Darmpermeabilität und Depression bei Patienten mit entzündlicher DarmerkrankungⅠ

Zusammenfassung: Depression ist ein globales Gesundheitsproblem, das eine frühzeitige und genaue Diagnose erfordert, um einen schnellen Zugang zu einer geeigneten Behandlung zu gewährleisten. In jüngster Zeit konzentrierte man sich auf die Analyse der Gehirn-Darm-Mikrobiota-Achse bei mehreren psychopathologischen Pfaden. Die Darmbarriere spielt eine Schlüsselrolle und Funktionsstörungen auf dieser Ebene haben Auswirkungen auf die psychische Gesundheit. Ziel der vorliegenden Studie war es, die Rolle von Darmpermeabilitäts-Biomarkern, d. h. Calprotectin, Zonulin, Lipopolysaccharid-bindendes Protein (LBP) und intestinales Fettsäure-bindendes Protein (I-FAB), bei Depressionen bei Patienten mit entzündlichen Darmerkrankungen (IBD) zu untersuchen ).

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Dies ist die erste Studie dieser Art, die in Rumänien, Osteuropa, durchgeführt wird, mit Schwerpunkt auf Patienten mit Morbus Crohn und Colitis ulcerosa. Die identifizierten Korrelationen zwischen Depression und Calprotectin sowie Depression und LBP haben das Potenzial, Aufschluss über den Prozess der schnellen Diagnose von Depressionen mithilfe von Biomarkern zu geben. Da Depressionen mit einer Verschlechterung der Lebensqualität stationärer Patienten mit IBD einhergehen, muss der Zugang zu geeigneten Behandlungen dringend erforderlich sein.

1. Einleitung

Depression ist eine individuelle, berufliche und soziale Behinderung, die mit somatischen Erkrankungen einhergeht [1,2] und mit einem hohen Sterblichkeitsrisiko durch Suizid [3] verbunden ist. Der Zugang zu Spezialisten, eine korrekte Diagnose und eine wirksame Heilung sind jedoch begrenzt [4]. Eine frühzeitige und genaue Diagnose [5,6] sowie eine personalisierte Behandlungsauswahl [7] sind notwendig, um das Leiden und die finanzielle Belastung der Krankheit zu verringern [3]. Gemäß den diagnostischen Kriterien im Diagnostic and Statistical Manual of MentalDisorders (DSM V) [8] ist Depression eine affektive Störung mit einer heterogenen Symptomgruppe. Für die Diagnose ist das Vorliegen von fünf der neun folgenden Symptome erforderlich: depressive Verstimmung, Lustlosigkeit, Schlaf- und Appetitlosigkeit, niedriges Energieniveau, kognitive Veränderungen, Schuld- und Schuldgefühle sowie Selbstmordgedanken. Bisher das genaue Pathophysiologische Mechanismen für den Nutzen einer wirksamen Behandlung sind nicht bekannt. Mehrere Mechanismen wurden in Frage gestellt, die Theorien befinden sich jedoch noch in der Entwicklung.

So wurden Funktionsstörungen auf der Hypothalamus-Hypophysen-Achse, Neurotransmittern, dem Vagusnerv, kurzkettigen Fettsäuremetaboliten, Tryptophan, Entzündungsfaktoren und der Gehirn-Darm-Mikrobiota-Achse untersucht [9–12]. Es ist erwiesen, dass stressbedingte Störungen nicht nur zu Veränderungen in der Zusammensetzung der Darmmikrobiota über die Hypothalamus-Hypophysen-Nebennieren-Achse führen, sondern auch den Darm beeinflussen

Zentralnervensystem durch Vagusstimulation, Darmpermeabilität und die Freisetzung entzündlicher und entzündungshemmender Verbindungen sowie Veränderungen der zirkulierenden Stoffe im Blut [13]. In den letzten zwei Jahrzehnten hat die Untersuchung der Beteiligung der Gehirn-Darm-Mikrobiota-Achse an psychischen Störungen an Dynamik gewonnen [9,14]. In diesem Zusammenhang hat die Rolle des Leaky-Gut-Syndroms mehr Aufmerksamkeit erhalten [15,16].

Die Darmbarriere spielt die Hauptrolle bei der Verdauung und Absorption von Nährstoffen. Zweitens kontrolliert sie streng den Transport von Antigenen aus dem Lumen in die Submukosa und hält das Gleichgewicht zwischen Toleranz und der Immunantwort, die Entzündungen verursacht, aufrecht. Die Integrität der Darmbarriere kann durch Ernährung, Dysbiose der Darmmikrobiota oder andere Faktoren beeinträchtigt werden. Diese können durch Translokation mikrobieller Antigene und Metaboliten eine Immunaktivierung bewirken. Derzeit wurden Serum-Zonulin, intestinales Fettsäure-bindendes Protein (IFABP/FABP2) und LBP sowie fäkales Albumin, Calprotectin und Zonulin als intestinale Permeabilität analysiert Marker [17]. Calprotectin ist ein Protein, das Kalzium und Zink bindet und ursprünglich aus Leukozyten isoliert wurde. Es eignet sich zur Unterscheidung einer entzündlichen Darmerkrankung vom Reizdarmsyndrom. Es spielt eine wichtige Rolle bei Entzündungen und gilt als Akute-Phase-Protein [18 ].

Normalwerte liegen zwischen 10 und 50 oder 60 (ug/g). Werte über 200 (ug/g) können auf eine entzündliche Erkrankung hinweisen, und Werte über 500–600 (ug/g) weisen mit Sicherheit auf das Vorliegen einer Darmerkrankung hin [19]. Lipopolysaccharid-bindendes Protein (LBP) ist ein essentieller Lipidbestandteil der äußeren Membran von gramnegativen Bakterien [20], die eine Endotoxämie verursachen [21]. LBP wird von Hepatozyten, Fettgewebe und Darmzellen produziert und fungiert als Akutphase-I-Protein und spielt eine wichtige Rolle bei der Immunantwort [22]. LBP liegt im Serum in Konzentrationen von 5–15 mg/ml vor und steigt während der Akute-Phase-Reaktion um das 10- bis 50-fache an. Die Barrierefunktion wird durch Zonulin aufrechterhalten, das als einziger physiologischer Modulator enger intrazellulärer Verbindungen (TJs) bekannt ist [15,23, 24]. Zonulin öffnet das TJ reversibel und wirkt auf den Protease-aktivierten Rezeptor 2, der sich im intrazellulären Raum des Verbindungskomplexes befindet [25]. Der mittlere Wert von Zonulin liegt bei 34 ng/ml [26].

Das intestinale Fettsäure-bindende Protein (I-FABP/FABP2) ist eines der neun verschiedenen identifizierten FABPs, die zu einer Superfamilie von Proteinen gehören, die Lipide binden. Die Hauptaufgabe liegt im intrazellulären Transport und der Regulierung der Fettsäureaufnahme [27]. Bei einer Schädigung der epithelialen Darmbarriere wird I-FABP in den Kreislauf freigesetzt und seine Plasmakonzentration steigt an [28]. Der Schwellenwert für I-FAPB liegt bei 2 ng/ml. In diesem Zusammenhang wollten wir die Rolle von Darmpermeabilitäts-Biomarkern bei Depressionen bei Patienten mit entzündlichen Darmerkrankungen (IBD) untersuchen, indem wir (i) die Beziehung zwischen Calprotectin, Zonulin und LBP untersuchten , IFABP/FABP2 und Depression und durch(ii) Bewertung des Einflusses von Depressionen auf die Lebensqualität.

2. Materialien und Methoden

2.1. Studiengruppe

Die erste Gruppe umfasste 60 Patienten aus der Gastroenterologie-Klinik des Constanta County Clinical Hospital zwischen April und Juni 2021. Die Einschlusskriterien waren eine IBD-Diagnose, ein Alter von 18 Jahren und älter, Lese- und Schreibkenntnisse und die Zustimmung zur Teilnahme an der Studie. Die Ausschlusskriterien waren Verweigerung der Einwilligung, schwere Depression oder andere schwere psychische Störungen, aufgrund derer sie an den spezialisierten psychiatrischen Dienst verwiesen wurden. Nach informierter Einwilligung wurden die Patienten von einem Forscher telefonisch kontaktiert, um einen soziodemografischen Fragebogen zu Depressionen und einen Fragebogen zur Qualität von Depressionen auszufüllen Leben.In die Studie wurden 30 Patienten einbezogen, die alle Phasen der Studie durchliefen.

2.2. Verwendete Fragebögen

Der Patient Health Questionnaire-9 (PHQ-9) [29] wurde bei den Teilnehmern angewendet, um das Ausmaß der Depression zu beurteilen, von der sie betroffen waren. Dieser Standardfragebogen enthält neun Punkte, die basierend auf den Symptomen, die der Patient in den letzten 14 Tagen hatte, beantwortet werden müssen. Die Werte werden wie folgt klassifiziert: 1–4 leichte Depression, 5–9 leichte Depression, 10–14 mittelschwere Depression, 15–19 mittelschwere Depression und 20–27 schwere Depression. Ebenso verwendeten wir einen Fragebogen zur Lebensqualität (EQ{{ 14}}D) [30,31] um Daten zur Lebensqualität zu sammeln. Die in diesem Tool enthaltenen Elemente sind die Mobilität des Patienten, Selbstfürsorge, Engagement bei üblichen Aktivitäten, Schmerzen oder Beschwerden sowie erlebte Angstzustände oder Depressionen. Die Items werden auf einer fünfstufigen Skala beantwortet.

2.3. Probenentnahme und Laboranalyse

Serologische Proben für Zonulin, IFABP/FABP2, LBP und Stuhlproben für Calprotectin wurden gemäß dem Protokoll für die Sammlung und den Transport potenziell infektiöser biologischer Proben entnommen. Serumproben wurden durch Venenpunktion, nüchtern und im Vacutainer mit einem Aktivatortuch gesammelt. Stuhlproben wurden aus spontan ausgeschiedenem Stuhl in Behältern ohne Trägermedium gesammelt. Das Serum wurde mit MyBioSource Kit, Inc. (San Diego, CA, USA) auf Zonulin getestet. und IFABP/FABP2 und LBPmit dem Wuhan Fine Biotech Co., Ltd. Kit (Wuhan, China). Die Proben wurden mit dem Kit der EUROIMMUN Medizinische Labordiagnostika AG auf Calprotectin getestet. Alle Tests wurden mittels Enzyme-Related Immunosorbent Test (ELISA) auf einem ADALTIS Analyzer GEN-4 und Victor X4 gemäß den Anweisungen des Kit-Herstellers durchgeführt.

Der Bereich der Normalwerte wurde vom Hersteller des Kits nur für Calprotectin wie folgt definiert: Weniger als oder gleich 50.0 mcg/g als normal, 50.1– 120,0 µg/g als Grenzwert und größer oder gleich 120,1 µg/g als positiv für eine Darmerkrankung. Für Zonulin hat der Hersteller des Reaktionskits keine unteren Nachweisgrenzen angegeben. Die untere Nachweisgrenze für das IFABP/FABP2-Kit betrug 0,156 ng/ml, 3,125 ng/ml für LBP und 3,125 ng/ml für Calprotectin. Für Zonulin, I-FABP/FABP2 und LBS/LBP hat der Hersteller des Kits keinen Bereich von Normalwerten angegeben und es wurden Werte verwendet, die von anderen Autoren in ihren Studien verwendet wurden. Das Serum wurde aus jeder Blutprobe durch Zentrifugation bei 3000 × g extrahiert 30 Minuten lang mit einer Thermo Scientific SL16R-Zentrifuge.

Alle erhaltenen Seren wurden bis zur Durchführung der Analysen bei −200 °C eingefroren aufbewahrt. Für IFABP/FABP2 und LBP wurden die Proben vor dem Test mit einem Probenverdünnungspuffer auf die Hälfte verdünnt. Die Stuhlproben wurden bis zum Testtag bei −20 °C aufbewahrt. Die Extraktion der Stuhlprobe wurde unter Verwendung eines 980-IE-Extraktionspuffers zusammen mit 20 mg Stuhl durchgeführt, 30 Sekunden lang gerührt und dann 10 Minuten lang bei 2000 × g mit der Thermo Scientific SL16R-Zentrifuge zentrifugiert. Die Verdünnung der Proben erfolgte dann mit 980 IU Probenpuffer und 20 IU Extraktionsüberstand.

Für die vier Marker wurden Mikrotiterplatten mit 96 Vertiefungen verwendet, die mit Fängerantikörpern beschichtet waren: Anti-Calprotectin-Antikörper, Anti-IFABP/FABP2-Antikörper, Anti-LBP-Antikörper oder Anti-Zonulin-Antikörper. Die Prinzipien des Tests waren die gleichen und basierten auf der enzymbezogenen immunologischen Testtechnologie (ELISA). Standardproben, Testproben und Biotin-konjugierte Nachweisantikörper wurden später in die Vertiefungen gegeben. TMB-Substrate (3,30,5,50-Tetramethylbenzidin) wurden verwendet, um die enzymatische Reaktion HRP (Meerrettichperoxidase) sichtbar zu machen. HRP katalysierte TMB, um ein blaues Produkt zu erzeugen, das sich nach Zugabe einer Säurestopplösung in Gelb änderte.

Die Dichte des gelben Flecks war proportional zur in der Platte eingefangenen Probenmenge. Die Farbintensität wurde bei 450 nm im Mikroplatten-Lesegerät gemessen und anschließend die Zielkonzentration berechnet.

2.4. Statistische Analyse

Die statistische Analyse wurde mit der IBM SPSS-Statistiksoftware Version 23 (Armonk, NY, USA: IBM Corp.) durchgeführt. Die Daten werden als Median und IQR (Interquartil) dargestelltBereich P75–P25) für kontinuierliche Variablen bei schiefen Verteilungen oder als Prozentsätze für kategoriale Variablen.

Da der Shapiro-Wilk-Normalitätstest im Fall der analysierten kontinuierlichen Variablen statistische Werte des Tests anzeigte, deren Wahrscheinlichkeit (p) niedriger als das Signifikanzniveau {{0}}.05 war, ist die Bedingung von Die Normalität wurde nicht erfüllt, mit Ausnahme der Variablen LBP und PHQ 9, für die p >=0.05. Wir hielten einen nichtparametrischen Ansatz zur Untersuchung der Korrelation zwischen den betreffenden Variablen mit der Darstellung des Rho-Korrelationskoeffizienten (ρ) nach Spearman und der damit verbundenen Wahrscheinlichkeit (p) für angemessener. Das Signifikanzniveau wurde auf 0,05 festgelegt.

Natürliches pflanzliches Arzneimittel zur Linderung von Verstopfung – Cistanche

Cistanche ist eine Gattung parasitärer Pflanzen, die zur Familie der Orobanchaceae gehört. Diese Pflanzen sind für ihre medizinischen Eigenschaften bekannt und werden seit Jahrhunderten in der Traditionellen Chinesischen Medizin (TCM) verwendet. Cistanche-Arten kommen überwiegend in Trocken- und Wüstenregionen Chinas, der Mongolei und anderen Teilen Zentralasiens vor. Cistanche-Pflanzen zeichnen sich durch ihre fleischigen, gelblichen Stängel aus und werden wegen ihrer potenziellen gesundheitlichen Vorteile sehr geschätzt. In der TCM wird angenommen, dass Cistanche tonisierende Eigenschaften hat und häufig zur Ernährung der Niere, zur Steigerung der Vitalität und zur Unterstützung der sexuellen Funktion verwendet wird. Es wird auch zur Behandlung von Problemen im Zusammenhang mit Alterung, Müdigkeit und allgemeinem Wohlbefinden eingesetzt. Obwohl Cistanche in der traditionellen Medizin schon seit langem verwendet wird, ist die wissenschaftliche Forschung zu seiner Wirksamkeit und Sicherheit noch nicht abgeschlossen und begrenzt. Es ist jedoch bekannt, dass es verschiedene bioaktive Verbindungen wie Phenylethanoidglykoside, Iridoide, Lignane und Polysaccharide enthält, die zu seiner medizinischen Wirkung beitragen können.

WecistanchesCistanche-Pulver, Cistanche-Tabletten, Cistanche-Kapseln, und andere Produkte werden mit entwickeltWüsteCistancheals Rohstoffe, die alle eine gute Wirkung bei der Linderung von Verstopfung haben. Der spezifische Mechanismus ist wie folgt: Es wird angenommen, dass Cistanche aufgrund seiner traditionellen Verwendung und bestimmter darin enthaltener Verbindungen potenzielle Vorteile bei der Linderung von Verstopfung hat. Während die wissenschaftliche Forschung speziell zur Wirkung von Cistanche bei Verstopfung begrenzt ist, wird angenommen, dass es über mehrere Mechanismen verfügt, die zu seinem Potenzial zur Linderung von Verstopfung beitragen können. Abführende Wirkung:Cistanchewird in der Traditionellen Chinesischen Medizin seit langem als Mittel gegen Verstopfung eingesetzt. Es wird angenommen, dass es eine leicht abführende Wirkung hat, die den Stuhlgang fördern und Verstopfung auslösen kann. Dieser Effekt kann auf verschiedene Verbindungen in Cistanche zurückgeführt werden, wie etwa Phenylethanoidglykoside und Polysaccharide. Befeuchtung des Darms: Basierend auf der traditionellen Verwendung wird Cistanche eine feuchtigkeitsspendende Wirkung zugeschrieben, die speziell auf den Darm abzielt. Die Förderung der Hydratation und Schmierung des Darms kann dazu beitragen, die Darmpassage weicher zu machen und die Darmpassage zu erleichtern, wodurch Verstopfung gelindert wird. Entzündungshemmende Wirkung: Verstopfung kann manchmal mit einer Entzündung im Verdauungstrakt einhergehen. Cistanche enthält bestimmte Verbindungen, darunter Phenylethanoidglykoside und Lignane, von denen angenommen wird, dass sie entzündungshemmende Eigenschaften haben. Durch die Reduzierung von Entzündungen im Darm kann es dazu beitragen, die Regelmäßigkeit des Stuhlgangs zu verbessern und Verstopfung zu lindern.