusen mit Darmerkrankungen modulieren. Wir fanden heraus, dass die geschädigte Darmmorphologie, die aus der Behandlung mit Cefixim resultierte, unter Verwendung von gerettet werden konnteCTwässriger Extrakt. *e Vergleich der mikrobiellen Diversität zwischen Mäusen, die damit behandelt wurdenCTExtrakt- und Kontrollmäuse wiesen auch darauf hin, dass die Störung in der Mikrobiom-Gemeinschaft der Modellgruppen durch Behandlung mit hohen und mittleren Konzentrationen wiederhergestellt werden konnteCTwässriger Extrakt. Die Behandlung mit Cefixim führte zu einer signifikanten Abnahme der Milchsäurebakterien; jedoch die Ergänzung derCTwässriger Extrakt stellte das Wachstum dieser Milchsäurebakterien wieder her. Außerdem ist der CT wässrigExtraktwar in der Lage, die durch Cefixim induzierten dramatischen Veränderungen in den Stoffwechselwegen des Darmmikrobioms abzumildern. Diese Ergebnisse lieferten einen Einblick in die vorteilhaften Wirkungen des wässrigen CT-Extrakts auf die Darmmikrobiota und lieferten auch eine wichtige Referenz für die Entwicklung verwandter Arzneimittel in der Zukunft.

cistanche's Anti-Aging-Funktion

1. Einleitung

Darmmikroorganismen besiedeln hauptsächlich das Darmlumen und die Schleimhautschicht und tauschen sich durch Stoff- und Energieaustausch, Umwandlung und andere Prozesse mit dem Wirt aus [1].DasSie sind Signalknotenpunkte, die Umweltbotschaften, wie Ernährung, mit genetischen und Immunsignalen integrieren und folglich den Stoffwechsel, die Immunität, das Nervensystem und die Reaktion auf Infektionen des Wirts beeinflussen [2]. Normalerweise besteht ein dynamisches Gleichgewicht zwischen der Darmflora und den Wirten; Darmdysbiose kann jedoch zu Veränderungen im Gesundheits-/Krankheitsgleichgewicht, Immunstörungen und einer Vielzahl von Krankheiten führen [3]. Moderate Veränderungen der Darmmikrobiota sind für den Wirt akzeptabel; Dies kann jedoch immer noch Möglichkeiten bieten, die Veränderungen anderer erschwerender Faktoren wie Bakteriophagen, Bakteriozine und oxidativen Stress zu verstärken [4]. Frühere Studien haben gezeigt, dass der Ethanolextrakt vonCistanche tubulosa(CT), eine traditionelle chinesische Kräuterformel, kann die mikrobielle Zusammensetzung des Darms bei Ratten regulieren [5], und die Gesamtglykoside von CT regulieren die gestörte Darmmikrobiota [6]. Cistanche-Arten, die hauptsächlich an den Wurzeln von Tamarix-Arten parasitieren, werden auch als „Ginseng der Wüste“ bezeichnet und sind ein Tonikum, das aus den Stängeln von Cistanchedeserticola (CD) und Cistanche bestehtCistanche Tubulus(CT) wird als pflanzliches Heilmittel verwendet [7].DasEs wurde festgestellt, dass die wichtigsten chemischen Komponenten von CT-Phenylethanolglykosiden (PHGs), die antioxidative Substanzen sind [8, 9], die Fortpflanzungsfunktion verbessern [10], die hepatische Sternzellenaktivierung unterdrücken, die Leitung von Signalwegen in TGF- 1/SMAD blockieren [ 11] und verhindern Rinderserumalbumin-induzierte Leberfibrose bei Ratten [12]. Unter mehr als 100 Komponenten in CT ist auch Polysaccharid eine der wichtigen Substanzen mit reichlich Gehalt [13, 14]. Frühere Studien haben gezeigt, dass C. deserticola-Polysaccharide die Melanogenese in Melanozyten induzieren, oxidativen Stress reduzieren [15], kognitive Dysfunktionen lindern, indem sie antioxidative und entzündungshemmende Prozesse bei Ratten regulieren [16], PC12-Zellen vor OGD/RP-induzierten Verletzungen schützen [17] , verbessern die Echinacosid-Absorption in vivo und beeinflussen die Darmmikrobiota [18]. Probiotika sind lebende, nicht pathogene Mikroorganismen, die gesundheitliche Vorteile haben und das mikrobielle Gleichgewicht im Gastrointestinaltrakt verleihen, wenn sie in angemessenen Mengen verabreicht werden [19].Dasy kann unspezifische zelluläre Immunantworten verstärken, die durch die Aktivierung von Makrophagen, natürlichen Killerzellen (NK) und antigenspezifischen zytotoxischen T-Lymphozyten und die Freisetzung verschiedener Zytokine in stammspezifischer und dosisabhängiger Weise gekennzeichnet sind [20]. Probiotische Stämme verbessern die Eigenschaften des Darmepithels durch TJ-Modulation, und es wurde gezeigt, dass spezifische probiotische Stämme die Muzinexpression regulieren, wodurch sie die Eigenschaften der Schleimschicht beeinflussen und indirekt das Immunsystem des Darms regulieren [21]. Stämme von Milchsäurebakterien (LAB) und Bifidobacterium sind wichtige Probiotika, die in vielen Bereichen eingesetzt wurden [22–26].ThDie Vorteile für die Gesundheit sind zahlreich, wobei ihre antioxidative Kapazität ein wichtiger Faktor für ihre gesundheitsbezogenen Funktionen ist[27]. Probiotika können Metallionen chelatieren, um sie daran zu hindern, die Oxidation zu katalysieren [28, 29]; sie können auch die Expression antioxidativer Enzyme erhöhen [30, 31], verschiedene Metaboliten mit antioxidativer Aktivität produzieren [32, 33], antioxidative Signalwege vermitteln [34–36] und die Enzyme regulieren, die reaktive Sauerstoffspezies (ROS) und die Darmreaktion produzieren Mikroorganismen gegenüber oxidativem Stress[37]. Eine kürzlich durchgeführte Studie zeigte, dass die Polysaccharide von CD das Wachstum einiger Milchsäurebakterien stimulieren könnten, was der menschlichen Gesundheit zugute kommen könnte [38]. Der Gehalt an Polysacchariden in CD unterscheidet sich jedoch von dem in CT [7, 39], und dieser Unterschied kann zu unterschiedlichen Wirkungen auf Darmmikroorganismen führen. Obwohl CD-Polysaccharide oxidativen Stress reduzieren können, indem sie den NRF2/HO-1-Weg aktivieren [15], können sich die Wirkungen eines einzelnen Polysaccharids von der Gesamtwirkung mehrerer Zusammensetzungen bei CT unterscheiden.ThFür uns ist es notwendig, die Wirkung von wässrigen CT-Extrakten auf Darmmikroorganismen genau zu definieren. Darüber hinaus können PHGs auch oxidativem Stress widerstehen [40] und Lipopolysaccharid-vermittelte Entzündungsreaktionen unterdrücken, indem sie den Keap1/Nrf2/HO-1-Weg aktivieren [41].DasDaher ist die Bestimmung der Wirkung des wässrigen CT-Extrakts von großem Wert. Darüber hinaus deuten die Wirkungen bestimmter Inhaltsstoffe des wässrigen CD-Extrakts auf oxidativen Stress und die Darmflora darauf hin, dass die Resistenz gegen oxidativen Stress mit Veränderungen der Darmflora korrelieren könnte CWässriger Extrakt auf die Darmmikrobiota von Mäusen mit Störungen der Darmflora. Diese Ergebnisse werden wertvolle Informationen über die möglichen Mechanismen liefern, durch die CT die Darmflora verändert und dem Darm Resistenz gegen oxidativen Stress verleiht.

2. Materialien und Methoden

2.1. Versuchstiere.

Insgesamt 18 männliche C57BL/6J-Mäuse der SPF-Klasse mit einem Gewicht von 18–22 g wurden vom Experimental Animal Center der Xinjiang Medical University mit der Lizenznummer SCXK (neu) 2018-0003 erworben.DasSie wurden in Käfigen unter standardisierten Bedingungen gehalten: 12 h Hell/Dunkel-Photoperiode, Temperatur 23 ± 2 Grad und Feuchtigkeit 55 ± 5 Prozent.DasDie Tiere wurden mit handelsüblichem Futter (51 % stickstofffreier Extrakt, 25 % Rohprotein, 4,6 % Rohfett, 6,5 % Rohasche, 4,0 % Rohfaser und 8,9 % Feuchtigkeit) und Leitungswasser gefüttert.DasDie Tiere wurden gemäß den Empfehlungen behandelt, die im Leitfaden für die Pflege und Verwendung von Labortieren der National Institutes of Health beschrieben sind.

2.2. Extraktion des wässrigen Extrakts.

Getrocknete Scheiben von C.tubulosa,bereitgestellt von Hotan Dichen Pharmaceutical Biotechnology Co., Ltd., wurden zu Pulver gemahlen, und es wurden Körnchen mit Teilchengrößen zwischen 20 und 40 mesh ausgewählt.DasDie Extraktionsbedingungen waren wie folgt: Fest-Flüssig-Verhältnis von 1:19, Temperatur von 80 Grad, Mikrowellenzeit von 6 min, Ultraschallzeit von 16 min, Mikrowellenleistung von 400 W und Ultraschallleistung von 400 W.DasDie Gehalte der Hauptkomponenten des wässrigen Extrakts wurden durch HPLC (Agilent 1260 Infinity II, Kalifornien, USA) gemessen. Kurz gesagt wurden die Standardsubstanzen Echinacosid (0,2 mg/ml) und Acteosid (0,2 mg/ml) in 50-prozentigem Methanol gelöst, um als Referenzsubstanzlösung zu dienen.Dasn, 1 g des wßrigen Extrakts wurde in 100 ml 50-prozentigem Methanol gelöst und 30 min stehengelassen.DasExtraktlösung wurde mit Ultraschall bei 250 W und 35 kHz für 10 min behandelt und anschließend bei 12,000 rpm/min zentrifugiert.DasDer Überstand wurde durch eine mikroporöse {{0}},45-μm-Filtermembran filtriert. Die Referenzsubstanzlösung und das Filtrat wurden dann durch HPLC unter folgenden Bedingungen detektiert: Octadecylsilan-gebundenes Kieselgel als Füllstoff, Methanol als Laufmittel A und 0,1 Prozent Ameisensäure als Laufmittel B.Dasdie Temperatur der Säule wurde auf 30 Grad eingestellt, die Detektionswellenlänge wurde auf 330 nm eingestellt und das Injektionsvolumen war 10 &mgr;l.

2.3. Experimente.

Nach einer Woche Anpassung wurden die 18 Mäuse nach dem Zufallsprinzip in sechs Gruppen eingeteilt: A (normal mit zugesetztem wässrigem CT-Extrakt in mittlerer Dosis), B (normal ohne wässrigen CT-Extrakt), C (Modell ohne wässrigen Extrakt), D (Modell mit hoch- dosierter wässriger CT-Extrakt hinzugefügt), E (Modell mit wässrigem CT-Extrakt in mittlerer Dosis hinzugefügt) und F (Modell mit wässrigem CT-Extrakt in niedriger Dosis hinzugefügt).DasGruppen wurden wie folgt behandelt: die Normalgruppe wurde mit normaler Kochsalzlösung getränkt, die Modellgruppe wurde mit Cefixim (30 mg/kg, Shiyao Group OuyiPharmaceutical Co., Ltd., Shijiazhuang, China) und normaler Kochsalzlösung getränkt, die hochdosierte Gruppe wurde getränkt mit Cefixim und 221,14 mg/kg des wässrigen CT-Extrakts, die Gruppe mit mittlerer Dosis wurde mit Cefixim und 165,54 mg/kg des wässrigen Extrakts getränkt, und die Gruppe mit niedriger Dosis wurde mit Cefixim und 110,57 mg/kg des wässrigen Extrakts getränkt.DasEine Gruppe wurde mit 165,54 mg/kg wässrigem Extrakt getränkt und es wurde kein Cefixim zugegeben. Cefixim wurde täglich um 12:00 h verabreicht, und andere Substanzen wurden täglich um 15:00 h verabreicht. Während der Experimente wurden die C-, D-, E- und F-Gruppen im Modellzustand von Darmerkrankungen gehalten.DasDer Kot wurde alle sieben Tage auf einem sterilen Tisch gesammelt und bei –20 Grad gelagert.

2.4. Histopathologische Beobachtung des Dickdarms von Mäusen.

Am Ende des Experiments wurden die Mäuse durch zervikale Dislokation getötet, und ihr Dickdarminhalt wurde auf einem sterilen, bedienbaren Tisch gesammelt und bei –80 Grad gelagert; Gleichzeitig wurden Dickdarmgewebeproben in 10 % neutralem Formalin fixiert.Dasn, die Proben wurden unter Verwendung einer Gradientenkonzentration von Ethanol dehydriert, unter Verwendung von Xylol hyalinisiert, in Paraffin eingebettet, geschnitten und mit Hämatoxylin-Eosin gefärbt. Morphologische Veränderungen in der Dickdarmschleimhaut wurden beobachtet und unter Verwendung eines optischen Mikroskops verglichen. Zottenlänge und Kryptentiefe im Dickdarm wurden gemessen, und das Verhältnis von Zottenlänge zu Kryptentiefe (V/C-Wert) wurde berechnet (51).

2.5. DNA-Extraktion und Bibliotheksaufbau.

DNA wurde aus den Fäkalien unter Verwendung des EZNA®Soil DNA Kits (Omega Bio-Tek, Norcross, GA, USA) gemäß dem Protokoll des Herstellers extrahiert. Die DNA-Qualität wurde mit einem Fluorometer (QuantiFluor™–ST, Promega Corporation, USA) bestimmt. Gepaarte Primer in der V3-V4-Region von 16s-rDNA wurden entwickelt, um die Region zu amplifizieren und 466-bp-DNA-Fragmente zu produzieren.DasVorwärtsprimer war 341F (-5-CCTACGGGNGGCWGCAG-3-), und der Rückwärtsprimer war 806R (-5-GGACTACHVGGGTATCTAAT-3-). Jedes PCR-Volumen betrug 25 μl und enthielt 2,5 μl 10 × PCR-Puffer, 2 μl dNTPs, 1 μl jedes Primers und 20–30 ng Matrizen-DNA. Dann wurden die indizierten Adapter an das Ende der Amplikons angefügt, um Sequenzierungsbibliotheken zu erzeugen. Die Bibliotheken wurden mit einem QuantiFluor™-Fluorometer validiert und auf 10 nmol quantifiziert.

2.6. 16s-rRNA-Gensequenzierung und mikrobielle Gemeinschaftsanalyse.

Die Illumina-Plattform (Illumina MiSeq) wurde verwendet, um 2 × 250 bp Paired-End-Daten zu erhalten. Operative taxonomische Einheiten (OTUs) wurden unter Verwendung der Uparse-Software durch Standard-Clustering mit 97 Prozent Ähnlichkeit erhalten. Der naive Bayesian-Zuweisungsalgorithmus des RDP-Klassifikators wurde verwendet, um die OTUs mit der Greengene-Datenbankversion 13.5 abzugleichen und eine Artannotation durchzuführen. Die Alpha-Diversität von Darmmikrobiota wurde unter Verwendung der Shannon- und Simpson-Indizes berechnet, und die Unterschiede zwischen den Gruppen wurden durch lineare Diskriminanzanalyse Effect Size (LEfSe) analysiert. Die Beta-Diversität wurde durch Hauptkoordinatenanalyse (PCoA) von Bray-Curtis-Unähnlichkeiten analysiert. PICRUSt2 wurde verwendet, um die mikrobielle Stoffwechselkapazität des Darmmikrobioms abzuschätzen [42].

2.7. Statistische Datenanalyse.

SPSS 20 wurde für die einfache ANOVA verwendet, und die experimentellen Daten wurden als X ± S ausgedrückt; X bezeichnet den Mittelwert und S bezeichnet die Standardabweichung.

3. Ergebnisse

3.1. Die Wirkung des wässrigen CT-Extrakts auf die Dickdarmmorphologie.

Die repräsentativen Verbindungen (Echinacosid und Acteosid) und ihre Konzentrationen des CT-Extrakts wurden durch HPLC validiert (Abbildung S1). Um die Wirkung des wässrigen Extrakts auf den Darm zu bestimmen, untersuchten wir die Länge der Kolonzotten und die Tiefe der Vertiefungen nach der Behandlung mit dem wässrigen Extrakt.DasDie Dickdarmzotten in den Normal- und Hochdosisgruppen (A, B und D) waren länger und fingerartig, während die Dickdarmzotten in den Modell- und Niedrigdosisgruppen (C und F) kurz waren und die Spitzen der Dickdarmzotten gebrochen waren ( Abbildung 1). Demgemäß erhöhte hochdosierter wässriger CT-Extrakt die Länge der Dickdarmzotten und verringerte die Vertiefungstiefe bei Mäusen mit Darmerkrankungen im Vergleich zu Mäusen in der Modellgruppe signifikant (P < 0.01).="" im="" gegensatz="" dazu="" war="" die="" vertiefungstiefe="" zwischen="" der="" hochdosisgruppe="" und="" der="" normalgruppe="" nicht="" signifikant="" unterschiedlich="" (p=""> 0,05) (Tabelle S1). Diese Ergebnisse zeigten, dass die hohe Dosis des wässrigen CT-Extrakts die Morphologie im Dickdarm von Mäusen bei Darmerkrankungen verbessern kann.

3.2. Die Wirkung des wässrigen CT-Extrakts auf die Diversität der Darmmikrobiota.

Wir führten eine 16s-rRNA-Gensequenzierung durch, um die mögliche Ursache der morphologischen Veränderungen im Dickdarm zu untersuchen und die Veränderungen der Darmmikrobiota nach der Behandlung mit dem wässrigen CT-Extrakt zu untersuchen. Aus den Rohdaten wurden durchschnittlich 100.553 effektive Tags im Bereich von 77.734 bis 125.144 erhalten (Tabelle S2).DasSetags wurden in 4932 OTUs geclustert (Tabelle S3). Anhand dieser OTUs haben wir dann die Diversität der Darmmikrobiota analysiert. Die Shannon- und Simpson-Indizes zeigten keinen Unterschied zwischen der A-Gruppe (normal mit dem wässrigen CT-Extrakt) und der B-Gruppe (normal ohne den wässrigen CT-Extrakt) (Abbildung 2(a)). Dies deutete darauf hin, dass der wässrige CT-Extrakt bei den Mäusen ohne Cefixim-Behandlung möglicherweise keine zusätzlichen vorteilhaften oder schädlichen Wirkungen auf die Vielfalt der Darmmikrobiota hatte. Allerdings zeigte die -Diversität in der Modellgruppe (C) im Vergleich zu der in den Normalgruppen einen abnehmenden Trend. Die mit hoch- und mitteldosierten wässrigen CT-Extrakten behandelten Mäuse zeigten Anzeichen einer Wiederherstellung der Diversität, während ein solches Phänomen bei Mäusen, die mit dem wässrigen CT-Extrakt in niedriger Dosis behandelt wurden, nicht beobachtet wurde ( 2(a) ). In der Zwischenzeit zeigte die PCoA, dass die Normalgruppen (A und B) und die Gruppen mit Darmerkrankungen, denen hochdosierte (D) und mitteldosierte (E) CTawässrige Extrakte verabreicht wurden, tendenziell kürzere Abstände zwischen den Proben aufwiesen als diejenigen in der Modellgruppe und in der Niedrigdosis CWasserextrakt-Ergänzungsgruppe (F) (Abbildung 2(b)). Diese Ergebnisse deuteten darauf hin, dass der wässrige CT-Extrakt dazu beitragen könnte, die Diversität der Darmmikrobiota bei Mäusen bei Darmerkrankungen zu verbessern.

3.3. Änderungen in der Zusammensetzung der Darmmikrobiota, die mit dem wässrigen CT-Extrakt behandelt wurden.

* Die Zusammensetzungsprofile der Mikrobiota wurden zwischen verschiedenen Gruppen verglichen. Auf der Stammebene war die relative Häufigkeit von Proteobakterien in der Modellgruppe höher als in den anderen Gruppen (Abbildung 3(a)). * Die Zunahme von Proteobakterien legte nahe, dass das Mikrobiom von Modellmäusen durch Cefixim verändert wurde und dass der wässrige CT-Extrakt der Darmmikrobiota zugute kommen könnte, da die erhöhte Prävalenz von Proteobakterien ein zentraler Marker für eine gestörte Darmflora ist [43–45]. Außerdem nahm auf Gattungsebene die relative Häufigkeit von Lactobacillus in der Modellgruppe im Vergleich zu der in den Normal- und Hochdosisgruppen ab; sie stieg jedoch im Vergleich zu der Gruppe mit mittlerer und niedriger Dosis (Abbildung 3(b)). Diese Ergebnisse deuteten darauf hin, dass der hochdosierte CTaqueous-Extrakt das Wachstum einiger Bakterien der Gattung Lactobacillus fördern könnte. Die unterschiedliche Mikrobiota zwischen den untersuchten Gruppen wurde gemäß der LEfSe-Analyse weiter bestimmt. *eine Analyse zeigte, dass nach der Behandlung mit Cefixim die relative Häufigkeit von Turicibacter, Alphaproteobacteria, Acidobacteria, Betaproteobacteriales und Chloroflexi signifikant zunahm, während die relative Häufigkeit von Lactobacillus, Eubacterium_nodatum_-Gruppe, Pseudonocardinals und Christensenellaceae_R-7_-Gruppe signifikant verringert im Vergleich zu denen in der normalen Gruppe (Abbildung 4(a)). Bemerkenswerterweise war die relative Häufigkeit von Muribaculaceae, Lactobacillus, Kineosporiaceae, der Eubacterium nodatum-Gruppe und Pedobacter signifikant höher als in der Modellgruppe, wenn die Modellgruppe mit dem hochdosierten wässrigen CT-Extrakt ergänzt wurde. Unterdessen nahmen die relativen Häufigkeiten von Rhodobacter, Ruminococcaceae UCG_013, Roseburia, Ruminiclostridium_9 und Candidatus Stoquefichus im Vergleich zu denen in der Modellgruppe signifikant ab (Abbildung 4(b)).

3.4. Funktionen der Darmmikrobiota im Zusammenhang mit der Behandlung mit dem wässrigen CT-Extrakt.

Wir verwendeten die PICRUSt2-Software, um die Stoffwechselwege der Darmmikrobiota vorherzusagen, und die Normalgruppe wurde als Referenz verwendet, um die Veränderungen in anderen Gruppen zu analysieren. Unter der Behandlung mit Cefixim stieg die relative Häufigkeit des Abbaus von Ethylbenzol, die Biosynthese von nichtribosomalen Peptiden der Siderophorgruppe und der Metabolismus von Xenobiotika durch Cytochrom-P450-Wege; nach der Behandlung mit hoch- und mitteldosierten wässrigen CT-Extrakten kehrte ihre relative Häufigkeit auf normale Werte zurück. Unterdessen nahm die relative Häufigkeit des Stoffwechselwegs der Cyanoaminosäuren unter der Behandlung mit Cefixim ab; sie stieg jedoch nach der Behandlung mit dem hochdosierten wässrigen CT-Extrakt an. Darüber hinaus waren im Allgemeinen die Veränderungen in verschiedenen Stoffwechselwegen nach der Behandlung mit Cefixim im Vergleich zu denen in der Normalgruppe signifikant; Die Zugabe des CTaqueous-Extrakts konnte jedoch übermäßige Veränderungen verhindern (Abbildung 5).

4. Diskussion

Die Dickdarmmorphologie kann durch Wachstum, Verdauung und Absorption, Immunregulation und Reparatur von Darmverletzungen verändert werden [46–50]. * Das V/C-Verhältnis kann den Verdauungsstatus des Darmtrakts umfassend widerspiegeln und ist direkt proportional zur Verdauungs- und Absorptionskapazität des Darmtrakts [51, 52]. In der vorliegenden Studie zeigten die Zotten- und Aussparungsbiopsie und statistische Daten, dass die hochdosierten wässrigenExtraktkonnte teilweise die fehlerhafte Morphologie innerhalb des Dickdarms verbessern. Um zu untersuchen, wie die wässrigeExtraktdie Darmmorphologie verändert und die Darmmikrobiota beeinflusst, haben wir von Veränderungen in der Darmflora zurückgearbeitet. Wir fanden heraus, dass die relative Häufigkeit von Proteobakterien, einem Hub-Marker für eine gestörte Darmflora, unter der Behandlung mit Cefixim im Vergleich zu der ohne Cefixim-Behandlung zunahm.* Die relative Häufigkeit anderer Hub-Marker, Bacteroidetes und Firmicutes, hatte keine signifikanten Veränderungen, obwohl diese Gruppen vorherrschend sind der menschliche Darm; Es wurde festgestellt, dass das Verhältnis von Bacteroides/Firmicutes bei fettleibigen Personen im Vergleich zu schlanken Personen verringert war, und dieses Verhältnis stieg bei Gewichtsverlust bei Personen mit zwei Arten von kalorienarmer Ernährung [38, 41, 43–45, 48, 53, 54]. Unterdessen war Turicibacter, das mit Fettleibigkeit assoziiert wird [55], in der Modellgruppe im Vergleich zu den anderen Gruppen signifikant erhöht. Bemerkenswerterweise wurde die Diversität der Darmmikrobiota in den Modellmäusen durch die Zugabe des CTaqueous-Extrakts verbessert. Wir haben einige spezifische Darmbakterien bei Mäusen unter verschiedenen Behandlungen festgestellt; Beispielsweise waren Lactobacillus und Muribaculaceae die beiden wichtigsten Bakteriengattungen, die in der Gruppe, die mit dem hochdosierten wässrigen CT-Extrakt behandelt wurde, im Vergleich zu denen in der Modellgruppe zunahmen (Abbildung 4). Jüngste Studien haben gezeigt, dass die Polysaccharide von wässrigen CT-Extrakten signifikante antioxidative Aktivitäten in vitro besitzen [56] und das Wachstum einiger Milchsäurebakterien fördern können, was der Wirtsgesundheit zugute kommen könnte [43]. Parallel dazu sind Muribaculaceae probiotische Organismen, die mit Langlebigkeit verbunden sind [57]. Diese legten nahe, dass der Mechanismus, durch den der wässrige CT-Extrakt die Darmmikrobiota verbessert, die Förderung oder der Schutz des Wachstums probiotischer Organismen sein könnte. Ein weiteres erwähnenswertes Bakterium war das Bakterium YE57. Obwohl der hochdosierte CTaqueous-Extrakt die relative Häufigkeit des Bakteriums YE57 in der vorliegenden Studie förderte (Abbildung 4), haben frühere Studien festgestellt, dass seine Häufigkeit im normalen Darm höher war als in dem Darm, der mit hochkonzentrierten Kräuterteerückständen behandelt wurde [58] und dass seine Häufigkeit nach der Intervention mit Bacillus licheniformis in Kombination mit XOS (Xylooligosaccharide) reduziert wurde [59]. * uns, die Rolle dieses Bakteriums in der Darmmikrobiota verdient weitere Untersuchungen. Außerdem könnte die relativ kleine Probenzahl in dieser Studie zu einem Maß an falsch positiven und falsch negativen Ergebnissen führen, und zukünftige Studien an größeren Proben werden vorgeschlagen, um die identifizierten bakteriellen Marker zu validieren.

CT wässrigExtraktDie Zusammensetzung könnte wegen ihrer Auswirkungen auf die Zusammensetzung und funktionelle Veränderungen in der Darmmikrobiota von Mäusen mit Darmerkrankungen wichtig sein. PHGs sind häufige aktive Komponenten, die bei CD und CT gefunden werden, und Echinacosid wurde als das wichtigste PHG bei CT identifiziert [60]. In den letzten Jahrzehnten wurde gezeigt, dass Echinacosid viele pharmakologische Aktivitäten besitzt, wie z. B. Anti-Aging- und neuroprotektive Wirkungen, Verbesserung der Herzfunktion, Verringerung von Hyperlipidämie und Hyperglykämie und Prävention von Fettleibigkeits-induziertem Diabetes und metabolischem Syndrom [53, 61–65]. Tatsächlich entdeckten wir Veränderungen in den Stoffwechselwegen der Darmmikrobiota.* Die Behandlung mit Cefixim führte zu einer Anreicherung von Bakterien im Zusammenhang mit dem Abbau von Ethylbenzol und der Biosynthese von nichtribosomalen Peptiden der Siderophorgruppe, während die Behandlungen mit dem hoch- und mitteldosierten CT wässrig warenExtraktkönnte diese Veränderungen lindern, was darauf hindeutet, dass dieser Extrakt die mit diesen Funktionen verbundene Bakteriengemeinschaft moderierte. Darüber hinaus zeigten die erhöhte bakterielle Anreicherung im Zusammenhang mit dem Cyanoaminosäure-Stoffwechselweg unter der Behandlung mit dem hochdosierten wässrigen Extrakt und seine verringerte Anreicherung in Modellmäusen, dass der wässrige CT-Extrakt den Metabolismus von Cyanoaminosäure fördern kann. * Die Veränderungen in relevanten Metaboliten könnten diesem wässrigen Extrakt pharmakologische Aktivitäten verleihen.

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