Lantana Camara-Extrakte aus ethanolischen Blättern weisen Anti-Aging-Eigenschaften bei Drosophila Melanogaster auf: Studien zur Überlebensrate und Lebensdauer

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Abstrakt

In diesem Artikel wollten wir die Anti-Aging-Aktivität des ethanolischen Blattextrakts von Lantana camara in Drosophila melanogaster untersuchen: Überleben und Langlebigkeit (Lebensdauer). L.camara-Blätter wurden gesammelt und gründlich von Sandpartikeln gewaschen, luftgetrocknet und gemahlen , und durch das Mazerationsverfahren unter Verwendung von Ethanol als Lösungsmittel extrahiert. Es wurde ein phytochemisches Screening durchgeführt. 168- Stunden LCso wurde bestimmt, indem Fruchtfliegen 7- Tage lang Konzentrationen im Bereich von 5 bis 5000 mg/10 g Nahrung ausgesetzt wurden. Es wurden 28-Tage-Überlebens- und Langlebigkeitsstudien durchgeführt, indem 5, 10 und 20 mg/10 g Nahrung von ethanolischem L.camara-Blattextrakt an 1-3 Tage alte Fruchtfliegen verabreicht wurden. Jede Konzentration wurde viermal mit jeweils 50 Fruchtfliegen wiederholt. Die Schlupfrate junger Fruchtfliegen aus Eiern, die von Fruchtfliegen gelegt wurden, denen L.camara-Blattextrakte verabreicht wurden, wurde ebenfalls durchgeführt. Die Gesamtausbeute der Extraktion wurde mit 18 % bestimmt . Die phytochemische Analyse ergab das Vorhandensein von Alkaloiden, Flavonoiden, Phenol, Steroiden, Herzglykosiden und Kohlenhydraten. Die 168--Stunden-LCso von L. camara wurde ebenfalls mit 1135 mg/10 g Nahrung bestimmt. L. camara war signifikant verlängert (P<0.05)survival rate="" and="" extended=""><0.05)d.melanogaster life="" span="" compared="" with="" control.l.camara="" significantly="" increased=""><().05) emergence="" rate="" of="" young="" fruit="" flies="" from="" eggs="" laid="" by="" fruit="" flies="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="" leaves="" extracts.="" from="" the="" experimental="" results,it="" can="" be="" concluded="" that="" the="" ethanol="" extract="" of="" l.camara="" leaves="" extended="" the="" life="" span="" of="" d.melanogaster="" at="" these="" concentrations.="" due="" to="" similarities="" of="" conserved="" genes="" between="" humans="" and="" fruit="" flies,="" the="" use="" of="" l.camara="" ethanolic="" leaves="" extract="" at="" these="" concentrations="" is="" safe="" and="" may="" be="" recommended="" as="" herbal="" medicine="" in="">

Schlüsselwörter:Überlebensrate,Lebensdauer,168-Stunde LCso,Anti-Aging,L.camara

Einführung

Das Altern ist ein natürlicher Prozess in allen Lebewesen, aber seine Geschwindigkeit wird durch gefährliche Umweltfaktoren, die Aufnahme und Assimilation gefährlicher Substanzen und Krankheiten beeinflusst [1]. Die Haut ist das Gewebe, das beim Menschen am stärksten vom Altern betroffen ist; Faltenbildung der Haut ist bei der natürlichen Alterung sichtbar[1]. Freie Radikale sind einer der Faktoren und ihre erschwinglichen Kosten und Wartung im Labor [3].D. melanogaster hat sich als Modell für die Untersuchung des Alterns bewährt [1,2]. Die Lebensspannenstudie ist das entscheidende Maß für die Alterungsrate bei Drosophila aufgrund der schnellen Generationszeit und postmitotischer Zellen, die diese Art zu einem guten Modell für gemacht haben Altersforschung [4].

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Lantana Camara wird auch als "spanische Flagge oder westindisches Wandelröschen" bezeichnet; und wird manchmal als "Roter Salbei" bezeichnet. L. Camara ist ein "Zierkraut" mit aromatischen Blättern, Prange, blauen, roten, gelben und leuchtend roten Blüten und dunkelblauen und schwarzen Früchten (Steinfrüchten)[5]. L. Camara, insbesondere die Blätter, wurden als Antitumormittel, antibakterielles Mittel, blutdrucksenkendes Mittel, Stärkungsmittel und schleimlösendes Mittel verwendet, während die Wurzeln für die Behandlung von Rheuma, Hautausschlägen und Malaria bekannt sind [5-7]. Das Aufgussverfahren zur Extraktion der Blätter und anderer Teile ist für seine entzündungshemmenden Eigenschaften bekannt und wird dem Bad als Antirheumatikum zugesetzt [6]. Der aus L. camara-Blättern hergestellte Sud wird in der Kräutermedizin meist zur Wundheilung, Fieberbehandlung, Hustenbehandlung, Grippebehandlung, Magenschmerzen, Malaria usw. verwendet [8].Cistanche-Salsa-VorteileEs wurde auch berichtet, dass es zur Behandlung von Krebs, Windpocken, Masernrheumatismus und Geschwüren eingesetzt werden kann [9]L. Camara zeigt auch die folgenden Aktivitäten wie Antioxidans, Antimykotikum, Antidiabetikum, Analgetikum und Entzündungshemmer [8].

Es gibt wenig oder keine Informationen über die Anti-Aging-Aktivitäten von L.Wachstum des Cistanche-PenisKamera. Ziel dieser Arbeit ist es, wissenschaftliche Daten zur Anti-Aging-Wirkung dieser Pflanze im D. melanogaster-Modell zu generieren. Wir untersuchten die Wirkung von Ethanolextrakt aus L. camara-Blättern auf die Überlebensrate und Lebensdauer von Fruchtfliegen.

Materialien und Methoden Pflanzensammlung und -extraktion

L. Camara-Blätter wurden im August 2019 in den Seniorenquartieren der Universität von Jos gesammelt und unter fließendem Leitungswasser gespült, um den Sand und andere Partikel zu entfernen. Die Blätter wurden 7 Tage bei Raumtemperatur luftgetrocknet und dann unter Verwendung von Mörser und Pistill zu Pulver zerkleinert. Etwa 110 g pulverisierte Blätter von L. Camara wurden in Ethanol für 72 h durch Mazerationsverfahren extrahiert und unter Verwendung eines Wasserbads (50 Grad) weiter bis zur Trockne konzentriert, wie von Alexander et al. [10] beschrieben. Der Prozentsatz der Gesamtausbeute war berechnet nach folgender Formel [11].

wobei Wo=das Gewicht der anfänglich getrockneten Probe, Wi=das Gewicht des Behälters allein und Wz=das Gewicht des Extrakts und des Behälters ist.

Cistanche kann Anti-Aging

Fliegenstamm D. melanogaster Harwich-Stämme vom Africa Center of Excellence wurden gezüchtet und auf einer einfachen Diät gehalten, die aus 100 g Maismehl, 20 g Bäckerhefe, 12 g Agar-Agar, 1 g Methylparaben in 5 ml Ethanol und 1700 g zubereitet wurde ml Wasser. Die Temperatur im Fliegenlabor wurde konstant bei 25 Grad gehalten.

168-Stunden Akute Toxizität von L. Camara Ethanol-Blätterextrakt

Der Assay der akuten Toxizität von L.camara wurde nach dem von Alexander et al. beschriebenen Verfahren durchgeführt. [10]. 1 bis 3 Tage alte Fruchtfliegen wurden betäubt, gezählt und 5, 10, 20, 50, 100, 250, 500 und 5000 mg/10 g Nahrung in jeweils 2 Wiederholungen ausgesetzt, wobei jede Wiederholung 30 erwachsene Fliegen aufwies. Die Fruchtfliegen wurden 24 h akklimatisieren gelassen. Die Sterblichkeitsrate wurde alle 24 Stunden für 7 aufeinanderfolgende Tage bewertet.

28-Tages-Überlebens- und Lebensdauerstudien

Überlebens- und Langlebigkeitsstudien wurden nach der von Abolaji et al. [12].cistanche tubulosa dosierung reddit1 bis 3 Tage alte Fruchtfliegen wurden auf milden Eischips anästhesiert, gezählt und 5, 10 und 20 mg/10 g Futter in vierfacher Ausfertigung mit jeweils 50 Fliegen ausgesetzt. Fruchtfliegen, die einer Behandlung unterzogen wurden, wurden in Intervallen von 3- Tagen in eine frisch zubereitete Konzentration (Futter gemischt mit Extrakt) überführt. Die Sterblichkeitsrate wurde alle 24 Stunden für 28 Tage wie in der Überlebensrate und eine Lebenszeit wie in der Langlebigkeitsstudie bewertet.

Entstehungsrate

Erwachsenen Fruchtfliegen wurden 5, 10 und 20 mg/10 g L. camara-Nahrung in dreifacher Ausfertigung verabreicht, wobei jedes Fläschchen 50 Fliegen für 7 Tage enthielt. Männliche und weibliche Fruchtfliegen, jeweils fünf, wurden aussortiert, um sich zu paaren und Eier auf einer frisch zubereiteten Diät ohne Extrakt (L. Camera-Blätter) für 24 h zu legen. Nach Ablauf von 24 h wurden erwachsene Fliegen (Eltern) abgesetzt und geopfert, während die Fläschchen (mit neu gelegten Eiern) bei einer konstanten Temperatur von 25 Grad gehalten und auf das Auftauchen junger Fliegen (Nachkommen) beobachtet wurden [10].

Phytochemisches Screening Ethanolische Blattextrakte von L. Camara. Qualitatives phytochemisches Screening wurde unter Verwendung eines Standardverfahrens durchgeführt, wie es von Software [13] beschrieben wird. Der ethanolische Blattextrakt von L. camara wurde auf das Vorhandensein von Alkaloiden, Phenolsäuren, Tannin, Flavonoiden, Saponinen, Kohlenhydraten, Herzglykosiden, Terpenoiden, Anthrochinon und Steroiden gescreent.

Statistische Analyse

Die Daten wurden als Mittelwert ± SEM (Standardfehler des Mittelwerts) ausgedrückt und dargestellt, eine Einweg-Varianzanalyse wurde an der Emergenzrate durchgeführt, gefolgt von einem türkischen Post-hoc-Test. Überlebenskurven und LCso wurden unter Verwendung von Log-rank (Mentel-Cox) und nichtlinearer Regression analysiert; Dosis-Antwort-X ist jeweils log (Dosis) (Graphpad Prism Statistiksoftware Version 7.04). Die Ergebnisse wurden bei P als statistisch signifikant angesehen<>

Ergebnisse

Gesamtertrag in Prozent und Phytochemikalien von ethanolischem Blattextrakt von L. Camara

Das Anfangsgewicht der L. camara-Blättermaterialien war 110, wohingegen das Gewicht des Extrakts nach dem Entfernen des Lösungsmittels (Ethanol) der Extraktion 20 g war. Die prozentuale Ausbeute wurde mit 18 % Gew./Gew. berechnet. Das Ergebnis des phytochemischen Screenings des ethanolischen L.camara-Blattextrakts ist in Tabelle 1 dargestellt.

168- Stunden LCso des ethanolischen Blattextrakts von L. camara in D. melanogaster

Das Ergebnis zeigte, dass L.camara bis zu 1000 mg/10 g nicht tödlich ist, aber zwischen 100 und 500 mg/g wurde die Sterblichkeit signifikant (P<0.05) compared="" with="" the="" negative="" control.="" the="" mortality="" rate="" 28-day="" survival="" rate="" of="" d.="" melanogaster="" administered="" l.="" camara="" ethanolic="">

The survival rate of fruit flies administered L. Camara ethanolic leaf extract ranged from 50 to 59%. The highest survival rate was recorded in 10 mg/10 g diet while the lowest survival rate was recorded in the negative control.L. camara increased non-significantly (P>0.05) die Überlebensrate von Fruchtfliegen bei 5, 10 und 20 mg/10 g im Vergleich zur Negativkontrolle, wie in Abb. 2 gezeigt. Dieses Ergebnis impliziert, dass L. Äthanolische Blattextrakte von Camara können einige schützende Wirkungen auf D. melanogaster haben.

Langlebigkeit (Lebensdauer) von Fruchtfliegen, denen ethanolische L. Camara-Blattextrakte verabreicht wurden

Die Lebensdauer von Fruchtfliegen, denen ethanolische Blattextrakte von L. Camara verabreicht wurden, wurde signifikant überlebt (P<0.05) the="" negatively="" controlled="" flies.l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts-treated="" flies="" lived="" up="" to="" 50days="" with33.5,33.6,and44.5%percentage="" increase="" at="" 5,10,and="" 20="" mg/10="" g="" diet="" respectively="" whereas="" the="" negatively="" controlled="" flies="" lived="" up="" to="" 39="" days="" as="" shown="" in="" fig.3.this="" result="" implies="" that="" l.="" camara="" ethanolic="" leaf="" extracts="" may="" have="" some="" anti-aging="" properties="" or="" activities="" in="" d.="">

Austrittsrate junger Fliegen aus Eiern

von D. melanogaster verabreichten ethanolischen Blattextrakten von L. camara Die Schlupfrate junger Fruchtfliegen aus Eiern erwachsener Fruchtfliegen, denen ethanolische Blattextrakte von L. camara verabreicht wurden, lag im Bereich von 91 bis 100 Prozent. Die höchste Schlupfrate wurde bei 20 mg/10 g Futter aufgezeichnet, während die niedrigste Schlupfrate bei der Negativkontrolle aufgezeichnet wurde.cistanche แอ ม เว ย์The extracts,at 5,10,and 20mg/10 g diet increased emergence rate non-significantly (P>0.05) verglichen

Diskussion

Phenolische Verbindungen sind sekundäre Metaboliten, die durch die Phenylpropanoid-Metabolisierung von Penrose-Phosphat produziert werden. Sie werden auch in der Shikimisäure von Pflanzen produziert [14]. Phenolverbindungen (Flavonoide, Phenolsäure, Tannine, Herzglykoside, Steroide, Saponine und Alkaloide) haben Anti-Aging-, entzündungshemmende, antiproliferative Eigenschaften, antioxidative a-Glykosidase- und a-Amylase-hemmende Wirkungen gezeigt [{{6 }}]. Es wurde berichtet, dass Herzglykosid die vier Gene von überexprimierten Prostatakrebszellen hemmt, einschließlich der Inhibitoren von Apoptose-Inhibitor-Survivin und Transkriptionsfaktoren [17]. Phenolverbindungen sind für ihr heilendes und vorbeugendes Potenzial bei einigen Krankheitszuständen hoch anerkannt; Krebs, Diabetes, Herz-Kreislauf-Erkrankungen, Fettleibigkeit, Bakterien- und Pilzinfektionen [14-18].wie viel cistanche zu nehmenDas qualitative phytochemische Screening des ethanolischen Blattextrakts von L. Camara ergab das Vorhandensein von Alkaloiden, Phenolsäure, Flavonoiden, Herzglykosiden, Kohlenhydraten und Steroiden, was mit [19] übereinstimmt. Diese Verbindungen können entweder einzeln oder in Synergie zum Anti-Aging-Phänomen bei Drosophila führen.

D. melanogaster as a model is mostly appreciable in drug screening and toxicity studies due to the conserved genes and biochemical pathways between the species and humans. European Centre for the Validation of Alternative Methods (ECVAM) has approved this species as an alternative model having met the standard for validation of the alternative model known as 3Rs: Reduction, Refinement, and Replacement of laboratory animal [20]. Our 168-hour also revealed that this plant leaves extract is safe for use since its LCso is 1135 mg/10 g diet in D. melanogaster which agrees with Pour and Sasidharan [21], who reported a high value for LCso of L. Camara in the Artemia salina model and no obvious acute toxicity in adult mice. It has been recorded that plants with a high value of LCso are less or non-toxic while plants with a low value of LCso are considered to be very toxic and shorten or reduce life expectancy [22]. The survival rate result further supported the claim that L. Camara ethanolic leaves extract is safe to use in folk medicine as it increased through the non-significantly (P>0.05) Überlebensrate von Fruchtfliegen, denen die Extrakte verabreicht wurden. Dieses Ergebnis stimmt mit Pour und Sasidharan [21] überein, die eine sehr geringe In-vivo-Toxizität von L. Camara-Blattextrakt im Artemia-salina-Modell berichteten.

Die Wirkung von L. Camara auf das Altern wurde mit einem Langlebigkeitsassay untersucht. Die Gruppe von Fruchtfliegen, denen L. Camara-Extrakt aus ethanolischen Blättern verabreicht wurde, lebte signifikant länger (P < 0,05)="" als="" die="" negativ="" kontrollierten="" fliegen.="" dies="" impliziert,="" dass="" der="" ethanolische="" blattextrakt="" von="" l.="" camara="" nicht="" nur="" sicher="" für="" die="" verwendung="" in="" der="" volksmedizin="" ist,="" sondern="" auch="" das="" überleben="" verlängert="" und="" die="" lebensdauer="" verlängert,="" indem="" er="" auf="" anti-aging-weise="">

The emergence rate revealed that L. Camara ethanolic leaf extracts had no toxic effect on the emergence rate at the concentration tested in D.melanogaster as it increased the emergence rate of young flies with no significance(P>0.05) verglichen mit der Negativkontrolle.

Dieser Artikel ist extrahiert aus doi: 10.1093/toxres/tfaa098 Advance Access Veröffentlichungsdatum: 12. Januar 2021 Papier